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编号:10242413
乙型肝炎患者HBV M和HBV DNA的相关性研究
http://www.100md.com 《中华实验和临床病毒学杂志》 2000年第4期
     作者:孟庆华 梁瑞彬 刘德恭 胡荣 向海平

    单位:首都医科大学北京佑安医院感染性疾病教研室 北京 100054

    关键词:肝炎病毒;乙型;肝炎;乙型;DNA;病毒

    中华实验和临床病毒学杂志000413 【摘要】 目的 探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒(HBV)血清学标志(HBV M)与HBV DNA检测结果的相关性与临床意义。方法 对414例乙型肝炎的HBV M和HBV DNA检测结果进行比较。HBV M用ELISA定量分析法检测,HBV DNA用斑点杂交法检测。结果 急性、慢性乙型肝炎患者中HBV DNA的阳性率与乙型肝炎肝硬化患者的HBV DNA阳性率比较,差异有显著性;HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性和HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性组的HBV DNA阳性率比较,差异无显著性;HBsAg和/或HBeAg的滴度与HBV DNA阳性率呈正相关关系。结论 HBV DNA是评价HBV活动最理想的标志;抗-HBe的出现不能作为HBV复制停止的指标;HBsAg的滴度和HBeAg的滴度变化可作为临床评价病毒复制程度和抗病毒疗效的参考指标。
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    Study of relativity between HBV M and HBV DNA in the cases with hepatitis B

    MENG Qinghua,LIANG Ruibin,LIU Degong

    (Beijing Yuan Hospital, Beijing 100054, China)

    【Abstract】 Objective Serum samples of 414 cases with hepatitis B were detected for hepatitis B markers (HBVM) and HBV DNA,in order to investigation the relationship between HBV M and HBV DNA,and its clinical significant. Methods HBV M and HBV DNA were detected by ELISA and blot hybridization methods respectively.Results HBV DNA positive rates in the groups of acute and chronic hepatitis B were higher than that in the group of liver cirrhosis (P<0.01); HBV DNA positive rates had no apparent difference between the HBsAg,HBeAg, anti-HBc positive group and the HBsAg, anti-HBe,anti-HBc positive group. Direct relativity was shown between the titer of HBsAg and/or HBeAg and the positive rate of HBV DNA. Conclusion HBV DNA can be treated as a sign of HBV activity; the appearance of anti-HBe can not be taken as indicator of ceasing of HBV replication; the changes in HBsAg and HBeAg titers may be used as clinical evaluation on HBV replication and index for anti-viral therapeutic effect.
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    【Key words】 Hepatitis B virus; Hepatitis B; DNA,viral

    目前临床上最常用的检测HBV感染的指标为血清HBV抗原抗体(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)五项标志(HBV M)和HBV DNA。HBV M的变化是HBV在感染的不同时期与机体免疫系统反应的结果,而核酸杂交法HBV DNA的检测则是直接观察血清中HBV是否存在的指标,具有较高的特异性,假阳性率较低。为了进一步探讨这两种检测结果的关系以及它们在临床病情判断中的意义,我们对414例乙型肝炎患者的HBV M和HBV DNA以及肝功检测结果进行了比较分析。

    1 材料和方法

    1.1 研究对象 414例病例均系北京佑安医院1999年1月至1999年6月的住院病例。其中男性277例,女性137例,平均年龄为36.7±13.4岁。急性乙型肝炎72例,慢性乙型肝炎269例,乙型肝炎肝硬化73例。诊断符合第5次全国传染病和寄生虫病学术会议制定的诊断标准。
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    1.2 检测方法及判定标准 HBV M采用雅培公司提供的全自动免疫分析仪定量检测。其中HBsAg和HBeAg均以滴度大于2(S/N)为阳性。HBV DNA采用斑点杂交法检测,试剂为上海医科大学源力试剂公司提供的地高辛标记HBV DNA检测试剂。肝功能检测采用COBAS血自动生化分析仪,ALT>40 U/L,AST>37 U/L,TBil>17.1 μmol/L为异常。

    2 结果

    2.1 414例乙型肝炎的HBV M和HBV DNA的比较 本组资料中急性乙型肝炎72例,其中HBV DNA阳性者52例,阳性率为72.2%;慢性乙型肝炎269例,HBV DNA阳性196例,阳性率为72.9%;乙型肝炎肝硬化73例,HBV DNA阳性41例,阳性率为56.2%。统计学处理结果显示,急性、慢性乙型肝炎患者中的HBV DNA阳性率分别与乙型肝炎肝硬化患者的HBV DNA阳性率有统计学上差异(P<0.05),见表1。
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    2.2 乙型肝炎HBeAg阳性与HBV DNA阳性的关系 在急性、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者中HBsAg、HBeAg和抗-HBc阳性者,HBV DNA的阳性率为65.7%(94/143),HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者,HBV DNA的阳性率为61.6%(90/146),二者差异无显著性。

