针刺治疗糖尿病视网膜病变的实验研究
作者：王德全 刘国真 李永春
单位：山东中医药大学附属医院眼科，济南 250011
关键词：针刺；糖尿病；视网膜
中国中医眼科杂志000301 [摘 要]目的 观察针刺对四氧嘧啶性糖尿病大鼠视网膜病变的预防和治疗作用。方法 将30只四氧嘧啶所致的糖尿病大鼠随机分为3组：造模组、预防组和治疗组，并设正常对照组。预防组自糖尿病模型形成之日起开始针刺，治疗组待确定有视网膜损害后开始针刺，每日1次。20周后将大鼠处死测其血流变、血小板聚集率、超氧化物歧化酶、脂质过氧化物，并进行光镜、电镜观察。结果 针刺预防组及治疗组的化验指标均好于造模组，电镜光镜显示视网膜的病理损害亦轻于造模组。结论 针刺对早期糖尿病视网膜病变具有良好的治疗和防止病变发展作用。 观察针刺对四氧嘧啶性糖尿病大鼠视网膜病变的预防和治疗作用。方法 将30只四氧嘧啶所致的糖尿病大鼠随机分为3组：造模组、预防组和治疗组，并设正常对照组。预防组自糖尿病模型形成之日起开始针刺，治疗组待确定有视网膜损害后开始针刺，每日1次。20周后将大鼠处死测其血流变、血小板聚集率、超氧化物歧化酶、脂质过氧化物，并进行光镜、电镜观察。结果 针刺预防组及治疗组的化验指标均好于造模组，电镜光镜显示视网膜的病理损害亦轻于造模组。结论 针刺对早期糖尿病视网膜病变具有良好的治疗和防止病变发展作用。
, http://www.100md.com
中图分类号：R245.311；R774.1 文献标识码：A 文章编号：1002-4379(2000)03-0125-04
The experimental study on effect acupuncture in treatment of diabetic retinopathy
WANG Dequan, LIU Guozhen, LI Yongchun.
Department of Ophthalmology, the Affiliated Hospital of Shandong Traditional Chinese University, Jinan 250011,China
[Abstract]OBJECTIVE To research effect of acupuncture in treatment of diabetic retinopathy. METHODS Forty rats were divided into four groups randomly. There were 10 rats in each group. Thirty rats with diabetic among them induced by alloxan were divided into model group, preventive group, and treated group. Ten normal rats were as control group. The rats were treated with acupuncture once daily when diabetes mellitus was diagnosed in the preventive group, and when retinopathy was diagnosed in treated group. Acupuncture was not performed in other two groups. All experimental rats were killed in 20 weeks. Index of hemodynamics, ratio of platelet aggregation, superoxidedismutase (SOD), and lipid peroxide assayed among them. Retinal tissues of the rats were examined with optical microscope and electronic microscope. RESULTS Various index of preventive group and treated group are better than model group. Retinal damages caused diabetes mellitus were milder in the preventive group and treated group than the model group according to the data from optical and electronic microscopes. CONCLUSIONS Acupuncture is effect on treatment and stay of diabetic retinopathy at early stage of the disease.
