应用RT-PCR检测流产胎儿组织中
作者：蔡家利 姜平 蔡宝祥
单位：蔡家利(西南农业大学动物养殖学院，重庆 400716)；姜平 蔡宝祥(南京农业大学动物医学院，南京 210095)
关键词：猪繁殖与呼吸综合征；反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)；诊断
中国病毒学000311摘要：根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型膜蛋白和核衣壳蛋白基因序列，设计了一对含有EcoR I和BamH I酶切位点的引物，用RT-PCR对四个流产猪场的病料进行了检测，扩增出约918 bp的基因片段。通过病毒分离、酶切鉴定和序列分析证实为PRRSV感染。结果说明应用所设计的引物进行RT-PCR快速检测PRRS是可行的，为我国快速特异诊断PRRS和PRRSV强毒株的深入研究奠定了基础。
中图分类号：S858.28 文献标识码：A
, 百拇医药
文章编号：1003-5125(2000)03-0272-05
Direct Detection of Porcine Reproductive and Respiratory
Syndrome Virus of Stillborn Fetus Tissues by Reverse
Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR)
CAI Jia-li
(Animal Husbandry and Veterinary Medical College,Southwest Agricultural University, Chongqing 400716, China)
, 百拇医药
CAI Bao-xiang，JIANG Ping
(Animal Medical College, Nanjing Ariculture University, Nanjing 210095, China)
Abstract: Primers for RT-PCR were designed on the basis of the M and N gene sequences of U. S. isolate of PRRSV. The primers have restriction endonuclease (EcoR I and BamH I) sites. The tissues of stillborn fetuses of affected swine were detected by RT-PCR in 4 pig farms. The samples were RT-PCR positive. A gene fragment about 918 bp was amplified by RT-PCR, PRRSV were isolated from the tissues of stillborn fetuses. The result showed that PRRSV can be quickly diagnosed by RT-PCR, which laid a basis for quick diagnosis of PRRS and further research of the PRRSV isolates of our country.
, 百拇医药
Key words: PRRS; RT-PCR: Detection; Diagnosis
作者简介：蔡家利(1956年-)，男，重庆市人，副教授，博士，主要研究动物病毒性传染病
参考文献
[1] 姜平，简中友，马志勇，等.中国某地区猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查及病毒分离[J].南京农业大学学报，1996，19(8)：118
[2] 郭宝清，陈章水，刘文兴，等.从疑似流产胎儿分离猪繁殖和呼吸综合征病毒的研究[J].中国畜禽传染病，1996(2)：1-3
[3] Meulenberg J J M, Hulst M M, De Mejier E J, et al. Lelystad virus, the causative agent of porcine epidemic abortion and respiratory syndrone (PEARS) is related to LDV and EAV [J]. Virology, 1993,192:62-74
, 百拇医药
[4] Mardassi H, Mounir S, Dea S, et al. Molecular analysis of the ORF3 to 7 of porcine reproductive and respiratory virus, Quebec reference strain [J]. Arch Virol, 1995,40:1045-1418
[5] 娄高明，李雪梅，殷震.猪繁殖与呼吸综合征诊断方法的研究进展[J].中国兽医杂志，1998，24(2)：40-43
[6] 林万明，杨瑞馥，黄尚志，等.PCR技术操作和应用指南[M].北京：人民军医出版社，1993.334-337
[7] 蔡家利，姜平，蔡宝祥.猪繁殖与呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因的克隆与鉴定[J].中国兽医学报，1999，19(1)：3-6
, 百拇医药
[8] 姜平，简中友，马志勇，等.猪繁殖和呼吸综合征病毒分离与鉴定[J].南京农业大学学报，1997，20(3)：82-86
[9] 罗满林，蔡宝祥，陈溥言.PCR技术及其在家畜病毒性疾病诊断中的应用[J].中国畜禽传染病，1993，(5)：61-63
[10] Suarez P, Zardoya R, Prieto C, et al. Direct detection of the porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus by reverse polymerase chain reaction (RT-PCR) [J]. Arch Virol, 1994,135:88-99
[11] Christopher H J, Nelson E A, Nelson J K, et al. Detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus in boar semen by PCR [J]. J Clin Microbiol, 1995,33(7):1739-1744
收稿日期：1999-04-08，修回日期：1999-06-15, 百拇医药
单位：蔡家利(西南农业大学动物养殖学院，重庆 400716)；姜平 蔡宝祥(南京农业大学动物医学院，南京 210095)
关键词：猪繁殖与呼吸综合征；反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)；诊断
中国病毒学000311摘要：根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型膜蛋白和核衣壳蛋白基因序列，设计了一对含有EcoR I和BamH I酶切位点的引物，用RT-PCR对四个流产猪场的病料进行了检测，扩增出约918 bp的基因片段。通过病毒分离、酶切鉴定和序列分析证实为PRRSV感染。结果说明应用所设计的引物进行RT-PCR快速检测PRRS是可行的，为我国快速特异诊断PRRS和PRRSV强毒株的深入研究奠定了基础。
中图分类号：S858.28 文献标识码：A
, 百拇医药
文章编号：1003-5125(2000)03-0272-05
Direct Detection of Porcine Reproductive and Respiratory
Syndrome Virus of Stillborn Fetus Tissues by Reverse
Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR)
CAI Jia-li
(Animal Husbandry and Veterinary Medical College,Southwest Agricultural University, Chongqing 400716, China)
, 百拇医药
CAI Bao-xiang，JIANG Ping
(Animal Medical College, Nanjing Ariculture University, Nanjing 210095, China)
Abstract: Primers for RT-PCR were designed on the basis of the M and N gene sequences of U. S. isolate of PRRSV. The primers have restriction endonuclease (EcoR I and BamH I) sites. The tissues of stillborn fetuses of affected swine were detected by RT-PCR in 4 pig farms. The samples were RT-PCR positive. A gene fragment about 918 bp was amplified by RT-PCR, PRRSV were isolated from the tissues of stillborn fetuses. The result showed that PRRSV can be quickly diagnosed by RT-PCR, which laid a basis for quick diagnosis of PRRS and further research of the PRRSV isolates of our country.
, 百拇医药
Key words: PRRS; RT-PCR: Detection; Diagnosis
作者简介：蔡家利(1956年-)，男，重庆市人，副教授，博士，主要研究动物病毒性传染病
参考文献
[1] 姜平，简中友，马志勇，等.中国某地区猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查及病毒分离[J].南京农业大学学报，1996，19(8)：118
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[11] Christopher H J, Nelson E A, Nelson J K, et al. Detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus in boar semen by PCR [J]. J Clin Microbiol, 1995,33(7):1739-1744
收稿日期：1999-04-08，修回日期：1999-06-15, 百拇医药