血液复检的临床意义
作者：马曙轩 刘景汉 丛红英 王桂莲
单位：解放军总医院输血科，北京 100853
关键词：血液复检；血源性疾病；输血
军医进修学院学报000322 [摘要] 目的：为了探讨造成血液复检不合格的原因，减少血源性疾病的传播，笔者将 21 064 袋血液的复检结果进行了统计分析。方法：复检项目中转氨酶(alanine transaminase,ALT)按照一般酶测定原理进行测定。乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)、丙肝病毒抗体(anti-hepatitis C virus,抗-HCV)和爱滋病病毒抗体(anti-human immunodeficiency virus,抗-HIV)均采用酶联免疫吸附法进行检测；梅毒血清试验采用传统的快速血浆反应素法(rapid plasma reagin,RPR)。结果：血液复检不合格率为 1.051%，不合格的主要原因是转氨酶的轻度增高和丙肝抗体阳性。乙肝复检不合格者极少，仅占复检血液的 0.298%，已经不是输血后肝炎的主要原因了。转氨酶+乙肝表面抗原和转氨酶+丙肝抗体两项阳性率均为零，说明急性乙型和丙型肝炎患者已被初检筛选。结论：为了保证受血者安全，杜绝血源性疾病的传播，对血液进行复检是必要的。
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中图号：R457.1 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)03-0226-03
Clinical significance of blood retest post collection
MA Shu-xuan, LIU Jing-han, CONG Hong-ying, WANG Gui-lian
(Department of blood transfusion, PLA General Hospital, Beijing 100853, China )
Objective:In order to seek the main causes for the blood retest post collection and to decrease the occurrence of diseases transmitted by blood transfusion, we perform the statistics and analysis on the retest of 21 064 units of blood. Methods:Of all the items carried out in blood retest, ALT is tested according to the general principle on enzyme examine. As to the items of HBsAg、anti-HCV and anti-HIV, method of ELISA is used. Syphilis is checked with rapid plasma reagin. Results:The rate of unqualified blood unit is about 1.051%. The results of the unqualified retest blood units are mainly caused by slightly increased level of ALT and the positivity of anti-HCV. The unqualified blood on account of the positivity of HBsAg only has a small fraction of 0.299%, which makes little contribution to the heapititis of posttransfusion. In addition, no positivity of ALT+HBsAg or ALT+anti-HCV tells us that the donor with acute heapititis B or C has been checked out in first test. Conclusion:Retest of blood is necessary in order to protect the blood recipients from suffering the transfusion transmitted diseases.
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Key words:blood retest; transfusion transmitted diseases; blood transfusion
我院自 1995 年 3 月按卫生部通知要求对血液进行复检以来，共复检血液 21 064 袋。其中A型血液 5 444袋，B型血液 7 058袋，O型血液 5 848袋，AB型血液 1 814袋。为了对初检合格而复检不合格的血液进行分析，笔者对 4 年来我院复检不合格的血液进行统计。从中可以看出，转氨酶异常和抗-HCV阳性占不合格血液的绝大多数(分别占23.58% 和 70.75%)。
1 材料和方法
1.1 标本的留取 捐血者均来自北京市各单位，捐血前体检均按照国家卫生部关于捐血者体检标准检查合格后抽静脉血 5ml，以硫酸铜比重法测定捐血者血色素是否合格。合格者将其不抗凝的血注入塑料试管中，置37 ℃ 的水浴箱中，待血清析出后取血清进行ALT、HBsAg、抗-HIV及血清梅毒试验。初检结果出来后，选合格捐血者进行采血，血液保养液为ACD-B方(上海市中心血站生产)或CPDA方(长春泰尔茂医用器具有限公司)。采血后立即将管道中不抗凝血液留入试管，取血清作为复检标本，复检通常在采血后次日上午进行。