, 百拇医药
[Key words]acupuncture;diabetes mellitus;retina
糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病最常见的并发症之一，以视网膜微血管的病变为特征，发病机理尚未完全明了。本病致残率高，在盲人中，由本病致盲者占10.7%〔1〕。针刺治疗本病的实验研究曾有报道〔2〕，1999年3月～1999年8月我们根据本病气阴两虚、瘀血阻络的病机，从整体出发，标本兼顾,以益气养阴、活血通络为治则，制定了相应的针刺处方，对实验性DR大鼠进行针刺治疗，取得了较理想的效果，报告如下。
1 材料和方法
1.1 实验材料
动物：健康雄性Wistar大鼠60只，由山东医科大学动物中心提供。药物：四氧嘧啶(alloxan),由美国Sigma公司生产。
, 百拇医药
1.2 实验方法
动物模型的制备：用生理盐水与四氧嘧啶配成1%的新鲜溶液，按160mg/kg的剂量快速腹腔注射，24h后重复一次。5d后尾静脉采血测血糖，凡血糖大于16.67mmol/L者作为糖尿病模型，进行实验。
动物分组：在60只大鼠中随机抽取10只做为①正常组；余50只开始造模，造模过程中死亡6只，有6只未成模，成功制备糖尿病大鼠38只，随机抽取10只做为②预防组，开始针刺治疗，每日1次，共20周。余28只自由饮食水15周后，随机抽取3只，处死后做视网膜血管铺片，显示眼底病变符合DR特征〔3〕，将余下20只(饲养过程中死亡5只)形成DR模型的大鼠随机分为③造模组10只，④治疗组10只，并开始对治疗组进行针刺治疗，共计5周。
1.3 治疗方法
取双侧穴位：肝俞、脾俞、肾俞、合谷、三阴交、睛明。
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大鼠的穴位参照文献〔4〕的取穴方法，用0.28mm×15mm毫针，针刺深约0.5～0.8cm，行小幅度捻转手法，平补平泻，留针15min，每5min行针1次，每次每穴10s左右。
1.4 检测指标及方法
①血流变：NEX-1型锥板式粘度仪(成都仪器厂)；②血小板聚集率：由LBY-NJ2型全自动四通道血小板凝聚仪测量(北京普利生集团)；③SOD、LPO：参照试剂盒说明操作，试剂盒由山东中医药大学中心实验室提供；④光镜检查：大鼠处死后立即摘除左侧眼球，用10%甲醛溶液固定，制备视网膜血管铺片；⑤电镜检查：JEOL-1200型透射电镜(日本)。
2 实验结果
2.1 血流变检测比较(表1)
表1 各组大鼠血流变的比较(
±s) 组 别
, 百拇医药
全血粘度
(高切mPa.s)
全血还原粘度
(高切mPa.s)
血浆粘度
(mPa.s)
红细胞压积
(%)
红细胞聚集指数
正常组
3.51±1.182)
, 百拇医药
5.25±2.212)
1.98±0.252)
41.67±2.06
1.67±0.202)
造模组
5.38±0.75
9.57±1.29
2.77±0.25
46.83±2.14
3.65±0.68
治疗组
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3.94±1.091)
7.29±1.521)
2.29±0.431)
46.06±1.86
2.51±0.361)
预防组
3.72±0.351)
6.19±2.251)
2.24±0.381)
45.89±1.63
, http://www.100md.com
2.34±0.351)
注：经q检验，除红细胞压积外与造模组比较：1)q值=治疗组分别为7.41，10.38，4.04，5.77；预防组分别为8.71，14.99，4.29，6.51，均P<0.05;2)q值=正常组分别为9.24，21.27，5.10，10.59，均P<0.01
2.2 各组血小板计数、血小板聚集率比较(表2)
表2各组间血小板计数比较差异无显著性(P>0.05)，DR时血小板聚集率明显升高，与正常组比较P<0.01。经治疗预防组和治疗组的血小板聚集率明显低于造模组(P<0.05)。
