肺癌中耐药基因p170的表达及其临床意义
作者：刘宝贵 李秀英 聂慧玲 石文春 李英 叶井华 张淑云
单位：刘宝贵(大连市胸部肿瘤研究所，辽宁 大连 116021)；李秀英(大连市第五人民医院，辽宁 大连 116021)；聂慧玲(大连市胸科肿瘤医院，辽宁 大连 116021)石文春(大连市第五人民医院，辽宁 大连 116021)；李英(大连市第五人民医院，辽宁 大连 116021)；叶井华(大连市胸科肿瘤医院，辽宁 大连 116021)；张淑云(大连市胸科肿瘤医院，辽宁 大连 116021)
关键词：肺癌；耐药基因p170；免疫组化
医师进修杂志000414
摘要：目的：检测耐药基因p170在术前有、无化疗的肺癌中表达情况以探讨其临床意义。方法：采用S-P免疫组化方法。检测113例肺癌(其中术前未化疗的肺癌93例，术前曾化疗的肺癌20例)和10例正常肺组织中p170的表达水平。结果：在113例肺癌中p170阳性表达率为46%，其中小细胞癌(SCLC)(15.4%)明显低于非小细胞癌(NSCLC)(50%)。术前曾化疗的肺癌20例，p170阳性表达率为75%。术前未化疗的肺癌93例阳性表达率39.8%，两者有明显差异(P<0.05)。在10例正常呼吸道上皮中p170阳性表达率30%(3/10)。结论：检测肺癌组织中p170的表达有助评估多药耐药性(MDR)化疗疗效对指导化疗方案有重要意义。
, http://www.100md.com
分类号：R734.2 文献标识码：A
文章编号：1002-0764(2000)04-0031-02
化疗是肿瘤综合性治疗的重要措施之一。但化疗的疗效与多药耐药性(MDR)密切相关。MDR1及其编码产物p170是一种高分子的糖蛋白，它可将细胞内的药物泵到细胞外，从而使细胞内的药物浓度维持于低水平，细胞由此获耐药性[1]，而使化疗失败。我们用免疫组化方法检测p170在术前有、无化疗的肺癌中表达情况以探讨其临床意义。
1 材料与方法
1.1 临床资料 我院胸外科手术切除的113例肺癌标本，男性82例，女性31例，年龄28～72岁，平均54.7岁。按WHO病理分类非小细胞肺癌(NSCLC)100例(鳞癌42例，腺癌30例，腺鳞癌12例，支气管肺泡癌8例，大细胞癌8例)，小细胞肺癌(SCLC)13例。其中术前曾化疗的肺癌20例。20例中NSCLC为14例，SCLC为6例。
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1.2 免疫组化方法 耐药基因p170检测采用S-P法，其试剂盒由福建迈新公司提供。石蜡常规切片置入枸橼酸钠溶液中微波处理，然后按说明书进行，染色后光镜下观察，并计数阳性细胞数，阳性细胞是以胞浆或/和细胞膜出现棕黄色颗粒为判断标准，并用已检出的p170阳性片做阳性对照，另用PBS缓冲液代替一抗做阴性对照。
1.3 结果统计 实验结果统计采用χ2检验。
2 结 果
2.1 在113例肺癌中p170阳性表达率为46%，其中NSCLC中p170阳性表达率为50%，而SCLC中p170阳性表达率为15.4%。经统计结果显示：两者间有明显差异(P<0.05)。在NSCLC中腺癌p170阳性表达率(50%)比鳞癌(47.6%)略高，但两者无显著差异(P>0.05)。见表1。
表1 各型肺癌中p170阳性表达 组织类型
, http://www.100md.com
例数
p170表达
阳性数
%
鳞癌*
42
20
47.6
腺癌*
30
15
50.0
腺鳞癌#
, 百拇医药
12
6
50.0
支气管肺泡癌#
8
4
50.0
大细胞癌#
8
5
62.5
小细胞癌#
13
, 百拇医药
2
15.4
合 计
113
52
46.0
注：#P<0.05，*P>0.05
2.2 在术前经长春新碱(VCR)、阿霉素(ADM)、顺柏(DDP)和足叶乙甙(Vp16)治疗过的20例肺癌组织中，p170阳性表达率为75%。其中NSCLC 14例，p170阳性表达13例(92.8%)，SCLC 6例，p170阳性表达2例(33.3%)。明显高于术前未化疗者。两者间比较有明显差异(P<0.05)，见表2。10例正常肺组织中p170阳性表达率30%(3/10)。
, 百拇医药
表2 术前有无化疗的肺癌p170的表达 类 型
例 数
p170表达
阳性数
%
术前化疗
