炎症牙龈组织中IL-8及其受体的共同表达
作者：栾庆先 涉谷俊昭 石原常 岩山幸雄 曹采方
单位：栾庆先(北京医科大学口腔医学院牙周科 100081)；曹采方(北京医科大学口腔医学院牙周科 100081)；涉谷俊昭(日本朝日大学齿学部齿周病学讲座)；石原常(日本朝日大学齿学部齿周病学讲座)；岩山幸雄(日本朝日大学齿学部齿周病学讲座)
关键词：
中华口腔医学杂志000327 牙周炎患者的牙龈组织局部产生白介素8(Interleukin-8，IL-8)，它可趋化和激活多形核白细胞聚集于局部，引起炎症和组织破坏。IL-8是如何在牙龈组织中发挥作用，牙龈组织中是否表达IL-8受体，这是本研究的目的。
1.材料和方法：选取3例牙周炎患者的牙龈组织，取样前探诊出血指数为2～3级。用2.5%戊二醛和2%多聚甲醛固定24 h，石蜡包埋，制作5 μm的连续组织切片。
组织切片通过二甲苯和梯度酒精脱蜡。用含0.3% H2O2的PBS液浸泡20 min。然后以正常兔血清封闭30 min。以抗人IL-8受体A单克隆抗体和抗人IL-8单克隆抗体作为第一抗体；等量PBS液作阴性对照，分别与切片在室温下反应30 min。采用与过氧化物酶相关联的卵蛋白-生物素染色系统，二氨基联苯胺(DAB)完成显色。以苏木精进行核复染。光学显微镜下观察，拍摄50倍和100倍放大影像。
2.结果：IL-8免疫组化染色：所有样本的牙龈表面上皮棘层的细胞间桥染色阳性，而粒层和基底层细胞均无着色。上皮下结缔组织内均有散在的IL-8阳性细胞，其胞浆有突起。对照组无任何着色现象。
IL-8受体A免疫组化染色：所有样本的牙龈表面上皮棘层细胞间桥IL-8受体A染色阳性，而粒层和基底层细胞均无着色。上皮下结缔组织均有散在的IL-8受体A阳性细胞，其胞浆有突起。与IL-8在炎症牙龈中的表达和分布一致。对照组无任何着色现象。
3.讨论：IL-8通过与其受体结合形成复合物而发挥作用，其受体的表达受温度的调节。4℃时该复合物内在化完全被抑制；37℃时内在化速度已经很快。内在化意味着该复合物从细胞表面被转运到细胞质内的溶酶体中，IL-8被降解后IL-8受体又重新回到细胞的表面。本研究在30℃室温条件下固定牙龈组织，这个温度与体温接近，更能反映体内牙龈组织中IL-8受体表达的实际情况。尽管室温固定的组织内IL-8受体的表达少于冰冻切片中的表达，但我们仍发现牙龈组织表达IL-8受体A。
IL-8受体可存在于黑色素瘤、银屑病、白血病、头颈部鳞状细胞癌患者的组织内，IL-8通过自分泌和旁分泌的方式参与上述疾病的病理过程[1]。本研究对同一牙龈组织连续切片的免疫组化分析显示，炎症牙龈组织内存在IL-8及其受体A的共同表达。这表明在炎症状态下，IL-8同样以自分泌和旁分泌的方式直接作用于局部牙龈组织，而不仅局限于通过激活和诱导多形核白细胞参与调节牙周疾病的免疫病理过程。
参考文献
1，Richards BL,Eisma RJ,Spiro JD,et al.Coexpression of interleukin-8 receptors in head and neck squamous cell carcinoma.Am J Surg,1997,174：507-512.
(收稿日期：1999-08-20), http://www.100md.com
单位：栾庆先(北京医科大学口腔医学院牙周科 100081)；曹采方(北京医科大学口腔医学院牙周科 100081)；涉谷俊昭(日本朝日大学齿学部齿周病学讲座)；石原常(日本朝日大学齿学部齿周病学讲座)；岩山幸雄(日本朝日大学齿学部齿周病学讲座)
关键词：
中华口腔医学杂志000327 牙周炎患者的牙龈组织局部产生白介素8(Interleukin-8，IL-8)，它可趋化和激活多形核白细胞聚集于局部，引起炎症和组织破坏。IL-8是如何在牙龈组织中发挥作用，牙龈组织中是否表达IL-8受体，这是本研究的目的。
1.材料和方法：选取3例牙周炎患者的牙龈组织，取样前探诊出血指数为2～3级。用2.5%戊二醛和2%多聚甲醛固定24 h，石蜡包埋，制作5 μm的连续组织切片。
组织切片通过二甲苯和梯度酒精脱蜡。用含0.3% H2O2的PBS液浸泡20 min。然后以正常兔血清封闭30 min。以抗人IL-8受体A单克隆抗体和抗人IL-8单克隆抗体作为第一抗体；等量PBS液作阴性对照，分别与切片在室温下反应30 min。采用与过氧化物酶相关联的卵蛋白-生物素染色系统，二氨基联苯胺(DAB)完成显色。以苏木精进行核复染。光学显微镜下观察，拍摄50倍和100倍放大影像。
2.结果：IL-8免疫组化染色：所有样本的牙龈表面上皮棘层的细胞间桥染色阳性，而粒层和基底层细胞均无着色。上皮下结缔组织内均有散在的IL-8阳性细胞，其胞浆有突起。对照组无任何着色现象。
IL-8受体A免疫组化染色：所有样本的牙龈表面上皮棘层细胞间桥IL-8受体A染色阳性，而粒层和基底层细胞均无着色。上皮下结缔组织均有散在的IL-8受体A阳性细胞，其胞浆有突起。与IL-8在炎症牙龈中的表达和分布一致。对照组无任何着色现象。
3.讨论：IL-8通过与其受体结合形成复合物而发挥作用，其受体的表达受温度的调节。4℃时该复合物内在化完全被抑制；37℃时内在化速度已经很快。内在化意味着该复合物从细胞表面被转运到细胞质内的溶酶体中，IL-8被降解后IL-8受体又重新回到细胞的表面。本研究在30℃室温条件下固定牙龈组织，这个温度与体温接近，更能反映体内牙龈组织中IL-8受体表达的实际情况。尽管室温固定的组织内IL-8受体的表达少于冰冻切片中的表达，但我们仍发现牙龈组织表达IL-8受体A。
IL-8受体可存在于黑色素瘤、银屑病、白血病、头颈部鳞状细胞癌患者的组织内，IL-8通过自分泌和旁分泌的方式参与上述疾病的病理过程[1]。本研究对同一牙龈组织连续切片的免疫组化分析显示，炎症牙龈组织内存在IL-8及其受体A的共同表达。这表明在炎症状态下，IL-8同样以自分泌和旁分泌的方式直接作用于局部牙龈组织，而不仅局限于通过激活和诱导多形核白细胞参与调节牙周疾病的免疫病理过程。
参考文献
1，Richards BL,Eisma RJ,Spiro JD,et al.Coexpression of interleukin-8 receptors in head and neck squamous cell carcinoma.Am J Surg,1997,174：507-512.
(收稿日期：1999-08-20), http://www.100md.com