叶下珠化学成分的研究
作者：沙东旭 刘英华 王龙顺 徐绥绪
单位：辽宁省医药工业研究院，沈阳 110015
关键词：叶下珠；短叶苏木酚酸乙酯；短叶苏木酚；柯里拉京；鞣花酸；没食子酸；2D-NMR
沈阳药科大学学报000307 摘 要 从叶下珠中分离得到6个化合物，根据理化数据和光谱方法鉴定为短叶苏木酚酸乙酯(1)、短叶苏木酚(2)、柯里拉京(3)、原儿茶酸(4)、没食子酸(5)和鞣花酸(6).其中(1)、(3)、(4)为本种植物中首次分离.根据2D-NMR修正了文献中化合物(1)和(2)的部分碳信号归属错误，归属了化合物(3)的碳氢谱数据.
分类号 R284.2
Studies on the Chemical Constituents of Common Leafflower(Phyllanthus urinaria)
, http://www.100md.com
Sha Dongxu,Liu Yinghua,Wang Longshun,Xu Suixu
Liaoning Medicinal Industry Institute,Shenyang 110015
Abstract Six compounds were isolated from the whole herb of Phyllanthus urinaria L..On the basis of physical and chemical properties and spectra data,they were identified as ethyl brevifolincarboxylate(1),brevifolin(2)，corilagin(3)，protocatechuic acid(4)，gallic acid(5)，ellagic acid(6).Compounds(1),(3)and(4)were isolated from this plant for the first time.The carbon assignment of compound(1)and(2)in literature were corrected by the use of 2D-NMR.
, 百拇医药
Key words Phyllanthus urinaria L.;ethyl brevifolincarboxylate;brevifolin;corilagin;ellagic acid;gallic acid;2D-NMR
叶下珠为大戟科植物叶下珠(Phyllanthus urinaria L.)的全草.作者对叶下珠的化学成分进行了研究，现报道其化学成分的提取分离与结构鉴定.
1 仪器与材料
北京产电光牌显微熔点测定仪；IFS-55型红外分光光度计(瑞士Brucker公司)；ARX-300MHz型核磁共振仪(瑞士Brucker公司)；VG 70-SE型质谱仪(英国VG公司).叶下珠药材(购自广东).
2 提取与分离
叶下珠粗粉9.5 kg,90%乙醇回流提取2次，每次2 h，过滤，滤液减压回收乙醇，清膏加适量水，分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取.乙酸乙酯萃取液减压回收溶剂，得提取物77.5 g.经硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，从流份146～159份沉淀中得化合物(1)100 mg，母液再行硅胶柱层析，氯仿-丙酮梯度洗脱得化合物(4)15 mg；从流份172～180份中得化合物(2)60 mg；流份183～190合并份再行聚酰胺层析，水洗脱得化合物(5)60 mg；流份207～220份再行聚酰胺层析，30%乙醇洗脱得化合物(3)40 mg；流份223～236份沉淀中得化合物(6)120 mg.
, 百拇医药
3 结构鉴定
通过理化性质及光谱分析(UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR，HMBC)对化合物(1)～(6)进行结构鉴定.
化合物(1)：黄色粉末，mp>300℃(氯仿-甲醇).不溶于苯、石油醚、氯仿，可溶于乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇和二甲基亚砜.三氯化铁反应阳性.IR(KBr)
maxcm-1：3230(OH)，1736，1697，1665( CO )，1600，1526(Ar-).1H-NMR(DMSOd6，300 MHz)δ：1.19(3H，t,J=7 Hz，—OCH2CH3)；4.05(2H，q,J=7 Hz，—OCH2CH3)；2.44(1H，dd,ABX系，JAB=18 Hz，JAX=2 Hz，H-10)；2.98(1H，dd,ABX系，JAB=18 Hz，JBX=7 Hz，H-10)；4.40(1H，dd,ABX系，JBX=7 Hz，JAX=2Hz,H-9);7.29(1H，S,Ar-H).13C-NMR数据见表1(表中“/”数值示其化学位移值不确定).EI-MS m/z(%)：320(M+，32)，274(20)，246(93)，218(38)，191(20).化合物(1)的光谱数据与文献〔1〕中短叶苏木酚酸乙酯(ethyl brevifolincarboxylate)基本一致，但文献中对C2～C6位信号归属有误，由HMBC谱中五个碳信号与质子相关情况(见表2)可以看到，H-9，H-10分别与138.49和145.77相关，由于C-2为直接连氧和羰基，应处于低场，因此推测145.77为C-2信号，则138.49为C-3信号；H-7与140.20和149.60相关，由于羟基的供电作用C-5应处于高场，推断140.20为C-5信号，149.60为C-6信号，则143.63为C-4信号.
