ELISA法检测结核抗体IgG在肺结核诊断中的应用
作者：赵丽玲 陈继红 任红岩 许旺
单位：赵丽玲(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)；陈继红(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)；任红岩(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)；许旺(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)
关键词：结核；抗体IgG；ELISA
宁夏医学杂志000320 【摘要】 为评价结核抗体检测对活动性肺结核的诊断价值，采用快速酶联免疫吸附法(ELISA)检测了418人血清和其中71人体腔液结核抗体IgG。结果活动性肺结核组血清和体腔液中的抗体水平均非常显著高于非结核组(P<0.001)。表明ELISA法检测结核抗体IgG可作为诊断及鉴别诊断活动性肺结核病和非结核性肺部疾病的一项有用的辅助手段。
【中图分类号】 R521 【文献标识码】 B
, 百拇医药
文章编号：1001-5949(2000)03-0163-02
结核病是严重危害人类健康的疾病，结核病过去检测依靠摄X线胸片、痰涂片镜检与培养，但敏感性低，而培养鉴定需要很长时间，远不能满足临床的需要。我们采用ELISA方法测定血清和胸水结核抗体IgG，提示对肺结核的临床诊断有一定的价值。现就我科1997～1998年在这方面的检测结果进行综合报道如下。
1 对象与方法
1.1 对象：活动性肺结核组146例，其中Ⅱ型6例，Ⅲ型64例，Ⅳ型14例，Ⅴ型62例；非活动性肺结核组37例；非结核性肺部疾病者235例，包括肺炎、慢阻肺、支扩、肺癌、肺纤维化等，均为我科同期的住院病人。胸水结核抗体共检测71例，其中有结核性胸腔积液62例，癌性胸水9例。
1.2 诊断依据：肺结核按1978年肺结核病分型诊断标准进行，其它组均经临床、实验室及组织学证实并排除其它疾病者。
, 百拇医药
1.3 方法：试剂，ELISA试剂盒购自温州尹利康生物技术有限公司。患者入院后次日采静脉血2ml，胸水患者经B超定位后抽取胸水，将新鲜的血清和胸水标本，按试剂药盒说明书规定的实验要点操作。用目测法，呈现兰色深于临介孔者为阳性，按呈色深浅判定+～表示阳性程度。
2 结果
2.1 活动性肺结核组血清结核抗体IgG敏感性为83.6%，特异性为90.4%，高于非活动性肺结核组和非结核性肺部疾病组，差异非常显著(P<0.001)，后两组间无差异(P>0.05)，见表1(用卡方检验)。
表1 各组病人检测结果的比较 组别
例数
阳性例数(%)
活动性肺结核
, 百拇医药
146
初治125
103(82.4)
复治21
19(90.5)
非活动性肺结核
37
5(13.5)
非结核性肺病
235
19(8.1)
2.2 不同类型肺结核血清结核抗体阳性率，在各型之间无差异(P>0.05，见表2)。表2 不同类型肺结核血清中特异性结核抗体检测结果 型别
, 百拇医药
例数
阳性例数(%)
Ⅱ
6
5(83.3)
Ⅲ
64
55(85.9)
Ⅳ
14
13(92.8)
Ⅴ
62
, 百拇医药
49(79)
2.3 结核性胸水结核抗体阳性率高于癌性胸水，差异显著(P<0.001)。结核性胸膜炎病人的胸水结核抗体阳性率高于血清结核抗体，差异有显著性(0.05>P>0.01，见表3)。表3 胸水特异性结核抗体检测结果 类别
例数
阳性例数(%)
结核性胸腔积液
62
57(91.9)
癌性胸腔积液
9
1(11.1)
, 百拇医药
