劲力康口服液对小鼠血中乳酸脱氢酶活力的影响
作者：陈立翠 刘贤武 杜松徽
单位：成都中医药大学，四川 成都 610075
关键词：劲力康口服液；抗疲劳；乳酸脱氢酶；血乳酸
成都中医药大学学报000320 摘 要： 观察了劲力康口服液对小白鼠血中乳酸脱氢酶(LDH)、血中乳酸含量及游泳时间的影响，从分子生物学角度阐述了劲力康口服液抗疲劳的部分机理。结果表明：劲力康口服液能明显增强小鼠血中LDH活性，降低血中乳酸含量，并能延长游泳时间(P<0.05)，从而显示有抗疲劳的作用。
中图分类号： R285.6 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)03-0038-02
“劲力康口服液”是以中医药理论为指导，结合现代医药技术研制而成的吸收快、利用率高、服用方便的中药口服制剂，由黄芪、枸杞、绞股蓝等药物组成，具有补气、益精、生血等功效。为从分子生物学角度探讨劲力康口服液抗疲劳的作用机理，我们进行了劲力康口服液对小鼠血中乳酸脱氢酶活力影响的观察，现将实验结果报告如下。
, 百拇医药
1 材料
1.1 药品
劲力康口服液：由成都中医药大学中药药性研究室提供，批号： 2000420，实验前按成人一日量 39 g/50 kg制成1∶2口服液，使用时根据需要用蒸溜水配制成不同浓度；三勒浆口服液：由华美制药公司出品，规格：30 mLx5，批号：9911023。
1.2 主要试剂
4%硫酸铜，浓硫酸(AR)、蛋白沉淀剂、肝素钠、沉淀剂-NaF混合液、1.5%对羟基联苯溶液乳酸标准应用液；LDH-L 试剂盒，由北京中生生物工程高技术公司提供，批号：991205。
1.3 动物
昆明种小白鼠，体重20 g±2 g,雌雄各半，共40只，由成都中医药大学实验动物中心提供(动物合格证：川实动管质：007号)。
, 百拇医药
1.4 仪器
分光光度计：751-GW 型，惠普上海分析仪器有限工司制造；离心机：LD5-2A型，北京医用离心机厂制造；游泳槽：有机玻璃制成，容积为80cmx50cmx40cm，成都中医药大学中药药性研究室提供；恒温水浴箱、微量移液器、镊子、试管、试管架、比色皿、灌胃针头、一次性注射器等。
2 方法与结果
2.1 劲力康口服液对小白鼠血中LDH活力及血中乳酸的影响
2.1.1 劲力康口服液对小白鼠血中LDH的影响
取健康昆明种小白鼠40只，雌雄各半，随机分为生理盐水组、劲力康高、低剂量组、三勒浆组(阳性对照组)共4组。各组每日给药1次，连续7天，于末次给药24 h后，将小鼠投入游泳槽内让其游泳，平均50 min后捞出，放置15 min后，拔眼球取血1.5 mL，用离心机离心15 min，然后取上清液加入到已加LDH-L试剂盒工作液的比色皿(血清∶工作液＝1∶5，比色皿为1 cm光径)，同时计时，分别在30 s、1、2、3 min时，于340 nm处分别读取A值，确定每分钟平均吸光度变化(ΔA/min)，计算LDH值(LDH活力的计算公式为：LDH (U/L)= ΔA/min×8095)。实验数据均按计量资料输入统计软件中，进行统计学处理。结果见表1。
, 百拇医药
2.1.2 劲力康口服液对小白鼠血中乳酸的影响
