烟酰胺对实验性心肌缺血的保护作用
作者：张素荣 关慧灵 刘金铎
单位：张素荣(新乡医学院第一附属医院心内科，河南 卫辉 453100)；关慧灵(新乡医学院第一附属医院心内科，河南 卫辉 453100)；刘金铎(新乡医学院第一附属医院心内科，河南 卫辉 453100)
关键词：
中国危重病急救医学000316 分类号：R541.4 文献标识码：B
文章编号：1003-0603(2000)03-0175-01▲
用异丙基肾上腺素制备心肌缺血模型，通过监测大鼠心肌酶学及组织学改变来观察烟酰胺对缺血心肌的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物：Wistar大鼠36只，雌雄不限，体重200～250 g。随机分为正常对照组和心肌缺血模型组和烟酰胺治疗组，每组12只，实验前腹腔内注射3%戊巴比妥钠45 mg/kg。正常对照组腹腔内注射生理盐水1.5 ml；模型组采用异丙基肾上腺素850 μg/kg，用生理盐水稀释到1.5 ml腹腔注射；治疗组用异丙基肾上腺素(剂量同上)腹腔注射，并肌肉注射烟酰胺50 mg/kg。将制备成的动物模型分别放于笼中，按一般方法喂养24小时后取材。将动物麻醉后固定于实验台上，暴露右侧颈总动脉，向动脉内插管取血2 ml，测定肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)。然后开胸取出心脏，用生理盐水清洗后放于固定液中，心尖部心肌经固定脱水和包埋，切成1 μm厚的组织切片，HE染色后进行光学显微镜检查。
, 百拇医药
1.2 生化检测：CPK、LDH和GOT用瑞士产COBASMIRA罗氏随机式多功能自动生化分析仪监测。
1.3 组织学改变程度与分类标准：组织学改变分为4度：Ⅰ度：无组织学改变；Ⅱ度：心肌间质血管充血、扩张，但无明显心肌坏死；Ⅲ度：心肌细胞出现点状坏死；Ⅳ度：心肌细胞出现小灶性坏死，心肌间质血管扩张、充血，伴有少量淋巴细胞浸润。
1.4 统计学方法：血清CPK、LDH和GOT水平以均数±标准差(
±s)表示，t检验。
2 结 果
2.1 3组动物血清CPK、LDH和GOT水平变化见表1。模型组与正常对照组比较，P均<0.05，说明异丙基肾上腺素850 μg/kg可复制大鼠心肌缺血模型。治疗组与模型组比较，P均<0.05；治疗组与正常对照组比较，P均>0.05。表明烟酰胺对缺血心肌有保护作用。
, 百拇医药
表1 各组大鼠心肌酶测定值(±s) 组别
动物数(只)
CPK(U/L)
LDH(μmol.s-1.L-1)
GOT(nmol.s-1.L-1)
正常对照组
12
, 百拇医药
1 807.81±214.80
4.56±1.29
1 924.38±757.32
模型组
12
2 516.32±808.55*
6.73±1.54*
3 154.80±816.66*
治疗组
12
1 916.38±302.15＃
, 百拇医药
4.08±1.35＃
2 085.75±504.60＃
注：与正常对照组比较：*P<0.05；与模型组比较：＃P<0.05
2.2 3组动物心肌组织学改变：正常对照组大鼠心肌均无组织学改变；心肌缺血模型组大鼠心肌组织学改变：Ⅲ度7只，Ⅳ度5只；烟酰胺治疗组大鼠心肌组织学改变：Ⅰ度、Ⅱ度各5只，Ⅲ 度2只。说明烟酰胺对异丙基肾上腺素所致的心肌缺血有治疗作用。
3 讨 论
实验证明，大量的异丙基肾上腺素能引起心肌细胞缺血和损伤。儿茶酚胺氧化能产生具有细胞毒性的氧自由基〔1〕。大量的氧自由基作用于细胞膜，使膜磷脂结构中聚饱和脂肪酸过氧化，导致心肌细胞膜肿胀，线粒体溃破，引起产能障碍〔2〕。在心室肌细胞膜上存在钾(K)通道，K通道开放剂吡那地尔(Pinacldil)和尼可地尔(Nicorandil)能够缩小心肌梗死面积，K通道阻滞剂格列苯脲(glibenclamide)可消除这些K通道开放剂的心肌保护作用〔3〕。说明烟酰胺对缺血心肌的保护作用主要是通过稳定细胞膜K通道开放而实现的。同时也提示烟酰胺可能有抗氧自由基作用，它能减少心肌酶CPK、LDH、GOT的释放。
, 百拇医药
获奖项目：河南省教委科技进步二等奖(199912088)
作者简介：张素荣(1953-)，女(汉族)，河南卫辉人，副教授。主要从事心血管疾病的防治研究，获河南省教委科技进步二等奖2项，著专著1部，发表论文20余篇。
参考文献：
[1]冯新主编.病理生理学.第3版.北京：人民卫生出版社，1991.221.
[2]于严，苏肇伉，丁文祥.氧自由基清除剂对缺血犬心肌再灌注损伤的保护作用 .中华胸心血管外科杂志，1995，11(1)：43-45.
[3]Yao Z,Gross G J.A comparison of adenosinoind cardioprotection and ischemic preconditoning in dogs.Efficacy,time course,and role of K+ ATP channels.Circulation,1994,89(3):12-29.
