复方联苯苄唑洗剂中联苯苄唑及氢化可的松的含量测定
作者：蔡果
单位：中国医学科学院 中国协和医科大学皮肤病医院，南京市 210042
关键词：
中国药房000320
中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1001-0408(2000)03-0132-01
复方联苯苄唑洗剂是我院自行研制的抗真菌、抗炎止痒的复方制剂，临床用于皮肤癣症、炎症。笔者参照《中国药典》建立了氢化可的松的含量测定方法[1]，并利用吸收度加合性原理于紫外254nm波长处测定总吸收值，再通过氢化可的松的浓度及二者在该波长处的标准曲线计算求得联苯苄唑的含量，从而建立了该制剂的含量测定方法。现将实验结果报告于下：
1 仪器与试药
, 百拇医药
UV-200型双光束紫外分光光度计(日本岛津)；分析天平(上海分析仪器厂)；氢化可的松对照品(扬州制药厂，纯度大于99.5%)；联苯苄唑对照品(扬州制药厂，含量100.2%)；联苯苄唑对照品(上海三维制药有限公司)。
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择
2.1.1 精密称取105℃干燥至恒重的联苯苄唑对照品20.0mg、氢化可的松对照品20.0mg，分别用无水乙醇配制成5.0μg/ml联苯苄唑液(Ⅰ)、5.0μg/ml氢化可的松液(Ⅱ)、含联苯苄唑、氢化可的松均为5.0μg/ml的混合液(Ⅲ)、复方联苯苄唑洗剂除掉联苯苄唑及氢化可的松的基质溶媒液(Ⅳ)。以无水乙醇为空白，将Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ在UV-200型机上于200nm～300nm波长围内扫描，结果表明，联苯苄唑在254nm波长及209nm波长处有特征吸收，氢化可的松在此波长范围有吸收，基质在209nm有吸收，而在254nm波长处无吸收。因此，可选择254nm波长为测定波长，该处吸收值：A总=A联+A氢。
, 百拇医药
2.1.2 精密称取105℃干燥至恒重的氢化可的松及联苯苄唑(均为对照品)各20.0mg，分别配成200μg/ml浓度，各精密量取1ml分别于带塞试管中，另取2支带塞试管，分别加入1ml洗剂溶媒基质液、1ml无水乙醇；以上4管各精密加入9ml无水乙醇、1ml氯化三苯四氮唑，摇匀，各精密加入1ml氢氧化四甲基氨，摇匀，于25℃暗处放置40min～45min，分别于450nm～500nm波长处扫描(以无水乙醇管作参比)。结果表明，仅氢化可的松管于485nm波长处有特征吸收，联苯苄唑管及洗剂溶媒基质管均无吸收。此结果说明联苯苄唑及溶媒基质对氢化可的松的测定无干扰。
2.2 标准曲线的绘制
精密配制浓度为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0μg/ml的联苯苄唑无水乙醇液，浓度为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0μg/ml氢化可的松无水乙醇液，每个浓度各配3份。以无水乙醇为参比，均于254nm波长处测定A值，各自的平均A值与浓度C呈线性关系。回归方程为：联苯苄唑：C=0.035A+0.1 178，γ=1.0(n=10)，线性范围：1.0～10.0μg/ml；氢化可的松：C=0.0 055A+0.1 135，γ=0.9 999(n=10)，线性范围：1.0～10.0μg/ml。结果表明，联苯苄唑、氢化可的松在254nm波长处、浓度在1.0～10.0μg/ml范围内均有良好的线性关系，可用于计算。
, http://www.100md.com
2.3 稳定性试验
分别取2.1项下的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ于3、5、24h重复测定(于254nm波长)A值，结果几乎不变。
2.4 重现性试验
精密配制浓度为5.0μg/ml的联苯苄唑无水乙醇液、氢化可的松无水乙醇液及含联苯苄唑、氢化可的松均为5.0μg/ml的混合液各5份，分别于254nm波长处测定A值，其RSD分别为：0.32%(n=5)、0.24%(n=5)、0.35%(n=5)。
2.5 回收率试验
2.5.1 模拟样品的制备，模拟处方精密配制含1%联苯苄唑、1%氢化可的松的复方联苯苄唑洗剂试样6份。
2.5.2 氢化可的松的含量测定(用对照品法)：精密配制200.0μg/ml的氢化可的松对照液；另取模拟样品精密稀释至含氢化可的松约200.0μg/ml浓度，分别精取1ml于具塞试管中，各精密加入9ml无水乙醇液，另取空白管加10ml无水乙醇液，各管精密加入1ml氯化三苯四氮唑1ml，摇匀，再各精密加入1ml氢氧化四甲基氨，摇匀，于25℃暗处放置40min～45min，以空白管为参比，于485nm波长处分别测定A值，计算即得氢化可的松在模拟样品中的浓度C氢可。
, 百拇医药
2.5.3 样品在254nm处A总的测定：精密量取模拟样品适量，精密稀释至含联苯苄唑、氢化可的松各5.0μg/ml的浓度，以无水乙醇作参比，于254nm波长处测定A值，即得A总。