在上述实验中另取适量眼球血，加入预先放有肝素钠的试管内，再在另一5 mL试管中加入0.48 mL沉淀剂NaF溶液，准确吸取全血20 μL加入试管内，再加入1.5 mL蛋白沉淀剂，震荡摇匀，用离心机按3000 r/min离心10 min，取出上清液，测定血乳酸含量(血乳酸含量计算方法为：血乳酸含量(mg/100 mL)=A测定管/A标准管×100%)。结果见表1。表1 劲力康口服液对小鼠LDH活力和血乳酸含量的影响 (
±s) 组 别
n
剂量(g/kg)
LDH值
血乳酸值
, http://www.100md.com
生理盐水组
10
等容积
147.21±53.63
48.56±19.77
劲大剂量组
10
15.66
257.63±53.39*
27.53±12.97*
劲小剂量组
10
, 百拇医药
3.92
242.55±90.51*
35.87±4.31
三勒浆组
10
10 mL/kg
183.69±94.10
28.78±10.35*
与生理盐水对照组比较：* P<0.05 2.2 劲力康口服液对小鼠游泳时间的影响
动物及分组、给药方法同2.1。末次给药24 h后，将各组小鼠放入水深40ml、水温35度C的水槽中，让其游泳，直至小鼠头部沉入水中10次不再浮出水面为止(即力竭)，再记录时间，计算出小鼠放入水中至力竭时的时间即为小鼠游泳时间。各分组情况及给药剂量见表2所示。
, 百拇医药
表2 劲力康口服液对小鼠游泳时间的影响 (±s) 组 别
样本数(只)
剂量(g/kg)
游泳时间 (min)
生理盐水组
10
等容积
45±23.81
劲大剂量组
10
15.66
, 百拇医药
120.67±10.82*
劲小剂量组
10
3.92
108.86±7.29*
三勒浆组
10
10ml/kg
104.15±35.05
与生理盐水对照组比较：* P<0.053 讨论
现代运动医学认为体力性疲劳的发生与肌肉在一定负荷运动之后所产生的能量消耗、代谢物堆积等因素有着不可分割的联系。骨骼肌进行高强度运动时，肌糖元迅速酵解，乳酸迅速增加，乳酸解离生成的氢离子占肌肉中酸性物质解离的85%以上，体内乳酸堆积过多，血中乳酸含量也相应增高，氢离子浓度升高，pH下降，影响到内环境的相对稳定，扰乱体内正常代谢，是运动性疲劳产生的重要的原因之一[1] 。乳酸在LDH作用下被氧化成丙酮酸，即乳酸的清除代谢可通过LDH催化而成，LDH活力增加可减少乳酸含量，进而发挥减轻疲劳的作用。中医理论认为精(津)、气、血是构成人体、维持人体生命活动的基本物质，是体力产生的物质基础，它们的化生和运行与中医的脾、肾有密切关系，人的耐力也由此而生。脾为后天之本，气血生化之源，脾主四肢肌肉，与运动关系密切。结合现代医学研究结果表明，脾具有维护脏腑的正常机能与激发和增强元气以抗御病邪的能力；肾藏精，主骨生髓，为先天之本，是体力产生的原动力和源泉，这决定了它的盛衰在生命活动中的重要意义。
, 百拇医药
劲力康口服液由黄芪、枸杞、绞股蓝等药物组成，是以中医药理论为指导，结合现代医药技术研制而成的一种吸收快，利用率高，服用方便的口服制剂，具有补气益精生血等功效，常用于体力劳动者、脑力劳动者过度疲劳所致的精气血不足之证。处方中黄芪为补脾气之要药，能增强机体的活动能力，有增强机体抵抗力的作用[2]；枸杞能滋补肝肾、益精血，能增强体质和体力而抗疲劳[3]；黄芪、枸杞等中药在提高运动耐力的同时，尚有分别激活或调节T淋巴细胞、巨噬细胞、抗体水平以增强或调节免疫功能，使机体的抗病能力增强，能承受大运动量的训练，延缓疲劳的产生[4]。绞股蓝含有多种与人参皂甙类似的成分，具有类人参样的生理活性物质，且能抗疲劳，兴奋肾上腺皮质，有大补元气的作用[5]。
