复方替硝唑漱口液的研制
作者：李建平 何凤慈 冯先义
单位：第三军医大学大坪医院野战外科研究所药剂科，重庆 400042
关键词：替硝唑；盐酸环丙沙星；漱口液；双波长-等吸收法
沈阳药科大学学报000406 摘 要 介绍了复方替硝唑漱口液的制备方法和质量标准.平均回收率，替哨唑为102.39%，RSD为0.64%；盐酸环丙沙星为99.48%，RSD为0.20%.
分类号 R94
Preparation of the Compound Tinidazole Gargle
Li Jianping，He Fengci，Feng Xianyi
, 百拇医药 (Department of Pharmacy,Institute of Field Surgery,Daping Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400042)
Abstract The preparation method and quality control of the compound tinidazole gargle were studied. The average recovery of tinidazole was 102.39%，RSD=0.64% and that of ciprofloxacin hydrochloride was 99.48%，RSD=0.20%.The results of bacteriostatic experiments,stability tests and irritant experiment showed that this gargle had good bacteriostatic effect,high stability and no irritability.
, 百拇医药
Key words tinidazole；ciprofloxacin hydrochloride；gargle；duble-wavelength and equal-absorption spectrophotometry
替硝唑(tinidazole,TNZ)为硝基咪唑类抗厌氧菌及抗原虫药，具有疗效高、疗程短、耐受性好、体内分布广等特点，其抗菌活性为甲硝唑的2～4倍，主要用于治疗各种厌氧菌感染〔1〕.经查阅文献，国内尚无以替硝唑为主药的漱口液，根据口腔疾病致病菌的特点，我们研制了复方替硝唑漱口液，除主药替硝唑外加入喹诺酮类抗生素盐酸环丙沙星，以增强其抗菌效果.用于牙周病、口腔粘膜感染性疾病以及清洁口腔、去除口臭等.
1 仪器与试药
DU-650分光光度仪(美国贝克曼公司)；SPM-10A数字酸度计(浙江萧山仪器标准件厂)；PSH-525型生化培养箱(重庆试验设备厂)；替硝唑(湖北省广济药业股份有限公司，批号970302)；盐酸环丙沙星(浙江新昌制药厂，批号961228)；金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、绿脓杆菌(铜绿假单胞菌ATCC27853)、大肠埃希氏菌(ATCC25922)均由四川省临床检验中心提供；肺炎克雷伯氏菌(本院检验科分离鉴定)；其它试剂均为分析纯.
, http://www.100md.com
2 处方与制备
处方 替硝唑0.05 g，盐酸环丙沙星0.05 g，氯化钠0.5 g ，甘油5 mL ，蒸馏水加至100 mL.
制备 称取替硝唑于适量蒸馏水中，加热溶解，然后加入盐酸环丙沙星、氯化钠溶解，加入甘油，再加蒸馏水至足量，混匀.过滤分装即得.
3 质量标准
3.1 性状及pH值
本品为无色澄明液体,pH4.00～5.00.
3.2 含量测定
3.2.1 紫外吸收光谱与含量测定方法〔2〕
按处方量称取替硝唑、盐酸环丙沙星各约0.05 g以及不含主药的其它成分，分别用蒸馏水定容溶于100 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液同等稀释到一定量，以溶剂为空白，在200～500 nm波长范围内扫描，得紫外吸收光谱(见图1).
, 百拇医药
Fig.1 Absorption spectra of the sample
1—tinidazole；2—ciprofloxacin hydrochloride；3—basicum
由图1可见替硝唑在317 nm处有最大吸收，盐酸环丙沙星在334 nm处有一稳定吸收峰，处方中其它成分无吸收.故分别选用双波长-等吸收分光光度法作为替硝唑和盐酸环丙沙星含量测定方法.
按处方比例称取替硝唑、盐酸环丙沙星适量，分别用0.01 mol/L氢氧化钠溶液配成3种不同浓度的溶液，以溶剂为空白，反复测定吸收度.最后确定317 nm为替硝唑测定波长，干扰组分盐酸环丙沙星对应的等吸收波长284 nm为参比波长；334 nm为盐酸环丙沙星测定波长，干扰组分替硝唑对应的等吸收波长300 nm为参比波长.