20
15
75.0
术前未化疗
93
37
39.8
, 百拇医药
合 计
113
52
46.0
3 讨 论
化疗药物不敏感是肺癌预后差的原因之一。肺癌中存在多药耐药基因(MDR)已被人们所认识。肺癌的多药耐药机制比较复杂，常见的原因有：生物膜表面系统、拓扑异构酶、谷胱甘肽S-转移酶，其中生物膜表面蛋白基因的过度表达与MDR密切相关，如MDR1及编码产物p170增多。p170在ATP的参与下可将进入癌细胞的抗癌药物排出体外，使癌细胞产生耐药[1]。本研究结果显示：p170在各类型肺癌中均有表达，总阳性率为46%，与Pujol等[2]报道的结果相同。从组织类型看，在NSCLC中p170阳性表达率50%，而SCLC中p170阳性表达率为15.4%、前者阳性率明显高于后者。Leondrodo[3]等用MAP57单克隆抗体检测137例人体肿瘤标本发现：临床对化疗敏感的SCLC极少表达P-gp(p170)，而NSCLC标本表达较多。这可能与SCLC对化疗敏感，而NSCLC化疗效果不佳的原因所在[4]。
, 百拇医药
化疗是肺癌综合性治疗的重要措施之一，但必须选择恰当有效的化疗药。本研究结果显示：术前化疗尤其是用MDR相关的化疗药如VCT、ADM等类药，p170阳性表达率(75%)，要高于术前未用化疗药者(39.8%)，两者有明显差异(P<0.05)。说明术前化疗者已产生耐药，p170阳性表达与术前化疗密切相关。有资料表明[5]p170阳性者化疗后，远处转移率高于阴性者。提示术前用MDR型药物化疗，未能达到控制亚临床转移灶的目的。也表明了p170药泵作用，使药物外排增加，影响药物对癌细胞的杀伤作用，致使化疗疗效降低。因此对p170阳性表达的肺癌选择化疗方案时，要避免使用MDR型的药物，因此检测肺癌中p170阳性表达可以作为肺癌病人选择化疗方案，判断治疗效果的方法之一。
p170在许多人体正常细胞中也可被检测到[6]，如肝、肾、大小肠、胆囊上皮及本文检测的呼吸道上皮。在p170这些分泌功能的气管上皮中的表达说明p170并非是一种异常蛋白，可能与各种保护屏障有关。它在清除细胞内代谢方面有着一定的生理功能。另外在我们检测的术前未化疗的肺癌组织中p170阳性表达率39.8%与Deer[7]报道结果相同。提示：部分肺癌细胞存在原发耐药性，以往认为肺癌尤其是NSCLC耐药是反复长期化疗诱发获得耐药。近年来的研究已证明，肺癌耐药既有内在性，又有获得性[3]，因此我们认为对肺癌患者有必要检测癌细胞中的耐药基因，这对临床指导化疗用药减少盲目性有重大意义。
, 百拇医药
作者简介：刘宝贵(1950～)，男，辽宁省人，副主任医师。
参考文献：
[1] GOTTESMAN M M.How cancer cells evade chemotherapy:sisteanth richard hinda rosenthal foundtion award lecture[J].Cancer Res,1993,53:747～754.
[2] PUJOL J L,SIMON J,GAUTIER V,et al.Lmmunohistochem-
ical study of P-glycoprotein distribution in lung cancer[J].Lung Cancer Lengcarmer,1993(1～2),10:1.
, 百拇医药
[3] 廖美琳.肺癌现代治疗[M].上海：上海医科大学出版社，1999.
[4] 刘旭明，唐彩萍，王 萍.耐药基因p170，GSTP：在肺癌中的表达及其临床意义[J].诊断病理学杂志，1999，6：94～96.
[5] 李恩孝，李 蓉，张珍华.乳腺癌细胞P—糖蛋白的表达及临床意义[J].中华肿瘤杂志，1998，20(5)：371～373.
[6] 曹利平，彭淑牖，DUCHROW M,等.P—糖蛋白在胆囊良恶性肿瘤中的表达[J].中华肿瘤杂志，1999，21：119～121.
[7] DEER T W,ROWLANDS D C,CROCKER J.Detection of the multidrug resistancerker P-glycoprotein by immunohistochem-
istry in malignant lung tumours[J].Thorax,1996,51(5):526～529.
