利多卡因气雾剂药效学实验研究
作者：霍义宏 于新发 区洁文 赵香兰
单位：(顺德市第一人民医院 广东 528300)
关键词：
广东药学000436 根据新药四类的报批要求，共进行了兔角膜及蛙皮肤表面麻醉和蛙及大鼠传导麻醉两个方面四种方法的实验研究。
1 试验目的
1.1 观察4%利多卡因(碱)气雾剂(简称气雾剂)对家兔角膜的麻醉强度、潜伏期，并与4.62%盐酸利多卡因注射液(简称注射液)比较，找出气雾剂的表面麻醉最低有效浓度。
1.2 观察气雾剂对蛙坐骨神经-腓肠肌及大鼠离体坐骨神经电刺激阈的影响，比较其与注射液的传导麻醉作用的潜伏期与麻醉强度。
, 百拇医药
2 实验材料
2.1 受试药物 气雾剂，本院研制，批号950908。含利多卡因(碱)0.5%、1%、2%、4%、8%。制剂标示量4%。
2.2 对照药物 2.31%、4.62%、9.24%盐酸利多卡因注射液，含碱基分别相当于2%、4%、8%气雾剂，批号950710。生理盐水批号950709，本院制剂中心提供。赋型剂(不含利多卡因碱)批号950908。
2.3 动物 中山医科大学实验动物中心提供。大白兔66只，雌雄各半，(合格证：粤卫动字26-001，检证字95A09)体重2±0.2kg。各组动物数：6～9只。SD大鼠，体重200～250g，雌雄各半(合格证：粤卫动字26-001，检证95A08)。蛙300只。
3 方法与结果
3.1 表面麻醉
, 百拇医药
3.1.1 气雾剂对兔角膜眨眼反射的影响
3.1.1.1 方法 把兔剪去睫毛，固定于兔盒内，露出头部，将兔眼睑拉开，使结膜囊成杯状，用药品对准眼球10cm处喷药约1秒或滴入药液约0.25ml，使药液充满结膜囊，并与眼球充分接触1min，然后用生理盐水冲洗3次，用药后1、2、5min各测试一次角膜反射，以后每5min测试1次，直至角膜反射恢复。每次测试刺激角膜3次，3次不眨眼定为有效，并观察用药前后角膜有无受损(充血、水肿、溃烂)，每组数据以x±s表示其大小及数据差异程度。组间差别的显著性采用t检验方法来比较。
3.1.1.2 实验结果 见表1。
表1 利多卡因气雾剂对兔角膜眨眼反射的影响实验结果 组别
给药时间
(min)
, http://www.100md.com
剂量
(ml)
起效时间
(min)
起效动物/
总动物(只)
维持时间
(min)
损伤动物/
动物总数(只)
生理盐水
1
0.25
, 百拇医药
—
0/7
0
0/7
赋型剂
1
0.25
—
0/7
0
0/7
A浓度(%)
0.5
, 百拇医药 1
0.25
2±0
2/6
3±0
0/7
1
1
0.25
1.16±0.408
6/6
9±8.5*
, http://www.100md.com
0/6
2
1
0.25
1±0
6/6
16.67±8.16***
0/6
4
1
, http://www.100md.com 0.25
1±0
7/7
40.0±18.71***
0/7
8
1
0.25
, http://www.100md.com
1±0
6/6
55.0±14.84***
0/7
B浓度(%)
4.62
1
0.25
, 百拇医药
1.33±0.70
9/9
7.29±4.22**
0/7
4.62
3
0.25
3.0±0
6/6
27.5±10.80***
0/7
9.24
, 百拇医药
1
0.25
1±0
6/6
31.67±7.53***
0/7
注：①“A”利多卡因气雾剂，“B”盐酸利多卡因注射液，下表同。
②与赋型剂和生理盐水比较：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。与相应浓度的4.62%注射液给药1min比较：P>0.05，P<0.05，P<0.01，P<0.001。4%气雾剂与4.62%注射液(给药3min)比较，与8%注射液比较，P>0.05。0.5%利多卡因气雾剂未予统计。
