黄连等单味浓缩颗粒与其饮片单煎液主成分含量的对比研究
作者：欧阳荣 周新蓓 曹湘萍
单位：曹湘萍(湖南省药品检验所，长沙市410001)；欧阳荣 周新蓓(湖南中医学院附属第一医院，长沙市 410007)
关键词：黄连；赤芍；桔梗；单味浓缩颗粒；单煎液
中国药房000327
摘要：目的：探讨中药单味浓缩颗粒剂的内在质量。方法：用紫外分光光度法、高效液相色谱法、薄层色谱法等方法进行定量、定性分析。结果：单味浓缩颗粒中主要成分的含量仅相当于同种饮片单煎液的1/3～1/2。结论：单味浓缩颗粒的生产工艺尚待进一步研究与探讨。
中图分类号：R96 文献标识码：B 文章编号：1001-0408(2000)03-0143-02
Comparative Study on Contents of Main Compositions Contained in the Single Herb Concentrate-granules with Their Single Herb Decoction for Rhizoma Coptidis，etc.
, 百拇医药
OU Yangrong，ZHOU Xinpei
(The First Affiliated Hospital，Hunan College of Traditional Chinese Medicine，Changsha 410007)
CAO Xiangping
(Hunan Province Institute of Drug Control，Changsha 410001)
ABSTRACT：OBJECTIVE：Exploring the inner quality of single herb concentrate-granules for Chinese medicinal herbs.METHO-DS：The methods of UV，HPLC，TLC，etc.were used for the qualitative and quantitative analysis.RESULTS:The contents of main compositions contained in the single herb concentrate-granules were only equivalent to 1/3～1/2 of those of their single herb decoction. CONCLUSION：It was showed that the production technics of single herb concentrate-granules for Chinese medicinal herbs was still worth further studying and exploring.
, 百拇医药
KEY WORDS：Rhixoma Coptidis；Radix Paeoniae Rubra；Radix Platycodi；single herb concentrate-granules；single herb decoction
单味中药浓缩颗粒现已在很多医院使用。但关于单味中药浓缩颗粒与同种饮片入煎在主要成分和质量上的差别，以及单味浓缩颗粒的质量控制研究报道却很少。本文对黄连、赤芍等单味浓缩颗粒及其对应的饮片单煎液主要成分的含量进行了初步考察，现报道如下。
1 仪器与试药
Waters 440/6 000泵高效液相色谱仪(美国Waters公司)；SPD-10A紫外检测器、CR-2AX数据处理机、UV-2501PC分光光度计(日本岛津)；ES-J120电子分析天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。对照品、对照药材(由中国药品生物制品检定所提供)。所用饮片及单味浓缩颗粒剂均抽自于本院门诊药房。
, http://www.100md.com
2 各供试品中主要成分的含量测定
2.1 黄连中生物碱[盐酸小檗碱(C20H18C1NO4)]的含量测定[1]
2.1.1 测定波长的选择：分别取颗粒剂、饮片、单煎液、对照品已处理好的样品，按分光光度法[2]试验，以0.05mol/L硫酸液为空白，分别在400nm～230nm范围内扫描，四者最大吸收波长均为345nm。其光谱图见图1。
图1 黄连各样品的紫外吸收曲线
2.1.2 颗粒剂处理与测定：取颗粒剂适量(相当于饮片约0.8g)，精密称定，按《中国药典》(一部)1990年版黄连含量测定项下操作，测定结果见表1。2.1.3 对照药材及饮片的处理与测定：分别取样品粗粉约0.8g，按2.1.2项下，自“精密称定……”起依法测定，结果见表1。
, 百拇医药
表1 样品中盐酸小檗碱的含量 样品
批号
含量(%)*
平均值(%)
浓缩颗粒
990353
2.21
2.16
2.18
990320
2.13
2.09
, 百拇医药
2.11
9911002
2.65
2.67
2.66
黄连钦片
1999年2月购
10.59
10.63
10.61
1999年4月购
10.22
10.16
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10.18
单煎液
