香荷药条的稳定性研究
作者：邓远辉 杨柳 董玉珍
单位：广州中医药大学第二附属医院中心实验室， 广州 510120
关键词：@香荷药条/化学；小檗碱/分析
广州中医药大学学报000324摘要：采用加速试验法和留样观察法两种方法对香荷药条进行了稳定性考察，结果表明其在室温下(θ=25℃)较稳定，依样品中盐酸小檗碱含量变化求得室温下有效贮存期为1年。
中图分类号：R283.623 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(2000)03-0264-02
Stability Test of Xianghe Suppositorium
, 百拇医药 DENG Yuanhui，YANG Liu，DONG Yuzhen
(Central Laboratory, the Second Affiliated Hospital, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510120, China)
Abstract: The stability test of Xianghe Suppositorium was carried out by the methods of accelerating destruction and sample reserving observation. It was shown that the sample was relatively stable at room temperature (25℃). According to the changes of berberine in the sample, its effective storage period at room temperature is one year.
, 百拇医药
Key words: @ XIANGHE SUPPOSITORIUM/chemistry; BERBERINE/analysis
药物制剂的稳定性如何，是药物质量的重要标志之一。过去，多用留样观察法来测定其贮存期，但往往需时太长，对研究新制剂、新药物很不方便，因此，利用加速试验来预测药物稳定性已广泛被应用。香荷药条是本院院内制剂，由黄连、黄柏、苦参、紫草、丁香等中药配伍组成，具有清热燥湿、杀虫疗癣之功。经本院妇科临床验证，认为对阴道炎有良好的疗效。本制剂是一种骨架型不溶性栓剂[1]，其稳定性预测方法采用 t0.9法，并与留样观察法相结合，以小檗碱的含量为指标，对香荷药条的稳定性进行研究，以初步考察其稳定期。
1 实验材料与仪器
1.1 仪器 SP8800 高效液相色谱仪，SP8800 高压泵，SPC200紫外可见光检测器，SP4270积分仪。
, http://www.100md.com
1.2 药品与试剂 香荷药条，由广东省中医院中心实验室自制。小檗碱对照品，由中国药品生物制品检定所提供。甲醇、乙腈为色谱纯，其余所用试剂为分析纯。
1.3 色谱条件[2] 色谱柱：BDSC18柱(4.9 mm×250mm，5μm)流动相为乙腈—水(1∶1，1000mL含KH2PO43.4g，SDS1.7g)，流速1mL/min，柱温室温，小檗碱检测波长为345nm。
2 实验方法与结果
2.1 高温加速实验(t0.9法)
2.1.1 标准曲线的制备 精密称取已干燥至恒重的小檗碱，以甲醇为溶剂，配制成0.28 g/L的溶液，精密吸取0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mL置于2mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀后，进样10μL测定。同一浓度测定3次，取其平均值，以标准品的量(μg)为横坐标，小檗碱的峰面积为纵坐标，得回归方程、相关系数及线性范围分别为：Y＝1.41×105X+5.46×106，r＝0.999 9，线性范围0.07 μg-2.24μg。
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2.1.2 供试样品的测定 将20条等重药条分4组置于烧杯中，分别在摄氏温度60℃(热力学温度Θ＝338.2 K)、75℃(348.2 K)、85℃(358.2 K)、95℃(368.2 K)恒温水浴箱中进行加速试验，定时取样，迅速流水冷却终止反应。取药条置于索氏提取器中，加50mL甲醇，65℃提取至无色，提取液置于250mL容量瓶中，用适量甲醇洗涤提取3次。与提取液合并后，用甲醇定容至刻度(250mL)，摇匀，精取0.5 mL置于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度(10mL)，微孔滤膜过滤，得供试液。按上述色谱条件进样分析，测定小檗碱含量，结果见表1。表1 香荷药条中小檗碱在不同温度下含量(ρ)的变化 Θ＝338.2K
Θ＝348.2K
Θ＝358.2K
Θ＝368.2K
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根据小檗碱的含量测定结果，求出各个加速温度下药物分解10%时的时间t0.9 ，然后以lgt0.9对温度θ的倒数关系来计算其室温贮存期。
在各个温度下以1gρ对t假定按一级反应回归处理，得：