2.3 各组超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及血清脂质过氧化物(lipid peroxide,LPO)水平比较(表3)
, 百拇医药
表2 血小板计数及血小板聚(±s) 组 别
n
血小板计数(×109/L)
血小板聚集率
(MPAG)(%)
正常组
10
88.37±10.83
24.92±7.792)
造模组
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10
87.45±7.75
55.40±5.82
治疗组
10
85.70±9.00
44.20±4.511)
预防组
10
92.72±5.13
35.36±7.931)
注：与造模组比较：1)q值分别为4.06，7.67均P<0.05；2)q值为11.99，P<0.01表3 各组大鼠红细胞SOD活性及血清
, 百拇医药
LPO水平的比较(±s)
组 别
n
SOD(μg/ml)
LPO(nmol/L)
正常组
10
97.97±5.522)
46.40±7.632)
造模组
10
, 百拇医药
64.57±7.08
94.60±7.67
治疗组
10
72.33±4.291)
84.00±6.051)
预防组
10
76.83±7.312)
73.70±5.582)
注：与造模组比较:1)q值分别为3.28，4.38，均P<0.05；2)q值分别为14.38，19.09，5.12，8.05，均P<0.01
, 百拇医药
表3中预防组及治疗组大鼠的红细胞SOD活性明显高于造模组，而血清LPO水平明显低于造模组(分别P<0.01和P<0.05)。
2.4 各组大鼠血糖测定结果
表4 各组大鼠血糖的测定结果 组 别
n
治疗前(mmol/L)
治疗后(mmol/L)
正常组
10
4.05±0.41
4.29±0.42
, 百拇医药 造模组
10
25.40±4.91
23.01±5.05
治疗组
10
26.76±4.18
22.98±4.28
预防组
10
26.12±4.23
20.91±3.36
, 百拇医药 经t检验预防组血糖较治疗前显著降低(t=2.90，P<0.05)。而造模组(t=1.06)与治疗组(t=1.63)的血糖治疗前后比较差异无显著性(P>0.05)。
2.5 病理组织改变
电镜：①正常组大鼠视网膜膜盘结构清晰(图1)，E为视网膜毛细血管内皮细胞核，P为周细胞，BM为基底膜，L为毛细血管管腔(图2)；②造模组：视网膜膜盘排列紊乱，结构溶解破坏。毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚，胞质内线粒体肿胀，有吞饮小泡增多现象(图3、图4)；③治疗组：膜盘排列较乱，结构模糊。毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚，胞质内部分线粒体肿胀变性，无吞饮小泡增多现象(图5、图6)；④预防组：膜盘排列稍乱，结构尚清晰。视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，无结节样增厚现象，线粒体结构基本正常，无吞饮小泡增多现象(图7、图8)。
光镜：视网膜血管铺片显示：①正常大鼠视网膜血管结构清晰(图9)；②造模组：毛细血管管腔不规则，动、静脉迂曲交叉及微血管瘤(图10)。③治疗组：毛细血管管腔不规则，动、静脉迂曲，较造模组病变轻，偶可见毛细血管瘤(图11)。③预防组：管腔基本规则，无明显动、静脉迂曲交叉现象，无毛细血管瘤(图12)。
, 百拇医药
3 讨论
DR的发病机理尚未完全明了，目前多强调其血栓性微血管病变的本质，其发病与血流动力学的异常，持续高血糖引起的生化改变及生长激素分泌增多有关。
糖尿病古称“消渴”，初起多属阴虚燥热，渐致气阴两虚。在此基础上，一方面气虚瘀停，再则阴亏血滞，皆可导致瘀血的产生，使已亏之精血不能正常输布运行，目失所养，致使视物昏瞻。故本病是以“气阴两虚、瘀血阻络”为主要病机特点的本虚标实之证，从而确立了“益气养阴、活血通络”的治则。取用背俞穴以扶正固本，其中脾俞健脾益气养血，肝俞养肝血以濡眼目，疏达肝气以化瘀。肾俞补肾益精以奉目珠，滋阴降火以清燥热。睛明位于眼区局部，刺之可使经气直达病所，以疏通眼底血络。合谷主颜面诸窍之疾，有行气通经活络之效。三阴交为足三阴经交会穴，用之健脾调肝益肾，且有活血祛瘀之动。据报道针之可促使某些视网膜轻度缺血疾病的视网膜电图恢复正常〔5〕。诸穴远近配合，标本兼顾，使瘀血去而血络通畅，气阴复而眼目得养，取得了良好的效果。
