乙型肝炎病毒感染者HLA-DRB基因分型及其相关性研究
作者：刘建平 林辉 宋建勇
单位：刘建平(第三军医大学预防医学系流行病学教研室，重庆 400038)；林辉(第三军医大学预防医学系流行病学教研室，重庆 400038)；宋建勇(第三军医大学预防医学系流行病学教研室，重庆 400038)
关键词：HBV感染；HLA-DRB；基因分型；聚合酶链反应(PCR)
第三军医大学学报000416 提 要： 目的 探索乙肝病毒(HBV)感染者HLA-DRB基因 频率及其与疾病的相关性。方法 用PCR-SSP对重庆地区汉族乙肝患者4 0例和正常人120名进行HLA-DRB基因分型，结合临床病型与HBV复制状态作相关性分析。结果：重庆地区汉族正常人以DR2(15)、DR5(12)、DR9位点 常见，乙肝患者与之比较DR3基因频率明显增高(P< 0.05)，DR5(12 )、DR7基 因频率也有增高，均见于慢性乙肝和肝硬化，相对危险度DR3为2.4,DR7为2.0。DR7基 因多见于HBV高复制状态，相对危险度为2.4。结论：HLA-DR3基因与 重庆地区汉族慢性乙肝和肝硬化相关，DR7与HBV高复制状态有关；免疫遗传因素参与慢性 乙肝的发病机制。
, 百拇医药
中图法分类号： R512.62 文献标识码：A
文章编号：1000-5404(2000)04-0354-03
HLA-DRB genotyping and its relation in patients with HBV infection
LIU Jia-ping, LIN Hui, SONG Jian-yong
(Department of Epide miology, Third Military Medical University, Chongqing 400038,China)
Abstract： Objective To study the frequency of dif ferent genotypes of HLA-DRB gene and their relations to HBV infection. Methods HLA-DRB genotyping was conducted in 40 cases of HBV infection and 120 healthy subjects with polymerase chian reaction-sequence specific prime r (PCR-SSP). All the patients and healthy subjects were residents of chongqing district and belonged to Han Natiionality. The relationship of different genotyp es of HLA-DRB with the clinical types of HBV infection was analyzed. Re sults HLA-DR2(15), DR5(12) and DR9 were the frequent gen otypes in the healthy residents of Chongqing with the frequency of 18.3%, 16.7% and 14.2% respectively. The frequency of HLA-DR3 was increased from 3.3% in h ealthy subjects to 12.5% in patients with chronic hepatitis B and hepatitis B-a ssociated liver cirrhosis (P< 0.05). The frequency of HLA-DR 5(12) and HLA-DR7 was also increased in those patients. The relative risk coefficient w as 2.4 for HLA-DR3 and 2.0 for HLA-DR7. HLA-DR7 was usually found in hi gh replication condition of HBV with a relative risk coefficient of 2.4. Conclusion HLA-DR3 is related to hepatitis B and liver cirrhosis o f the Han Nationality in Chongqing district. HLA-DR7 is usually found in high replication condition of HBV. And immune and genetic factors participate in the pathogenesis of hepatitis B.