1999年2月购
6.25
6.17
6.21
1999年4月购
6.60
6.66
6.63
对照药材
9103
9.98
, http://www.100md.com
10.11
10.04
*指相当于生药中盐酸小檗碱的含量
2.1.4 饮片单煎液的处理与测定：取饮片约0.8g，精密称定，置烧杯中，煎煮2次(每次加水100ml，浸泡30min，煎煮30min)，过滤，合并滤液，蒸至近干，残渣用盐酸-甲醇(1∶100)适量加热提取，每次5ml～10ml，至提取液无色为止，合并提取液转移至50ml量瓶中，用盐酸-甲醇(1∶100)少量洗涤容器，洗液并入提取液中，并加至刻度。按2.1.2项下，自“精密称定……”起依法测定，结果见表1。
2.2 赤芍中芍药苷的含量测定[3]
2.2.1 色谱条件：色谱柱：Shim-pack CLCODS(6.0×150mm；10μm)；流动相：甲醇-水(30∶70)；流速：1ml/min；检测波长：230nm；柱温：40℃。理论板数按芍药苷峰计算应不低于1 000。进样量10μl。
, http://www.100md.com
2.2.2 线性关系的考察：取芍药苷对照品约15mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取芍药苷对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，按高效液相色谱法[4]，进样10μl，测定，以对照品浓度对峰面积积分值进行线性回归，结果在30.64μg～153.20μg范围内呈线性关系。回归方程为：A=341.061T—514.45XC，γ=0.9 999。
2.2.3 颗粒剂的处理与测定：取颗粒剂适量(相当于饮片约0.5g)，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超声处理30min，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。同法测定，结果见表2与图2。
图2 赤芍呼样品的色谱图
, 百拇医药
表2 样品中芍药苷的含量 样品
批号
含量(%)*
平均值(%)
浓缩颗粒
990907
3.74
3.70
3.72
990325
4.55
4.62
, http://www.100md.com
4.58
9907107
5.88
5.89
5.88
赤芍饮片
1999年2月购
6.23
6.19
6.21
1999年4月购
6.57
6.55
, 百拇医药
6.56
单煎液
1999年2月购
6.03
6.05
6.04
1999年4月购
5.94
5.89
5.92
*指相当于生药中芍药苷的含量
2.2.4 饮片的处理与测定：取饮片约0.5g，按2.2.3项下，自“精密称定，置50ml量瓶中……”起，依法测定，结果见表2与图2。
, 百拇医药
2.2.5 饮片单煎液的处理与测定：取饮片约0.5g，精密称定，置烧杯中，煎煮2次(每次加水100ml，浸泡30min，煎煮30min)，过滤，合并滤液，蒸至近干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至50ml量瓶中，按2.2.3项下，自“超声处理30min……”起，依法测定，结果见表2与图2。
2.3 桔梗总皂苷的测定[5]
2.3.1 颗粒剂的处理与测定：取颗粒剂适量(相当于饮片约4g)，精密称定，按《中国药典》(一部)1995年版桔梗含量测定项下操作，测定结果见表3。
表3 样品中桔梗皂苷的含量 样品
批号
含量(%)*
平均值(%)
, http://www.100md.com
浓缩颗粒
980836
3.37
3.41
3.39
991216
2.97
3.02
3.00
9907126
3.21
3.17
3.19
, 百拇医药
桔梗饮片
1999年2月购
9.57
9.63
9.60
1999年4月购
7.12
7.01
7.06
单煎液
1999年2月购
9.69
9.59
, 百拇医药
9.64
1999年4月购
7.51
8.63
7.57
*指相当于生药中桔梗皂苷的含量
2.3.2 对照药材及饮片的处理与测定：分别取样品粗粉约4g，按2.3.1项下，自“精密称定……”起，依法测定，结果见表3。
2.3.3 饮片单煎液的处理与测定：取饮片粗粉约4g，精密称定，置烧杯中，煎煮2次(每次加水100ml，浸泡30min，煎煮30min)，过滤，合并滤液，蒸至近干，残渣用甲醇适量加热提取，每次5ml～10ml，至提取液无色为止，合并提取液。提取液置水浴上浓缩至15ml～20ml，按2.3.1项下，自“精密称定……”起，依法测定，结果见表3。
, 百拇医药
3 薄层层析法对黄连组样品的对比试验
取各样品粉末50mg(颗粒剂相当于饮片50mg)，按《中国药典》(一部)1995年版黄连鉴别(3)项下操作，色谱图见图3。
图3 黄连各样品的薄层色谱图
4 讨论
4.1 从以上试验结果可以看出，每组样品中，饮片单煎液中主要成分的含量均高于浓缩颗粒。其中，黄连饮片单煎液中盐酸小檗碱的含量为浓缩颗粒的3倍，芍药苷含量为浓缩颗粒2倍。饮片与饮片单煎液中主要成分的含量亦有差异。其中，黄连饮片单煎液中盐酸小檗碱的含量约为饮片含量的60%。说明盐酸小檗碱的提取与提取温度有很大的关系，与文献报道相近[6]。