Θ＝338.2K时，lgρ＝-0.00043t+1.9950,r＝-0.9666；
, 百拇医药
Θ＝348.2K时，lgρ＝-0.00103t+1.9913,r＝-0.9149；
Θ＝358.2K时，lgρ＝-0.00218t+1.9973,r＝-0.9569；
Θ＝368.2K时，lgρ＝-0.00625t+2.0034,r＝-0.9679。
由于各温度下lgρ与t的关系接近直线关系，说明分解反应可近似视为一级反应，求出各个温度下药物残存率p＝90%时的t，即t0.9，得：
t0.9，338.2k， =94.78h，lgt0.9，338.2K ＝1.9767;
t0.9，348.2K =36.02h，lgt0.9，348.2K ＝1.5565;
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t0.9，358.2K =19.75h，lgt0.9，358.2K ＝1.2956;
t0.9，368.2K =7.87h，lgt0.9，368.2K ＝0.8960;
用lgt0.9对1/Θ进行线性回归，得：
lgt0.9＝4361.65/Θ-10.9301，r＝0.9964。
摄氏温度θ＝25℃，即以Θ＝298.2 K代入回归方程，得：t0.9,298.2K ＝4971.64 h＝207d。由此推出香荷药条的室温摄氏温度为25℃(热力学温度为298.2 K)，稳定期为207d。
2.2 留样观察法 取供试品，在室温自然条件下以塑料薄膜袋密封贮存，1年后取样检测小檗碱含量，结果小檗碱的残存率在90%左右。其他检查包括外观性状、薄层鉴别、水分及卫生学等，均符合规定，说明本品较稳定。
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3 小结
药物制剂的稳定性是影响药物质量的重要标志之一。以往，多用留样观察法来测定药物的贮存期，但此法费工费时，对研究新制剂极为不便。本实验涉及的香荷药条的稳定性预测采用化学动力学法，通过求出各个加速温度下药物分解10%时的时间t0.9，然后以lgt0.9对温度的Θ的倒数关系来计算其室温贮存期。由于药条的外包装不耐高温，所以实验过程中我们拆除了药条的密封外包装，即本实验中药物是在非密闭的条件下进行稳定性预测。而留样观察实验的药物是经密闭封口的成品，因此两个实验结果相比，加温加速试验得出的室温贮存期偏短。为了进一步验证药条贮存期与密封与否的关系，我们将药条密闭于容器中，在恒温箱中保持温度(40±2℃)，用饱和氯化钠溶液控制相对湿度为75%。在此条件下加速试验3个月，取出检测，结果发现，香荷药条中小檗碱的含量变化在12%左右，其他如外观性状、卫生学指标等均合格，其质量标准仍在所要求的范围内。根据美国FDA规定，可确定此产品的有效期为2年。可见，是否密闭保存是影响该制剂的重要因素之一。由于影响加温加速实验的因素较多，较准确的稳定期仍应以室温留样观察为主。
, 百拇医药
基金项目：广东省重点科技攻关资助项目 (9622007-03)
作者简介：邓远辉(1962-)，男，学士，副主任药师
参考文献：
[1] 杨柳，邓远辉，董玉珍.香荷药条的制备工艺研究[J].中草药，1999，30(5):344
[2] 潘杨，王天山，马国祥，等.HPLC法测定糖渴清片中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量[J].南京中医药大学学报，1996，12(6):25
收稿日期：2000-02-22, 百拇医药
单位：广州中医药大学第二附属医院中心实验室， 广州 510120
关键词：@香荷药条/化学；小檗碱/分析
广州中医药大学学报000324摘要：采用加速试验法和留样观察法两种方法对香荷药条进行了稳定性考察，结果表明其在室温下(θ=25℃)较稳定，依样品中盐酸小檗碱含量变化求得室温下有效贮存期为1年。
中图分类号：R283.623 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(2000)03-0264-02
Stability Test of Xianghe Suppositorium
, 百拇医药 DENG Yuanhui，YANG Liu，DONG Yuzhen
(Central Laboratory, the Second Affiliated Hospital, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510120, China)
Abstract: The stability test of Xianghe Suppositorium was carried out by the methods of accelerating destruction and sample reserving observation. It was shown that the sample was relatively stable at room temperature (25℃). According to the changes of berberine in the sample, its effective storage period at room temperature is one year.
