喉肿瘤浸润转移相关标志物的研究现状
作者：任晓勇 阎利英 李随勤
单位：任晓勇(西安医科大学第一临床医学院耳鼻喉科 710061)；阎利英(西安医科大学第一临床医学院耳鼻喉科 710061)；李随勤(西安医科大学第一临床医学院耳鼻喉科 710061)
关键词：喉肿瘤；肿瘤标记，生物学；综述文献
山东医大基础医学院学报000421 摘要 浸润转移是恶性肿 瘤的本质特征,也是肿瘤患者死亡的主要原因,近年,学者们在探索肿瘤浸润转移机制的过 程中,发现了许多与之有关的细胞分子和基因,其中一些与喉癌的浸润转移关系较为密切,包 括粘附分子类、蛋白溶解酶、基底膜成分、增殖细胞核抗原(PCNA)以及浸润转移相关基因nm 23、p53等。现按上述分类对喉癌浸润转移相关标志物及其研究现状作一综述。
中图分类号 R739.65 文献标识码：A
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文章编号 1008-8202(2000)04-0244-03
1 粘附分子类与喉癌的浸润转移
近年发现的粘附 分子主要有整合素(integrins,IF)、CD44、钙粘附蛋白(cadherins)、免疫球蛋白(Ig)超族 、凝集素类等。其中前3类在喉癌中的作用研究较多。
1.1 CD44 CD44是分布极广泛的细胞表面跨膜糖蛋白,按分子量大小分为80～90KD、110 ～160KD和180～215KD三种类型。CD44基因位于人类11号染色体短臂,有20个高度保守 的外显子,分组成型外显子和V区变异型外显子。前者编码形成标准型CD44(CD44S),后者转录 时插入相应的mRNA链中,指导合成变异型CD44(CD44V)。肿瘤的浸润转移主要与CD44V相关。 尽管不少学者研究发现,CD44V6表达与肿瘤恶性及侵袭呈正相关,但并非在所有肿瘤中均如 此,有学者检测鳞状上皮源性肿瘤的CD44表达后得出不同结论,认为CD44V表达水平高低取决 于组织和肿瘤类型,从而对CD44V6促进所有肿瘤生长的观点提出了疑问。为 了解CD44V6在喉癌中的作用,Spafford等[1]随访70例喉鳞状细胞癌(LSCC)并用免 疫组化技术观察了CD44V6染色强度和阳性细胞数,结果显示,Ⅰ～Ⅱ期喉癌随生存期延长, CD44V6表达增强,Ⅳ期喉癌随生存期缩短,CD44H和CD44V表达减弱,两组差异有显著性,CD44 H、CD44V6表达与喉及下咽癌细胞粘附力呈正相关,表达减少时,癌细胞粘附力下降,侵袭性 加强。而Ostwald等[2]用CD44V5、CD44V6抗体对28例未转移和26例远处转移喉 癌及20例喉癌转移淋巴结进行了研究,发现3组病例CD44V5、CD44V6表达无明显差别,但 在癌灶中心和表面细胞上,后者CD44V5、CD44V6水平明显高于前者,认为CD44与喉癌细胞 增生密切相关。虽然对于CD44在肿瘤中的作用尚无一致看法,但目前多数学者倾向于喉及下 咽癌的浸润转移与CD44表达呈负相关。
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1.2 Cadherins 按其组织分布不同分N-Csdh erin,主要分布在神经肌肉组织;P-Cadherin在胎盘组织中;E-Cadherin(E-cd)分布于上皮 组织中。其中E-cd与头颈癌、上消化道鳞癌复发转移 有一定关系,可作为咽喉鳞癌分化程度和侵袭性的标志物。E-cd基因位于人类染色体16q22. 1,编码120KD细胞表面跨膜蛋白,该蛋白以同种亲和的方式与附近细胞表面同类型E-cd分子 相互作用,提高细胞粘附性,维持组织正常形态。E-cd的丢失,活性减低可导致肿瘤细胞扩散 。因为E-cd表达与声带癌分化进展呈负相关,Liu[3]等认为,E-cd尚具有类似抑癌 基因的作用。除了用免疫组化方法外,Joug等[4]还结合原位杂交，Western杂交 技术检测了包括喉癌在内的32例头颈鳞癌的E-cd,证实E-cd表达确与肿瘤淋巴结转移相关 。另外,Franchi等[5]用免疫组化技术对照研究了30例临床未发现有潜在淋巴结转 移(P N0+)与无淋巴结转移喉癌,前者E-cd丢失率高于后者,二者有显著差异,认为E-cd可 作为预测潜在淋巴结转移的独立指标,对临床N0患者的治疗选择有重要意义。由于E-cd 抑制肿瘤浸润转移的作用得到认可,它可作为包括喉癌在内许多恶性肿瘤淋巴结转移及预后 的重要指标。