收稿日期：1999-12-20, 百拇医药
单位：刘宝贵(大连市胸部肿瘤研究所，辽宁 大连 116021)；李秀英(大连市第五人民医院，辽宁 大连 116021)；聂慧玲(大连市胸科肿瘤医院，辽宁 大连 116021)石文春(大连市第五人民医院，辽宁 大连 116021)；李英(大连市第五人民医院，辽宁 大连 116021)；叶井华(大连市胸科肿瘤医院，辽宁 大连 116021)；张淑云(大连市胸科肿瘤医院，辽宁 大连 116021)
关键词：肺癌；耐药基因p170；免疫组化
医师进修杂志000414
摘要：目的：检测耐药基因p170在术前有、无化疗的肺癌中表达情况以探讨其临床意义。方法：采用S-P免疫组化方法。检测113例肺癌(其中术前未化疗的肺癌93例，术前曾化疗的肺癌20例)和10例正常肺组织中p170的表达水平。结果：在113例肺癌中p170阳性表达率为46%，其中小细胞癌(SCLC)(15.4%)明显低于非小细胞癌(NSCLC)(50%)。术前曾化疗的肺癌20例，p170阳性表达率为75%。术前未化疗的肺癌93例阳性表达率39.8%，两者有明显差异(P<0.05)。在10例正常呼吸道上皮中p170阳性表达率30%(3/10)。结论：检测肺癌组织中p170的表达有助评估多药耐药性(MDR)化疗疗效对指导化疗方案有重要意义。
, http://www.100md.com
分类号：R734.2 文献标识码：A
文章编号：1002-0764(2000)04-0031-02
化疗是肿瘤综合性治疗的重要措施之一。但化疗的疗效与多药耐药性(MDR)密切相关。MDR1及其编码产物p170是一种高分子的糖蛋白，它可将细胞内的药物泵到细胞外，从而使细胞内的药物浓度维持于低水平，细胞由此获耐药性[1]，而使化疗失败。我们用免疫组化方法检测p170在术前有、无化疗的肺癌中表达情况以探讨其临床意义。
1 材料与方法
1.1 临床资料 我院胸外科手术切除的113例肺癌标本，男性82例，女性31例，年龄28～72岁，平均54.7岁。按WHO病理分类非小细胞肺癌(NSCLC)100例(鳞癌42例，腺癌30例，腺鳞癌12例，支气管肺泡癌8例，大细胞癌8例)，小细胞肺癌(SCLC)13例。其中术前曾化疗的肺癌20例。20例中NSCLC为14例，SCLC为6例。
, http://www.100md.com
1.2 免疫组化方法 耐药基因p170检测采用S-P法，其试剂盒由福建迈新公司提供。石蜡常规切片置入枸橼酸钠溶液中微波处理，然后按说明书进行，染色后光镜下观察，并计数阳性细胞数，阳性细胞是以胞浆或/和细胞膜出现棕黄色颗粒为判断标准，并用已检出的p170阳性片做阳性对照，另用PBS缓冲液代替一抗做阴性对照。
1.3 结果统计 实验结果统计采用χ2检验。
2 结 果
2.1 在113例肺癌中p170阳性表达率为46%，其中NSCLC中p170阳性表达率为50%，而SCLC中p170阳性表达率为15.4%。经统计结果显示：两者间有明显差异(P<0.05)。在NSCLC中腺癌p170阳性表达率(50%)比鳞癌(47.6%)略高，但两者无显著差异(P>0.05)。见表1。
表1 各型肺癌中p170阳性表达 组织类型
, http://www.100md.com
例数
p170表达
阳性数
%
鳞癌*
42
20
47.6
腺癌*
30
15
50.0
腺鳞癌#
, 百拇医药
12
6
50.0
支气管肺泡癌#
8
4
50.0
大细胞癌#
8
5
62.5
小细胞癌#
13
, 百拇医药
2
15.4
合 计
113
52
46.0
注：#P<0.05，*P>0.05
2.2 在术前经长春新碱(VCR)、阿霉素(ADM)、顺柏(DDP)和足叶乙甙(Vp16)治疗过的20例肺癌组织中，p170阳性表达率为75%。其中NSCLC 14例，p170阳性表达13例(92.8%)，SCLC 6例，p170阳性表达2例(33.3%)。明显高于术前未化疗者。两者间比较有明显差异(P<0.05)，见表2。10例正常肺组织中p170阳性表达率30%(3/10)。
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表2 术前有无化疗的肺癌p170的表达 类 型
例 数
p170表达
阳性数
%
术前化疗
20
15
75.0
术前未化疗
93
37
39.8
, 百拇医药
合 计
113
52
46.0
3 讨 论