, 百拇医药 4.2 经用薄层层析法对黄连组样品进行的对比试验发现，单味颗粒与饮片单煎液的成分均有较大的差异。每组中，饮片单煎液的各斑点色泽普遍深于浓缩颗粒，进一步说明中药饮片单煎液中各主要成分的含量高于浓缩颗粒。这似乎说明了浓缩颗粒的药理、药性及临床疗效与传统的汤药不一定相当。因此，建议单味中药浓缩颗粒的生产厂家要严把药材来源质量关，应根据每一味中药品种所含主要成分的不同性质进一步改进、完善其生产工艺。有关部门应制定中药浓缩颗粒剂的质量管理规范，以及有效成分或指标成分量化为核心的系列标准，以确保单味浓缩颗粒与饮片单煎液的生物等效性。
4.3 由于本实验受一定条件限制，所用浓缩颗粒、对照药材及单煎液不是取样于同一批药材，故实验结果可能有出入。但所用饮片均经湖南省药品检验所鉴定，系《中国药典》(一部)1995年版收载品种，因此笔者认为，本实验结果仍然具有一定可靠性和可比性。
参考文献：
1.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1990年版.北京：人民卫生出版社，1990：276.
, http://www.100md.com
2.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1995年版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995：附录31～32.
3.周新蓓.高效液相色谱法测定赤芍浓缩颗粒中芍药苷的 含量[J].中国实验方剂学杂志，1999，3：5.
4.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1995年版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995：附录37～40.
5.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1995年版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995： 243.
6.陈惠红.温度对黄连提取方法的影响[J].中国药业，1999，8 (2)：21.
(收稿日期：2000-02-21 修回日期：2000-04-10), 百拇医药
单位：曹湘萍(湖南省药品检验所，长沙市410001)；欧阳荣 周新蓓(湖南中医学院附属第一医院，长沙市 410007)
关键词：黄连；赤芍；桔梗；单味浓缩颗粒；单煎液
中国药房000327
摘要：目的：探讨中药单味浓缩颗粒剂的内在质量。方法：用紫外分光光度法、高效液相色谱法、薄层色谱法等方法进行定量、定性分析。结果：单味浓缩颗粒中主要成分的含量仅相当于同种饮片单煎液的1/3～1/2。结论：单味浓缩颗粒的生产工艺尚待进一步研究与探讨。
中图分类号：R96 文献标识码：B 文章编号：1001-0408(2000)03-0143-02
Comparative Study on Contents of Main Compositions Contained in the Single Herb Concentrate-granules with Their Single Herb Decoction for Rhizoma Coptidis，etc.
, 百拇医药
OU Yangrong，ZHOU Xinpei
(The First Affiliated Hospital，Hunan College of Traditional Chinese Medicine，Changsha 410007)
CAO Xiangping
(Hunan Province Institute of Drug Control，Changsha 410001)
ABSTRACT：OBJECTIVE：Exploring the inner quality of single herb concentrate-granules for Chinese medicinal herbs.METHO-DS：The methods of UV，HPLC，TLC，etc.were used for the qualitative and quantitative analysis.RESULTS:The contents of main compositions contained in the single herb concentrate-granules were only equivalent to 1/3～1/2 of those of their single herb decoction. CONCLUSION：It was showed that the production technics of single herb concentrate-granules for Chinese medicinal herbs was still worth further studying and exploring.