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1.3 Intrgrins IF是由α、β亚单位组成的异型二聚体。已发现的α链 有14种,β链有11种。IF是识别层粘连蛋白、胶原蛋白、纤维连接蛋白等配体并与之结合,为 联系细胞外环境与细胞内骨架的重要结构。IF的异常表达与肿瘤复发转移及预后相关。Cort estina等[6]对30例进展期喉癌的免疫组化研究表明,肿瘤组织IFα6、β4的 分布失去在正常上皮基底面的线性分布,呈现弥散分布。变异愈明显,恶性度愈高,预后愈差 。Wolf等[7]通过研究IFα6β4在头颈癌的表达,发现IFα6、β4强者 易出现早期复发,而表达弱者预后良好。总之,IF作为细胞外基质(ECM)的主要成分,在肿瘤浸 润过程中表达量与空间分布的变异,为介导肿瘤细胞的侵袭转移发挥作用。
2 蛋白溶解酶与喉癌的浸润转移
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目前已知的蛋白溶解酶有丝氨酸蛋白酶、 金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶。尿激酶纤溶酶原激活剂(U-PA)系统(丝氨 酸类)和基质金属蛋白酶(matrix metulloproteinase,MMPs)及其抑制因子(tissue inhibito rs of metalloproteinase,TIMPs)与肿瘤浸润转移关系密切。
2.1 U-PA系统 由U-PA 、U-PAR和U-PAI组成。U-PA与U-PAR结合,激活纤溶酶原(plasminogen,PA)为纤溶酶(pla smin,Pn )。后者能使组织外基质(ECM)中的层粘蛋白(limini,LN)、胶原蛋白(collagen,CI)及纤维连 接蛋白(fibronectin,FN)降解。通过U-PA与U-PAR的结合在细胞表面水化PA,是肿瘤细胞浸 润转移的限速步骤。在乳腺癌患者中,U-PA酶活性高表达者的生存期明显短于 U-PA酶活性低表达者。当U-PA有较高表达时PAI-2与良好预后有关,后者被认为是原发乳 腺 癌的一种重要抑制剂[9]。U-PA系统对喉癌浸润转移影响的报道不多。Paralini [8]等通过免疫组化技术发现喉癌中U-PA的表达上调,U-PA出现于肿瘤的实质 细胞以及肿瘤间质的巨噬细胞和成纤维细胞中,淋巴结转移组的U-PA活力及抗原水平明显高 于无淋巴结转移组,提示该系统对喉癌侵袭性有重要影响。
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2.2 MMPs和TIMPs 二者由肿 瘤实质及间质细胞分泌。MMPs是通过对ECM的降解而促进肿瘤细胞的侵袭。MMPs分4种类型: ①间质胶原蛋白酶(MMP-1);②Ⅳ型胶原酶(MMP-2);③基质溶解素(strom cyclins);④膜 型基质金属蛋白酶(MT-MMP-2)。TIMPS是具有特异抑制MMPs功能的活性肽,对ECM降解起调 节作用。现在对MMPs/TIMPs在头颈癌中的作用研究较多。Charous等[9]研究 发现,所有头颈鳞癌组的MT-MMP-1基因转录增加,89%MT-MMP-1表达增高,同时MMP-2酶 原被激活,而MT-MMP-1主要存在于浸润区域肿瘤细胞表面,提示MT-MMP-1涉及头颈鳞癌 组织MMP-2酶原激活。对单独喉癌的研究迄今为止仍很少,但已有对下咽癌临床病理研究结 果的报告,认为原发癌MMP-2表达与治疗结果明显相关,分泌MMP-2的下咽鳞癌有高度浸润及 转移趋势,预后不良。TIMPs在分化好的肿瘤中表达,不一定能够水解ECM成份 ,因为存在TIMPs等一系列抑制因子。其作用是降低肿瘤的浸润转移能力。由上述可见,MMPs /TIMPs之间存在的动态平衡可能对肿瘤浸润转移有重要调节作用。Kawamata等[10] 检测到非转移性口腔鳞癌细胞CHY和转移性细胞系HN与MMPs为TIMPs的分泌情况发现,前者 主要分泌TIMP-2,后者主要分泌MMP-2,为上述理论提供了佐证。