    2.3 乙型肝炎HBsAg、HBeAg滴度与HBV DNA阳性率之间的关系 在HBsAg阳性的307例病例中HBV DNA阳性者为197例(64.2%),在HBeAg阳性的143例病例中HBV DNA阳性的例数为94例(65.7%),HBsAg,HBeAg滴度与HBV DNA阳性间的关系见表2。HBsAg和/或HBeAg的滴度与HBV DNA阳性率之间存在正相关关系,HBsAg和HBeAg的高滴度都能反映出乙型肝炎病毒复制的活跃程度。

    2.4 乙型肝炎重叠感染与HBV DNA阳性间的关系 在414份被调查的病例中,共有52例混合或重叠感染甲型、丙型、丁型肝炎病毒,其中以感染甲型者多见,占混合或重叠感染的69.0%。混合或重叠感染 的急性、慢性肝炎和肝硬化患者的HBV DNA检测结果见表3。急性乙型肝炎混合感染甲型肝炎病毒9例,HBV DNA阳性7例;混合感染丁肝炎病毒1例,HBV DNA呈阳性。慢性乙型肝炎重叠感染甲、丙、丁型肝炎病毒的例数和HBV DNA的阳性例数分别为甲型肝炎27例,HBV DNA阳性21例;丙型肝炎11例,HBV DNA阳性10例;丁型肝炎3例,HBV DNA阳性2例;肝硬化中仅发现1例与丙型肝炎病毒重叠感染,该患者是一名反复多次输血的患者,其HBV DNA检测阳性。可见重叠感染其他类型肝炎病毒病例的HBV DNA阳性率(80.8%)明显高于单纯感染乙型肝炎病毒者(68.2%),二者相比较,差异有显著性(P<0.01)。
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    3 讨论

    本资料显示,在HBV感染后的不同时期,HBV M的检测可出现如表1所示的不同形式组合,其中也包括HBV M全阴的可能,但是HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性和HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性的组合率最高,占所有病例的69.8%。而这两种组合中HBV DNA的阳性率之间差异并无显著性,说明HBsAg、抗-HBe和抗-HBc阳性患者的病毒复制率并不比前者明显降低,HBsAg、抗-HBe、和抗-HBc阳性患者仍有较强的传染性。急性乙型肝炎患者HBeAg转阴后HBV DNA不一定立刻消失〔1〕,但动态观察HBV DNA的滴度会逐渐下降,病情预后良好;慢性乙型肝炎和肝硬化者HBeAg阴转,抗-HBe阳性而HBV DNA持续阳性和滴度不下降者,可能存在HBV前C基因区的变异〔2〕。抗-HBe的出现是否意味着HBV复制受到一定程度的抑制,还需对血清中HBV DNA进行定量分析来明确〔3〕
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    表1 414例乙型肝炎患者HBV M和HBV DNA的比较

    Fig.1 Comparison of HBV M and HBV DNA in 414 hepatitis B patients n(%) HBV M阳性HBV M positive

    急性乙型肝炎HBV DNA

    Acute hepatitis B HBV DNA

    慢性乙型肝炎HBV DNA

    Chronic hepatitis B HBV DNA

    肝炎后肝硬化HBV DNA

    Liver cirrhosis HBV DNA
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    合计

    Total

    +

    -

    +

    -

    +

    -

    1/3/5

    10(62.50)

    6(37.50)

    66(68.75)

    30(31.25)
, 百拇医药
    18(58.06)

    13(41.94)

    143

    1/4/5

    14(56.00)

    11(44.00)

    57(64.77)

    31(35.23)

    19(55.88)

    14(44.12)

    146

    1/5
, http://www.100md.com
    2(100)

    0

    10(83.33)

    2(16.27)

    1(25.00)

    3(75.00)

    18

    4/5

    4(80.00)

    1(20.00)

    6(46.15)

    7(53.85)
, 百拇医药
    1(50.00)

    1(50.00)

    20

    5

    3(60.00)

    2(40.00)

    5(62.50)

    3(37.50)

    0

    1

    14

    2/4/5

    5
, http://www.100md.com
    0

    37

    0

    1

    0

    43

    HBV M全阴性

    HBV M negative

    14

    0

    15

    0

    1
, 百拇医药
    0

    30

    合计

    Total

    52(72.22)*

    20(27.78)

    196(72.86)**

    73(27.14)

    41(56.16)***

    32(43.84)

    414

, http://www.100md.com     1:HBsAg. 2:Anti-HBs. 3:HBeAg. 4.Anti-HBe. 5:Anti-HBc

    *∶**,P>0.05. *∶***,P<0.05. **∶***,P<0.05表2 HBsAg和HBeAg滴度与HBV DNA阳性的关系

    Fig.2 The relationship between the HBV DNA positivity

    and the titers of HBsAg and HBeAg 滴度(S/N)

    Titer(S/N)

    No.