3.2.2 标准曲线的绘制
, 百拇医药
分别精密称取105℃干燥至恒重的替硝唑、盐酸环丙沙星对照品约0.05 g置100 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀.精密吸取 5 mL置50 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀.再分别精取1、2、3、4、5 mL置25 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀.以溶剂为空白，在317、284、334、300 nm波长处测定吸收度，计算△A替(△A替＝A317nm-A284nm)、△A环(△A环=A334nm-A300nm),以△A替和△A环分别对浓度C进行回归，得回归方程.
替硝唑(2～10 μg/mL)回归方程：
C＝47.007 42 △A替-0.141 61，r=0.999 9(n=5).
, 百拇医药
盐酸环丙沙星(2～10 μg/mL)回归方程：
C＝60.503 22 △A环-0.032 45，r=0.999 9(n=5).
3.2.3 回收率试验
按处方比例配制供试液.精密吸取适量，以0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释成系列浓度的测定液，以317 nm和284 nm，334 nm和300 nm波长对测定吸收度，分别计算△A替和△A环，代入回归方程，结果测得替硝唑平均回收率为102.39%，RSD为0.64%(n=4).盐酸环丙沙星平均回收率为99.48%，RSD为0.20%(n=4).
3.2.4 样品含量测定
取3批样品溶液，精密吸取5 mL置50 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，再精密吸取稀释液2 mL，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液定容于25 mL容量瓶中，以317 nm和284 nm、334 nm和300 nm波长对测定吸收度，分别代入回归方程，计算样品含量(结果见表1).
, 百拇医药
Tab.1 Results of determination of samples Batch No
Tinidazole
Ciprofloxacin hydrochloride
△A
C/μg.mL-1
Result(%)
△A
C/μg.mL-1
Result(%)
, 百拇医药
980
302
0.088
16±
0.001 19
4.007 2±
0.056 0
100.18±
1.40
0.066 74±
0.000 67
4.005 5±
, 百拇医药
0.040 8
100.14±
1.02
98
0401
0.087
91±
0.000 21
3.990 8±
0.009 8
99.77±
0.25
0.066 77±
, http://www.100md.com
0.000 64
4.007 4±
0.038 7
100.19±
0.97
9
80403
0.088
08±
0.000 22
3.998 8±
0.010 2
, 百拇医药 99.97±
0.26
0.066 94±
0.000 40
4.017 6±
0.023 9
100.44±
0.60
4 稳定性试验
采用初均速法〔3〕，取一定数量复方替硝唑漱口液，分别置于80、75、70、65、60、55、50 ℃恒温水浴中加热，一定时间(见表2)取出，冰水浴中终止反应，按上述方法测定供试品替硝唑、盐酸环丙沙星的含量(结果见表2).
, 百拇医药
以加热前替硝唑、盐酸环丙沙星含量C0为100%，计算恒温加热t时间后替硝唑、盐酸环丙沙星的相对百分含量C，由公式V0＝(C0-C)/t算出V0.以lgV\-0对1/T进行回归，得替硝唑的直线方程：lgV0＝-4 132.048 7/T+10.549 7,r=0.997 8,t25℃0.9 =2.31 a；盐酸环丙沙星的直线方程：lgV0＝-3 609.513 1/T+8.965 5,r＝
Tab.2 Results of stability tests at different temparatures t/℃
T/K
1/T×10
t/h
, 百拇医药
Tinidazole
Ciprofloxacin hydrochloride
C
V0
lgV0
C
V0
lgV0
50
323.2
3.094
, 百拇医药 9
99.75
0.005 6
-2.251 8
99.94
0.006 7
-2.173 9
55
328.2
3.047
8
99.92
0.010 0
, 百拇医药
-2.000 0
99.93
0.008 8
-2.055 5
60
333.2
3.001
7
99.91
0.012 9
-1.889 4
99.92
0.014 3
, http://www.100md.com
-1.844 7
65
338.2
2.957
6
99.87
0.021 7
-1.663 5
99.89
0.018 3
-1.737 5
70
343.2
, http://www.100md.com
2.914
5
99.83
0.034 0
-1.468 5
99.87
0.026 0
-1.585 0
75
348.2
2.872
4
99.81
, 百拇医药
0.047 5
-1.323 3
99.84
0.040 0
-1.397 9
80
353.2
2.831
3
99.79
0.070 0
-1.154 9
, 百拇医药 99.82
0.060 0
-1.221 8
0.996 6,t25℃0.9＝1.57 a.