, 百拇医药
我们通过本实验结果，对针刺治疗DR的作用机理进行了初步探讨：①视网膜微血管的结构和机能紊乱，已被公认为DR的基本病理。通过光镜、电镜病理片显示预防组及治疗组的血管病变明显轻于造模组，因而可以认为针刺对减轻微血管结构的损伤，保护血—视网膜屏障具有一定的作用。②糖尿病患者血液中存在着“四高二低”现象(高凝、高粘、高聚、高浓度；红细胞变形能力降低、纤溶活性降低)，易致微循环瘀滞和微血栓形成，使视网膜组织血氧供应障碍，内皮细胞壁发生改变，如周细胞减少，微血管瘤形成，基底膜增厚等。本实验结果显示，针刺治疗后预防组及治疗组大鼠的血流变与血小板聚集率均较造模组有明显改善，因而可以认为针刺可能通过纠正血液动力学及其成分的异常，从而改善视网膜微循环，减轻视网膜组织的缺血缺氧状态。③自由基的增多可通过一系列生化反应，引起毛细血管基底膜增厚和使血液处于高凝状态，从而在DR的发生中起到重要作用。脂质过氧化物含量反映机体脂质过氧化的速率和强度，超氧化物歧化酶(SOD)属于机体的抗氧化酶保护系统，是氧自由基的主要清除酶。经过针刺治疗，预防组及治疗组大鼠LPO水平明显低于造模组，而红细胞SOD活性明显高于造模组。由此我们认为针刺降糖作用虽不明显，但可能通过对大鼠的整体调节作用，清除自由基，提高抗氧化能力达到对DR的防治作用。
, 百拇医药
预防组的效果较治疗组为优，显示了及早、长期的针刺治疗，对控制DR的发生发展大有裨益。
图1 正常组大鼠视网膜膜盘结构清晰，排列规则 ×15000 图2 正常组大鼠视网膜毛细血管。E为内皮细胞核，P为周细胞，BM为基底膜，L为毛细血管管腔 ×6000 图3 造模组大鼠视网膜膜盘排列紊乱，结构溶解破坏 ×15000 图4 造模组大鼠视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚(黑箭头)，胞质内线粒体肿胀(△)，有吞饮小泡增多现象(白箭头)×12000 图5 治疗组视网膜膜盘排列较乱，结构模糊 ×10000 图6 治疗组视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚(黑箭头)，胞质内部分线粒体肿胀变性，无吞饮小泡增多现象，R为红细胞 ×15000 图7 预防组视网膜膜盘排列稍乱，结构尚清晰 ×15000 图8 预防组视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，无结节样增厚现象，线粒体结构基本正常(黑箭头)，无吞饮小泡增多现象 ×10000 图9 正常大鼠视网膜血管结构 消化铺片 HE ×100 图10 造模组大鼠视网膜毛细血管排列紊乱，迂曲交叉，有的扭曲成团，管经不规则，粗细不均，出现无细胞毛细血管(黑箭头)，可见微血管瘤(*)消化铺片 HE ×200 图11 治疗组大鼠视网膜毛细血管管腔不规则，动静脉排列稍乱，迂曲交叉，但较造模组病变轻，未见无细胞毛细血管。偶可见毛细血管瘤(*)消化铺片 HE ×400 图12 预防组大鼠视网膜毛细血管管腔基本规则，无明显动静脉迂曲交叉现象，无毛细血管瘤和无细胞毛细血管 消化铺片 HE ×200
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参考文献
1，姚芳蔚.眼底病的中医治疗[M].上海：上海中医药大学出版社，1995.63.
2，李石良，陈汉平，郑蕙田，等.针刺对实验性糖尿病大鼠视网膜病变的影响及其作用机理的研究[J].中国针灸，1997，(7)：405.
3，李石良，陈汉平，郑蕙田，等.不同病程糖尿病大鼠的视网膜血管形态学变化[J].*中国糖尿病杂志，1996，4(1)：11.
4，林文注，王 佩.实验针灸学[M].上海：上海科学技术出版社，1994.286.
5，段俊国.不同穴位电针对家兔闪电视网膜电图的作用[J].中国针灸，1996，(12)：38.