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3 基底膜成 分 与喉癌的浸润转移
基底膜(BM)是癌细胞发生侵袭转移的天然屏障,癌细胞 发生侵袭转移必须经过基底膜。LN和各型胶原为ECM中BM的主要成分,影响细胞的形态、分化 与功能。肿瘤细胞在侵袭过程中与ECM相互作用,释放各种蛋白溶解酶,降解ECM成分,包括LN 、Ⅳ型胶原等。恶性肿瘤的基底膜呈不连续、局部缺损改变。变化显著者常伴有较高转移率 和不良预后。Hagedorn[11]对喉癌的研究发现,BM成分减少与肿瘤分化程度降低 一致,Ⅶ型胶原可作为肿瘤早期侵袭的指标,而Ⅳ型胶原则与肿瘤分化相关。Antonini等 [12]对正常、发育不良和喉癌组织的LN和Ⅳ型胶原的免疫组化研究显示,轻度发育不 良和正常上皮中二者为连续线性,随变异加强出现断裂,在喉癌中随分化程度变差,着色程度 减少,认为基底膜成分的合成和分解与细胞转变相关。LN的免疫结构在肿瘤浸润转移过程中 常遭破坏或缺失。另外,值得注意的是LN除了结构方面的功能外,作为一种细胞 分子对肿瘤细胞生长发展有重要作用。Oritat等[13]研究了157例晚期胃癌LN的分 布情况后,发现肿瘤外周深层组织LN存在是以肿瘤扩散为特征,而且与血管浸润和肝转移相 关 ,说明LN在刺激肿瘤细胞有重要的作用,而且LN受体水平与肿瘤恶性程度有关。这一作用在喉 癌中尚未见报道。
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4 增殖细胞核抗原(PCNA)与喉癌浸润转移
PCNA又称为周期素(cyclin),是DNA聚合酶的辅助蛋白,其合成水平与细胞增殖率和DNA合成 直接相关。PCNA在 细胞核中的水平从G1开始上升,先于DNA合成开始,在S期达到高峰,在G2开始下降,在M期 和静止期维持最低水平,是反映细胞增殖的有用指标。Lukomsk等[14]对22例声 门上喉癌的石蜡标本行免疫组化研究,发现PCNA与肿瘤分化、淋巴结转移相关,而与肿瘤大小 无关。有学者对63例喉癌随访发现,5年生存组PCNA指数明显低于5年内死亡组(P<0 .05)。有颈淋巴转移组PCNA指数高于无颈淋巴转移组,认为PCNA可作为判断喉癌转 移及预后有意义的标志物。而Kram等[15]对103例喉鳞癌的研究表明,PCNA表达与 肿瘤分级、恶性度显著相关,与淋巴转移无关。由此可见,虽然对PCNA与肿瘤分化、恶性度的 相关性有较一致的看法,但能否将其作为淋巴结转移相关指标尚有异议。
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5 肿 瘤浸润转 移相关基因与喉癌浸润转移
5.1 nm23基因 又称NME基因,是1988年由美国 国立癌症研究所的Steeg等采用消减法从高转移和低转移鼠k-1735黑素瘤细胞系cDNA 文库中获得的,是目前公认的对肿瘤浸润转移有抑制作用的抑癌基因。nm23编码的似核苷二 磷酸激酶(NDPK)的蛋白分子,参与微管的集合与分解,影响细胞的结构和相互关系,其异常表 达有助于肿瘤细胞的扩散。Gunduz等[16]研究发现,nm23在选取的所有喉癌与正 常粘膜上均有表达,喉癌中nm23表达量的降低与肿瘤分化差、复发、转移呈正相关,认为它可 以作为喉癌预后的重要因素。Lee[17]等也有类似的报道,在所有正常粘膜中均有 nm23,几乎在一半(46%)的喉癌中表达量减低,而在淋巴结转移病例中80%很少出现nm23表达 ,并且与生存时间较短相关。尽管大多数学者认为,nm23与喉癌浸润转移呈负相关,但并非所 有的研究结论均相同。Scholnick[18]等用PCR方法检测37例声门上喉癌的TP53、Rb 、3P及NME等位基因缺失率分别为56%、59%、64%、和70%。NME等位基因缺失与淋巴结转移无 相关性。nm23对喉癌浸润转移的影响仍需进一步研究。