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1.2 复检的原理、方法和试剂
1.2.1 转氨酶测定 按照一般的酶测定原理进行测定，即：L-丙氨酸+α酮戊二酸ALT→L-谷氨酸
丙酮酸+NADH+H+LDH→L-乳酸
在 30 ℃ 波长 340 nm 条件下读取吸光值(A)，然后依照下式计算血清中转氨酶的酶活浓度：
转氨酶酶疾浓度(μ/L)＝(△A测定/min -△A空白/min)×4286在 30 ℃ 条件下，酶浓度 ≤29 即为正常。
1.2.2 乙型肝炎表面抗原(HBsAg) 采用酶联免疫吸附法 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂为荷兰欧嘉隆科技公司(ORGANONTEKNIKA)生产的乙肝表面抗原检测试剂盒，所有操作步骤均严格按厂商说明书执行[1]。
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1.2.3 丙肝病毒的检测 检测抗-HCV抗体，采用(ELISA)法，试剂盒包被抗原含有丙型肝炎病毒结构区核心抗原和非结构区抗原 C22 和 C23，NS4 和 NS5 (美国DiaSorin公司生产)，按厂商说明书进行操作[2]。初检则采用的是国产试剂(上海实业科华生物技术的限公司)。
1.2.4 爱滋病病毒抗体检测 抗-HIV同样采用ELISA法。试剂为荷兰欧嘉隆科技公司生产，检测过程按“全国爱滋病病毒检测管理规范”和厂商说明书执行。
1.2.5 梅毒血清试验 采用传统的快速血浆反应素法(rapid plasm reagin,RPR)，在不加热血清反应素抗原中，加适量的直径 3～5 μm 的活性炭微粒即成RPR抗原。在印有直径 18 mm 的圆圈的硬纸卡上加捐血者血清 50 μl 和RPR抗原 17 μl。室温 100 r/min 机械摇动反应 8 min。反应混合液中出现肉眼可见黑色凝集颗粒的为梅毒抗体反应阳性，否则为阴性[3]。
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2 结 果
我们对被检合格的 21 064 袋血液进行复检，转氨酶酶活浓度 ≥30 U 即为不合格。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、RPR任意一项若出现阳性，弱阳性或可疑均视为不合格。其中抗-HIV初检有 3 例可疑，送国家爱滋病确证实验室进行确认，结果均为阴性。复检时未发现阳性或可疑标本。复检结果附表。
附表 21 064血液复检阳性数
复检例数
ALT
HBsAg
ALT并HBsAg
抗-HCV
ALT并抗-HCV
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抗-HCV
RPR
A 型
5 444
9
1
0
45
0
0
2
B 型
7 058
, http://www.100md.com 14
2
0
33
0
0
3
O 型
5 848
24
2
0
54
0
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0
1
AB型
1 814
3
1
0
18
0
0
0
合 计
21 064
50
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6
0
150
0
0
6
不合格率(‰)
2.479
0.298
0
7.439
0
0
, http://www.100md.com 0.298
由附表可见，复检血液不合格的主要原因是转氨酶升高和丙肝抗体阳性。其中转氨酶异常升高占不合格血液的 23.5% (50/212)，丙肝抗体阳性及可疑占不合格血液的 70.75% (150/212)。由于乙型肝炎的检测方法已经比较稳定，同时我院初检，复检乙型肝炎表面抗原均采用进口试剂，所以乙肝表面抗原复检不合格标本仅有 6 例，其中 1 例可疑，2 例弱阳性，3 例阳性，占复检不合格标本的 0.298‰。由此可见乙型肝炎在输血后肝炎中所占的比例是很小[3]。
从附表还可看出转氨酶异常同时合并乙型肝炎表面抗原阳性的标本没有 1 例，转氨酶异常同时合并丙肝抗体阳性的标本亦没有,这说明急性乙型肝炎患者和丙型肝炎患者已被初检检出，而复检时转氨酶异常则是其它原因引起的。乙型肝炎和丙型肝炎复检异常的标本也多为可疑或弱阳性，并不同时伴有转氨酶的异常。梅毒血清试验复检合格率为 100%，一方面由于初检和复检方法成熟稳定，另一方面说明捐血者中该病发病率较低。所有项目复检不合格血液占复检标本总数的 1.015% (212/21 064)。
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3 讨 论
对血液进行复检旨在杜绝捐血者“冒名顶替”造成的不合格血液输入患者体内，引起血源性疾病的传播。1995 年以来我们的捐血者均是来自厂矿机关的工人和干部，加上我们严格执行采血前查证制度，基本杜绝了“冒名顶替”现象。但是对血液进行复检仍然是十分必要的，其主要原因有：①防止初检过程中将捐血者标本弄错，把不合格捐血者血液采集后输入患者体内；②目前国家卫生部对捐血者丙肝病毒抗检测规定初检可以使用国产试剂，而复检必须使用进口试剂，以保证血源的安全；③初检合格的捐血者在 30 d 内初检结果均有效，有的捐血者在初检合格后一段时间再捐血，因此复检也可能检出已经感染了肝炎病毒或爱滋病病毒但初检时正好处在“窗口期”的捐血者，降低了漏检率。
因此，虽然对血液进行复检浪费了一定的血液资源，但是为了保证受血者的安全，杜绝血源性疾病的传播，对血液进行复检是必要的。同时应不断总结造成血液复检不合格的原因，降低血液复检不合格率，以减少血液资源的浪费。