收稿日期：2000-02-21, 百拇医药
单位：山东中医药大学附属医院眼科，济南 250011
关键词：针刺；糖尿病；视网膜
中国中医眼科杂志000301 [摘 要]目的 观察针刺对四氧嘧啶性糖尿病大鼠视网膜病变的预防和治疗作用。方法 将30只四氧嘧啶所致的糖尿病大鼠随机分为3组：造模组、预防组和治疗组，并设正常对照组。预防组自糖尿病模型形成之日起开始针刺，治疗组待确定有视网膜损害后开始针刺，每日1次。20周后将大鼠处死测其血流变、血小板聚集率、超氧化物歧化酶、脂质过氧化物，并进行光镜、电镜观察。结果 针刺预防组及治疗组的化验指标均好于造模组，电镜光镜显示视网膜的病理损害亦轻于造模组。结论 针刺对早期糖尿病视网膜病变具有良好的治疗和防止病变发展作用。 观察针刺对四氧嘧啶性糖尿病大鼠视网膜病变的预防和治疗作用。方法 将30只四氧嘧啶所致的糖尿病大鼠随机分为3组：造模组、预防组和治疗组，并设正常对照组。预防组自糖尿病模型形成之日起开始针刺，治疗组待确定有视网膜损害后开始针刺，每日1次。20周后将大鼠处死测其血流变、血小板聚集率、超氧化物歧化酶、脂质过氧化物，并进行光镜、电镜观察。结果 针刺预防组及治疗组的化验指标均好于造模组，电镜光镜显示视网膜的病理损害亦轻于造模组。结论 针刺对早期糖尿病视网膜病变具有良好的治疗和防止病变发展作用。
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中图分类号：R245.311；R774.1 文献标识码：A 文章编号：1002-4379(2000)03-0125-04
The experimental study on effect acupuncture in treatment of diabetic retinopathy
WANG Dequan, LIU Guozhen, LI Yongchun.
Department of Ophthalmology, the Affiliated Hospital of Shandong Traditional Chinese University, Jinan 250011,China
[Abstract]OBJECTIVE To research effect of acupuncture in treatment of diabetic retinopathy. METHODS Forty rats were divided into four groups randomly. There were 10 rats in each group. Thirty rats with diabetic among them induced by alloxan were divided into model group, preventive group, and treated group. Ten normal rats were as control group. The rats were treated with acupuncture once daily when diabetes mellitus was diagnosed in the preventive group, and when retinopathy was diagnosed in treated group. Acupuncture was not performed in other two groups. All experimental rats were killed in 20 weeks. Index of hemodynamics, ratio of platelet aggregation, superoxidedismutase (SOD), and lipid peroxide assayed among them. Retinal tissues of the rats were examined with optical microscope and electronic microscope. RESULTS Various index of preventive group and treated group are better than model group. Retinal damages caused diabetes mellitus were milder in the preventive group and treated group than the model group according to the data from optical and electronic microscopes. CONCLUSIONS Acupuncture is effect on treatment and stay of diabetic retinopathy at early stage of the disease.