, 百拇医药
Key words： HBV infection; HLA-DRB gene; genotyping; polymerase chain reaction (PCR)▲
人体感染乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)后的临床表现形式多样，其预后各不 相同。这与机体对HBV免疫应答(Ir)方式不同有关，而机体的Ir基因位于人主要组织相容性 复合物(即HLA基因)的D区。研究HLA-DR基因型与HBV不同感染形式之间的相关性，本文用聚 合酶链反应(PCR)技术序列特异性引物扩增DNA片段，检测120名重庆地区汉族正常人和40例 乙型肝炎(乙肝)患者HLA-DRB基因频率分布，分析其与HBV复制水平的相关性，从免疫遗传角度探讨慢性乙肝的发生机制。
1 材料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 HBV感染者 40例乙肝取自本校西南医院感染病科和消化科住院患者，经临床和病 原学诊断的病例包括急性黄疸型乙型肝炎3例，慢性乙肝25例，乙肝后肝硬化12例。诊断均 符合1995年《病毒性肝炎防治方案》中的标准，未做病理组织学分型。患者均为重庆地区汉 族人，其中男29例，女11例，平均年龄40.2岁(23～72岁)。
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1.1.2 正常对照 120名对照来源于本校新桥医院输血科，为本地汉族健康献血员，其中 ，男76名，女44名，平均年龄36.5岁(21～47岁)。
1.2 外周血单个核细胞DNA提取
取肝素抗凝血3 ml，室温下2 000 r/min离心5 min，吸取白细胞层，以1×TEN( 1 mol/L Tris.HCl+5 mol/L NaCl+0.5 mol/L EDTA)以及10% SDS混合振荡，加入蛋白酶K(P K 1 mg/ml)30 μl,37°C振荡过夜。加入等量酚氯仿混合液充分混匀，4 0 00 r/m in离心5 min，反复2次，取上清加二倍无水乙醇混匀，可见DNA呈线状析出，离心弃上清后 加70%乙醇洗2次，真空干燥20 min，溶于200 μl Tris.HCl EDTA液(PH 8.0)，以紫外分 光光度计检测DNA含量。
, http://www.100md.com 1.3 HLA-DRB基因分型
采用中国医学科学院基础所生产的“HLA-DRB基因分型试剂盒”(批号981026)序列特异 性引物PCR(PCR-SSP)方法扩增DR1、DR2(15)、DR2(16)、DR3、DR4、DR 5(11)、DR5(12)、DR6(13)、DR6(14)、DR7、DR8、DR9共 计12个基因位点。基本原理根据第11届国际HLA Workshop会议确定的HLA-DRB基因核苷酸 序列，设计一系列组特异的序列特异性引物。在适宜的反应体系中经Tag DNA聚合酶催化， 扩增出不同序列的PCR产物。经2%琼脂糖凝胶电泳分离后，与标准型别的阳性对照比较，在 紫外灯下直接判断和确定HLA-DRB基因型别。
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1.4 HBV检测
标志物用ELISA法检测，HBV DNA用斑点杂交检测。
1.5 统计学方法
所得数据进入Epi 5.01b软件，用卡方检验计算χ2值，Yate's校正P值，Fisher氏精确概率检验P值。
2 结果
2.1 重庆地区汉族正常人HLA-DRB亚型基因频率分布
提取DNA经PCR扩增电泳后呈现明显条带。结果表明，本地区正常人群以DR2(15) 、DR5(12)、DR9位点常见，其基因频率分别为18.3%、16.7%、14.2%。
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2.2 乙肝患者HLA-DRB亚型基因频率分布
DRB基因位点连锁亚型分布与正常人群比较，见表1。乙肝患者DR3基因频率明显增高 ，统计学处理差异显著(P< 0.05)；DR5(12)、DR7基因频率 也有升高，但未 达到统计学差异；这些基因亚型均出现在慢性乙肝和肝硬化患者。携带DR3、DR7基因位 点发生慢性乙肝或肝硬化的相对危险度(RR)分别为2.40和2.0，见表2。
2.3 乙肝患者HBV复制状态与DRB基因的关系
根据HBV标志物和HBV DNA检测结果将乙肝患者分为HBV高复制状态(HBeAg和/或HBV DNA 阳性)和低复制状态(抗-HBe阳性，HBeAg阴性)，比较两者DRB基因频率差异，见表3。
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可见，DR7基因位点在HBV高复制状态多见(P< 0.05)，其RR为2.42 ，其余各基因位点未发现显著差异。
表1 慢性乙肝及肝硬化患者HLA-DRB基因连锁型分布
Tab 1 HLA-DRB gene linkage in patients with chronic
hepatit is B and liver cirrhosis HLA-DRB linkage
Chronic he patitis B
Hepatitis B-associated cirrhosis
DR2(15)-DR9
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-
1
DR2(16)-DR5(12)
1
1
DR3-DR1
1
-
DR3-DR9
-
1
DR5(11)-DR7
, 百拇医药
2
-
DR5(11)-DR5(12)
-
1
DR5(12)-DR3
-
1
DR5(12)-DR4
1
-
, 百拇医药
DR5(12)-DR7
1
-
DR9-DR4
1
-
表2 乙肝患者与正常人HLA-DRB基因频率比较
Tab 2 Comparison of HLA-DRB gene frequency in patients with hepatitis B and in healthy subjects
Hepatitis B group(n=40)
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Control (n=120)
HLA-DRB gene
No.