3 讨论
近十年来，大量的研究证实，血清结核抗体检测在结核诊断中有重要意义。国内文献报道在活动性肺结核的敏感性为62%～83%，特异性为94%[1，2]。本文结果血清及胸水结核抗体与文献相符，说明结核抗体IgG在活动性，非活动性肺结核和非结核性肺部疾病的诊断鉴别有重要价值。
临床上大多数肺结核病诊断不难，但是对一些免疫功能抑制同时合并有其它疾病者，X线不典型、常规病原学检测不能确定诊断，虽然现有各种先进的基因诊断技术、聚合酶链反应(PCR)，敏感性、特异性高，快速，不依赖培养，检出低活力菌等优点，但目前仍处于研究阶段，难以普及。ELISA法可快速诊断可疑活动性肺结核病人，可以做为活动性肺结核的诊断参考辅助的指标。
在肺结核病人中，细胞免疫起决定作用，但研究发现结核病人体液免疫水平是升高的，其增高的程度与病变活动程度成正比，病情越重，愈为明显，随病情好转而恢复。也有文献认为[3]，体液免疫水平升高是结核菌的繁殖，大量的抗原尤其是结核蛋白抗原的释放，又兼抑制性T细胞功能的削弱，故选择性刺激B细胞丛产生大量的抗体，抗体本身无抗结核菌作用，在体内抗体与结核菌结合，发挥调理素样的作用，使结核菌更容易被吞噬细胞所吞噬，增强细胞免疫功能。
, 百拇医药
关于抗结核治疗对特异性血清结核抗体IgG的影响，报道不一，有认为随着抗结核治疗时间的延长，血清结核抗体水平逐渐下降。本文非活动性结核组均通过治疗后，有相当一大部分结核抗体水平下降。也有人通过随访认为结核抗体IgG在治疗一年至一年半仍维持较高水平，抗体阴转较少[4，5]。关于血清结核抗体是否下降，究竟能维持多长时间，我们虽未做长期观察，但本文通过对21例复治肺结核病人的检测，其中主要以Ⅲ型和Ⅳ型肺结核为多，病史最长达20年之久，结核抗体检测阳性率达95.2%。说明结核抗体在体内维持较高水平时间可更长，其原因有待于进一步的探讨。抗结核治疗后，结核抗体IgG变化不一致，提示我们应根据不同的病期的检测结果做具体分析。
通常胸水中不易找到结核菌，胸水结核菌的培养约1/5的为阳性，费时较长。本文通过ELISA法检测结核性胸膜炎病人胸水结核抗体IgG的阳性率为91.9%，高于癌性胸水11.1%。提示体腔液结核抗体检测，也是鉴别结核与非结核的可行的辅助方法。有人通过观察，结核性体腔液的结核抗体水平与病程长短无关，认为体腔液中抗体的持续时间可能比较长，能持续多久，尚需动态观察，才能得出结论[6]。
, http://www.100md.com
我们认为用ELISA方法检测血清和胸水结核抗体IgG方法简单，无需精密仪器，重复性较好，特别是对临床有结核中毒症状，或有不明原因咯血，痰菌阴性，X线征象不典型的活动性肺结核诊断常较困难，该方法作为一种结核诊断的辅助手段，值得广泛的推广应用。
责编：杨自革
参考文献
[1] 徐朝焰，等.血清结核抗体PPD-IgG检测在结核诊断中的应用[J].中国实用内科杂志，1998，18(10)：618
[2] 秦光祖，等.快速ELISA检测血清抗PPD-IgG对肺结核的诊断价值[J].中国防痨杂志，1997，19(1)：31
[3] 彭卫生.新编结核病学[M].中国医药科技出版社，1994.61
[4] Daniel TM，et al.Enzyme-linked immunosor bene assay using mycobacterial tuberculosis[J].Chest，1985，88：388
[5] 郑跃杰，等.抗结核治疗后三种抗结核抗体的动态观察[J].中华结核和呼吸杂志，1997，14(4)：195
[6] 李景吾，等.酶联免疫法检测体腔液中的抗PPD抗体对结核病诊断价值[J].中华结核和呼吸杂志，1991，14(4)：193