, 百拇医药
[Key words]acupuncture;diabetes mellitus;retina
糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病最常见的并发症之一，以视网膜微血管的病变为特征，发病机理尚未完全明了。本病致残率高，在盲人中，由本病致盲者占10.7%〔1〕。针刺治疗本病的实验研究曾有报道〔2〕，1999年3月～1999年8月我们根据本病气阴两虚、瘀血阻络的病机，从整体出发，标本兼顾,以益气养阴、活血通络为治则，制定了相应的针刺处方，对实验性DR大鼠进行针刺治疗，取得了较理想的效果，报告如下。
1 材料和方法
1.1 实验材料
动物：健康雄性Wistar大鼠60只，由山东医科大学动物中心提供。药物：四氧嘧啶(alloxan),由美国Sigma公司生产。
, 百拇医药
1.2 实验方法
动物模型的制备：用生理盐水与四氧嘧啶配成1%的新鲜溶液，按160mg/kg的剂量快速腹腔注射，24h后重复一次。5d后尾静脉采血测血糖，凡血糖大于16.67mmol/L者作为糖尿病模型，进行实验。
动物分组：在60只大鼠中随机抽取10只做为①正常组；余50只开始造模，造模过程中死亡6只，有6只未成模，成功制备糖尿病大鼠38只，随机抽取10只做为②预防组，开始针刺治疗，每日1次，共20周。余28只自由饮食水15周后，随机抽取3只，处死后做视网膜血管铺片，显示眼底病变符合DR特征〔3〕，将余下20只(饲养过程中死亡5只)形成DR模型的大鼠随机分为③造模组10只，④治疗组10只，并开始对治疗组进行针刺治疗，共计5周。
1.3 治疗方法
取双侧穴位：肝俞、脾俞、肾俞、合谷、三阴交、睛明。
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大鼠的穴位参照文献〔4〕的取穴方法，用0.28mm×15mm毫针，针刺深约0.5～0.8cm，行小幅度捻转手法，平补平泻，留针15min，每5min行针1次，每次每穴10s左右。
1.4 检测指标及方法
①血流变：NEX-1型锥板式粘度仪(成都仪器厂)；②血小板聚集率：由LBY-NJ2型全自动四通道血小板凝聚仪测量(北京普利生集团)；③SOD、LPO：参照试剂盒说明操作，试剂盒由山东中医药大学中心实验室提供；④光镜检查：大鼠处死后立即摘除左侧眼球，用10%甲醛溶液固定，制备视网膜血管铺片；⑤电镜检查：JEOL-1200型透射电镜(日本)。
2 实验结果
2.1 血流变检测比较(表1)
表1 各组大鼠血流变的比较(
±s) 组 别, 百拇医药
全血粘度
(高切mPa.s)
全血还原粘度
(高切mPa.s)
血浆粘度
(mPa.s)
红细胞压积
(%)
红细胞聚集指数
正常组
3.51±1.182)
, 百拇医药
5.25±2.212)
1.98±0.252)
41.67±2.06
1.67±0.202)
造模组
5.38±0.75
9.57±1.29
2.77±0.25
46.83±2.14
3.65±0.68
治疗组
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3.94±1.091)
7.29±1.521)
2.29±0.431)
46.06±1.86
2.51±0.361)
预防组
3.72±0.351)
6.19±2.251)
2.24±0.381)
45.89±1.63
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2.34±0.351)
注：经q检验，除红细胞压积外与造模组比较：1)q值=治疗组分别为7.41，10.38，4.04，5.77；预防组分别为8.71，14.99，4.29，6.51，均P<0.05;2)q值=正常组分别为9.24，21.27，5.10，10.59，均P<0.01
2.2 各组血小板计数、血小板聚集率比较(表2)
表2各组间血小板计数比较差异无显著性(P>0.05)，DR时血小板聚集率明显升高，与正常组比较P<0.01。经治疗预防组和治疗组的血小板聚集率明显低于造模组(P<0.05)。
2.3 各组超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及血清脂质过氧化物(lipid peroxide,LPO)水平比较(表3)