Frequency(% )
No.
Frequency(%)
Chi square
Pc value
RR (95%CI)
DR1
1
2.5
, 百拇医药
2
1.7
0.11
1.00*
1.34 (0.26～6.80)
DR2(15)
8
20.0
22
18.3
0.05
1.00
, 百拇医药
1.08(0.56～2 .11)
DR2(16)
2
5.0
5
4.2
0.05
0.82
1.15(0.35～3.83)
DR3
5
12.5
, 百拇医药
4
3.3
4.72
0.04*
2.40(1.25～4.60)
DR4
2
5.0
10
8.3
0.48
0.73*
, 百拇医药
0.65(0.18～2.37)
DR5(11)
3
7.5
9
7.5
0.00
1.00*
1.00(0.36～2.7 7)
DR5(12)
11
27.5
, 百拇医药
20
16.7
2.24
0.20
1.58(0.89～2. 80)
DR6(13)
1
2.5
7
5.8
0.70
0.68*
, 百拇医药
0.49(0.08～3.1 1)
DR6(14)
0
0
5
4.2
1.71
0.33
0.00
DR7
6
15.0
, 百拇医药 7
5.8
3.36
0.13
2.00(1.03～3.85)
DR8
2
5.0
7
5.8
0.04
1.00*
0.88(0.25～3.09)
, 百拇医药
DR9
6
15.0
17
14.2
0.02
1.89
1.05(0.50～2.22)
DRvacancy
2
5.0
5
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4.2
0.05
1.00*
1.15(0.35～3 .83)
Pc:Corrected P value;*:Fisher exact test;RR:Relative risk; CI:C onfidence interval
表3 HBV不同复制状态HLA-DRB基因亚型比较
Tab 3 Comparison of HLA-DRB subtypes in different replication of HBV HLA-DRB Subtype
H igh replication(n=17)
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Low replication(n=17)
Chi square
Fisher's P value
RR(95%CI)
DR1
0
1
1.00
1.00
0.00
DR2(15)
5
, 百拇医药
4
0.15
1.00
1.16(0.57～2.36)
DR2(16)
1
1
0.00
1.00
1.00
DR3
0
, http://www.100md.com 4
4.40
0.10
0.00
DR4
0
2
2.06
0.49
0.00
DR5(11)
2
1
, 百拇医药
0.35
1.00
1.38(0.57～3.32)
DR5(12)
8
4
2.00
0.28
1.63(0.86～3.10)
DR7
5
0
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5.69
0.04
2.42(1.57～3.73)
DR9
1
4
2.05
0.34
0.36(0.06～2.16)
3 讨论
HLA是目前所知的最具有高度多态性的遗传系统，作为个体组织细胞的遗传标志，特别 是免疫细胞上的HLA具有向抗原特异性T细胞受体传递抗原多肽的生物学特性，在抗原识别、 免疫应答和免疫调控，破坏外来抗原靶细胞方面起着重要作用。近年来寻找与疾病相关的HL A基因并探讨其在疾病发生中的作用已成为HLA系统研究的一个热门和重点领域。研究表明， 人感染HBV后临床表现的多样性除与病毒本身的变异有关外，另一很重要的因素在于机体对H BV应答的个体遗传差异。国内有关HLA基因分型与HBV感染相关性的研究极少报道。
, 百拇医药
本文对HLA-DRB基因(表达DR1-18，DR51-53位点)的分型表明，DR3位点 与慢性乙肝和乙肝后肝硬化有关，携带DR3位点的个体感染HBV后易发生慢性感染，其RR为 2.4。DR7、DR5(12)位点可能与慢性乙肝有关，其确证需扩大样本进一步研究，DR 7位点与HBV高复制状态有关，推测HBV感染携带DR7位点者病毒不易清除，呈持续感染状 态，因而临床表现为慢性化。这一结果与国外对接种乙肝疫苗后无(弱)应答状态HLA-DR位 点分型结果相吻合[1～3]，即最多见的位点为DR7、DR3以及两者的结合型。We issman等[2]认为造成无应签状态的原因与携带上述亚型者难以将HBsAg信息提 呈给T细胞，并产生抗体有关，其确切机制尚有待深入研究。日本Zeniya等[4]的研 究表明，HBV无症状携带者和组织学损害轻微的慢性乙肝DR5基因频率明显升高(P < 0.0 5)，认为免疫遗传背景是决定HBV感染疾病易感性的重要因素之一。Thursz等[5]在 西非的研究表明，DR6(13)基因位点与儿童和成年人HBV感染自然恢复即免于持续性感染有关。因此，对呈自限性的急性乙肝比较研究将有可能发现对抗HB V慢性感染的抗病基因。由于人种和地域的差异，为阐明HBV感染与HLA基因型的关系，针对 我国国情，建议进行全国范围内的协作，扩大HLA基因分型的类别，进行家系研究，并结合 临床肝组织病理和肝损害情况深入研究，以探明HBV相关的疾病易感(或抗病)基因及其在发 病机制中的作用，为乙肝的防治寻找新的突破口。
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基金项目：第三军医大学科研基金资助项目(X96-1-3)
作者简介：刘建平(1961-)，男，山东省菜西市人，博士， 副教授，主要从事传染病、流行病方面的研究，发表论文46篇。电话：(023)68752287
参考文献：
[1] Wolfgang J, Schmidt M, Deinhardt F. Vaccination against hep atitis B: Comparison of three different vaccination schedules[J]. J Infect Dis ,1989,160(5):766-769.