化疗药物不敏感是肺癌预后差的原因之一。肺癌中存在多药耐药基因(MDR)已被人们所认识。肺癌的多药耐药机制比较复杂，常见的原因有：生物膜表面系统、拓扑异构酶、谷胱甘肽S-转移酶，其中生物膜表面蛋白基因的过度表达与MDR密切相关，如MDR1及编码产物p170增多。p170在ATP的参与下可将进入癌细胞的抗癌药物排出体外，使癌细胞产生耐药[1]。本研究结果显示：p170在各类型肺癌中均有表达，总阳性率为46%，与Pujol等[2]报道的结果相同。从组织类型看，在NSCLC中p170阳性表达率50%，而SCLC中p170阳性表达率为15.4%、前者阳性率明显高于后者。Leondrodo[3]等用MAP57单克隆抗体检测137例人体肿瘤标本发现：临床对化疗敏感的SCLC极少表达P-gp(p170)，而NSCLC标本表达较多。这可能与SCLC对化疗敏感，而NSCLC化疗效果不佳的原因所在[4]。
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化疗是肺癌综合性治疗的重要措施之一，但必须选择恰当有效的化疗药。本研究结果显示：术前化疗尤其是用MDR相关的化疗药如VCT、ADM等类药，p170阳性表达率(75%)，要高于术前未用化疗药者(39.8%)，两者有明显差异(P<0.05)。说明术前化疗者已产生耐药，p170阳性表达与术前化疗密切相关。有资料表明[5]p170阳性者化疗后，远处转移率高于阴性者。提示术前用MDR型药物化疗，未能达到控制亚临床转移灶的目的。也表明了p170药泵作用，使药物外排增加，影响药物对癌细胞的杀伤作用，致使化疗疗效降低。因此对p170阳性表达的肺癌选择化疗方案时，要避免使用MDR型的药物，因此检测肺癌中p170阳性表达可以作为肺癌病人选择化疗方案，判断治疗效果的方法之一。
p170在许多人体正常细胞中也可被检测到[6]，如肝、肾、大小肠、胆囊上皮及本文检测的呼吸道上皮。在p170这些分泌功能的气管上皮中的表达说明p170并非是一种异常蛋白，可能与各种保护屏障有关。它在清除细胞内代谢方面有着一定的生理功能。另外在我们检测的术前未化疗的肺癌组织中p170阳性表达率39.8%与Deer[7]报道结果相同。提示：部分肺癌细胞存在原发耐药性，以往认为肺癌尤其是NSCLC耐药是反复长期化疗诱发获得耐药。近年来的研究已证明，肺癌耐药既有内在性，又有获得性[3]，因此我们认为对肺癌患者有必要检测癌细胞中的耐药基因，这对临床指导化疗用药减少盲目性有重大意义。
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作者简介：刘宝贵(1950～)，男，辽宁省人，副主任医师。
参考文献：
[1] GOTTESMAN M M.How cancer cells evade chemotherapy:sisteanth richard hinda rosenthal foundtion award lecture[J].Cancer Res,1993,53:747～754.
[2] PUJOL J L,SIMON J,GAUTIER V,et al.Lmmunohistochem-
ical study of P-glycoprotein distribution in lung cancer[J].Lung Cancer Lengcarmer,1993(1～2),10:1.
, 百拇医药
[3] 廖美琳.肺癌现代治疗[M].上海：上海医科大学出版社，1999.
[4] 刘旭明，唐彩萍，王 萍.耐药基因p170，GSTP：在肺癌中的表达及其临床意义[J].诊断病理学杂志，1999，6：94～96.
[5] 李恩孝，李 蓉，张珍华.乳腺癌细胞P—糖蛋白的表达及临床意义[J].中华肿瘤杂志，1998，20(5)：371～373.
[6] 曹利平，彭淑牖，DUCHROW M,等.P—糖蛋白在胆囊良恶性肿瘤中的表达[J].中华肿瘤杂志，1999，21：119～121.
[7] DEER T W,ROWLANDS D C,CROCKER J.Detection of the multidrug resistancerker P-glycoprotein by immunohistochem-
istry in malignant lung tumours[J].Thorax,1996,51(5):526～529.
收稿日期：1999-12-20, 百拇医药