, 百拇医药
KEY WORDS：Rhixoma Coptidis；Radix Paeoniae Rubra；Radix Platycodi；single herb concentrate-granules；single herb decoction
单味中药浓缩颗粒现已在很多医院使用。但关于单味中药浓缩颗粒与同种饮片入煎在主要成分和质量上的差别，以及单味浓缩颗粒的质量控制研究报道却很少。本文对黄连、赤芍等单味浓缩颗粒及其对应的饮片单煎液主要成分的含量进行了初步考察，现报道如下。
1 仪器与试药
Waters 440/6 000泵高效液相色谱仪(美国Waters公司)；SPD-10A紫外检测器、CR-2AX数据处理机、UV-2501PC分光光度计(日本岛津)；ES-J120电子分析天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。对照品、对照药材(由中国药品生物制品检定所提供)。所用饮片及单味浓缩颗粒剂均抽自于本院门诊药房。
, http://www.100md.com
2 各供试品中主要成分的含量测定
2.1 黄连中生物碱[盐酸小檗碱(C20H18C1NO4)]的含量测定[1]
2.1.1 测定波长的选择：分别取颗粒剂、饮片、单煎液、对照品已处理好的样品，按分光光度法[2]试验，以0.05mol/L硫酸液为空白，分别在400nm～230nm范围内扫描，四者最大吸收波长均为345nm。其光谱图见图1。
图1 黄连各样品的紫外吸收曲线
2.1.2 颗粒剂处理与测定：取颗粒剂适量(相当于饮片约0.8g)，精密称定，按《中国药典》(一部)1990年版黄连含量测定项下操作，测定结果见表1。2.1.3 对照药材及饮片的处理与测定：分别取样品粗粉约0.8g，按2.1.2项下，自“精密称定……”起依法测定，结果见表1。
, 百拇医药
表1 样品中盐酸小檗碱的含量 样品
批号
含量(%)*
平均值(%)
浓缩颗粒
990353
2.21
2.16
2.18
990320
2.13
2.09
, 百拇医药
2.11
9911002
2.65
2.67
2.66
黄连钦片
1999年2月购
10.59
10.63
10.61
1999年4月购
10.22
10.16
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10.18
单煎液
1999年2月购
6.25
6.17
6.21
1999年4月购
6.60
6.66
6.63
对照药材
9103
9.98
, http://www.100md.com
10.11
10.04
*指相当于生药中盐酸小檗碱的含量
2.1.4 饮片单煎液的处理与测定：取饮片约0.8g，精密称定，置烧杯中，煎煮2次(每次加水100ml，浸泡30min，煎煮30min)，过滤，合并滤液，蒸至近干，残渣用盐酸-甲醇(1∶100)适量加热提取，每次5ml～10ml，至提取液无色为止，合并提取液转移至50ml量瓶中，用盐酸-甲醇(1∶100)少量洗涤容器，洗液并入提取液中，并加至刻度。按2.1.2项下，自“精密称定……”起依法测定，结果见表1。
2.2 赤芍中芍药苷的含量测定[3]
2.2.1 色谱条件：色谱柱：Shim-pack CLCODS(6.0×150mm；10μm)；流动相：甲醇-水(30∶70)；流速：1ml/min；检测波长：230nm；柱温：40℃。理论板数按芍药苷峰计算应不低于1 000。进样量10μl。
, http://www.100md.com
2.2.2 线性关系的考察：取芍药苷对照品约15mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取芍药苷对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，按高效液相色谱法[4]，进样10μl，测定，以对照品浓度对峰面积积分值进行线性回归，结果在30.64μg～153.20μg范围内呈线性关系。回归方程为：A=341.061T—514.45XC，γ=0.9 999。
2.2.3 颗粒剂的处理与测定：取颗粒剂适量(相当于饮片约0.5g)，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超声处理30min，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。同法测定，结果见表2与图2。
图2 赤芍呼样品的色谱图
, 百拇医药
表2 样品中芍药苷的含量 样品
批号
含量(%)*
平均值(%)
浓缩颗粒
990907
3.74
3.70
3.72
990325
4.55
4.62
, http://www.100md.com
4.58
9907107
5.88
5.89
5.88
赤芍饮片
1999年2月购
6.23
6.19
6.21
1999年4月购
6.57
6.55
, 百拇医药
6.56
单煎液
1999年2月购
6.03
6.05
6.04
1999年4月购
5.94
5.89
5.92
*指相当于生药中芍药苷的含量
