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编号:10241092
带显微分光光度和图象分析的显微激光散射系统
http://www.100md.com 《中国激光医学杂志》 2000年第3期
     作者:黄耀熊

    单位:暨南大学生物医学工程研究所(广州市,5 10632)

    关键词:

    Untitled Document【征文号:20327】

    目的:研制一种可对处于不同条件下的单个活态细胞,其胞内分子和胞膜 各种动、静态特性,以及细胞形态结构,同时进行无损、在位、实时测定的带快速显微分光 光度和图象分析功能的显微激光散射光谱和图像分析技术和装置。

    材料和方法:整部装置建立在一Nikon TE300倒置显微镜上。He-Ne激光通过其物镜,聚焦 成约6 μm直径光斑照射到样品上,散射光借助一光纤导出送至光电倍增管后,再送至自相 关器作自相关函数分析。快速显微分光光度和图象分析部分分别在显微镜的前窗和侧窗引出 ,并借助自编的有关软件程序实现有关的操作控制和测定分析。

    结果:本技术可对0.6 μm线径的散射体积进行激光散射测定,并可实现对单个细胞的扫描 测量。给出细胞内分子及其聚集体的大小和分布状态,以及细胞膜的变形系数、扰曲弹性模 量和刚度系数等参数。此外,快速显微分光光度和图象分析部分可在30 ms内给出该线径范 围内样品的分子吸收光谱(波段400~800 nm),测出该分子的性质结构和浓度,同时还给出 整个视场范围内的样品图象,并由图象分析软件得出细胞的大小、形态、表面曲率等参数。

    结论:本技术的实现,使得细胞成为天然的微试管,且所要测定的各种参数同时从分子水平 、亚细胞和细胞水平全面反映细胞胞内蛋白、膜与细胞整体形态结构和功能,特别是在不干 扰其自然状态情况下,对单个细胞进行跟踪测量,这是目前其他手段均未能实现的,预期可 对细胞的生命过程提供新的认识。, 百拇医药