笔者曾对“劲力康口服液” 抗疲劳、抗缺氧、兴奋神经中枢、延缓衰老等方面进行了药效学实验研究(通过小鼠爬杆试验法观察增强肌力作用，小鼠游泳试验观察抗疲劳作用，动物耗氧量测定法观察抗缺氧作用，还观察了对中枢神经系统功能的影响等)，提示本方有补气益精生血抗疲劳的作用。本次实验主要是根据疲劳的机理即血中乳酸的堆积与乳酸脱氢酶清除活力，拟从分子生物学角度探讨劲力康口服液抗疲劳的作用机理。结果表明：劲力康口服液各剂量组均能明显延长小鼠游泳时间，提高小鼠血中乳酸脱氢酶活力，同时降低血乳酸含量，说明劲力康口服液有增强体力、抗疲劳的作用，且抗疲劳的作用机理与该方增强乳酸脱氢酶活力，清除血中乳酸密切相关。对劲力康口服液用于脑力劳动者过度疲劳，对脑组织ATP的生成和储存、促进能量代谢、减少乳酸堆积、增加组织运动强度和时间的作用机理有待进一步探讨。
, 百拇医药
基金项目：四川省计划委员会资助项目
作者简介：陈立翠，女，1950年4月生；副研究员；研究方向：儿科呼吸系统疾病的临床与实验研究及体质食疗研究。
参考文献
1，郭中钰.抗疲劳1号对游泳大鼠血乳酸含量的影响[J].中国病理生理杂志， 1998，14(2)：34
2，杨玉梅.增血速口服液的抗疲劳与耐缺氧作用研究[J].中草药，1998.29(9):616
3，施建蓉.中医药组方抗运动性疲劳的研究与展望[J].中国运动医学杂志，1999，18(4):344
4，陈金和.补肾延寿胶囊抗衰老作用[J].中国临床药理学与治疗学杂志，1999，4(1):30
5，张谟瑞.多功能的抗衰老药——绞股蓝[J].中医药信息杂志，1996，13(4):12
(收稿日期：2000-06-17), 百拇医药
单位：成都中医药大学，四川 成都 610075
关键词：劲力康口服液；抗疲劳；乳酸脱氢酶；血乳酸
成都中医药大学学报000320 摘 要： 观察了劲力康口服液对小白鼠血中乳酸脱氢酶(LDH)、血中乳酸含量及游泳时间的影响，从分子生物学角度阐述了劲力康口服液抗疲劳的部分机理。结果表明：劲力康口服液能明显增强小鼠血中LDH活性，降低血中乳酸含量，并能延长游泳时间(P<0.05)，从而显示有抗疲劳的作用。
中图分类号： R285.6 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)03-0038-02
“劲力康口服液”是以中医药理论为指导，结合现代医药技术研制而成的吸收快、利用率高、服用方便的中药口服制剂，由黄芪、枸杞、绞股蓝等药物组成，具有补气、益精、生血等功效。为从分子生物学角度探讨劲力康口服液抗疲劳的作用机理，我们进行了劲力康口服液对小鼠血中乳酸脱氢酶活力影响的观察，现将实验结果报告如下。
, 百拇医药
1 材料
1.1 药品
劲力康口服液：由成都中医药大学中药药性研究室提供，批号： 2000420，实验前按成人一日量 39 g/50 kg制成1∶2口服液，使用时根据需要用蒸溜水配制成不同浓度；三勒浆口服液：由华美制药公司出品，规格：30 mLx5，批号：9911023。
1.2 主要试剂
4%硫酸铜，浓硫酸(AR)、蛋白沉淀剂、肝素钠、沉淀剂-NaF混合液、1.5%对羟基联苯溶液乳酸标准应用液；LDH-L 试剂盒，由北京中生生物工程高技术公司提供，批号：991205。
1.3 动物