, 百拇医药
化合物(2)：黄色针状结晶，mp>300℃(甲醇).难溶于氯仿，溶于热的甲醇溶液，也可溶于二甲基亚砜，易溶于碱水溶液.三氯化铁反应阳性.IR(KBr)maxcm-1；3195(OH)，1710，1670( CO )，1592，1520，(Ar-).1H-NMR(CD3COCD3，300 MHz)δ：2.54，3.32(各2H，t,环戊烯酮环上—CH2—CH2—)；7.42(1H，s,Ar—H).13C-NMR数据见表1.其光谱数据与文献〔2〕中短叶苏木酚(brevifolin)基本一致.但文献中对C-5，C-6位信号归属有误，参照化合物(1)的碳信号归属，推断141.60为C-5信号，149.41为C-6信号.化合物(1)、(2)的结构见图1.
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Tab.1 The 13C-NMR data of compounds(1)、(2)and literature C
Compound(1)
Literature〔1〕
Compound(2)
Literature〔2〕
2
145.77
149.7
145.14
145.02
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3
138.49
140.3
140.23
139.93
3a
114.93
115.1
115.63
115.10
4
143.63
145.9/143.7
, 百拇医药
144.37
144.09
5
140.20
138.5
141.60
149.15
6
149.60
143.7/145.9
149.41
141.39
7
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108.02
108.2
108.08
107.96
7a
112.98
113.1
113.38
113.29
8
160.11
160.2
160.71
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160.52
9
40.69
41.0
23.99
23.81
10
37.01
36.8
33.15
32.99
11
193.02
, 百拇医药
193.0
195.74
195.52
CO
171.99
172.1
OCH\-2
60.56
60.67
CH3
13.86
13.9
, 百拇医药 Tab.2 HMBC data of compound(1) C
13C-NMR
HMBC
2
145.77
H-9
3
138.49
H-9，H-10
4
143.63
5
, 百拇医药
140.20
H-7
6
149.60
H-7
化合物(3)：灰白色无定形粉末，mp202～204℃(分解).三氯化铁反应阳性.稀酸水解得没食子酸、鞣花酸及葡萄糖.IR(KBr)maxcm-1：3404(OH),1719( CO )，1616，1513(Ar-).13C-NMR谱中δ 93.5～61.5六个碳信号为葡萄糖的碳信号；在1H-NMR谱中δ 6.20(1H，d)为糖的端基质子信号，其偶合常数J=7.2 Hz，推断其苷键为β构型.其1H-NMR和 13C-NMR数据见表(3).FAB-MS谱中给出657(M+Na+)峰.化合物(3)的光谱数据与文献〔3，4〕中柯里拉京(corilagin,见图2)的数据基本一致，故鉴定之.参照文献〔1〕及HMBC谱归属了化合物(3)氢信号(见表3).
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Fig.1 The structures of compound(1) and (2)
1—Ethyl brevifolincarboxylate R=COOCH2CH3；
2—Brevifolin R=H
Fig.2 The structure of corilagin Tab.3 13C-NMR and 1H-NMR data of compound(3) No
C
H
No
C
, 百拇医药
H
Glucose
C-1
93.51
6.40
(B)
3
144.07
2
68.23
4.08
4
136.45
, 百拇医药
3
69.93
4.84
5
144.20
4
63.67
4.48
6
115.83
5
74.93
4.54
, 百拇医药
7
166.56
6
61.51
4.13，4.98
(C)
C-1
125.02
Galloy1
(A)
C-1
120.11
2
, 百拇医药
107.35
6.72(1H)
2、6
110.11
7.15(2H)
3
144.65
3、5
145.15
4
135.93
4
138.57
, 百拇医药
5
144.20
7
164.53
6
115.18
HHDP
C-1
124.88
7
167.96
(B)
2
, 百拇医药
109.27
6.86(1H)
化合物(4)：白色针状结晶，mp 196～198℃(水重结晶).三氯化铁反应阳性.IR(KBr)maxcm-1：3310，2500～3000(COOH),1674( CO )，1602，1527(Ar-).EI-MS m/z(%)：154(M+，80)，137(100)，109(35).以上数据与文献〔3〕中原儿茶酸相对照基本一致.故鉴定为原儿茶酸(protocatechuic acid).
