复肝宝保肝降酶及抗肝纤维化的实验研究
作者：赵德语 张维东
单位：赵德语(山东省枣庄市中医院，山东 枣庄 277101)；张维东(山东省医学科学院基础医学研究所，山东 济南 250014)
关键词：复肝宝；肝损伤；肝纤维化；中医药
中国中西医结合急救杂志000409摘要：目的：观察中药复肝宝抗实验性肝损伤和肝纤维化的疗效。方法：保肝降酶实验用50只小鼠，抗肝纤维化实验用70只大鼠，各随机分为5组。正常对照组及损伤组不给任何治疗性药物，大黄虫丸组给大黄虫丸1 000 mg/kg，复肝宝大、小剂量组分别给复肝宝2 250和375 mg/kg，均每日1次。保肝降酶实验小鼠口服给药4日后，腹腔注射2.5 %四氯化碳(CCl4)油溶液0.01 ml/g(除正常对照组)，20小时后处死，测定血清谷丙转氨酶(GPT)，并观察肝病理组织学改变。抗肝纤维化实验大鼠(除正常对照组)皮下注射40%CCl41.25 ml/kg，每周2次，6周后给相应药物5周，然后处死，测定Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)及肝组织中胶原蛋白含量，并观察肝病理组织学改变。结果：复肝宝大、小剂量组与损伤组比较，GPT及肝胶原蛋白含量均差异显著(P<0.05或P<0.01)，PⅢP、 肝细胞损伤程度及纤维化分级亦有显著性差异(P均<0.05)。结论：复肝宝对CCl4诱发小鼠急性肝损伤有保护作用；对CCl4诱发大鼠慢性肝纤维化有治疗作用，可使肝纤维化明显减轻。
, 百拇医药
中图分类号：R361.2;R965 文献标识码：A 文章编号：10089691(2000)04021704
The experiment study of antiliver fibrosis and protection of liver and to lower enzyme treating with Fuganbao(复肝宝)
ZHAO Deyu,ZHANG Weidong
Zaozhuang Traditional Chinese Medical Hospital,Zaozhuang Shandong 277101
Abstract:Objective:To observe the result of the Fuganbao(复肝宝) in treatment of experimental liver trauma and liver fibrosis.Methods:Fifty mice were served in the experiment of protection of liver and to lower enzyme,and 70 rats in the experiment of antiliver fibrosis.The mice or rats were randomly divided into five groups in each experiment.None medicine was given to the empty contrast team and the model team,The medical contrast team was given to Dahuang Zhechong pill (大黄虫丸,1 000 mg/kg),and the therapy team with little(375 mg/kg) and big dose(2 250 mg/kg) was given to the Fuganbao one time per day.The mice used in the experiment of protection liver and to lower enzyme was given to the medicine by oral for four days,and then 2.5% CCl4(the dose was 0.01 ml/g) injected into their abdomen(but no use in the empty contrast team).After 20 hours,the mice were killed.The serum enzyme of glutamate pyruvate transminase(GPT) was determined and the pathological changes of the liver were observed.The rats used in the experiment of antiliver fibrosis,40% CCl4 (the dose of 1.25 ml/kg) was injected into their subcutaneous two times per week,but except of the empty contrast team.After six weeks,the correspondence medicine was given to them for five weeks.Then the rats were killed,and the contents of the procollagen Ⅲ peptide(PⅢP) and collagenous protein in the heptic tissue were determined.The pathological changes were also observed.Results:Contrast the big and little dose Fuganbao team with the model team,the contents of GPT and hepatic collagenous protein were significantly different(P<0.05 or P<0.01),PⅢP and degree of the liver trauma and grade of liver fibrosis were significantly different(all P<0.05).Conclusions:Fuganbao can protect the liver when liver trauma is happened with the toxic reaction of CCl4 in mice.Fuganbao has the theraputic capability to the chronic liver fibrosis caused by the CCl4 in rats,it can run lower the liver fibrosis obviously.