收稿日期：1999-08-14, 百拇医药
单位：张素荣(新乡医学院第一附属医院心内科，河南 卫辉 453100)；关慧灵(新乡医学院第一附属医院心内科，河南 卫辉 453100)；刘金铎(新乡医学院第一附属医院心内科，河南 卫辉 453100)
关键词：
中国危重病急救医学000316 分类号：R541.4 文献标识码：B
文章编号：1003-0603(2000)03-0175-01▲
用异丙基肾上腺素制备心肌缺血模型，通过监测大鼠心肌酶学及组织学改变来观察烟酰胺对缺血心肌的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物：Wistar大鼠36只，雌雄不限，体重200～250 g。随机分为正常对照组和心肌缺血模型组和烟酰胺治疗组，每组12只，实验前腹腔内注射3%戊巴比妥钠45 mg/kg。正常对照组腹腔内注射生理盐水1.5 ml；模型组采用异丙基肾上腺素850 μg/kg，用生理盐水稀释到1.5 ml腹腔注射；治疗组用异丙基肾上腺素(剂量同上)腹腔注射，并肌肉注射烟酰胺50 mg/kg。将制备成的动物模型分别放于笼中，按一般方法喂养24小时后取材。将动物麻醉后固定于实验台上，暴露右侧颈总动脉，向动脉内插管取血2 ml，测定肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)。然后开胸取出心脏，用生理盐水清洗后放于固定液中，心尖部心肌经固定脱水和包埋，切成1 μm厚的组织切片，HE染色后进行光学显微镜检查。
, 百拇医药
1.2 生化检测：CPK、LDH和GOT用瑞士产COBASMIRA罗氏随机式多功能自动生化分析仪监测。
1.3 组织学改变程度与分类标准：组织学改变分为4度：Ⅰ度：无组织学改变；Ⅱ度：心肌间质血管充血、扩张，但无明显心肌坏死；Ⅲ度：心肌细胞出现点状坏死；Ⅳ度：心肌细胞出现小灶性坏死，心肌间质血管扩张、充血，伴有少量淋巴细胞浸润。
1.4 统计学方法：血清CPK、LDH和GOT水平以均数±标准差(
±s)表示，t检验。2 结 果
2.1 3组动物血清CPK、LDH和GOT水平变化见表1。模型组与正常对照组比较，P均<0.05，说明异丙基肾上腺素850 μg/kg可复制大鼠心肌缺血模型。治疗组与模型组比较，P均<0.05；治疗组与正常对照组比较，P均>0.05。表明烟酰胺对缺血心肌有保护作用。
, 百拇医药
表1 各组大鼠心肌酶测定值(
±s) 组别动物数(只)
CPK(U/L)
LDH(μmol.s-1.L-1)
GOT(nmol.s-1.L-1)
正常对照组
12
, 百拇医药
1 807.81±214.80
4.56±1.29
1 924.38±757.32
模型组
12
2 516.32±808.55*
6.73±1.54*
3 154.80±816.66*
治疗组
12
1 916.38±302.15＃
, 百拇医药
4.08±1.35＃
2 085.75±504.60＃
注：与正常对照组比较：*P<0.05；与模型组比较：＃P<0.05
2.2 3组动物心肌组织学改变：正常对照组大鼠心肌均无组织学改变；心肌缺血模型组大鼠心肌组织学改变：Ⅲ度7只，Ⅳ度5只；烟酰胺治疗组大鼠心肌组织学改变：Ⅰ度、Ⅱ度各5只，Ⅲ 度2只。说明烟酰胺对异丙基肾上腺素所致的心肌缺血有治疗作用。
3 讨 论
实验证明，大量的异丙基肾上腺素能引起心肌细胞缺血和损伤。儿茶酚胺氧化能产生具有细胞毒性的氧自由基〔1〕。大量的氧自由基作用于细胞膜，使膜磷脂结构中聚饱和脂肪酸过氧化，导致心肌细胞膜肿胀，线粒体溃破，引起产能障碍〔2〕。在心室肌细胞膜上存在钾(K)通道，K通道开放剂吡那地尔(Pinacldil)和尼可地尔(Nicorandil)能够缩小心肌梗死面积，K通道阻滞剂格列苯脲(glibenclamide)可消除这些K通道开放剂的心肌保护作用〔3〕。说明烟酰胺对缺血心肌的保护作用主要是通过稳定细胞膜K通道开放而实现的。同时也提示烟酰胺可能有抗氧自由基作用，它能减少心肌酶CPK、LDH、GOT的释放。
, 百拇医药
获奖项目：河南省教委科技进步二等奖(199912088)
作者简介：张素荣(1953-)，女(汉族)，河南卫辉人，副教授。主要从事心血管疾病的防治研究，获河南省教委科技进步二等奖2项，著专著1部，发表论文20余篇。
参考文献：
[1]冯新主编.病理生理学.第3版.北京：人民卫生出版社，1991.221.
[2]于严，苏肇伉，丁文祥.氧自由基清除剂对缺血犬心肌再灌注损伤的保护作用 .中华胸心血管外科杂志，1995，11(1)：43-45.
[3]Yao Z,Gross G J.A comparison of adenosinoind cardioprotection and ischemic preconditoning in dogs.Efficacy,time course,and role of K+ ATP channels.Circulation,1994,89(3):12-29.
收稿日期：1999-08-14, 百拇医药