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5.2 p53基因 该基因位于人类 染色体17p13,具有调节细胞增殖分化的功能,失活后在肿瘤发生发展上起重要作用 。野生型p53(WTP53)编码产生53Kd核酸蛋白,具有抑制DNA复制转录,能与病毒致癌基因产物 结合抑制肿瘤的恶性表型作用。基因丢失、突变而丧失抑癌作用,成为致癌基因,致细胞无限 生长。Munek-Wikland等[19]观察到,有重度DNA异常、高增殖活性与P53蛋白过 度表达的喉原位癌发展成为浸润的可能性更大,Gasparin等[20]对头颈癌包括喉 癌的研究报道中显示，p53蛋白表达者多为临床晚期,恶性程度较高。然而，Frank等[ 22 ]在对P53在下咽癌中的作用研究后发现,P53表达与肿瘤浸润转移及预后并无明显相关,对 P53的预后意义表示怀疑。
6 结束语
肿瘤的浸润转移机 制 颇为复杂。目前认为,它是肿瘤细胞与细胞外基质相互作用的过程,包括粘附、降解和移动3 个步骤。这个动态过程需要基因调控并受到各种蛋白溶解酶、粘附分子活性 以及基底膜形态的影响。目前已经发现为数不少的浸润转移相关标志物,有助于肿瘤早期诊 断、预测疗效及预后等,但因缺乏统一性、系统性,对实际工作的指导意义不大。要从根本上 阐明浸润转移机制,提高恶性肿瘤的诊治水平,尚需要更深入的研究。
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参考文献
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(收稿日期，2000-02-01), 百拇医药
单位：任晓勇(西安医科大学第一临床医学院耳鼻喉科 710061)；阎利英(西安医科大学第一临床医学院耳鼻喉科 710061)；李随勤(西安医科大学第一临床医学院耳鼻喉科 710061)
关键词：喉肿瘤；肿瘤标记，生物学；综述文献
山东医大基础医学院学报000421 摘要 浸润转移是恶性肿 瘤的本质特征,也是肿瘤患者死亡的主要原因,近年,学者们在探索肿瘤浸润转移机制的过 程中,发现了许多与之有关的细胞分子和基因,其中一些与喉癌的浸润转移关系较为密切,包 括粘附分子类、蛋白溶解酶、基底膜成分、增殖细胞核抗原(PCNA)以及浸润转移相关基因nm 23、p53等。现按上述分类对喉癌浸润转移相关标志物及其研究现状作一综述。
中图分类号 R739.65 文献标识码：A
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文章编号 1008-8202(2000)04-0244-03
1 粘附分子类与喉癌的浸润转移
近年发现的粘附 分子主要有整合素(integrins,IF)、CD44、钙粘附蛋白(cadherins)、免疫球蛋白(Ig)超族 、凝集素类等。其中前3类在喉癌中的作用研究较多。
1.1 CD44 CD44是分布极广泛的细胞表面跨膜糖蛋白,按分子量大小分为80～90KD、110 ～160KD和180～215KD三种类型。CD44基因位于人类11号染色体短臂,有20个高度保守 的外显子,分组成型外显子和V区变异型外显子。前者编码形成标准型CD44(CD44S),后者转录 时插入相应的mRNA链中,指导合成变异型CD44(CD44V)。肿瘤的浸润转移主要与CD44V相关。 尽管不少学者研究发现,CD44V6表达与肿瘤恶性及侵袭呈正相关,但并非在所有肿瘤中均如 此,有学者检测鳞状上皮源性肿瘤的CD44表达后得出不同结论,认为CD44V表达水平高低取决 于组织和肿瘤类型,从而对CD44V6促进所有肿瘤生长的观点提出了疑问。