化合物(5)：无色针状结晶，mp 238～240℃(水重结晶),水溶液呈弱酸性，三氯化铁反应阳性，溴甲酚绿反应阳性.IR(KBr)maxcm-1:3495，3281(OH),2500～3000(COOH),1666( CO )，1612(Ar-).与没食子酸对照品共薄层,Rf值完全一致，共熔点不下降.故鉴定为没食子酸(gallic acid).
, 百拇医药
化合物(6)：黄棕色针状结晶，mp>300℃(甲醇).三氯化铁反应阳性.IR(KBr)maxcm-1：3234(OH)，1731( CO )，1612，1500(Ar-).1H-NMR(DMSOd6，300 MHz)δ：10.79(2H，br,—OH),7.46(1H，s，Ar-H).EI-MS：m/z(%)302(M+，100),246(12).化合物(6)的光谱数据与文献〔5〕中鞣花酸(ellagic acid)基本一致，故鉴定之.
致谢 叶下珠药材由许春泉高级工程师鉴定.各种光谱数据分别由本校测试中心和化工部感光研究院测试，一并感谢. 参考文献
1 郭佳生，王素贤，李铣，等.鼠掌老鹳草抗菌活性成分的研究.药学学报，1987，22(1)：28～32
, http://www.100md.com
2 万振先，喻庆禄，易杨华.叶下珠化学成分的研究(Ⅱ).中草药，1997，28(3)：134～135
3 陈玉武，任丽娟.密柑草抗癌有效成分的研究Ⅱ.多酚类成分的分离与鉴定.中草药，1997，28(4)：198～202
4 Takashi Yoshida,Gen-ichiro Nonaka,Itsuo Nishioka.Punicafolin,an ellagitannin from the leaves of Punica granatum.Phytochemistry,1985，24(9)：2075～2078
5 姚庆强，左春旭.叶下珠化学成分的研究.药学学报,1993，28(11)：829～835
收稿日期:1999-09-07
, 百拇医药
单位：辽宁省医药工业研究院，沈阳 110015
关键词：叶下珠；短叶苏木酚酸乙酯；短叶苏木酚；柯里拉京；鞣花酸；没食子酸；2D-NMR
沈阳药科大学学报000307 摘 要 从叶下珠中分离得到6个化合物，根据理化数据和光谱方法鉴定为短叶苏木酚酸乙酯(1)、短叶苏木酚(2)、柯里拉京(3)、原儿茶酸(4)、没食子酸(5)和鞣花酸(6).其中(1)、(3)、(4)为本种植物中首次分离.根据2D-NMR修正了文献中化合物(1)和(2)的部分碳信号归属错误，归属了化合物(3)的碳氢谱数据.
分类号 R284.2
Studies on the Chemical Constituents of Common Leafflower(Phyllanthus urinaria)
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Sha Dongxu,Liu Yinghua,Wang Longshun,Xu Suixu
Liaoning Medicinal Industry Institute,Shenyang 110015
Abstract Six compounds were isolated from the whole herb of Phyllanthus urinaria L..On the basis of physical and chemical properties and spectra data,they were identified as ethyl brevifolincarboxylate(1),brevifolin(2)，corilagin(3)，protocatechuic acid(4)，gallic acid(5)，ellagic acid(6).Compounds(1),(3)and(4)were isolated from this plant for the first time.The carbon assignment of compound(1)and(2)in literature were corrected by the use of 2D-NMR.