5 抑菌试验
采用纸片法〔4〕观察该制剂对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌的抑制作用.经37℃恒温培养24 h后，测量抑菌圈直径，同时以0.05%替硝唑、0.05%盐酸环丙沙星对照液为空白进行对比试验.结果表明，复方替硝唑漱口液抑菌圈直径比单组分比较相差显著(P<0.05).提示复方替硝唑漱口液抑菌效果与单组分有显著差异(结果见表3).
Tab.3 Results of bacteriostatic experiments(n=4，
±SD) Offered bacterium
, 百拇医药
Bacteriostatic coil diameters
A
B
C
Staphylococci aureus
9.570±0.246
7.170±1.007*
7.470±0.099*
Blue pus organism
32.298±0.216
6.342±0.180*
, http://www.100md.com
31.288±0.316*
Bacillus canalis capsulatus
17.368±1.556
6.333±0.409*
14.398±0.503*
Escherichia coli
42.928±0.493
5.990±0.080*
41.560±0.480*
, 百拇医药
A is compound tinidazole gargle;B is 0.05% tinidazole check sample;C is 0.05% ciprofloxacin hydrochloride check sample；The mark* is P<0.05(compared with compound tinidazole gargle).
6 刺激性试验
取健康家兔6只，雌雄各半，体重1.4～2.3 kg，右眼滴复方替硝唑漱口液2滴，左眼滴不含替硝唑和盐酸环丙沙星的处方空白液作对照，每天3次连滴7 d.观察家兔眼无充血、水肿、畏光、流泪等异常现象.
7 讨论
a.复方替硝唑漱口液处方简单、制备容易、含量测定方法易行.抑菌效果优于单纯成分的溶液而且无刺激性.
, 百拇医药
b.该制剂稳定性较好，有效期可暂定 1年半.但须避光保存，防止替硝唑见光分解，降低疗效.
参考文献
1，湛建国,程泽能,张郁葱.复方替硝唑含漱剂的研制.中国药学杂志,1997,32(2):94～96
2，谷杰,周仲强,卢宇平,等.复方替硝唑栓的制备、质量控制及临床应用.中国药房,1996,7(6)：262
3，庞贻慧，鲁纯素.药物稳定性预测方法.北京：人民卫生出版社，1984.76～80
4，叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程.南京：东南大学出版社，1991.460～462
收稿日期:1999-11-24
, 百拇医药
单位：第三军医大学大坪医院野战外科研究所药剂科，重庆 400042
关键词：替硝唑；盐酸环丙沙星；漱口液；双波长-等吸收法
沈阳药科大学学报000406 摘 要 介绍了复方替硝唑漱口液的制备方法和质量标准.平均回收率，替哨唑为102.39%，RSD为0.64%；盐酸环丙沙星为99.48%，RSD为0.20%.
分类号 R94
Preparation of the Compound Tinidazole Gargle
Li Jianping，He Fengci，Feng Xianyi
, 百拇医药 (Department of Pharmacy,Institute of Field Surgery,Daping Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400042)
Abstract The preparation method and quality control of the compound tinidazole gargle were studied. The average recovery of tinidazole was 102.39%，RSD=0.64% and that of ciprofloxacin hydrochloride was 99.48%，RSD=0.20%.The results of bacteriostatic experiments,stability tests and irritant experiment showed that this gargle had good bacteriostatic effect,high stability and no irritability.
, 百拇医药
Key words tinidazole；ciprofloxacin hydrochloride；gargle；duble-wavelength and equal-absorption spectrophotometry
替硝唑(tinidazole,TNZ)为硝基咪唑类抗厌氧菌及抗原虫药，具有疗效高、疗程短、耐受性好、体内分布广等特点，其抗菌活性为甲硝唑的2～4倍，主要用于治疗各种厌氧菌感染〔1〕.经查阅文献，国内尚无以替硝唑为主药的漱口液，根据口腔疾病致病菌的特点，我们研制了复方替硝唑漱口液，除主药替硝唑外加入喹诺酮类抗生素盐酸环丙沙星，以增强其抗菌效果.用于牙周病、口腔粘膜感染性疾病以及清洁口腔、去除口臭等.