为 了解CD44V6在喉癌中的作用,Spafford等[1]随访70例喉鳞状细胞癌(LSCC)并用免 疫组化技术观察了CD44V6染色强度和阳性细胞数,结果显示,Ⅰ～Ⅱ期喉癌随生存期延长, CD44V6表达增强,Ⅳ期喉癌随生存期缩短,CD44H和CD44V表达减弱,两组差异有显著性,CD44 H、CD44V6表达与喉及下咽癌细胞粘附力呈正相关,表达减少时,癌细胞粘附力下降,侵袭性 加强。而Ostwald等[2]用CD44V5、CD44V6抗体对28例未转移和26例远处转移喉 癌及20例喉癌转移淋巴结进行了研究,发现3组病例CD44V5、CD44V6表达无明显差别,但 在癌灶中心和表面细胞上,后者CD44V5、CD44V6水平明显高于前者,认为CD44与喉癌细胞 增生密切相关。虽然对于CD44在肿瘤中的作用尚无一致看法,但目前多数学者倾向于喉及下 咽癌的浸润转移与CD44表达呈负相关。
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1.2 Cadherins 按其组织分布不同分N-Csdh erin,主要分布在神经肌肉组织;P-Cadherin在胎盘组织中;E-Cadherin(E-cd)分布于上皮 组织中。其中E-cd与头颈癌、上消化道鳞癌复发转移 有一定关系,可作为咽喉鳞癌分化程度和侵袭性的标志物。E-cd基因位于人类染色体16q22. 1,编码120KD细胞表面跨膜蛋白,该蛋白以同种亲和的方式与附近细胞表面同类型E-cd分子 相互作用,提高细胞粘附性,维持组织正常形态。E-cd的丢失,活性减低可导致肿瘤细胞扩散 。因为E-cd表达与声带癌分化进展呈负相关,Liu[3]等认为,E-cd尚具有类似抑癌 基因的作用。除了用免疫组化方法外,Joug等[4]还结合原位杂交，Western杂交 技术检测了包括喉癌在内的32例头颈鳞癌的E-cd,证实E-cd表达确与肿瘤淋巴结转移相关 。另外,Franchi等[5]用免疫组化技术对照研究了30例临床未发现有潜在淋巴结转 移(P N0+)与无淋巴结转移喉癌,前者E-cd丢失率高于后者,二者有显著差异,认为E-cd可 作为预测潜在淋巴结转移的独立指标,对临床N0患者的治疗选择有重要意义。由于E-cd 抑制肿瘤浸润转移的作用得到认可,它可作为包括喉癌在内许多恶性肿瘤淋巴结转移及预后 的重要指标。
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1.3 Intrgrins IF是由α、β亚单位组成的异型二聚体。已发现的α链 有14种,β链有11种。IF是识别层粘连蛋白、胶原蛋白、纤维连接蛋白等配体并与之结合,为 联系细胞外环境与细胞内骨架的重要结构。IF的异常表达与肿瘤复发转移及预后相关。Cort estina等[6]对30例进展期喉癌的免疫组化研究表明,肿瘤组织IFα6、β4的 分布失去在正常上皮基底面的线性分布,呈现弥散分布。变异愈明显,恶性度愈高,预后愈差 。Wolf等[7]通过研究IFα6β4在头颈癌的表达,发现IFα6、β4强者 易出现早期复发,而表达弱者预后良好。总之,IF作为细胞外基质(ECM)的主要成分,在肿瘤浸 润过程中表达量与空间分布的变异,为介导肿瘤细胞的侵袭转移发挥作用。
2 蛋白溶解酶与喉癌的浸润转移
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目前已知的蛋白溶解酶有丝氨酸蛋白酶、 金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶。尿激酶纤溶酶原激活剂(U-PA)系统(丝氨 酸类)和基质金属蛋白酶(matrix metulloproteinase,MMPs)及其抑制因子(tissue inhibito rs of metalloproteinase,TIMPs)与肿瘤浸润转移关系密切。