, 百拇医药
③本试验从给药后3min才进行检测，故起效时间一项未能评价。
3.1.2 蛙皮肤刺激法观察气雾剂表面麻醉潜伏期
3.1.2.1 方法 自蛙口角处剪上颌，用粗线穿下颌将蛙悬吊，将蛙蹼浸于稀盐酸中，试其缩腿反射，盐酸浓度0.05M、0.1M，先将双蹼浸于盐酸液中10秒，观其反射，试毕用清水洗净蛙蹼之酸液。将气雾剂及对照药液分别喷或涂于蛙蹼，分别于0.5、1、3、5、10min后用清水冲洗干净，浸入青蛙有反射的对应酸液中，测其对酸液的反射，记录反射消失的时间即潜伏期。数据处理方法与兔角膜法相同。
3.1.2.2 实验结果 见表2。
表2 利多卡因气雾剂表面麻醉潜伏期(蛙皮肤法)实验结果 组别
起效动物数/
, 百拇医药
动物总数(只)
潜伏期
(min)
与赋型剂比较
与4.62%利多卡
因注射液比较
生理盐水
0/7
—
—
—
赋型剂
7/7
, 百拇医药
1.86±1.07
—
P<0.01
A(%)
1
8/8
1.21±0.81
P>0.05
P<0.05
2
7/7
0.5±0
P<0.01
, http://www.100md.com
P>0.05
4
7/7
0.5±0
P<0.01
P>0.05
B(%)
4.62
7/7
0.5±0
P<0.01
3.1.3 小结
上述两项有关表面麻醉的实验结果表明，气雾剂的表面麻醉作用最低有效浓度为1%，4%气雾剂的表面麻醉作用较4.62%注射液起效快，维持时间长，本剂型最低有效浓度为1%，其作用与4.62%注射液相当。本品(4%利多卡因气雾剂)给药1min，作用维持时间相当于4.62%盐酸利多卡因注射液给药3min。另外通过蛙皮肤刺激法测得的本品潜伏期短，证明本品药物透入组织速度快；赋型剂也有一定的麻醉作用；2%气雾剂与4.62%注射液潜伏期相当。
, 百拇医药
3.2 传导麻醉
3.2.1 蛙离体坐骨神经-腓肠肌标本法
3.2.1.1 方法 制作蛙离体坐骨神经-腓肠肌标本，装于肌槽内，神经远端连接电刺激器电极，中间留一段供喷药(或涂药)用，腓肠肌跟腱连接换能器，测定用药前电刺激阈。用气雾剂或注射液喷药或涂药，使给药部位有药液均匀覆盖1min，从给药算起，每2min测试一次，如对原刺激阈电压无反应，则逐渐加大刺激电压到原刺激阈10倍电压作为已麻醉标准，记录自用药到麻醉所需时间，刺激阈两次测量不再增大作为最大麻醉强度。数据处理方法与兔角膜法相同。
3.2.1.2 实验结果 见表3。表3 4%利多卡因气雾剂对蛙离体坐骨神经-腓肠肌标本电刺激阈的影响 组别
动物数(只)
给药前阈值
, 百拇医药
(mV)
达到麻醉所需
时间(min)
最大麻醉强度
(为原刺激阈倍数)
任氏液
6
0.12±0.05
—
1.0±0
赋型剂
6
0.10±0.03
, http://www.100md.com
—
1.0±0
A(%)
1
6
0.10±0.02
15.67±6.98
49.2±34.95***
, 百拇医药
2
6
0.12±0.04
11.33±3.50
84.22±59.08***
4
6
0.12±0.03
11.00±3.74
, http://www.100md.com
148.13±79.97***
B(%)
4.62
6
0.09±0.01
10.33±3.20
155.27±111.40***
注：与任氏液、赋型剂比较***P<0.001；与4.62%盐酸利多卡因注射液比较，P>0.05，P<0.05。
, http://www.100md.com
3.2.2 大白鼠离体坐骨神经法
3.2.2.1 方法 用1%戊巴比妥钠0.4ml/100g麻醉大鼠，制备大白鼠离体坐骨神经标本，放置在封闭盒内，远端连接电刺激器，另一端连计算机，留中间段供给药。用电刺激器刺激神经远端，确定标本的基础动作电位。给药于神经中段，每隔1min测定动作电位，直至降低100%，算出给药后3min动作电位降低的百分率，以及降低100%所需时间，并作比较，数理统计方法同兔角膜法。