1 仪器与试药
DU-650分光光度仪(美国贝克曼公司)；SPM-10A数字酸度计(浙江萧山仪器标准件厂)；PSH-525型生化培养箱(重庆试验设备厂)；替硝唑(湖北省广济药业股份有限公司，批号970302)；盐酸环丙沙星(浙江新昌制药厂，批号961228)；金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、绿脓杆菌(铜绿假单胞菌ATCC27853)、大肠埃希氏菌(ATCC25922)均由四川省临床检验中心提供；肺炎克雷伯氏菌(本院检验科分离鉴定)；其它试剂均为分析纯.
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2 处方与制备
处方 替硝唑0.05 g，盐酸环丙沙星0.05 g，氯化钠0.5 g ，甘油5 mL ，蒸馏水加至100 mL.
制备 称取替硝唑于适量蒸馏水中，加热溶解，然后加入盐酸环丙沙星、氯化钠溶解，加入甘油，再加蒸馏水至足量，混匀.过滤分装即得.
3 质量标准
3.1 性状及pH值
本品为无色澄明液体,pH4.00～5.00.
3.2 含量测定
3.2.1 紫外吸收光谱与含量测定方法〔2〕
按处方量称取替硝唑、盐酸环丙沙星各约0.05 g以及不含主药的其它成分，分别用蒸馏水定容溶于100 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液同等稀释到一定量，以溶剂为空白，在200～500 nm波长范围内扫描，得紫外吸收光谱(见图1).
, 百拇医药
Fig.1 Absorption spectra of the sample
1—tinidazole；2—ciprofloxacin hydrochloride；3—basicum
由图1可见替硝唑在317 nm处有最大吸收，盐酸环丙沙星在334 nm处有一稳定吸收峰，处方中其它成分无吸收.故分别选用双波长-等吸收分光光度法作为替硝唑和盐酸环丙沙星含量测定方法.
按处方比例称取替硝唑、盐酸环丙沙星适量，分别用0.01 mol/L氢氧化钠溶液配成3种不同浓度的溶液，以溶剂为空白，反复测定吸收度.最后确定317 nm为替硝唑测定波长，干扰组分盐酸环丙沙星对应的等吸收波长284 nm为参比波长；334 nm为盐酸环丙沙星测定波长，干扰组分替硝唑对应的等吸收波长300 nm为参比波长.
3.2.2 标准曲线的绘制
, 百拇医药
分别精密称取105℃干燥至恒重的替硝唑、盐酸环丙沙星对照品约0.05 g置100 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀.精密吸取 5 mL置50 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀.再分别精取1、2、3、4、5 mL置25 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀.以溶剂为空白，在317、284、334、300 nm波长处测定吸收度，计算△A替(△A替＝A317nm-A284nm)、△A环(△A环=A334nm-A300nm),以△A替和△A环分别对浓度C进行回归，得回归方程.
替硝唑(2～10 μg/mL)回归方程：
C＝47.007 42 △A替-0.141 61，r=0.999 9(n=5).
, 百拇医药
盐酸环丙沙星(2～10 μg/mL)回归方程：
C＝60.503 22 △A环-0.032 45，r=0.999 9(n=5).
3.2.3 回收率试验
按处方比例配制供试液.精密吸取适量，以0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释成系列浓度的测定液，以317 nm和284 nm，334 nm和300 nm波长对测定吸收度，分别计算△A替和△A环，代入回归方程，结果测得替硝唑平均回收率为102.39%，RSD为0.64%(n=4).盐酸环丙沙星平均回收率为99.48%，RSD为0.20%(n=4).
3.2.4 样品含量测定
取3批样品溶液，精密吸取5 mL置50 mL容量瓶中，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，再精密吸取稀释液2 mL，用0.01 mol/L氢氧化钠溶液定容于25 mL容量瓶中，以317 nm和284 nm、334 nm和300 nm波长对测定吸收度，分别代入回归方程，计算样品含量(结果见表1).