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Key words Phyllanthus urinaria L.;ethyl brevifolincarboxylate;brevifolin;corilagin;ellagic acid;gallic acid;2D-NMR
叶下珠为大戟科植物叶下珠(Phyllanthus urinaria L.)的全草.作者对叶下珠的化学成分进行了研究，现报道其化学成分的提取分离与结构鉴定.
1 仪器与材料
北京产电光牌显微熔点测定仪；IFS-55型红外分光光度计(瑞士Brucker公司)；ARX-300MHz型核磁共振仪(瑞士Brucker公司)；VG 70-SE型质谱仪(英国VG公司).叶下珠药材(购自广东).
2 提取与分离
叶下珠粗粉9.5 kg,90%乙醇回流提取2次，每次2 h，过滤，滤液减压回收乙醇，清膏加适量水，分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取.乙酸乙酯萃取液减压回收溶剂，得提取物77.5 g.经硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，从流份146～159份沉淀中得化合物(1)100 mg，母液再行硅胶柱层析，氯仿-丙酮梯度洗脱得化合物(4)15 mg；从流份172～180份中得化合物(2)60 mg；流份183～190合并份再行聚酰胺层析，水洗脱得化合物(5)60 mg；流份207～220份再行聚酰胺层析，30%乙醇洗脱得化合物(3)40 mg；流份223～236份沉淀中得化合物(6)120 mg.
, 百拇医药
3 结构鉴定
通过理化性质及光谱分析(UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR，HMBC)对化合物(1)～(6)进行结构鉴定.
化合物(1)：黄色粉末，mp>300℃(氯仿-甲醇).不溶于苯、石油醚、氯仿，可溶于乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇和二甲基亚砜.三氯化铁反应阳性.IR(KBr)
maxcm-1：3230(OH)，1736，1697，1665( CO )，1600，1526(Ar-).1H-NMR(DMSOd6，300 MHz)δ：1.19(3H，t,J=7 Hz，—OCH2CH3)；4.05(2H，q,J=7 Hz，—OCH2CH3)；2.44(1H，dd,ABX系，JAB=18 Hz，JAX=2 Hz，H-10)；2.98(1H，dd,ABX系，JAB=18 Hz，JBX=7 Hz，H-10)；4.40(1H，dd,ABX系，JBX=7 Hz，JAX=2Hz,H-9);7.29(1H，S,Ar-H).13C-NMR数据见表1(表中“/”数值示其化学位移值不确定).EI-MS m/z(%)：320(M+，32)，274(20)，246(93)，218(38)，191(20).化合物(1)的光谱数据与文献〔1〕中短叶苏木酚酸乙酯(ethyl brevifolincarboxylate)基本一致，但文献中对C2～C6位信号归属有误，由HMBC谱中五个碳信号与质子相关情况(见表2)可以看到，H-9，H-10分别与138.49和145.77相关，由于C-2为直接连氧和羰基，应处于低场，因此推测145.77为C-2信号，则138.49为C-3信号；H-7与140.20和149.60相关，由于羟基的供电作用C-5应处于高场，推断140.20为C-5信号，149.60为C-6信号，则143.63为C-4信号., 百拇医药
化合物(2)：黄色针状结晶，mp>300℃(甲醇).难溶于氯仿，溶于热的甲醇溶液，也可溶于二甲基亚砜，易溶于碱水溶液.三氯化铁反应阳性.IR(KBr)
maxcm-1；3195(OH)，1710，1670( CO )，1592，1520，(Ar-).1H-NMR(CD3COCD3，300 MHz)δ：2.54，3.32(各2H，t,环戊烯酮环上—CH2—CH2—)；7.42(1H，s,Ar—H).13C-NMR数据见表1.其光谱数据与文献〔2〕中短叶苏木酚(brevifolin)基本一致.但文献中对C-5，C-6位信号归属有误，参照化合物(1)的碳信号归属，推断141.60为C-5信号，149.41为C-6信号.化合物(1)、(2)的结构见图1., http://www.100md.com
Tab.1 The 13C-NMR data of compounds(1)、(2)and literature C
Compound(1)
Literature〔1〕
Compound(2)
Literature〔2〕
2
145.77
149.7
145.14
145.02
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3
138.49
140.3
140.23
139.93
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114.93
115.1
115.63
115.10
4
143.63
145.9/143.7
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144.37
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138.5
141.60
149.15
6
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141.39
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108.02
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113.38