昆明种小白鼠，体重20 g±2 g,雌雄各半，共40只，由成都中医药大学实验动物中心提供(动物合格证：川实动管质：007号)。
, 百拇医药
1.4 仪器
分光光度计：751-GW 型，惠普上海分析仪器有限工司制造；离心机：LD5-2A型，北京医用离心机厂制造；游泳槽：有机玻璃制成，容积为80cmx50cmx40cm，成都中医药大学中药药性研究室提供；恒温水浴箱、微量移液器、镊子、试管、试管架、比色皿、灌胃针头、一次性注射器等。
2 方法与结果
2.1 劲力康口服液对小白鼠血中LDH活力及血中乳酸的影响
2.1.1 劲力康口服液对小白鼠血中LDH的影响
取健康昆明种小白鼠40只，雌雄各半，随机分为生理盐水组、劲力康高、低剂量组、三勒浆组(阳性对照组)共4组。各组每日给药1次，连续7天，于末次给药24 h后，将小鼠投入游泳槽内让其游泳，平均50 min后捞出，放置15 min后，拔眼球取血1.5 mL，用离心机离心15 min，然后取上清液加入到已加LDH-L试剂盒工作液的比色皿(血清∶工作液＝1∶5，比色皿为1 cm光径)，同时计时，分别在30 s、1、2、3 min时，于340 nm处分别读取A值，确定每分钟平均吸光度变化(ΔA/min)，计算LDH值(LDH活力的计算公式为：LDH (U/L)= ΔA/min×8095)。实验数据均按计量资料输入统计软件中，进行统计学处理。结果见表1。
, 百拇医药
2.1.2 劲力康口服液对小白鼠血中乳酸的影响
在上述实验中另取适量眼球血，加入预先放有肝素钠的试管内，再在另一5 mL试管中加入0.48 mL沉淀剂NaF溶液，准确吸取全血20 μL加入试管内，再加入1.5 mL蛋白沉淀剂，震荡摇匀，用离心机按3000 r/min离心10 min，取出上清液，测定血乳酸含量(血乳酸含量计算方法为：血乳酸含量(mg/100 mL)=A测定管/A标准管×100%)。结果见表1。表1 劲力康口服液对小鼠LDH活力和血乳酸含量的影响 (
±s) 组 别n
剂量(g/kg)
LDH值
血乳酸值
, http://www.100md.com
生理盐水组
10
等容积
147.21±53.63
48.56±19.77
劲大剂量组
10
15.66
257.63±53.39*
27.53±12.97*
劲小剂量组
10
, 百拇医药
3.92
242.55±90.51*
35.87±4.31
三勒浆组
10
10 mL/kg
183.69±94.10
28.78±10.35*
与生理盐水对照组比较：* P<0.05 2.2 劲力康口服液对小鼠游泳时间的影响
动物及分组、给药方法同2.1。末次给药24 h后，将各组小鼠放入水深40ml、水温35度C的水槽中，让其游泳，直至小鼠头部沉入水中10次不再浮出水面为止(即力竭)，再记录时间，计算出小鼠放入水中至力竭时的时间即为小鼠游泳时间。各分组情况及给药剂量见表2所示。
, 百拇医药
表2 劲力康口服液对小鼠游泳时间的影响 (
±s) 组 别样本数(只)
剂量(g/kg)
游泳时间 (min)
生理盐水组
10
等容积
45±23.81
劲大剂量组
10
15.66
, 百拇医药
120.67±10.82*
劲小剂量组
10
3.92
108.86±7.29*
三勒浆组
10
10ml/kg
104.15±35.05
与生理盐水对照组比较：* P<0.053 讨论