, 百拇医药
Tab.1 Results of determination of samples Batch No
Tinidazole
Ciprofloxacin hydrochloride
△A
C/μg.mL-1
Result(%)
△A
C/μg.mL-1
Result(%)
, 百拇医药
980
302
0.088
16±
0.001 19
4.007 2±
0.056 0
100.18±
1.40
0.066 74±
0.000 67
4.005 5±
, 百拇医药
0.040 8
100.14±
1.02
98
0401
0.087
91±
0.000 21
3.990 8±
0.009 8
99.77±
0.25
0.066 77±
, http://www.100md.com
0.000 64
4.007 4±
0.038 7
100.19±
0.97
9
80403
0.088
08±
0.000 22
3.998 8±
0.010 2
, 百拇医药 99.97±
0.26
0.066 94±
0.000 40
4.017 6±
0.023 9
100.44±
0.60
4 稳定性试验
采用初均速法〔3〕，取一定数量复方替硝唑漱口液，分别置于80、75、70、65、60、55、50 ℃恒温水浴中加热，一定时间(见表2)取出，冰水浴中终止反应，按上述方法测定供试品替硝唑、盐酸环丙沙星的含量(结果见表2).
, 百拇医药
以加热前替硝唑、盐酸环丙沙星含量C0为100%，计算恒温加热t时间后替硝唑、盐酸环丙沙星的相对百分含量C，由公式V0＝(C0-C)/t算出V0.以lgV\-0对1/T进行回归，得替硝唑的直线方程：lgV0＝-4 132.048 7/T+10.549 7,r=0.997 8,t25℃0.9 =2.31 a；盐酸环丙沙星的直线方程：lgV0＝-3 609.513 1/T+8.965 5,r＝
Tab.2 Results of stability tests at different temparatures t/℃
T/K
1/T×10
t/h
, 百拇医药
Tinidazole
Ciprofloxacin hydrochloride
C
V0
lgV0
C
V0
lgV0
50
323.2
3.094
, 百拇医药 9
99.75
0.005 6
-2.251 8
99.94
0.006 7
-2.173 9
55
328.2
3.047
8
99.92
0.010 0
, 百拇医药
-2.000 0
99.93
0.008 8
-2.055 5
60
333.2
3.001
7
99.91
0.012 9
-1.889 4
99.92
0.014 3
, http://www.100md.com
-1.844 7
65
338.2
2.957
6
99.87
0.021 7
-1.663 5
99.89
0.018 3
-1.737 5
70
343.2
, http://www.100md.com
2.914
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348.2
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, 百拇医药
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-1.323 3
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-1.397 9
80
353.2
2.831
3
99.79
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-1.154 9
, 百拇医药 99.82
0.060 0
-1.221 8
0.996 6,t25℃0.9＝1.57 a.
5 抑菌试验
采用纸片法〔4〕观察该制剂对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌的抑制作用.经37℃恒温培养24 h后，测量抑菌圈直径，同时以0.05%替硝唑、0.05%盐酸环丙沙星对照液为空白进行对比试验.结果表明，复方替硝唑漱口液抑菌圈直径比单组分比较相差显著(P<0.05).提示复方替硝唑漱口液抑菌效果与单组分有显著差异(结果见表3).
Tab.3 Results of bacteriostatic experiments(n=4，
±SD) Offered bacterium, 百拇医药
Bacteriostatic coil diameters
A
B
C
Staphylococci aureus
9.570±0.246
7.170±1.007*
7.470±0.099*
Blue pus organism
32.298±0.216
6.342±0.180*
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31.288±0.316*
Bacillus canalis capsulatus
17.368±1.556
6.333±0.409*
14.398±0.503*
Escherichia coli
42.928±0.493
5.990±0.080*
41.560±0.480*
, 百拇医药
A is compound tinidazole gargle;B is 0.05% tinidazole check sample;C is 0.05% ciprofloxacin hydrochloride check sample；The mark* is P<0.05(compared with compound tinidazole gargle).
6 刺激性试验
取健康家兔6只，雌雄各半，体重1.4～2.3 kg，右眼滴复方替硝唑漱口液2滴，左眼滴不含替硝唑和盐酸环丙沙星的处方空白液作对照，每天3次连滴7 d.观察家兔眼无充血、水肿、畏光、流泪等异常现象.
7 讨论
a.复方替硝唑漱口液处方简单、制备容易、含量测定方法易行.抑菌效果优于单纯成分的溶液而且无刺激性.
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b.该制剂稳定性较好，有效期可暂定 1年半.但须避光保存，防止替硝唑见光分解，降低疗效.
参考文献
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2，谷杰,周仲强,卢宇平,等.复方替硝唑栓的制备、质量控制及临床应用.中国药房,1996,7(6)：262
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收稿日期:1999-11-24
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