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160.52
9
40.69
41.0
23.99
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10
37.01
36.8
33.15
32.99
11
193.02
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193.0
195.74
195.52
CO
171.99
172.1
OCH\-2
60.56
60.67
CH3
13.86
13.9
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13C-NMR
HMBC
2
145.77
H-9
3
138.49
H-9，H-10
4
143.63
5
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140.20
H-7
6
149.60
H-7
化合物(3)：灰白色无定形粉末，mp202～204℃(分解).三氯化铁反应阳性.稀酸水解得没食子酸、鞣花酸及葡萄糖.IR(KBr)
maxcm-1：3404(OH),1719( CO )，1616，1513(Ar-).13C-NMR谱中δ 93.5～61.5六个碳信号为葡萄糖的碳信号；在1H-NMR谱中δ 6.20(1H，d)为糖的端基质子信号，其偶合常数J=7.2 Hz，推断其苷键为β构型.其1H-NMR和 13C-NMR数据见表(3).FAB-MS谱中给出657(M+Na+)峰.化合物(3)的光谱数据与文献〔3，4〕中柯里拉京(corilagin,见图2)的数据基本一致，故鉴定之.参照文献〔1〕及HMBC谱归属了化合物(3)氢信号(见表3)., http://www.100md.com
Fig.1 The structures of compound(1) and (2)
1—Ethyl brevifolincarboxylate R=COOCH2CH3；
2—Brevifolin R=H
Fig.2 The structure of corilagin Tab.3 13C-NMR and 1H-NMR data of compound(3) No
C
H
No
C
, 百拇医药
H
Glucose
C-1
93.51
6.40
(B)
3
144.07
2
68.23
4.08
4
136.45
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3
69.93
4.84
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144.20
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63.67
4.48
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115.83
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74.93
4.54
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7
166.56
6
61.51
4.13，4.98
(C)
C-1
125.02
Galloy1
(A)
C-1
120.11
2
, 百拇医药
107.35
6.72(1H)
2、6
110.11
7.15(2H)
3
144.65
3、5
145.15
4
135.93
4
138.57
, 百拇医药
5
144.20
7
164.53
6
115.18
HHDP
C-1
124.88
7
167.96
(B)
2
, 百拇医药
109.27
6.86(1H)
化合物(4)：白色针状结晶，mp 196～198℃(水重结晶).三氯化铁反应阳性.IR(KBr)
maxcm-1：3310，2500～3000(COOH),1674( CO )，1602，1527(Ar-).EI-MS m/z(%)：154(M+，80)，137(100)，109(35).以上数据与文献〔3〕中原儿茶酸相对照基本一致.故鉴定为原儿茶酸(protocatechuic acid).化合物(5)：无色针状结晶，mp 238～240℃(水重结晶),水溶液呈弱酸性，三氯化铁反应阳性，溴甲酚绿反应阳性.IR(KBr)
maxcm-1:3495，3281(OH),2500～3000(COOH),1666( CO )，1612(Ar-).与没食子酸对照品共薄层,Rf值完全一致，共熔点不下降.故鉴定为没食子酸(gallic acid)., 百拇医药
化合物(6)：黄棕色针状结晶，mp>300℃(甲醇).三氯化铁反应阳性.IR(KBr)
maxcm-1：3234(OH)，1731( CO )，1612，1500(Ar-).1H-NMR(DMSOd6，300 MHz)δ：10.79(2H，br,—OH),7.46(1H，s，Ar-H).EI-MS：m/z(%)302(M+，100),246(12).化合物(6)的光谱数据与文献〔5〕中鞣花酸(ellagic acid)基本一致，故鉴定之.致谢 叶下珠药材由许春泉高级工程师鉴定.各种光谱数据分别由本校测试中心和化工部感光研究院测试，一并感谢. 参考文献
1 郭佳生，王素贤，李铣，等.鼠掌老鹳草抗菌活性成分的研究.药学学报，1987，22(1)：28～32
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2 万振先，喻庆禄，易杨华.叶下珠化学成分的研究(Ⅱ).中草药，1997，28(3)：134～135
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收稿日期:1999-09-07
, 百拇医药