2.1 U-PA系统 由U-PA 、U-PAR和U-PAI组成。U-PA与U-PAR结合,激活纤溶酶原(plasminogen,PA)为纤溶酶(pla smin,Pn )。后者能使组织外基质(ECM)中的层粘蛋白(limini,LN)、胶原蛋白(collagen,CI)及纤维连 接蛋白(fibronectin,FN)降解。通过U-PA与U-PAR的结合在细胞表面水化PA,是肿瘤细胞浸 润转移的限速步骤。在乳腺癌患者中,U-PA酶活性高表达者的生存期明显短于 U-PA酶活性低表达者。当U-PA有较高表达时PAI-2与良好预后有关,后者被认为是原发乳 腺 癌的一种重要抑制剂[9]。U-PA系统对喉癌浸润转移影响的报道不多。Paralini [8]等通过免疫组化技术发现喉癌中U-PA的表达上调,U-PA出现于肿瘤的实质 细胞以及肿瘤间质的巨噬细胞和成纤维细胞中,淋巴结转移组的U-PA活力及抗原水平明显高 于无淋巴结转移组,提示该系统对喉癌侵袭性有重要影响。
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2.2 MMPs和TIMPs 二者由肿 瘤实质及间质细胞分泌。MMPs是通过对ECM的降解而促进肿瘤细胞的侵袭。MMPs分4种类型: ①间质胶原蛋白酶(MMP-1);②Ⅳ型胶原酶(MMP-2);③基质溶解素(strom cyclins);④膜 型基质金属蛋白酶(MT-MMP-2)。TIMPS是具有特异抑制MMPs功能的活性肽,对ECM降解起调 节作用。现在对MMPs/TIMPs在头颈癌中的作用研究较多。Charous等[9]研究 发现,所有头颈鳞癌组的MT-MMP-1基因转录增加,89%MT-MMP-1表达增高,同时MMP-2酶 原被激活,而MT-MMP-1主要存在于浸润区域肿瘤细胞表面,提示MT-MMP-1涉及头颈鳞癌 组织MMP-2酶原激活。对单独喉癌的研究迄今为止仍很少,但已有对下咽癌临床病理研究结 果的报告,认为原发癌MMP-2表达与治疗结果明显相关,分泌MMP-2的下咽鳞癌有高度浸润及 转移趋势,预后不良。TIMPs在分化好的肿瘤中表达,不一定能够水解ECM成份 ,因为存在TIMPs等一系列抑制因子。其作用是降低肿瘤的浸润转移能力。由上述可见,MMPs /TIMPs之间存在的动态平衡可能对肿瘤浸润转移有重要调节作用。Kawamata等[10] 检测到非转移性口腔鳞癌细胞CHY和转移性细胞系HN与MMPs为TIMPs的分泌情况发现,前者 主要分泌TIMP-2,后者主要分泌MMP-2,为上述理论提供了佐证。
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3 基底膜成 分 与喉癌的浸润转移
基底膜(BM)是癌细胞发生侵袭转移的天然屏障,癌细胞 发生侵袭转移必须经过基底膜。LN和各型胶原为ECM中BM的主要成分,影响细胞的形态、分化 与功能。肿瘤细胞在侵袭过程中与ECM相互作用,释放各种蛋白溶解酶,降解ECM成分,包括LN 、Ⅳ型胶原等。恶性肿瘤的基底膜呈不连续、局部缺损改变。变化显著者常伴有较高转移率 和不良预后。Hagedorn[11]对喉癌的研究发现,BM成分减少与肿瘤分化程度降低 一致,Ⅶ型胶原可作为肿瘤早期侵袭的指标,而Ⅳ型胶原则与肿瘤分化相关。Antonini等 [12]对正常、发育不良和喉癌组织的LN和Ⅳ型胶原的免疫组化研究显示,轻度发育不 良和正常上皮中二者为连续线性,随变异加强出现断裂,在喉癌中随分化程度变差,着色程度 减少,认为基底膜成分的合成和分解与细胞转变相关。LN的免疫结构在肿瘤浸润转移过程中 常遭破坏或缺失。另外,值得注意的是LN除了结构方面的功能外,作为一种细胞 分子对肿瘤细胞生长发展有重要作用。Oritat等[13]研究了157例晚期胃癌LN的分 布情况后,发现肿瘤外周深层组织LN存在是以肿瘤扩散为特征,而且与血管浸润和肝转移相 关 ,说明LN在刺激肿瘤细胞有重要的作用,而且LN受体水平与肿瘤恶性程度有关。这一作用在喉 癌中尚未见报道。