[2] Weissman J Y, Mark M T, Myron J T, et al. Lack of respons e to r ecombinant hepatitis B vaccine in nonresponders to the plasma vaccine[J]. JAMA ,1988,260(12):1 734-1 738.
, http://www.100md.com
[3] Canho R, Grosheide P M, Schalm S W, et al. Failure of neo natal hepatits B vaccination: The role of HBV DNA levels in hepatitis B carrier mother s and HLA antigens in neonates[J]. J Hepatol,1994,20(4):483-486.
[4] Zeniya M, Watanabe F, Aizawa Y, et al. Immunogenetic back ground of hepatitis B virus infection and autoimmune hepatitis in Japan[J]. Gastroen terol Jpn,1993,28(Suppl 4):69-75.
[5] Thursz M R, Kwiatkowski D, Allsopp C, et al. Association betwee n and MHC class Ⅱ allele and clearance of hepatitis B virus in the Gambia[J]. N Engl J Med,1995,232(16):1 065-1 069.
收稿日期：1999-05-17；修回日期：1999-12-22, 百拇医药
单位：刘建平(第三军医大学预防医学系流行病学教研室，重庆 400038)；林辉(第三军医大学预防医学系流行病学教研室，重庆 400038)；宋建勇(第三军医大学预防医学系流行病学教研室，重庆 400038)
关键词：HBV感染；HLA-DRB；基因分型；聚合酶链反应(PCR)
第三军医大学学报000416 提 要： 目的 探索乙肝病毒(HBV)感染者HLA-DRB基因 频率及其与疾病的相关性。方法 用PCR-SSP对重庆地区汉族乙肝患者4 0例和正常人120名进行HLA-DRB基因分型，结合临床病型与HBV复制状态作相关性分析。结果：重庆地区汉族正常人以DR2(15)、DR5(12)、DR9位点 常见，乙肝患者与之比较DR3基因频率明显增高(P< 0.05)，DR5(12 )、DR7基 因频率也有增高，均见于慢性乙肝和肝硬化，相对危险度DR3为2.4,DR7为2.0。DR7基 因多见于HBV高复制状态，相对危险度为2.4。结论：HLA-DR3基因与 重庆地区汉族慢性乙肝和肝硬化相关，DR7与HBV高复制状态有关；免疫遗传因素参与慢性 乙肝的发病机制。
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中图法分类号： R512.62 文献标识码：A
文章编号：1000-5404(2000)04-0354-03
HLA-DRB genotyping and its relation in patients with HBV infection
LIU Jia-ping, LIN Hui, SONG Jian-yong
(Department of Epide miology, Third Military Medical University, Chongqing 400038,China)
Abstract： Objective To study the frequency of dif ferent genotypes of HLA-DRB gene and their relations to HBV infection. Methods HLA-DRB genotyping was conducted in 40 cases of HBV infection and 120 healthy subjects with polymerase chian reaction-sequence specific prime r (PCR-SSP). All the patients and healthy subjects were residents of chongqing district and belonged to Han Natiionality. The relationship of different genotyp es of HLA-DRB with the clinical types of HBV infection was analyzed. Re sults HLA-DR2(15), DR5(12) and DR9 were the frequent gen otypes in the healthy residents of Chongqing with the frequency of 18.3%, 16.7% and 14.2% respectively. The frequency of HLA-DR3 was increased from 3.3% in h ealthy subjects to 12.5% in patients with chronic hepatitis B and hepatitis B-a ssociated liver cirrhosis (P< 0.05). The frequency of HLA-DR 5(12) and HLA-DR7 was also increased in those patients. The relative risk coefficient w as 2.4 for HLA-DR3 and 2.0 for HLA-DR7. HLA-DR7 was usually found in hi gh replication condition of HBV with a relative risk coefficient of 2.4. Conclusion HLA-DR3 is related to hepatitis B and liver cirrhosis o f the Han Nationality in Chongqing district. HLA-DR7 is usually found in high replication condition of HBV. And immune and genetic factors participate in the pathogenesis of hepatitis B.