2.2.4 饮片的处理与测定：取饮片约0.5g，按2.2.3项下，自“精密称定，置50ml量瓶中……”起，依法测定，结果见表2与图2。
, 百拇医药
2.2.5 饮片单煎液的处理与测定：取饮片约0.5g，精密称定，置烧杯中，煎煮2次(每次加水100ml，浸泡30min，煎煮30min)，过滤，合并滤液，蒸至近干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至50ml量瓶中，按2.2.3项下，自“超声处理30min……”起，依法测定，结果见表2与图2。
2.3 桔梗总皂苷的测定[5]
2.3.1 颗粒剂的处理与测定：取颗粒剂适量(相当于饮片约4g)，精密称定，按《中国药典》(一部)1995年版桔梗含量测定项下操作，测定结果见表3。
表3 样品中桔梗皂苷的含量 样品
批号
含量(%)*
平均值(%)
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浓缩颗粒
980836
3.37
3.41
3.39
991216
2.97
3.02
3.00
9907126
3.21
3.17
3.19
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桔梗饮片
1999年2月购
9.57
9.63
9.60
1999年4月购
7.12
7.01
7.06
单煎液
1999年2月购
9.69
9.59
, 百拇医药
9.64
1999年4月购
7.51
8.63
7.57
*指相当于生药中桔梗皂苷的含量
2.3.2 对照药材及饮片的处理与测定：分别取样品粗粉约4g，按2.3.1项下，自“精密称定……”起，依法测定，结果见表3。
2.3.3 饮片单煎液的处理与测定：取饮片粗粉约4g，精密称定，置烧杯中，煎煮2次(每次加水100ml，浸泡30min，煎煮30min)，过滤，合并滤液，蒸至近干，残渣用甲醇适量加热提取，每次5ml～10ml，至提取液无色为止，合并提取液。提取液置水浴上浓缩至15ml～20ml，按2.3.1项下，自“精密称定……”起，依法测定，结果见表3。
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3 薄层层析法对黄连组样品的对比试验
取各样品粉末50mg(颗粒剂相当于饮片50mg)，按《中国药典》(一部)1995年版黄连鉴别(3)项下操作，色谱图见图3。
图3 黄连各样品的薄层色谱图
4 讨论
4.1 从以上试验结果可以看出，每组样品中，饮片单煎液中主要成分的含量均高于浓缩颗粒。其中，黄连饮片单煎液中盐酸小檗碱的含量为浓缩颗粒的3倍，芍药苷含量为浓缩颗粒2倍。饮片与饮片单煎液中主要成分的含量亦有差异。其中，黄连饮片单煎液中盐酸小檗碱的含量约为饮片含量的60%。说明盐酸小檗碱的提取与提取温度有很大的关系，与文献报道相近[6]。
, 百拇医药 4.2 经用薄层层析法对黄连组样品进行的对比试验发现，单味颗粒与饮片单煎液的成分均有较大的差异。每组中，饮片单煎液的各斑点色泽普遍深于浓缩颗粒，进一步说明中药饮片单煎液中各主要成分的含量高于浓缩颗粒。这似乎说明了浓缩颗粒的药理、药性及临床疗效与传统的汤药不一定相当。因此，建议单味中药浓缩颗粒的生产厂家要严把药材来源质量关，应根据每一味中药品种所含主要成分的不同性质进一步改进、完善其生产工艺。有关部门应制定中药浓缩颗粒剂的质量管理规范，以及有效成分或指标成分量化为核心的系列标准，以确保单味浓缩颗粒与饮片单煎液的生物等效性。
4.3 由于本实验受一定条件限制，所用浓缩颗粒、对照药材及单煎液不是取样于同一批药材，故实验结果可能有出入。但所用饮片均经湖南省药品检验所鉴定，系《中国药典》(一部)1995年版收载品种，因此笔者认为，本实验结果仍然具有一定可靠性和可比性。
参考文献：
1.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1990年版.北京：人民卫生出版社，1990：276.
, http://www.100md.com
2.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1995年版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995：附录31～32.
3.周新蓓.高效液相色谱法测定赤芍浓缩颗粒中芍药苷的 含量[J].中国实验方剂学杂志，1999，3：5.
4.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1995年版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995：附录37～40.
5.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部)[S].1995年版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995： 243.
6.陈惠红.温度对黄连提取方法的影响[J].中国药业，1999，8 (2)：21.
(收稿日期：2000-02-21 修回日期：2000-04-10), 百拇医药