(收稿：1999—09—09), 百拇医药
单位：赵丽玲(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)；陈继红(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)；任红岩(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)；许旺(宁夏银川市第一人民医院呼吸科，宁夏 银川 750001)
关键词：结核；抗体IgG；ELISA
宁夏医学杂志000320 【摘要】 为评价结核抗体检测对活动性肺结核的诊断价值，采用快速酶联免疫吸附法(ELISA)检测了418人血清和其中71人体腔液结核抗体IgG。结果活动性肺结核组血清和体腔液中的抗体水平均非常显著高于非结核组(P<0.001)。表明ELISA法检测结核抗体IgG可作为诊断及鉴别诊断活动性肺结核病和非结核性肺部疾病的一项有用的辅助手段。
【中图分类号】 R521 【文献标识码】 B
, 百拇医药
文章编号：1001-5949(2000)03-0163-02
结核病是严重危害人类健康的疾病，结核病过去检测依靠摄X线胸片、痰涂片镜检与培养，但敏感性低，而培养鉴定需要很长时间，远不能满足临床的需要。我们采用ELISA方法测定血清和胸水结核抗体IgG，提示对肺结核的临床诊断有一定的价值。现就我科1997～1998年在这方面的检测结果进行综合报道如下。
1 对象与方法
1.1 对象：活动性肺结核组146例，其中Ⅱ型6例，Ⅲ型64例，Ⅳ型14例，Ⅴ型62例；非活动性肺结核组37例；非结核性肺部疾病者235例，包括肺炎、慢阻肺、支扩、肺癌、肺纤维化等，均为我科同期的住院病人。胸水结核抗体共检测71例，其中有结核性胸腔积液62例，癌性胸水9例。
1.2 诊断依据：肺结核按1978年肺结核病分型诊断标准进行，其它组均经临床、实验室及组织学证实并排除其它疾病者。
, 百拇医药
1.3 方法：试剂，ELISA试剂盒购自温州尹利康生物技术有限公司。患者入院后次日采静脉血2ml，胸水患者经B超定位后抽取胸水，将新鲜的血清和胸水标本，按试剂药盒说明书规定的实验要点操作。用目测法，呈现兰色深于临介孔者为阳性，按呈色深浅判定+～表示阳性程度。
2 结果
2.1 活动性肺结核组血清结核抗体IgG敏感性为83.6%，特异性为90.4%，高于非活动性肺结核组和非结核性肺部疾病组，差异非常显著(P<0.001)，后两组间无差异(P>0.05)，见表1(用卡方检验)。
表1 各组病人检测结果的比较 组别
例数
阳性例数(%)
活动性肺结核
, 百拇医药
146
初治125
103(82.4)
复治21
19(90.5)
非活动性肺结核
37
5(13.5)
非结核性肺病
235
19(8.1)
2.2 不同类型肺结核血清结核抗体阳性率，在各型之间无差异(P>0.05，见表2)。表2 不同类型肺结核血清中特异性结核抗体检测结果 型别
, 百拇医药
例数
阳性例数(%)
Ⅱ
6
5(83.3)
Ⅲ
64
55(85.9)
Ⅳ
14
13(92.8)
Ⅴ
62
, 百拇医药
49(79)
2.3 结核性胸水结核抗体阳性率高于癌性胸水，差异显著(P<0.001)。结核性胸膜炎病人的胸水结核抗体阳性率高于血清结核抗体，差异有显著性(0.05>P>0.01，见表3)。表3 胸水特异性结核抗体检测结果 类别
例数
阳性例数(%)
结核性胸腔积液
62
57(91.9)
癌性胸腔积液
9
1(11.1)
, 百拇医药
3 讨论