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作者简介：马曙轩(1967-)，男，河南省长葛市人，1999年第三军医大学毕业，解放军总医院输血科主管技师；发表论文5篇。电话：(010)66939434
[参考文献]
[1] 俞树荣，陈 拯，张卓然，等.微生物学和微生物学检验[M].第二版，北京：人民卫生出版社，1988.356，385.
[2] Shimizu YK,Weiner AJ,Rosenblatt J， et al.Early events in heapititis C virus infection of chimpanzees[J].ProcNatl Acad SCI,1990,87:6441-6444.
[3] 陶义训，杨振修.性病的免疫诊断[J].中华医学检验杂志，1995，18(16)：335-337.
[4] 刘景汉，林武存，王海林,等.临床输血指南[S].北京：人民军医出版社，1998.49.
收稿日期：1999-12-24； 修回日期：2000-01-23, http://www.100md.com
单位：解放军总医院输血科，北京 100853
关键词：血液复检；血源性疾病；输血
军医进修学院学报000322 [摘要] 目的：为了探讨造成血液复检不合格的原因，减少血源性疾病的传播，笔者将 21 064 袋血液的复检结果进行了统计分析。方法：复检项目中转氨酶(alanine transaminase,ALT)按照一般酶测定原理进行测定。乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)、丙肝病毒抗体(anti-hepatitis C virus,抗-HCV)和爱滋病病毒抗体(anti-human immunodeficiency virus,抗-HIV)均采用酶联免疫吸附法进行检测；梅毒血清试验采用传统的快速血浆反应素法(rapid plasma reagin,RPR)。结果：血液复检不合格率为 1.051%，不合格的主要原因是转氨酶的轻度增高和丙肝抗体阳性。乙肝复检不合格者极少，仅占复检血液的 0.298%，已经不是输血后肝炎的主要原因了。转氨酶+乙肝表面抗原和转氨酶+丙肝抗体两项阳性率均为零，说明急性乙型和丙型肝炎患者已被初检筛选。结论：为了保证受血者安全，杜绝血源性疾病的传播，对血液进行复检是必要的。
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中图号：R457.1 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)03-0226-03
Clinical significance of blood retest post collection
MA Shu-xuan, LIU Jing-han, CONG Hong-ying, WANG Gui-lian
(Department of blood transfusion, PLA General Hospital, Beijing 100853, China )
Objective:In order to seek the main causes for the blood retest post collection and to decrease the occurrence of diseases transmitted by blood transfusion, we perform the statistics and analysis on the retest of 21 064 units of blood. Methods:Of all the items carried out in blood retest, ALT is tested according to the general principle on enzyme examine. As to the items of HBsAg、anti-HCV and anti-HIV, method of ELISA is used. Syphilis is checked with rapid plasma reagin. Results:The rate of unqualified blood unit is about 1.051%. The results of the unqualified retest blood units are mainly caused by slightly increased level of ALT and the positivity of anti-HCV. The unqualified blood on account of the positivity of HBsAg only has a small fraction of 0.299%, which makes little contribution to the heapititis of posttransfusion. In addition, no positivity of ALT+HBsAg or ALT+anti-HCV tells us that the donor with acute heapititis B or C has been checked out in first test. Conclusion:Retest of blood is necessary in order to protect the blood recipients from suffering the transfusion transmitted diseases.
