仙人掌茎粗多糖提取与总糖含量测定
作者：靳丹虹 纪耀华 崔玉辉 李淑惠
单位：靳丹虹(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)；纪耀华(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)；崔玉辉(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)；李淑惠(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)
关键词：仙人掌；粗多糖；比色法；含量测定
时珍国医国药000306 提要 采用硫酸-苯酚比色法，测定仙人掌茎粗多糖中总糖含量。以阿拉伯糖为标准品，测定波长为482 nm。仙人掌茎粗多糖提取收率为0.913%，总糖含量40.66%。
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2000)03-0199-01
仙人掌粗多糖系从仙人掌科植物仙人掌Opuntia dillenii Haw.的新鲜植物茎中提取的蛋白多糖。仙人掌作为药用已有悠久历史，具有行气活血、清热解毒功能[1]。化学成分研究证明，其同属植物中含有酪胺类等几十种生物碱[2]。另有人从仙人掌果实中离析出阿拉伯半乳糖等多糖成分[3]。但有关仙人掌茎粗多糖的化学研究尚未见报道。我们从仙人掌茎中提得粗多糖，经药理研究证明能使正常小鼠免疫器官重量增加，提高网状内皮系统吞噬功能，同时具有抗疲劳和抗炎作用[4]。本文进一步对此粗多糖中总糖的含量进行了测定。
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1 仪器与药品
721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)，光学读数分析天平(湘仪天平仪器厂)；阿拉伯糖对照品(中国药品生物制品检定所)；苯酚、硫酸、乙醇等试剂均为分析纯；仙人掌新鲜植物茎取自庭院盆栽(2～3 a)仙人掌，并经本校生药教研室鉴定。
2 方法与结果
2.1 仙人掌粗多糖的提取：仙人掌新鲜茎(挖除刺状叶)约0.4 kg，95%乙醇回流除单糖、其它醇溶性成分及色素。药渣常法水煮3次，浓缩至稠，加4倍量乙醇，静止48 h，抽滤。沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚抽洗，挥散溶剂至干，得灰白色粗多糖粉末，收率0.913%，本品难溶于乙醇、乙醚、苯等各类有机溶剂，可溶于热水呈透明淡棕色溶液。茚三酮反应阴性，molisch反应呈棕色环。
2.2 含量测定
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2.2.1 标准曲线的制备：精密称取105℃干燥至恒重的阿拉伯糖150 mg，置100 ml量瓶中，定容。使浓度相当于1.5 mg/ml，精密吸取标准品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，摇匀。分别精密吸取1.0 ml置具塞试管中，加8.0%苯酚溶液1.0 ml，摇匀，快速加入浓H2SO4 5.0 ml，摇匀，置水浴中加热15 min，取出冷至室温。按分光光度法[5]于482 nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。结果对照品浓度在30～150 μg/ml之间，与吸光度呈良好线性关系，建立回归方程为：
A=4.156 4×10-3C-0.012 9，γ=0.999 2。
2.2.2 样品液制备：精密称取干燥(105℃)至恒重的仙人掌粗多糖0.15 g，定容于100 ml量瓶中，精密吸取5 ml置50 ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。使浓度相当于150 mg/ml的样品液，备用。
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2.2.3 样品测定：精密吸取样品液1 ml，置具塞试管中，照标准曲线项下，自“加8%苯酚溶液1.0 ml……”起依法测定吸光度。重复5次，根据回归方程计算溶液浓度，进而计算出总糖百分含量。仙人掌粗多糖中总糖含量为40.66%。
2.2.4 回收率试验：精密吸取已知含量的样品液一定量，5份，分别精密加入不同浓度的标准溶液一定量，依样品测定方法进行测定，计算平均回收率为96.5%， RSD为2.0%，n=5。
3 讨论
多糖含量测定，通常采用硫酸-苯酚比色法，以葡萄糖为标准品在490 nm波长下测定吸光度。我们曾用此法对本文所述仙人掌茎粗多糖进行了含量测定，结果总糖含量为5.34%。由于含量太低，提示葡萄糖可能不是仙人掌茎粗多糖的主要组分。鉴于文献报道[4]仙人掌果实中粗多糖的组成主要为阿拉伯糖，故选用阿拉伯糖为标准品进行测定。结果测定总糖含量为40.66%。表明仙人掌茎粗多糖中阿拉伯糖的比率大于葡萄糖，其确切的组分分析及结构鉴定有待进一步研究。
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作者简介：靳丹虹(1965-)，女(汉族)，吉林省通化市人，现任长春医学高等专科学校药学系讲师，学士学位.