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4 增殖细胞核抗原(PCNA)与喉癌浸润转移
PCNA又称为周期素(cyclin),是DNA聚合酶的辅助蛋白,其合成水平与细胞增殖率和DNA合成 直接相关。PCNA在 细胞核中的水平从G1开始上升,先于DNA合成开始,在S期达到高峰,在G2开始下降,在M期 和静止期维持最低水平,是反映细胞增殖的有用指标。Lukomsk等[14]对22例声 门上喉癌的石蜡标本行免疫组化研究,发现PCNA与肿瘤分化、淋巴结转移相关,而与肿瘤大小 无关。有学者对63例喉癌随访发现,5年生存组PCNA指数明显低于5年内死亡组(P<0 .05)。有颈淋巴转移组PCNA指数高于无颈淋巴转移组,认为PCNA可作为判断喉癌转 移及预后有意义的标志物。而Kram等[15]对103例喉鳞癌的研究表明,PCNA表达与 肿瘤分级、恶性度显著相关,与淋巴转移无关。由此可见,虽然对PCNA与肿瘤分化、恶性度的 相关性有较一致的看法,但能否将其作为淋巴结转移相关指标尚有异议。
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5 肿 瘤浸润转 移相关基因与喉癌浸润转移
5.1 nm23基因 又称NME基因,是1988年由美国 国立癌症研究所的Steeg等采用消减法从高转移和低转移鼠k-1735黑素瘤细胞系cDNA 文库中获得的,是目前公认的对肿瘤浸润转移有抑制作用的抑癌基因。nm23编码的似核苷二 磷酸激酶(NDPK)的蛋白分子,参与微管的集合与分解,影响细胞的结构和相互关系,其异常表 达有助于肿瘤细胞的扩散。Gunduz等[16]研究发现,nm23在选取的所有喉癌与正 常粘膜上均有表达,喉癌中nm23表达量的降低与肿瘤分化差、复发、转移呈正相关,认为它可 以作为喉癌预后的重要因素。Lee[17]等也有类似的报道,在所有正常粘膜中均有 nm23,几乎在一半(46%)的喉癌中表达量减低,而在淋巴结转移病例中80%很少出现nm23表达 ,并且与生存时间较短相关。尽管大多数学者认为,nm23与喉癌浸润转移呈负相关,但并非所 有的研究结论均相同。Scholnick[18]等用PCR方法检测37例声门上喉癌的TP53、Rb 、3P及NME等位基因缺失率分别为56%、59%、64%、和70%。NME等位基因缺失与淋巴结转移无 相关性。nm23对喉癌浸润转移的影响仍需进一步研究。
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5.2 p53基因 该基因位于人类 染色体17p13,具有调节细胞增殖分化的功能,失活后在肿瘤发生发展上起重要作用 。野生型p53(WTP53)编码产生53Kd核酸蛋白,具有抑制DNA复制转录,能与病毒致癌基因产物 结合抑制肿瘤的恶性表型作用。基因丢失、突变而丧失抑癌作用,成为致癌基因,致细胞无限 生长。Munek-Wikland等[19]观察到,有重度DNA异常、高增殖活性与P53蛋白过 度表达的喉原位癌发展成为浸润的可能性更大,Gasparin等[20]对头颈癌包括喉 癌的研究报道中显示，p53蛋白表达者多为临床晚期,恶性程度较高。然而，Frank等[ 22 ]在对P53在下咽癌中的作用研究后发现,P53表达与肿瘤浸润转移及预后并无明显相关,对 P53的预后意义表示怀疑。
6 结束语
肿瘤的浸润转移机 制 颇为复杂。目前认为,它是肿瘤细胞与细胞外基质相互作用的过程,包括粘附、降解和移动3 个步骤。这个动态过程需要基因调控并受到各种蛋白溶解酶、粘附分子活性 以及基底膜形态的影响。目前已经发现为数不少的浸润转移相关标志物,有助于肿瘤早期诊 断、预测疗效及预后等,但因缺乏统一性、系统性,对实际工作的指导意义不大。要从根本上 阐明浸润转移机制,提高恶性肿瘤的诊治水平,尚需要更深入的研究。
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(收稿日期，2000-02-01), 百拇医药