    HBsAg阳性组

    Group of HBsAg
, 百拇医药
    positive

    HBeAg阳性组

    Group of HBeAg

    positive

    DNA阳性例数/

    阳性率(%)

    Case of DNA positive/

    positive rate(%)

    DNA阳性例数/

    阳性率(%)

    Case of DNA positive/
, http://www.100md.com
    positive rate(%)

    <50

    43

    27/62.8

    16/37.2

    50~100

    65

    61/93.8

    4/6.1

    100~150

    52

    49/94.2

, http://www.100md.com     3/5.8

    150~200

    35

    31/88.6

    4/11.4

    200~250

    30

    10/33.3

    20/66.7

    >250

    66

    19/28.8

    47/71.2
, http://www.100md.com
    合计

    Total

    291

    197/67.7

    94/32.3

    注:HBsAg滴度与HBV DNA阳性率的等级相关系数r=0.943,P≤0.01。HBeAg滴度与HBV DNA阳性率的等级相关系数r=1.00,P≤0.005

    Notes:Grade relatived coefficient between titer of HBsAg and positive rate of HBV DNA r=0.943,P≤0.01.Grade relatived coefficient between titer of HBeAg and positive rate of HBV DNA r=1.00,P≤0.005
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    急性、慢性乙型肝炎患者的HBV DNA阳性率均明显高于肝硬化患者,但急性与慢性肝炎患者的HBV DNA阳性率之间差异无显著性,这说明从早期病毒复制活跃进展为慢性肝炎后病毒复制仍很活跃,至肝硬化期病毒复制有所减弱。但即使是肝硬化期HBV DNA 的检出率仍很高(56.2%)。这可能是病情持续得不到顿挫的原因。因此有作者认为在肝炎后肝硬化进行抗病毒治疗仍有积极意义〔4〕,可以顿挫病情延缓病变的进展,降低肝癌的发生率。

    长期以来普遍认为HBeAg的滴度与HBV复制的活跃程度有密切关系。本资料显示HBsAg和HBeAg的滴度均与HBV DNA阳性率之间存在正相关关系。说明HBsAg的滴度和HBeAg的滴度同样可以作为临床上评价病毒复制程度和抗病毒疗效观察的指标。

    73例HBV DNA阳性,而HBV M均阴性者,说明不能单纯以HBV M结果来判断HBV是否仍活动,而HBV DNA是最可靠的反映血清中病毒存在的指标。强调对HBV M均阴性,肝功能异常的患者,一定要检测HBV DNA。
, 百拇医药
    表3 52例混合或重叠感染其他类型病毒的乙型肝炎患者HBV DNA的检测情况

    Fig.3 Test of HBV DNA positivity in 52 patients infected with other hepatitis virus 分组

    Group

    例数

    No.

    HAV

    HCV

    HDV

    检测数

    No.detected
, 百拇医药
    HBV DNA(+)

    (%)

    检测数

    No.detected

    HBV DNA(+)

    (%)

    检测数

    No.detected

    HBV DNA(+)

    (%)

    急性肝炎

    Acute hepatitis
, 百拇医药
    10

    9

    7

    (77.8)

    0

    1

    1

    (100.0)

    慢性肝炎

    Chronic hepatitis

    41

    27

    21
, http://www.100md.com
    (77.8)

    11

    10

    ( 90.9)

    3

    2

    (66.7)

    肝硬化

    Liver cirrhosis

    1

    0

    1

    1
, 百拇医药
    (100.00)

    0

    合 计

    Total

    52

    36

    28

    (77.8)

    12

    11

    ( 91.7)

    4

    3
, 百拇医药
    (75.0)

    参 考 文 献

    1,Tassopoulos NC,Kuhns MC,Koutelou MG,et al.Quantitative detection of hepatitis B virus DNA in sera from patients with acute hepatitis B.Dig Dis Sci,1993,38:2156.

    2,Lindh M, Savage K, Rees J, et al.HBeAg immunostaining of liver tissue in various stages of chronic hepatitis B.Liver, 1999,19:294-298.

    3,向海平,郭雁宾,孟庆华,等.聚合酶链反应定量检测乙型肝炎病毒DNA及其临床意义分析.中华实验和临床病毒学杂志,1999,13:89-90.

    4,International interferon-α hepatocellular carcinoma study group. Effect of interferon-α on progression of cirrhosis to hepatocellullar carcinoma: a retrospective cohort study. Lancet,1998,351:1535-1539.

    (收稿日期:2000-08-25)

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