近十年来，大量的研究证实，血清结核抗体检测在结核诊断中有重要意义。国内文献报道在活动性肺结核的敏感性为62%～83%，特异性为94%[1，2]。本文结果血清及胸水结核抗体与文献相符，说明结核抗体IgG在活动性，非活动性肺结核和非结核性肺部疾病的诊断鉴别有重要价值。
临床上大多数肺结核病诊断不难，但是对一些免疫功能抑制同时合并有其它疾病者，X线不典型、常规病原学检测不能确定诊断，虽然现有各种先进的基因诊断技术、聚合酶链反应(PCR)，敏感性、特异性高，快速，不依赖培养，检出低活力菌等优点，但目前仍处于研究阶段，难以普及。ELISA法可快速诊断可疑活动性肺结核病人，可以做为活动性肺结核的诊断参考辅助的指标。
在肺结核病人中，细胞免疫起决定作用，但研究发现结核病人体液免疫水平是升高的，其增高的程度与病变活动程度成正比，病情越重，愈为明显，随病情好转而恢复。也有文献认为[3]，体液免疫水平升高是结核菌的繁殖，大量的抗原尤其是结核蛋白抗原的释放，又兼抑制性T细胞功能的削弱，故选择性刺激B细胞丛产生大量的抗体，抗体本身无抗结核菌作用，在体内抗体与结核菌结合，发挥调理素样的作用，使结核菌更容易被吞噬细胞所吞噬，增强细胞免疫功能。
, 百拇医药
关于抗结核治疗对特异性血清结核抗体IgG的影响，报道不一，有认为随着抗结核治疗时间的延长，血清结核抗体水平逐渐下降。本文非活动性结核组均通过治疗后，有相当一大部分结核抗体水平下降。也有人通过随访认为结核抗体IgG在治疗一年至一年半仍维持较高水平，抗体阴转较少[4，5]。关于血清结核抗体是否下降，究竟能维持多长时间，我们虽未做长期观察，但本文通过对21例复治肺结核病人的检测，其中主要以Ⅲ型和Ⅳ型肺结核为多，病史最长达20年之久，结核抗体检测阳性率达95.2%。说明结核抗体在体内维持较高水平时间可更长，其原因有待于进一步的探讨。抗结核治疗后，结核抗体IgG变化不一致，提示我们应根据不同的病期的检测结果做具体分析。
通常胸水中不易找到结核菌，胸水结核菌的培养约1/5的为阳性，费时较长。本文通过ELISA法检测结核性胸膜炎病人胸水结核抗体IgG的阳性率为91.9%，高于癌性胸水11.1%。提示体腔液结核抗体检测，也是鉴别结核与非结核的可行的辅助方法。有人通过观察，结核性体腔液的结核抗体水平与病程长短无关，认为体腔液中抗体的持续时间可能比较长，能持续多久，尚需动态观察，才能得出结论[6]。
, http://www.100md.com
我们认为用ELISA方法检测血清和胸水结核抗体IgG方法简单，无需精密仪器，重复性较好，特别是对临床有结核中毒症状，或有不明原因咯血，痰菌阴性，X线征象不典型的活动性肺结核诊断常较困难，该方法作为一种结核诊断的辅助手段，值得广泛的推广应用。
责编：杨自革
参考文献
[1] 徐朝焰，等.血清结核抗体PPD-IgG检测在结核诊断中的应用[J].中国实用内科杂志，1998，18(10)：618
[2] 秦光祖，等.快速ELISA检测血清抗PPD-IgG对肺结核的诊断价值[J].中国防痨杂志，1997，19(1)：31
[3] 彭卫生.新编结核病学[M].中国医药科技出版社，1994.61
[4] Daniel TM，et al.Enzyme-linked immunosor bene assay using mycobacterial tuberculosis[J].Chest，1985，88：388
[5] 郑跃杰，等.抗结核治疗后三种抗结核抗体的动态观察[J].中华结核和呼吸杂志，1997，14(4)：195
[6] 李景吾，等.酶联免疫法检测体腔液中的抗PPD抗体对结核病诊断价值[J].中华结核和呼吸杂志，1991，14(4)：193
(收稿：1999—09—09), 百拇医药