2.5.4 计算结果：根据2.5.2项测得的C氢，按2.2项下氢化可的松的回归方程计算出在254nm波长处A氢值。基于A总=A氢+A联，由2.5.3可得出A联=A总 — A氢，最后按2.2项下联苯苄唑的回归方程可计算出C联 ，结果见表1。
表1 联苯苄唑、氢化可的松回收率测定结果(n=4) 药品
投入量(mg)
, 百拇医药
测得量(mg)
回收率(%)
(%)
RSD(%)
联苯苄唑
200.2
198.0
98.9
98.6
200.4
198.4
99.0
, http://www.100md.com 199.7
198.2
99.2
100.2
98.8
98.6
0.6
99.3
98.0
98.7
99.8
97.3
97.5
, http://www.100md.com
氢化可的松
200.7
201.8
100.5
101.1
198.8
200.2
100.7
0.4
197.7
199.4
100.9
98.4
, http://www.100md.com
99.7
101.3
98.5
100.1
101.6
100.1
101.4
101.3
2.6 样品的测定
精密量取自制样品数份，按回收率项下测定，结果见表2。表2 样品的含量测定结果(%，n=4) 编号
联苯苄唑
RSD(%)
, 百拇医药
氢化可的松
RSD(%)
1
97.62
0.52
98.93
0.42
2
96.89
0.47
98.52
0.37
3
, http://www.100md.com
95.47
0.58
97.68
0.35
4
98.17
0.49
101.21
0.40
3 讨论
由上可知，联苯苄唑与氢化可的松在254nm波长处均有吸收，但基质在此无吸收，故此处的A值为二者吸收值之和(根据吸收度加合性原理)，且此波长二者均有良好线性关系可供计算；氢化可的松具有与试剂反应生成红色络合物的性质，加之联苯苄唑及基质对其测定无干扰，因而建立氢化可的松的含量测定方法须注意用对照品法较好，这样可消除操作上的系统误差。
本法可不经分离，操作较简便，稳定性及重现性均较好，可作为该制剂的含量测定方法进行质量控制。
参考文献：
1.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(二部)[S].1995年 版.北京：化学工业出版社、广东科技出版社，1995：508.
(收稿日期：2000-03-20), 百拇医药
单位：中国医学科学院 中国协和医科大学皮肤病医院，南京市 210042
关键词：
中国药房000320
中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1001-0408(2000)03-0132-01
复方联苯苄唑洗剂是我院自行研制的抗真菌、抗炎止痒的复方制剂，临床用于皮肤癣症、炎症。笔者参照《中国药典》建立了氢化可的松的含量测定方法[1]，并利用吸收度加合性原理于紫外254nm波长处测定总吸收值，再通过氢化可的松的浓度及二者在该波长处的标准曲线计算求得联苯苄唑的含量，从而建立了该制剂的含量测定方法。现将实验结果报告于下：
1 仪器与试药
, 百拇医药
UV-200型双光束紫外分光光度计(日本岛津)；分析天平(上海分析仪器厂)；氢化可的松对照品(扬州制药厂，纯度大于99.5%)；联苯苄唑对照品(扬州制药厂，含量100.2%)；联苯苄唑对照品(上海三维制药有限公司)。
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择
2.1.1 精密称取105℃干燥至恒重的联苯苄唑对照品20.0mg、氢化可的松对照品20.0mg，分别用无水乙醇配制成5.0μg/ml联苯苄唑液(Ⅰ)、5.0μg/ml氢化可的松液(Ⅱ)、含联苯苄唑、氢化可的松均为5.0μg/ml的混合液(Ⅲ)、复方联苯苄唑洗剂除掉联苯苄唑及氢化可的松的基质溶媒液(Ⅳ)。以无水乙醇为空白，将Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ在UV-200型机上于200nm～300nm波长围内扫描，结果表明，联苯苄唑在254nm波长及209nm波长处有特征吸收，氢化可的松在此波长范围有吸收，基质在209nm有吸收，而在254nm波长处无吸收。因此，可选择254nm波长为测定波长，该处吸收值：A总=A联+A氢。
, 百拇医药
2.1.2 精密称取105℃干燥至恒重的氢化可的松及联苯苄唑(均为对照品)各20.0mg，分别配成200μg/ml浓度，各精密量取1ml分别于带塞试管中，另取2支带塞试管，分别加入1ml洗剂溶媒基质液、1ml无水乙醇；以上4管各精密加入9ml无水乙醇、1ml氯化三苯四氮唑，摇匀，各精密加入1ml氢氧化四甲基氨，摇匀，于25℃暗处放置40min～45min，分别于450nm～500nm波长处扫描(以无水乙醇管作参比)。结果表明，仅氢化可的松管于485nm波长处有特征吸收，联苯苄唑管及洗剂溶媒基质管均无吸收。此结果说明联苯苄唑及溶媒基质对氢化可的松的测定无干扰。