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Key words： HBV infection; HLA-DRB gene; genotyping; polymerase chain reaction (PCR)▲
人体感染乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)后的临床表现形式多样，其预后各不 相同。这与机体对HBV免疫应答(Ir)方式不同有关，而机体的Ir基因位于人主要组织相容性 复合物(即HLA基因)的D区。研究HLA-DR基因型与HBV不同感染形式之间的相关性，本文用聚 合酶链反应(PCR)技术序列特异性引物扩增DNA片段，检测120名重庆地区汉族正常人和40例 乙型肝炎(乙肝)患者HLA-DRB基因频率分布，分析其与HBV复制水平的相关性，从免疫遗传角度探讨慢性乙肝的发生机制。
1 材料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 HBV感染者 40例乙肝取自本校西南医院感染病科和消化科住院患者，经临床和病 原学诊断的病例包括急性黄疸型乙型肝炎3例，慢性乙肝25例，乙肝后肝硬化12例。诊断均 符合1995年《病毒性肝炎防治方案》中的标准，未做病理组织学分型。患者均为重庆地区汉 族人，其中男29例，女11例，平均年龄40.2岁(23～72岁)。
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1.1.2 正常对照 120名对照来源于本校新桥医院输血科，为本地汉族健康献血员，其中 ，男76名，女44名，平均年龄36.5岁(21～47岁)。
1.2 外周血单个核细胞DNA提取
取肝素抗凝血3 ml，室温下2 000 r/min离心5 min，吸取白细胞层，以1×TEN( 1 mol/L Tris.HCl+5 mol/L NaCl+0.5 mol/L EDTA)以及10% SDS混合振荡，加入蛋白酶K(P K 1 mg/ml)30 μl,37°C振荡过夜。加入等量酚氯仿混合液充分混匀，4 0 00 r/m in离心5 min，反复2次，取上清加二倍无水乙醇混匀，可见DNA呈线状析出，离心弃上清后 加70%乙醇洗2次，真空干燥20 min，溶于200 μl Tris.HCl EDTA液(PH 8.0)，以紫外分 光光度计检测DNA含量。
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采用中国医学科学院基础所生产的“HLA-DRB基因分型试剂盒”(批号981026)序列特异 性引物PCR(PCR-SSP)方法扩增DR1、DR2(15)、DR2(16)、DR3、DR4、DR 5(11)、DR5(12)、DR6(13)、DR6(14)、DR7、DR8、DR9共 计12个基因位点。基本原理根据第11届国际HLA Workshop会议确定的HLA-DRB基因核苷酸 序列，设计一系列组特异的序列特异性引物。在适宜的反应体系中经Tag DNA聚合酶催化， 扩增出不同序列的PCR产物。经2%琼脂糖凝胶电泳分离后，与标准型别的阳性对照比较，在 紫外灯下直接判断和确定HLA-DRB基因型别。
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1.4 HBV检测
标志物用ELISA法检测，HBV DNA用斑点杂交检测。
1.5 统计学方法
所得数据进入Epi 5.01b软件，用卡方检验计算χ2值，Yate's校正P值，Fisher氏精确概率检验P值。
2 结果
2.1 重庆地区汉族正常人HLA-DRB亚型基因频率分布
提取DNA经PCR扩增电泳后呈现明显条带。结果表明，本地区正常人群以DR2(15) 、DR5(12)、DR9位点常见，其基因频率分别为18.3%、16.7%、14.2%。
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2.2 乙肝患者HLA-DRB亚型基因频率分布
DRB基因位点连锁亚型分布与正常人群比较，见表1。乙肝患者DR3基因频率明显增高 ，统计学处理差异显著(P< 0.05)；DR5(12)、DR7基因频率 也有升高，但未 达到统计学差异；这些基因亚型均出现在慢性乙肝和肝硬化患者。携带DR3、DR7基因位 点发生慢性乙肝或肝硬化的相对危险度(RR)分别为2.40和2.0，见表2。
2.3 乙肝患者HBV复制状态与DRB基因的关系
根据HBV标志物和HBV DNA检测结果将乙肝患者分为HBV高复制状态(HBeAg和/或HBV DNA 阳性)和低复制状态(抗-HBe阳性，HBeAg阴性)，比较两者DRB基因频率差异，见表3。
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可见，DR7基因位点在HBV高复制状态多见(P< 0.05)，其RR为2.42 ，其余各基因位点未发现显著差异。
表1 慢性乙肝及肝硬化患者HLA-DRB基因连锁型分布
Tab 1 HLA-DRB gene linkage in patients with chronic