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大辞典(上册)[M].上海：科学技术出版社，1977∶663
[2]王意成.药用的仙人掌植物[J].江苏中医杂志，1980(2)∶54
[3]钱鸿卿.药用仙人掌类植物的研究进展[J].中草药，1996，27∶261
[4]刘 洁，孙文娟，王 杰，等.仙人掌粗多糖的药理实验研究[J].长春中医学院学报，1997，3(2)∶55
[5]中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(1995年版1部)[M].广州：广东科技出版社，1995∶附录30
收稿日期：1999-09-14
修订日期：1999-11-13, http://www.100md.com
单位：靳丹虹(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)；纪耀华(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)；崔玉辉(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)；李淑惠(长春医学高等专科学校，吉林 长春 130031)
关键词：仙人掌；粗多糖；比色法；含量测定
时珍国医国药000306 提要 采用硫酸-苯酚比色法，测定仙人掌茎粗多糖中总糖含量。以阿拉伯糖为标准品，测定波长为482 nm。仙人掌茎粗多糖提取收率为0.913%，总糖含量40.66%。
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2000)03-0199-01
仙人掌粗多糖系从仙人掌科植物仙人掌Opuntia dillenii Haw.的新鲜植物茎中提取的蛋白多糖。仙人掌作为药用已有悠久历史，具有行气活血、清热解毒功能[1]。化学成分研究证明，其同属植物中含有酪胺类等几十种生物碱[2]。另有人从仙人掌果实中离析出阿拉伯半乳糖等多糖成分[3]。但有关仙人掌茎粗多糖的化学研究尚未见报道。我们从仙人掌茎中提得粗多糖，经药理研究证明能使正常小鼠免疫器官重量增加，提高网状内皮系统吞噬功能，同时具有抗疲劳和抗炎作用[4]。本文进一步对此粗多糖中总糖的含量进行了测定。
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1 仪器与药品
721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)，光学读数分析天平(湘仪天平仪器厂)；阿拉伯糖对照品(中国药品生物制品检定所)；苯酚、硫酸、乙醇等试剂均为分析纯；仙人掌新鲜植物茎取自庭院盆栽(2～3 a)仙人掌，并经本校生药教研室鉴定。
2 方法与结果
2.1 仙人掌粗多糖的提取：仙人掌新鲜茎(挖除刺状叶)约0.4 kg，95%乙醇回流除单糖、其它醇溶性成分及色素。药渣常法水煮3次，浓缩至稠，加4倍量乙醇，静止48 h，抽滤。沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚抽洗，挥散溶剂至干，得灰白色粗多糖粉末，收率0.913%，本品难溶于乙醇、乙醚、苯等各类有机溶剂，可溶于热水呈透明淡棕色溶液。茚三酮反应阴性，molisch反应呈棕色环。
2.2 含量测定
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2.2.1 标准曲线的制备：精密称取105℃干燥至恒重的阿拉伯糖150 mg，置100 ml量瓶中，定容。使浓度相当于1.5 mg/ml，精密吸取标准品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，摇匀。分别精密吸取1.0 ml置具塞试管中，加8.0%苯酚溶液1.0 ml，摇匀，快速加入浓H2SO4 5.0 ml，摇匀，置水浴中加热15 min，取出冷至室温。按分光光度法[5]于482 nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。结果对照品浓度在30～150 μg/ml之间，与吸光度呈良好线性关系，建立回归方程为：
A=4.156 4×10-3C-0.012 9，γ=0.999 2。
2.2.2 样品液制备：精密称取干燥(105℃)至恒重的仙人掌粗多糖0.15 g，定容于100 ml量瓶中，精密吸取5 ml置50 ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。使浓度相当于150 mg/ml的样品液，备用。
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2.2.3 样品测定：精密吸取样品液1 ml，置具塞试管中，照标准曲线项下，自“加8%苯酚溶液1.0 ml……”起依法测定吸光度。重复5次，根据回归方程计算溶液浓度，进而计算出总糖百分含量。仙人掌粗多糖中总糖含量为40.66%。
2.2.4 回收率试验：精密吸取已知含量的样品液一定量，5份，分别精密加入不同浓度的标准溶液一定量，依样品测定方法进行测定，计算平均回收率为96.5%， RSD为2.0%，n=5。
3 讨论
多糖含量测定，通常采用硫酸-苯酚比色法，以葡萄糖为标准品在490 nm波长下测定吸光度。我们曾用此法对本文所述仙人掌茎粗多糖进行了含量测定，结果总糖含量为5.34%。由于含量太低，提示葡萄糖可能不是仙人掌茎粗多糖的主要组分。鉴于文献报道[4]仙人掌果实中粗多糖的组成主要为阿拉伯糖，故选用阿拉伯糖为标准品进行测定。结果测定总糖含量为40.66%。表明仙人掌茎粗多糖中阿拉伯糖的比率大于葡萄糖，其确切的组分分析及结构鉴定有待进一步研究。
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作者简介：靳丹虹(1965-)，女(汉族)，吉林省通化市人，现任长春医学高等专科学校药学系讲师，学士学位.
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大辞典(上册)[M].上海：科学技术出版社，1977∶663
[2]王意成.药用的仙人掌植物[J].江苏中医杂志，1980(2)∶54
[3]钱鸿卿.药用仙人掌类植物的研究进展[J].中草药，1996，27∶261
[4]刘 洁，孙文娟，王 杰，等.仙人掌粗多糖的药理实验研究[J].长春中医学院学报，1997，3(2)∶55
[5]中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(1995年版1部)[M].广州：广东科技出版社，1995∶附录30
收稿日期：1999-09-14
修订日期：1999-11-13, http://www.100md.com