3.2.2.2 结果 见表4表4 利多卡因气雾剂对大白鼠离体坐骨神经标本动作电位的影响 组别
动物数
(只)
给药后3min基础动作
电位(mv)降低百分率(%)
, 百拇医药
降低100%所需时间
(min)
任氏液
8
0
—
赋型剂
8
0
—
A(%)
1
9
, http://www.100md.com 80.08±11.04
6.33±2.78
2
7
92.4±14.64
4.14±2.48
, 百拇医药
4
9
98.54±3.25
2.62±1.06
B(%)
4.62
8
98.93±3.0
2.25±0.89
注：与4.62%盐酸利多卡因注射液比较，P<0.05，P<0.05，P<0.001。
, 百拇医药
3.2.3 小结 通过传导麻醉的两个实验说明，1%、2%及4%利多卡因气雾剂具有传导麻醉作用，作用非常显著，有一定量效关系。
4 讨论
4.1 4%利多卡因气雾剂具有表面麻醉作用，作用较4.62%盐酸利多卡因注射液起效快，维持时间长。
4.2 本剂型表面麻醉最低有效浓度为1%，随着药物浓度增加，维持时间延长。本品(4%利多卡因气雾剂)给药1min作用平均维持时间为40.0±18.71min，比4.62%盐酸利多卡因注射液给药3min时作用时间延长。
4.3 通过蛙皮肤刺激法测得的本品表面麻醉潜伏期短，2%利多卡因气雾剂与4.62%盐酸利多卡因注射液潜伏期相当，表明本品药物用于表面麻醉透入组织速度快。
4.4 通过传导麻醉的两个实验说明，1%、2%及4%利多卡因气雾剂均具有传导麻醉作用，有明显量效关系。4%利多卡因气雾剂与4.62%盐酸利多卡因注射液比较统计学上无显著差异，提示二者传导麻醉作用强度及速度相当。
(收稿：2000-04-18), 百拇医药
单位：(顺德市第一人民医院 广东 528300)
关键词：
广东药学000436 根据新药四类的报批要求，共进行了兔角膜及蛙皮肤表面麻醉和蛙及大鼠传导麻醉两个方面四种方法的实验研究。
1 试验目的
1.1 观察4%利多卡因(碱)气雾剂(简称气雾剂)对家兔角膜的麻醉强度、潜伏期，并与4.62%盐酸利多卡因注射液(简称注射液)比较，找出气雾剂的表面麻醉最低有效浓度。
1.2 观察气雾剂对蛙坐骨神经-腓肠肌及大鼠离体坐骨神经电刺激阈的影响，比较其与注射液的传导麻醉作用的潜伏期与麻醉强度。
, 百拇医药
2 实验材料
2.1 受试药物 气雾剂，本院研制，批号950908。含利多卡因(碱)0.5%、1%、2%、4%、8%。制剂标示量4%。
2.2 对照药物 2.31%、4.62%、9.24%盐酸利多卡因注射液，含碱基分别相当于2%、4%、8%气雾剂，批号950710。生理盐水批号950709，本院制剂中心提供。赋型剂(不含利多卡因碱)批号950908。
2.3 动物 中山医科大学实验动物中心提供。大白兔66只，雌雄各半，(合格证：粤卫动字26-001，检证字95A09)体重2±0.2kg。各组动物数：6～9只。SD大鼠，体重200～250g，雌雄各半(合格证：粤卫动字26-001，检证95A08)。蛙300只。
3 方法与结果
3.1 表面麻醉
, 百拇医药
3.1.1 气雾剂对兔角膜眨眼反射的影响
3.1.1.1 方法 把兔剪去睫毛，固定于兔盒内，露出头部，将兔眼睑拉开，使结膜囊成杯状，用药品对准眼球10cm处喷药约1秒或滴入药液约0.25ml，使药液充满结膜囊，并与眼球充分接触1min，然后用生理盐水冲洗3次，用药后1、2、5min各测试一次角膜反射，以后每5min测试1次，直至角膜反射恢复。每次测试刺激角膜3次，3次不眨眼定为有效，并观察用药前后角膜有无受损(充血、水肿、溃烂)，每组数据以x±s表示其大小及数据差异程度。组间差别的显著性采用t检验方法来比较。