, 百拇医药
Key words: @ XIANGHE SUPPOSITORIUM/chemistry; BERBERINE/analysis
药物制剂的稳定性如何，是药物质量的重要标志之一。过去，多用留样观察法来测定其贮存期，但往往需时太长，对研究新制剂、新药物很不方便，因此，利用加速试验来预测药物稳定性已广泛被应用。香荷药条是本院院内制剂，由黄连、黄柏、苦参、紫草、丁香等中药配伍组成，具有清热燥湿、杀虫疗癣之功。经本院妇科临床验证，认为对阴道炎有良好的疗效。本制剂是一种骨架型不溶性栓剂[1]，其稳定性预测方法采用 t0.9法，并与留样观察法相结合，以小檗碱的含量为指标，对香荷药条的稳定性进行研究，以初步考察其稳定期。
1 实验材料与仪器
1.1 仪器 SP8800 高效液相色谱仪，SP8800 高压泵，SPC200紫外可见光检测器，SP4270积分仪。
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1.2 药品与试剂 香荷药条，由广东省中医院中心实验室自制。小檗碱对照品，由中国药品生物制品检定所提供。甲醇、乙腈为色谱纯，其余所用试剂为分析纯。
1.3 色谱条件[2] 色谱柱：BDSC18柱(4.9 mm×250mm，5μm)流动相为乙腈—水(1∶1，1000mL含KH2PO43.4g，SDS1.7g)，流速1mL/min，柱温室温，小檗碱检测波长为345nm。
2 实验方法与结果
2.1 高温加速实验(t0.9法)
2.1.1 标准曲线的制备 精密称取已干燥至恒重的小檗碱，以甲醇为溶剂，配制成0.28 g/L的溶液，精密吸取0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mL置于2mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀后，进样10μL测定。同一浓度测定3次，取其平均值，以标准品的量(μg)为横坐标，小檗碱的峰面积为纵坐标，得回归方程、相关系数及线性范围分别为：Y＝1.41×105X+5.46×106，r＝0.999 9，线性范围0.07 μg-2.24μg。
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2.1.2 供试样品的测定 将20条等重药条分4组置于烧杯中，分别在摄氏温度60℃(热力学温度Θ＝338.2 K)、75℃(348.2 K)、85℃(358.2 K)、95℃(368.2 K)恒温水浴箱中进行加速试验，定时取样，迅速流水冷却终止反应。取药条置于索氏提取器中，加50mL甲醇，65℃提取至无色，提取液置于250mL容量瓶中，用适量甲醇洗涤提取3次。与提取液合并后，用甲醇定容至刻度(250mL)，摇匀，精取0.5 mL置于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度(10mL)，微孔滤膜过滤，得供试液。按上述色谱条件进样分析，测定小檗碱含量，结果见表1。表1 香荷药条中小檗碱在不同温度下含量(ρ)的变化 Θ＝338.2K
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根据小檗碱的含量测定结果，求出各个加速温度下药物分解10%时的时间t0.9 ，然后以lgt0.9对温度θ的倒数关系来计算其室温贮存期。
在各个温度下以1gρ对t假定按一级反应回归处理，得：
Θ＝338.2K时，lgρ＝-0.00043t+1.9950,r＝-0.9666；
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Θ＝348.2K时，lgρ＝-0.00103t+1.9913,r＝-0.9149；
Θ＝358.2K时，lgρ＝-0.00218t+1.9973,r＝-0.9569；
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由于各温度下lgρ与t的关系接近直线关系，说明分解反应可近似视为一级反应，求出各个温度下药物残存率p＝90%时的t，即t0.9，得：
t0.9，338.2k， =94.78h，lgt0.9，338.2K ＝1.9767;
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t0.9，358.2K =19.75h，lgt0.9，358.2K ＝1.2956;
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用lgt0.9对1/Θ进行线性回归，得：
lgt0.9＝4361.65/Θ-10.9301，r＝0.9964。
摄氏温度θ＝25℃，即以Θ＝298.2 K代入回归方程，得：t0.9,298.2K ＝4971.64 h＝207d。由此推出香荷药条的室温摄氏温度为25℃(热力学温度为298.2 K)，稳定期为207d。
2.2 留样观察法 取供试品，在室温自然条件下以塑料薄膜袋密封贮存，1年后取样检测小檗碱含量，结果小檗碱的残存率在90%左右。其他检查包括外观性状、薄层鉴别、水分及卫生学等，均符合规定，说明本品较稳定。
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3 小结
药物制剂的稳定性是影响药物质量的重要标志之一。以往，多用留样观察法来测定药物的贮存期，但此法费工费时，对研究新制剂极为不便。本实验涉及的香荷药条的稳定性预测采用化学动力学法，通过求出各个加速温度下药物分解10%时的时间t0.9，然后以lgt0.9对温度的Θ的倒数关系来计算其室温贮存期。由于药条的外包装不耐高温，所以实验过程中我们拆除了药条的密封外包装，即本实验中药物是在非密闭的条件下进行稳定性预测。而留样观察实验的药物是经密闭封口的成品，因此两个实验结果相比，加温加速试验得出的室温贮存期偏短。为了进一步验证药条贮存期与密封与否的关系，我们将药条密闭于容器中，在恒温箱中保持温度(40±2℃)，用饱和氯化钠溶液控制相对湿度为75%。在此条件下加速试验3个月，取出检测，结果发现，香荷药条中小檗碱的含量变化在12%左右，其他如外观性状、卫生学指标等均合格，其质量标准仍在所要求的范围内。根据美国FDA规定，可确定此产品的有效期为2年。可见，是否密闭保存是影响该制剂的重要因素之一。由于影响加温加速实验的因素较多，较准确的稳定期仍应以室温留样观察为主。
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基金项目：广东省重点科技攻关资助项目 (9622007-03)
作者简介：邓远辉(1962-)，男，学士，副主任药师
参考文献：
[1] 杨柳，邓远辉，董玉珍.香荷药条的制备工艺研究[J].中草药，1999，30(5):344
[2] 潘杨，王天山，马国祥，等.HPLC法测定糖渴清片中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量[J].南京中医药大学学报，1996，12(6):25
收稿日期：2000-02-22, 百拇医药