2.2 标准曲线的绘制
精密配制浓度为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0μg/ml的联苯苄唑无水乙醇液，浓度为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0μg/ml氢化可的松无水乙醇液，每个浓度各配3份。以无水乙醇为参比，均于254nm波长处测定A值，各自的平均A值与浓度C呈线性关系。回归方程为：联苯苄唑：C=0.035A+0.1 178，γ=1.0(n=10)，线性范围：1.0～10.0μg/ml；氢化可的松：C=0.0 055A+0.1 135，γ=0.9 999(n=10)，线性范围：1.0～10.0μg/ml。结果表明，联苯苄唑、氢化可的松在254nm波长处、浓度在1.0～10.0μg/ml范围内均有良好的线性关系，可用于计算。
, http://www.100md.com
2.3 稳定性试验
分别取2.1项下的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ于3、5、24h重复测定(于254nm波长)A值，结果几乎不变。
2.4 重现性试验
精密配制浓度为5.0μg/ml的联苯苄唑无水乙醇液、氢化可的松无水乙醇液及含联苯苄唑、氢化可的松均为5.0μg/ml的混合液各5份，分别于254nm波长处测定A值，其RSD分别为：0.32%(n=5)、0.24%(n=5)、0.35%(n=5)。
2.5 回收率试验
2.5.1 模拟样品的制备，模拟处方精密配制含1%联苯苄唑、1%氢化可的松的复方联苯苄唑洗剂试样6份。
2.5.2 氢化可的松的含量测定(用对照品法)：精密配制200.0μg/ml的氢化可的松对照液；另取模拟样品精密稀释至含氢化可的松约200.0μg/ml浓度，分别精取1ml于具塞试管中，各精密加入9ml无水乙醇液，另取空白管加10ml无水乙醇液，各管精密加入1ml氯化三苯四氮唑1ml，摇匀，再各精密加入1ml氢氧化四甲基氨，摇匀，于25℃暗处放置40min～45min，以空白管为参比，于485nm波长处分别测定A值，计算即得氢化可的松在模拟样品中的浓度C氢可。
, 百拇医药
2.5.3 样品在254nm处A总的测定：精密量取模拟样品适量，精密稀释至含联苯苄唑、氢化可的松各5.0μg/ml的浓度，以无水乙醇作参比，于254nm波长处测定A值，即得A总。
2.5.4 计算结果：根据2.5.2项测得的C氢，按2.2项下氢化可的松的回归方程计算出在254nm波长处A氢值。基于A总=A氢+A联，由2.5.3可得出A联=A总 — A氢，最后按2.2项下联苯苄唑的回归方程可计算出C联 ，结果见表1。
表1 联苯苄唑、氢化可的松回收率测定结果(n=4) 药品
投入量(mg)
, 百拇医药
测得量(mg)
回收率(%)
(%)RSD(%)
联苯苄唑
200.2
198.0
98.9
98.6
200.4
198.4
99.0
, http://www.100md.com 199.7
198.2
99.2
100.2
98.8
98.6
0.6
99.3
98.0
98.7
99.8
97.3
97.5
, http://www.100md.com
氢化可的松
200.7
201.8
100.5
101.1
198.8
200.2
100.7
0.4
197.7
199.4
100.9
98.4
, http://www.100md.com
99.7
101.3
98.5
100.1
101.6
100.1
101.4
101.3
2.6 样品的测定
精密量取自制样品数份，按回收率项下测定，结果见表2。表2 样品的含量测定结果(%，n=4) 编号
联苯苄唑
RSD(%)
, 百拇医药
氢化可的松
RSD(%)
1
97.62
0.52
98.93
0.42
2
96.89
0.47
98.52
0.37
3
, http://www.100md.com
95.47
0.58
97.68
0.35
4
98.17
0.49
101.21
0.40
3 讨论
由上可知，联苯苄唑与氢化可的松在254nm波长处均有吸收，但基质在此无吸收，故此处的A值为二者吸收值之和(根据吸收度加合性原理)，且此波长二者均有良好线性关系可供计算；氢化可的松具有与试剂反应生成红色络合物的性质，加之联苯苄唑及基质对其测定无干扰，因而建立氢化可的松的含量测定方法须注意用对照品法较好，这样可消除操作上的系统误差。
本法可不经分离，操作较简便，稳定性及重现性均较好，可作为该制剂的含量测定方法进行质量控制。
参考文献：
1.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(二部)[S].1995年 版.北京：化学工业出版社、广东科技出版社，1995：508.
(收稿日期：2000-03-20), 百拇医药