3.1.1.2 实验结果 见表1。
表1 利多卡因气雾剂对兔角膜眨眼反射的影响实验结果 组别
给药时间
(min)
, http://www.100md.com
剂量
(ml)
起效时间
(min)
起效动物/
总动物(只)
维持时间
(min)
损伤动物/
动物总数(只)
生理盐水
1
0.25
, 百拇医药
—
0/7
0
0/7
赋型剂
1
0.25
—
0/7
0
0/7
A浓度(%)
0.5
, 百拇医药 1
0.25
2±0
2/6
3±0
0/7
1
1
0.25
1.16±0.408
6/6
9±8.5*
, http://www.100md.com
0/6
2
1
0.25
1±0
6/6
16.67±8.16***
0/6
4
1
, http://www.100md.com 0.25
1±0
7/7
40.0±18.71***
0/7
8
1
0.25
, http://www.100md.com
1±0
6/6
55.0±14.84***
0/7
B浓度(%)
4.62
1
0.25
, 百拇医药
1.33±0.70
9/9
7.29±4.22**
0/7
4.62
3
0.25
3.0±0
6/6
27.5±10.80***
0/7
9.24
, 百拇医药
1
0.25
1±0
6/6
31.67±7.53***
0/7
注：①“A”利多卡因气雾剂，“B”盐酸利多卡因注射液，下表同。
②与赋型剂和生理盐水比较：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。与相应浓度的4.62%注射液给药1min比较：
P>0.05，P<0.05，P<0.01，P<0.001。4%气雾剂与4.62%注射液(给药3min)比较，与8%注射液比较，P>0.05。0.5%利多卡因气雾剂未予统计。, 百拇医药
③本试验从给药后3min才进行检测，故起效时间一项未能评价。
3.1.2 蛙皮肤刺激法观察气雾剂表面麻醉潜伏期
3.1.2.1 方法 自蛙口角处剪上颌，用粗线穿下颌将蛙悬吊，将蛙蹼浸于稀盐酸中，试其缩腿反射，盐酸浓度0.05M、0.1M，先将双蹼浸于盐酸液中10秒，观其反射，试毕用清水洗净蛙蹼之酸液。将气雾剂及对照药液分别喷或涂于蛙蹼，分别于0.5、1、3、5、10min后用清水冲洗干净，浸入青蛙有反射的对应酸液中，测其对酸液的反射，记录反射消失的时间即潜伏期。数据处理方法与兔角膜法相同。
3.1.2.2 实验结果 见表2。
表2 利多卡因气雾剂表面麻醉潜伏期(蛙皮肤法)实验结果 组别
起效动物数/
, 百拇医药
动物总数(只)
潜伏期
(min)
与赋型剂比较
与4.62%利多卡
因注射液比较
生理盐水
0/7
—
—
—
赋型剂
7/7
, 百拇医药
1.86±1.07
—
P<0.01
A(%)
1
8/8
1.21±0.81
P>0.05
P<0.05
2
7/7
0.5±0
P<0.01
, http://www.100md.com
P>0.05
4
7/7
0.5±0
P<0.01
P>0.05
B(%)
4.62
7/7
0.5±0
P<0.01
3.1.3 小结
上述两项有关表面麻醉的实验结果表明，气雾剂的表面麻醉作用最低有效浓度为1%，4%气雾剂的表面麻醉作用较4.62%注射液起效快，维持时间长，本剂型最低有效浓度为1%，其作用与4.62%注射液相当。本品(4%利多卡因气雾剂)给药1min，作用维持时间相当于4.62%盐酸利多卡因注射液给药3min。另外通过蛙皮肤刺激法测得的本品潜伏期短，证明本品药物透入组织速度快；赋型剂也有一定的麻醉作用；2%气雾剂与4.62%注射液潜伏期相当。
, 百拇医药
3.2 传导麻醉
3.2.1 蛙离体坐骨神经-腓肠肌标本法