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Key words:blood retest; transfusion transmitted diseases; blood transfusion
我院自 1995 年 3 月按卫生部通知要求对血液进行复检以来，共复检血液 21 064 袋。其中A型血液 5 444袋，B型血液 7 058袋，O型血液 5 848袋，AB型血液 1 814袋。为了对初检合格而复检不合格的血液进行分析，笔者对 4 年来我院复检不合格的血液进行统计。从中可以看出，转氨酶异常和抗-HCV阳性占不合格血液的绝大多数(分别占23.58% 和 70.75%)。
1 材料和方法
1.1 标本的留取 捐血者均来自北京市各单位，捐血前体检均按照国家卫生部关于捐血者体检标准检查合格后抽静脉血 5ml，以硫酸铜比重法测定捐血者血色素是否合格。合格者将其不抗凝的血注入塑料试管中，置37 ℃ 的水浴箱中，待血清析出后取血清进行ALT、HBsAg、抗-HIV及血清梅毒试验。初检结果出来后，选合格捐血者进行采血，血液保养液为ACD-B方(上海市中心血站生产)或CPDA方(长春泰尔茂医用器具有限公司)。采血后立即将管道中不抗凝血液留入试管，取血清作为复检标本，复检通常在采血后次日上午进行。
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1.2 复检的原理、方法和试剂
1.2.1 转氨酶测定 按照一般的酶测定原理进行测定，即：L-丙氨酸+α酮戊二酸ALT→L-谷氨酸
丙酮酸+NADH+H+LDH→L-乳酸
在 30 ℃ 波长 340 nm 条件下读取吸光值(A)，然后依照下式计算血清中转氨酶的酶活浓度：
转氨酶酶疾浓度(μ/L)＝(△A测定/min -△A空白/min)×4286在 30 ℃ 条件下，酶浓度 ≤29 即为正常。
1.2.2 乙型肝炎表面抗原(HBsAg) 采用酶联免疫吸附法 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂为荷兰欧嘉隆科技公司(ORGANONTEKNIKA)生产的乙肝表面抗原检测试剂盒，所有操作步骤均严格按厂商说明书执行[1]。
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1.2.3 丙肝病毒的检测 检测抗-HCV抗体，采用(ELISA)法，试剂盒包被抗原含有丙型肝炎病毒结构区核心抗原和非结构区抗原 C22 和 C23，NS4 和 NS5 (美国DiaSorin公司生产)，按厂商说明书进行操作[2]。初检则采用的是国产试剂(上海实业科华生物技术的限公司)。
1.2.4 爱滋病病毒抗体检测 抗-HIV同样采用ELISA法。试剂为荷兰欧嘉隆科技公司生产，检测过程按“全国爱滋病病毒检测管理规范”和厂商说明书执行。
1.2.5 梅毒血清试验 采用传统的快速血浆反应素法(rapid plasm reagin,RPR)，在不加热血清反应素抗原中，加适量的直径 3～5 μm 的活性炭微粒即成RPR抗原。在印有直径 18 mm 的圆圈的硬纸卡上加捐血者血清 50 μl 和RPR抗原 17 μl。室温 100 r/min 机械摇动反应 8 min。反应混合液中出现肉眼可见黑色凝集颗粒的为梅毒抗体反应阳性，否则为阴性[3]。
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2 结 果
我们对被检合格的 21 064 袋血液进行复检，转氨酶酶活浓度 ≥30 U 即为不合格。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、RPR任意一项若出现阳性，弱阳性或可疑均视为不合格。其中抗-HIV初检有 3 例可疑，送国家爱滋病确证实验室进行确认，结果均为阴性。复检时未发现阳性或可疑标本。复检结果附表。
附表 21 064血液复检阳性数
复检例数
ALT
HBsAg
ALT并HBsAg
抗-HCV
ALT并抗-HCV
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抗-HCV
RPR
A 型
5 444
9
1
0
45
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2
B 型
7 058
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2