hepatit is B and liver cirrhosis HLA-DRB linkage
Chronic he patitis B
Hepatitis B-associated cirrhosis
DR2(15)-DR9
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-
1
DR2(16)-DR5(12)
1
1
DR3-DR1
1
-
DR3-DR9
-
1
DR5(11)-DR7
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2
-
DR5(11)-DR5(12)
-
1
DR5(12)-DR3
-
1
DR5(12)-DR4
1
-
, 百拇医药
DR5(12)-DR7
1
-
DR9-DR4
1
-
表2 乙肝患者与正常人HLA-DRB基因频率比较
Tab 2 Comparison of HLA-DRB gene frequency in patients with hepatitis B and in healthy subjects
Hepatitis B group(n=40)
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Control (n=120)
HLA-DRB gene
No.
Frequency(% )
No.
Frequency(%)
Chi square
Pc value
RR (95%CI)
DR1
1
2.5
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2
1.7
0.11
1.00*
1.34 (0.26～6.80)
DR2(15)
8
20.0
22
18.3
0.05
1.00
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1.08(0.56～2 .11)
DR2(16)
2
5.0
5
4.2
0.05
0.82
1.15(0.35～3.83)
DR3
5
12.5
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4
3.3
4.72
0.04*
2.40(1.25～4.60)
DR4
2
5.0
10
8.3
0.48
0.73*
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0.65(0.18～2.37)
DR5(11)
3
7.5
9
7.5
0.00
1.00*
1.00(0.36～2.7 7)
DR5(12)
11
27.5
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20
16.7
2.24
0.20
1.58(0.89～2. 80)
DR6(13)
1
2.5
7
5.8
0.70
0.68*
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0.49(0.08～3.1 1)
DR6(14)
0
0
5
4.2
1.71
0.33
0.00
DR7
6
15.0
, 百拇医药 7
5.8
3.36
0.13
2.00(1.03～3.85)
DR8
2
5.0
7
5.8
0.04
1.00*
0.88(0.25～3.09)
, 百拇医药
DR9
6
15.0
17
14.2
0.02
1.89
1.05(0.50～2.22)
DRvacancy
2
5.0
5
, http://www.100md.com
4.2
0.05
1.00*
1.15(0.35～3 .83)
Pc:Corrected P value;*:Fisher exact test;RR:Relative risk; CI:C onfidence interval
表3 HBV不同复制状态HLA-DRB基因亚型比较
Tab 3 Comparison of HLA-DRB subtypes in different replication of HBV HLA-DRB Subtype
H igh replication(n=17)
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Low replication(n=17)
Chi square
Fisher's P value
RR(95%CI)
DR1
0
1
1.00
1.00
0.00
DR2(15)
5
, 百拇医药
4
0.15
1.00
1.16(0.57～2.36)
DR2(16)
1
1
0.00
1.00
1.00
DR3
0
, http://www.100md.com 4
4.40
0.10
0.00
DR4
0
2
2.06
0.49
0.00
DR5(11)
2
1
, 百拇医药
0.35
1.00
1.38(0.57～3.32)
DR5(12)
8
4
2.00
0.28
1.63(0.86～3.10)
DR7
5
0