3.2.1.1 方法 制作蛙离体坐骨神经-腓肠肌标本，装于肌槽内，神经远端连接电刺激器电极，中间留一段供喷药(或涂药)用，腓肠肌跟腱连接换能器，测定用药前电刺激阈。用气雾剂或注射液喷药或涂药，使给药部位有药液均匀覆盖1min，从给药算起，每2min测试一次，如对原刺激阈电压无反应，则逐渐加大刺激电压到原刺激阈10倍电压作为已麻醉标准，记录自用药到麻醉所需时间，刺激阈两次测量不再增大作为最大麻醉强度。数据处理方法与兔角膜法相同。
3.2.1.2 实验结果 见表3。表3 4%利多卡因气雾剂对蛙离体坐骨神经-腓肠肌标本电刺激阈的影响 组别
动物数(只)
给药前阈值
, 百拇医药
(mV)
达到麻醉所需
时间(min)
最大麻醉强度
(为原刺激阈倍数)
任氏液
6
0.12±0.05
—
1.0±0
赋型剂
6
0.10±0.03
, http://www.100md.com
—
1.0±0
A(%)
1
6
0.10±0.02
15.67±6.98
49.2±34.95***
, 百拇医药
2
6
0.12±0.04
11.33±3.50
84.22±59.08***
4
6
0.12±0.03
11.00±3.74
, http://www.100md.com
148.13±79.97***
B(%)
4.62
6
0.09±0.01
10.33±3.20
155.27±111.40***
注：与任氏液、赋型剂比较***P<0.001；与4.62%盐酸利多卡因注射液比较，
P>0.05，P<0.05。, http://www.100md.com
3.2.2 大白鼠离体坐骨神经法
3.2.2.1 方法 用1%戊巴比妥钠0.4ml/100g麻醉大鼠，制备大白鼠离体坐骨神经标本，放置在封闭盒内，远端连接电刺激器，另一端连计算机，留中间段供给药。用电刺激器刺激神经远端，确定标本的基础动作电位。给药于神经中段，每隔1min测定动作电位，直至降低100%，算出给药后3min动作电位降低的百分率，以及降低100%所需时间，并作比较，数理统计方法同兔角膜法。
3.2.2.2 结果 见表4表4 利多卡因气雾剂对大白鼠离体坐骨神经标本动作电位的影响 组别
动物数
(只)
给药后3min基础动作
电位(mv)降低百分率(%)
, 百拇医药
降低100%所需时间
(min)
任氏液
8
0
—
赋型剂
8
0
—
A(%)
1
9
, http://www.100md.com 80.08±11.04
6.33±2.78
2
7
92.4±14.64
4.14±2.48
, 百拇医药
4
9
98.54±3.25
2.62±1.06
B(%)
4.62
8
98.93±3.0
2.25±0.89
注：与4.62%盐酸利多卡因注射液比较，
P<0.05，P<0.05，P<0.001。, 百拇医药
3.2.3 小结 通过传导麻醉的两个实验说明，1%、2%及4%利多卡因气雾剂具有传导麻醉作用，作用非常显著，有一定量效关系。
4 讨论
4.1 4%利多卡因气雾剂具有表面麻醉作用，作用较4.62%盐酸利多卡因注射液起效快，维持时间长。
4.2 本剂型表面麻醉最低有效浓度为1%，随着药物浓度增加，维持时间延长。本品(4%利多卡因气雾剂)给药1min作用平均维持时间为40.0±18.71min，比4.62%盐酸利多卡因注射液给药3min时作用时间延长。
4.3 通过蛙皮肤刺激法测得的本品表面麻醉潜伏期短，2%利多卡因气雾剂与4.62%盐酸利多卡因注射液潜伏期相当，表明本品药物用于表面麻醉透入组织速度快。
4.4 通过传导麻醉的两个实验说明，1%、2%及4%利多卡因气雾剂均具有传导麻醉作用，有明显量效关系。4%利多卡因气雾剂与4.62%盐酸利多卡因注射液比较统计学上无显著差异，提示二者传导麻醉作用强度及速度相当。
(收稿：2000-04-18), 百拇医药