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33
0
0
3
O 型
5 848
24
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54
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AB型
1 814
3
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合 计
21 064
50
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6
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150
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不合格率(‰)
2.479
0.298
0
7.439
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由附表可见，复检血液不合格的主要原因是转氨酶升高和丙肝抗体阳性。其中转氨酶异常升高占不合格血液的 23.5% (50/212)，丙肝抗体阳性及可疑占不合格血液的 70.75% (150/212)。由于乙型肝炎的检测方法已经比较稳定，同时我院初检，复检乙型肝炎表面抗原均采用进口试剂，所以乙肝表面抗原复检不合格标本仅有 6 例，其中 1 例可疑，2 例弱阳性，3 例阳性，占复检不合格标本的 0.298‰。由此可见乙型肝炎在输血后肝炎中所占的比例是很小[3]。
从附表还可看出转氨酶异常同时合并乙型肝炎表面抗原阳性的标本没有 1 例，转氨酶异常同时合并丙肝抗体阳性的标本亦没有,这说明急性乙型肝炎患者和丙型肝炎患者已被初检检出，而复检时转氨酶异常则是其它原因引起的。乙型肝炎和丙型肝炎复检异常的标本也多为可疑或弱阳性，并不同时伴有转氨酶的异常。梅毒血清试验复检合格率为 100%，一方面由于初检和复检方法成熟稳定，另一方面说明捐血者中该病发病率较低。所有项目复检不合格血液占复检标本总数的 1.015% (212/21 064)。
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对血液进行复检旨在杜绝捐血者“冒名顶替”造成的不合格血液输入患者体内，引起血源性疾病的传播。1995 年以来我们的捐血者均是来自厂矿机关的工人和干部，加上我们严格执行采血前查证制度，基本杜绝了“冒名顶替”现象。但是对血液进行复检仍然是十分必要的，其主要原因有：①防止初检过程中将捐血者标本弄错，把不合格捐血者血液采集后输入患者体内；②目前国家卫生部对捐血者丙肝病毒抗检测规定初检可以使用国产试剂，而复检必须使用进口试剂，以保证血源的安全；③初检合格的捐血者在 30 d 内初检结果均有效，有的捐血者在初检合格后一段时间再捐血，因此复检也可能检出已经感染了肝炎病毒或爱滋病病毒但初检时正好处在“窗口期”的捐血者，降低了漏检率。
因此，虽然对血液进行复检浪费了一定的血液资源，但是为了保证受血者的安全，杜绝血源性疾病的传播，对血液进行复检是必要的。同时应不断总结造成血液复检不合格的原因，降低血液复检不合格率，以减少血液资源的浪费。
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作者简介：马曙轩(1967-)，男，河南省长葛市人，1999年第三军医大学毕业，解放军总医院输血科主管技师；发表论文5篇。电话：(010)66939434
[参考文献]
[1] 俞树荣，陈 拯，张卓然，等.微生物学和微生物学检验[M].第二版，北京：人民卫生出版社，1988.356，385.
[2] Shimizu YK,Weiner AJ,Rosenblatt J， et al.Early events in heapititis C virus infection of chimpanzees[J].ProcNatl Acad SCI,1990,87:6441-6444.
[3] 陶义训，杨振修.性病的免疫诊断[J].中华医学检验杂志，1995，18(16)：335-337.
[4] 刘景汉，林武存，王海林,等.临床输血指南[S].北京：人民军医出版社，1998.49.
收稿日期：1999-12-24； 修回日期：2000-01-23, http://www.100md.com