现代运动医学认为体力性疲劳的发生与肌肉在一定负荷运动之后所产生的能量消耗、代谢物堆积等因素有着不可分割的联系。骨骼肌进行高强度运动时，肌糖元迅速酵解，乳酸迅速增加，乳酸解离生成的氢离子占肌肉中酸性物质解离的85%以上，体内乳酸堆积过多，血中乳酸含量也相应增高，氢离子浓度升高，pH下降，影响到内环境的相对稳定，扰乱体内正常代谢，是运动性疲劳产生的重要的原因之一[1] 。乳酸在LDH作用下被氧化成丙酮酸，即乳酸的清除代谢可通过LDH催化而成，LDH活力增加可减少乳酸含量，进而发挥减轻疲劳的作用。中医理论认为精(津)、气、血是构成人体、维持人体生命活动的基本物质，是体力产生的物质基础，它们的化生和运行与中医的脾、肾有密切关系，人的耐力也由此而生。脾为后天之本，气血生化之源，脾主四肢肌肉，与运动关系密切。结合现代医学研究结果表明，脾具有维护脏腑的正常机能与激发和增强元气以抗御病邪的能力；肾藏精，主骨生髓，为先天之本，是体力产生的原动力和源泉，这决定了它的盛衰在生命活动中的重要意义。
, 百拇医药
劲力康口服液由黄芪、枸杞、绞股蓝等药物组成，是以中医药理论为指导，结合现代医药技术研制而成的一种吸收快，利用率高，服用方便的口服制剂，具有补气益精生血等功效，常用于体力劳动者、脑力劳动者过度疲劳所致的精气血不足之证。处方中黄芪为补脾气之要药，能增强机体的活动能力，有增强机体抵抗力的作用[2]；枸杞能滋补肝肾、益精血，能增强体质和体力而抗疲劳[3]；黄芪、枸杞等中药在提高运动耐力的同时，尚有分别激活或调节T淋巴细胞、巨噬细胞、抗体水平以增强或调节免疫功能，使机体的抗病能力增强，能承受大运动量的训练，延缓疲劳的产生[4]。绞股蓝含有多种与人参皂甙类似的成分，具有类人参样的生理活性物质，且能抗疲劳，兴奋肾上腺皮质，有大补元气的作用[5]。
笔者曾对“劲力康口服液” 抗疲劳、抗缺氧、兴奋神经中枢、延缓衰老等方面进行了药效学实验研究(通过小鼠爬杆试验法观察增强肌力作用，小鼠游泳试验观察抗疲劳作用，动物耗氧量测定法观察抗缺氧作用，还观察了对中枢神经系统功能的影响等)，提示本方有补气益精生血抗疲劳的作用。本次实验主要是根据疲劳的机理即血中乳酸的堆积与乳酸脱氢酶清除活力，拟从分子生物学角度探讨劲力康口服液抗疲劳的作用机理。结果表明：劲力康口服液各剂量组均能明显延长小鼠游泳时间，提高小鼠血中乳酸脱氢酶活力，同时降低血乳酸含量，说明劲力康口服液有增强体力、抗疲劳的作用，且抗疲劳的作用机理与该方增强乳酸脱氢酶活力，清除血中乳酸密切相关。对劲力康口服液用于脑力劳动者过度疲劳，对脑组织ATP的生成和储存、促进能量代谢、减少乳酸堆积、增加组织运动强度和时间的作用机理有待进一步探讨。
, 百拇医药
基金项目：四川省计划委员会资助项目
作者简介：陈立翠，女，1950年4月生；副研究员；研究方向：儿科呼吸系统疾病的临床与实验研究及体质食疗研究。
参考文献
1，郭中钰.抗疲劳1号对游泳大鼠血乳酸含量的影响[J].中国病理生理杂志， 1998，14(2)：34
2，杨玉梅.增血速口服液的抗疲劳与耐缺氧作用研究[J].中草药，1998.29(9):616
3，施建蓉.中医药组方抗运动性疲劳的研究与展望[J].中国运动医学杂志，1999，18(4):344
4，陈金和.补肾延寿胶囊抗衰老作用[J].中国临床药理学与治疗学杂志，1999，4(1):30
5，张谟瑞.多功能的抗衰老药——绞股蓝[J].中医药信息杂志，1996，13(4):12
(收稿日期：2000-06-17), 百拇医药