, http://www.100md.com
5.69
0.04
2.42(1.57～3.73)
DR9
1
4
2.05
0.34
0.36(0.06～2.16)
3 讨论
HLA是目前所知的最具有高度多态性的遗传系统，作为个体组织细胞的遗传标志，特别 是免疫细胞上的HLA具有向抗原特异性T细胞受体传递抗原多肽的生物学特性，在抗原识别、 免疫应答和免疫调控，破坏外来抗原靶细胞方面起着重要作用。近年来寻找与疾病相关的HL A基因并探讨其在疾病发生中的作用已成为HLA系统研究的一个热门和重点领域。研究表明， 人感染HBV后临床表现的多样性除与病毒本身的变异有关外，另一很重要的因素在于机体对H BV应答的个体遗传差异。国内有关HLA基因分型与HBV感染相关性的研究极少报道。
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本文对HLA-DRB基因(表达DR1-18，DR51-53位点)的分型表明，DR3位点 与慢性乙肝和乙肝后肝硬化有关，携带DR3位点的个体感染HBV后易发生慢性感染，其RR为 2.4。DR7、DR5(12)位点可能与慢性乙肝有关，其确证需扩大样本进一步研究，DR 7位点与HBV高复制状态有关，推测HBV感染携带DR7位点者病毒不易清除，呈持续感染状 态，因而临床表现为慢性化。这一结果与国外对接种乙肝疫苗后无(弱)应答状态HLA-DR位 点分型结果相吻合[1～3]，即最多见的位点为DR7、DR3以及两者的结合型。We issman等[2]认为造成无应签状态的原因与携带上述亚型者难以将HBsAg信息提 呈给T细胞，并产生抗体有关，其确切机制尚有待深入研究。日本Zeniya等[4]的研 究表明，HBV无症状携带者和组织学损害轻微的慢性乙肝DR5基因频率明显升高(P < 0.0 5)，认为免疫遗传背景是决定HBV感染疾病易感性的重要因素之一。Thursz等[5]在 西非的研究表明，DR6(13)基因位点与儿童和成年人HBV感染自然恢复即免于持续性感染有关。因此，对呈自限性的急性乙肝比较研究将有可能发现对抗HB V慢性感染的抗病基因。由于人种和地域的差异，为阐明HBV感染与HLA基因型的关系，针对 我国国情，建议进行全国范围内的协作，扩大HLA基因分型的类别，进行家系研究，并结合 临床肝组织病理和肝损害情况深入研究，以探明HBV相关的疾病易感(或抗病)基因及其在发 病机制中的作用，为乙肝的防治寻找新的突破口。
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基金项目：第三军医大学科研基金资助项目(X96-1-3)
作者简介：刘建平(1961-)，男，山东省菜西市人，博士， 副教授，主要从事传染病、流行病方面的研究，发表论文46篇。电话：(023)68752287
参考文献：
[1] Wolfgang J, Schmidt M, Deinhardt F. Vaccination against hep atitis B: Comparison of three different vaccination schedules[J]. J Infect Dis ,1989,160(5):766-769.
[2] Weissman J Y, Mark M T, Myron J T, et al. Lack of respons e to r ecombinant hepatitis B vaccine in nonresponders to the plasma vaccine[J]. JAMA ,1988,260(12):1 734-1 738.
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[3] Canho R, Grosheide P M, Schalm S W, et al. Failure of neo natal hepatits B vaccination: The role of HBV DNA levels in hepatitis B carrier mother s and HLA antigens in neonates[J]. J Hepatol,1994,20(4):483-486.
[4] Zeniya M, Watanabe F, Aizawa Y, et al. Immunogenetic back ground of hepatitis B virus infection and autoimmune hepatitis in Japan[J]. Gastroen terol Jpn,1993,28(Suppl 4):69-75.
[5] Thursz M R, Kwiatkowski D, Allsopp C, et al. Association betwee n and MHC class Ⅱ allele and clearance of hepatitis B virus in the Gambia[J]. N Engl J Med,1995,232(16):1 065-1 069.
收稿日期：1999-05-17；修回日期：1999-12-22, 百拇医药