, 百拇医药
表2 血小板计数及血小板聚(
±s) 组 别n
血小板计数(×109/L)
血小板聚集率
(MPAG)(%)
正常组
10
88.37±10.83
24.92±7.792)
造模组
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10
87.45±7.75
55.40±5.82
治疗组
10
85.70±9.00
44.20±4.511)
预防组
10
92.72±5.13
35.36±7.931)
注：与造模组比较：1)q值分别为4.06，7.67均P<0.05；2)q值为11.99，P<0.01表3 各组大鼠红细胞SOD活性及血清
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LPO水平的比较(
±s)组 别
n
SOD(μg/ml)
LPO(nmol/L)
正常组
10
97.97±5.522)
46.40±7.632)
造模组
10
, 百拇医药
64.57±7.08
94.60±7.67
治疗组
10
72.33±4.291)
84.00±6.051)
预防组
10
76.83±7.312)
73.70±5.582)
注：与造模组比较:1)q值分别为3.28，4.38，均P<0.05；2)q值分别为14.38，19.09，5.12，8.05，均P<0.01
, 百拇医药
表3中预防组及治疗组大鼠的红细胞SOD活性明显高于造模组，而血清LPO水平明显低于造模组(分别P<0.01和P<0.05)。
2.4 各组大鼠血糖测定结果
表4 各组大鼠血糖的测定结果 组 别
n
治疗前(mmol/L)
治疗后(mmol/L)
正常组
10
4.05±0.41
4.29±0.42
, 百拇医药 造模组
10
25.40±4.91
23.01±5.05
治疗组
10
26.76±4.18
22.98±4.28
预防组
10
26.12±4.23
20.91±3.36
, 百拇医药 经t检验预防组血糖较治疗前显著降低(t=2.90，P<0.05)。而造模组(t=1.06)与治疗组(t=1.63)的血糖治疗前后比较差异无显著性(P>0.05)。
2.5 病理组织改变
电镜：①正常组大鼠视网膜膜盘结构清晰(图1)，E为视网膜毛细血管内皮细胞核，P为周细胞，BM为基底膜，L为毛细血管管腔(图2)；②造模组：视网膜膜盘排列紊乱，结构溶解破坏。毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚，胞质内线粒体肿胀，有吞饮小泡增多现象(图3、图4)；③治疗组：膜盘排列较乱，结构模糊。毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚，胞质内部分线粒体肿胀变性，无吞饮小泡增多现象(图5、图6)；④预防组：膜盘排列稍乱，结构尚清晰。视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，无结节样增厚现象，线粒体结构基本正常，无吞饮小泡增多现象(图7、图8)。
光镜：视网膜血管铺片显示：①正常大鼠视网膜血管结构清晰(图9)；②造模组：毛细血管管腔不规则，动、静脉迂曲交叉及微血管瘤(图10)。③治疗组：毛细血管管腔不规则，动、静脉迂曲，较造模组病变轻，偶可见毛细血管瘤(图11)。③预防组：管腔基本规则，无明显动、静脉迂曲交叉现象，无毛细血管瘤(图12)。
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3 讨论
DR的发病机理尚未完全明了，目前多强调其血栓性微血管病变的本质，其发病与血流动力学的异常，持续高血糖引起的生化改变及生长激素分泌增多有关。
糖尿病古称“消渴”，初起多属阴虚燥热，渐致气阴两虚。在此基础上，一方面气虚瘀停，再则阴亏血滞，皆可导致瘀血的产生，使已亏之精血不能正常输布运行，目失所养，致使视物昏瞻。故本病是以“气阴两虚、瘀血阻络”为主要病机特点的本虚标实之证，从而确立了“益气养阴、活血通络”的治则。取用背俞穴以扶正固本，其中脾俞健脾益气养血，肝俞养肝血以濡眼目，疏达肝气以化瘀。肾俞补肾益精以奉目珠，滋阴降火以清燥热。睛明位于眼区局部，刺之可使经气直达病所，以疏通眼底血络。合谷主颜面诸窍之疾，有行气通经活络之效。三阴交为足三阴经交会穴，用之健脾调肝益肾，且有活血祛瘀之动。据报道针之可促使某些视网膜轻度缺血疾病的视网膜电图恢复正常〔5〕。诸穴远近配合，标本兼顾，使瘀血去而血络通畅，气阴复而眼目得养，取得了良好的效果。
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我们通过本实验结果，对针刺治疗DR的作用机理进行了初步探讨：①视网膜微血管的结构和机能紊乱，已被公认为DR的基本病理。通过光镜、电镜病理片显示预防组及治疗组的血管病变明显轻于造模组，因而可以认为针刺对减轻微血管结构的损伤，保护血—视网膜屏障具有一定的作用。②糖尿病患者血液中存在着“四高二低”现象(高凝、高粘、高聚、高浓度；红细胞变形能力降低、纤溶活性降低)，易致微循环瘀滞和微血栓形成，使视网膜组织血氧供应障碍，内皮细胞壁发生改变，如周细胞减少，微血管瘤形成，基底膜增厚等。本实验结果显示，针刺治疗后预防组及治疗组大鼠的血流变与血小板聚集率均较造模组有明显改善，因而可以认为针刺可能通过纠正血液动力学及其成分的异常，从而改善视网膜微循环，减轻视网膜组织的缺血缺氧状态。③自由基的增多可通过一系列生化反应，引起毛细血管基底膜增厚和使血液处于高凝状态，从而在DR的发生中起到重要作用。脂质过氧化物含量反映机体脂质过氧化的速率和强度，超氧化物歧化酶(SOD)属于机体的抗氧化酶保护系统，是氧自由基的主要清除酶。经过针刺治疗，预防组及治疗组大鼠LPO水平明显低于造模组，而红细胞SOD活性明显高于造模组。由此我们认为针刺降糖作用虽不明显，但可能通过对大鼠的整体调节作用，清除自由基，提高抗氧化能力达到对DR的防治作用。
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预防组的效果较治疗组为优，显示了及早、长期的针刺治疗，对控制DR的发生发展大有裨益。
图1 正常组大鼠视网膜膜盘结构清晰，排列规则 ×15000 图2 正常组大鼠视网膜毛细血管。E为内皮细胞核，P为周细胞，BM为基底膜，L为毛细血管管腔 ×6000 图3 造模组大鼠视网膜膜盘排列紊乱，结构溶解破坏 ×15000 图4 造模组大鼠视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚(黑箭头)，胞质内线粒体肿胀(△)，有吞饮小泡增多现象(白箭头)×12000 图5 治疗组视网膜膜盘排列较乱，结构模糊 ×10000 图6 治疗组视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，结节样增厚(黑箭头)，胞质内部分线粒体肿胀变性，无吞饮小泡增多现象，R为红细胞 ×15000 图7 预防组视网膜膜盘排列稍乱，结构尚清晰 ×15000 图8 预防组视网膜毛细血管基底膜电子密度不均匀，无结节样增厚现象，线粒体结构基本正常(黑箭头)，无吞饮小泡增多现象 ×10000 图9 正常大鼠视网膜血管结构 消化铺片 HE ×100 图10 造模组大鼠视网膜毛细血管排列紊乱，迂曲交叉，有的扭曲成团，管经不规则，粗细不均，出现无细胞毛细血管(黑箭头)，可见微血管瘤(*)消化铺片 HE ×200 图11 治疗组大鼠视网膜毛细血管管腔不规则，动静脉排列稍乱，迂曲交叉，但较造模组病变轻，未见无细胞毛细血管。偶可见毛细血管瘤(*)消化铺片 HE ×400 图12 预防组大鼠视网膜毛细血管管腔基本规则，无明显动静脉迂曲交叉现象，无毛细血管瘤和无细胞毛细血管 消化铺片 HE ×200
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参考文献
1，姚芳蔚.眼底病的中医治疗[M].上海：上海中医药大学出版社，1995.63.
2，李石良，陈汉平，郑蕙田，等.针刺对实验性糖尿病大鼠视网膜病变的影响及其作用机理的研究[J].中国针灸，1997，(7)：405.
3，李石良，陈汉平，郑蕙田，等.不同病程糖尿病大鼠的视网膜血管形态学变化[J].*中国糖尿病杂志，1996，4(1)：11.
4，林文注，王 佩.实验针灸学[M].上海：上海科学技术出版社，1994.286.
5，段俊国.不同穴位电针对家兔闪电视网膜电图的作用[J].中国针灸，1996，(12)：38.
收稿日期：2000-02-21, 百拇医药