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Key words:Fuganbao;liver trauma;liver fibrosis;traditional Chinese medicine
CLC number:R361.2;R965 Document code:A Artical ID:10089691(2000)04021704
慢性乙型肝炎是严重危害人们健康的多发病，常可导致肝功能损害，甚至发展为肝硬化。防治肝纤维化是防止发生肝炎后肝硬化的关键问题。我们根据有关资料和临床经验，筛选部分中药制成复肝宝，自1995年开始进行保肝降酶及抗肝纤维化的临床及实验研究，取得了较好的效果。报告如下。
1 保肝降酶实验
1.1 材料与方法：
1.1.1 材料：昆明种小鼠，体重18～22 g，每批动物实验中体重差别不超过3 g，雌雄各半，由山东省卫生防疫站动物实验室提供。复肝宝(自拟处方)，主要成分为黄芪、丹参、赤芍、桃仁、白花蛇舌草、青皮、鳖甲等。四氯化碳(CCl4)由天津市化学试剂一厂生产。大黄虫丸为上海市中药一厂产品。谷丙转氨酶(GPT)试剂盒为北京化工厂产品。721分光光度计。
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1.1.2 方法：将动物随机分为5组：正常对照组，CCl4损伤组，大黄虫丸组(1 000 mg/kg)，复肝宝大剂量组(2 250 mg/kg)，复肝宝小剂量组(375 mg/kg)。每组10只。除正常对照组及损伤组外，其余各组动物每日口服相应药物1次，共给药4次。最后1次给药后1小时，给小鼠(正常对照组除外)腹腔注射2.5%CCl4油溶液0.01 ml/g，20小时后摘眼取血，分离血清，赖氏法测定血清GPT活性；同时取肝脏组织，10%甲醛固定，做病理组织学观察。
1.2 实验结果：
1.2.1 血清GPT测定结果见表1。由表1可见，无论复肝宝剂量如何，其对CCl4损伤鼠肝脏均有保护作用，与传统保肝中药大黄虫丸有相似作用。
表1 复肝宝对肝损伤小鼠血清GPT的影响(
±s) 组别
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动物数(只)
GPT(nmol.s-1.L-1)
正常对照组
10
779.49±276.22
损伤组
10
4 845.64±275.72△△
大黄虫丸组
10
4 443.72± 78.68△△*
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复肝宝小剂量组
10
4 303.69± 87.85△△*
复肝宝大剂量组
10
4 252.52± 80.35△△*
注：与正常对照组比较：△△P<0.01；与损伤组比较：P<0.05
1.2.2 病理组织学检查：在光镜下可见，损伤组动物肝细胞明显浊肿，可见多处点灶状嗜酸性坏死或溶解性坏死。复肝宝大、小剂量给药组肝细胞可见浊肿、嗜酸性变及嗜酸性小体，也可见点灶状坏死，但坏死范围及程度明显轻于损伤组。大黄虫丸组的改变与复肝宝大、小剂量组无明显差别。为了便于观察，将肝组织损伤程度分4级。0级(-)：肝组织结构正常，无明显变性、坏死及炎性细胞浸润；Ⅰ级(+)：肝小叶结构尚正常，肝细胞明显浊肿，少数肝细胞气球样变，并可见部分肝细胞嗜酸性变，少数区域可见嗜酸性小体；Ⅱ级(++)：较多的肝细胞嗜酸性变，肝组织中常见嗜酸性小体，并可见部分肝细胞呈点灶状坏死；Ⅲ级 (+++)：肝小叶结构不清，多数肝细胞嗜酸性变，并可见灶状及片状肝细胞坏死，坏死的范围及程度明显加重。小鼠急性肝损伤情况见表2，组织学改变见图1～4。使用不同剂量复肝宝及大黄虫丸组均能使肝组织损伤明显减轻，以复肝宝大剂量组减轻程度最为明显。表2 复肝宝对肝细胞损伤情况的影响 组别
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动物数
(只)
肝组织损伤程度
平均损伤
程度分级
(-)
(+)
(++)
(+++)
正常对照组
10
10
损伤组
, 百拇医药
10
3
7
2.7
大黄虫丸组
10
5
4
1
1.6
复肝宝小剂量组
10
4
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5
1
1.7
复肝宝大剂量组
10
1
5
4
1.3
注：与损伤组比较：P<0.05
图1 小鼠正常肝组织(HE×400)
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图2 损伤组肝组织嗜酸性坏死(HE×400)
图3 复肝宝大剂量组肝细胞灶状坏死(HE×400)
图4 复肝宝小剂量组肝细胞灶状坏死(HE×400)
2 复肝宝对大鼠CCl4诱发慢性肝纤维化的影响
2.1 材料与方法：
2.1.1 材料：Wistar大鼠，雌雄各半，体重110～160 g，由山东医科大学实验动物中心提供。复肝宝、大黄虫丸、CCl4同前。
, 百拇医药
2.1.2 方法：将Wistar大鼠，随机分为5组，即正常对照组、损伤组、复肝宝大剂量组、复肝宝小剂量组、大黄虫丸组。除正常对照组外，各组动物均皮下注射40% CCl4 1.25 ml/kg，每周2次。给CCl4 6周后，大黄虫丸组和复肝宝大、小剂量组分别以1 000 mg/kg、2 250 mg/kg、375 mg/kg剂量灌胃，每日1次。治疗5周后，所有动物用0.3 %戊巴比妥钠10 ml/kg注射麻醉，摘眼球取血，测定血清中Ⅲ型前胶原肽(PⅢP，放射免疫法)；取出肝脏，一部分用10%甲醛固定做病理检查，另一部分速冻冰柜内做胶原蛋白含量测定(氯氨T法)。
2.2 实验结果：
2.2.1 复肝宝对CCl4诱发慢性肝损伤病理组织学改变的影响见表3。按下列标准进行肝纤维化分级：0级(-)：无纤维化；Ⅰ级(+)：门管区中央静脉壁增厚；Ⅱ级(++)：门管区纤维化，向肝小叶呈芒状放射，部分增生的纤维分割肝小叶；Ⅲ级(+++)：形成假小叶。组织学改变见图5～8。由表3可见，复肝宝可使大鼠CCl4诱发的肝损伤减轻或修复，使纤维化程度减轻，并随剂量加大而作用加强。
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表3 复肝宝对肝损伤大鼠肝纤维化程度的影响 组别
动物数
(只)
肝组织损伤程度
平均损伤
程度分级
纤维化分级
平均纤维
化分级
(-)
(+)
(++)
(+++)
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(-)
(+)
(++)
(+++)
正常对照组
10
10
10
损伤组
10
8
2
1.2
, 百拇医药 4
6
2.6
大黄虫丸组
10
10
1.0
3
5
2
1.9
复肝宝小剂量组
10
, 百拇医药
10
1.0
1
3
4
2
1.7
复肝宝大剂量组
10
10
1.0
5
4
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1
1.6
注：与损伤组比较：P<0.05
图5 大鼠正常肝组织(HE×200)
图6 损伤组肝纤维化(HE×200)
图7 复肝宝大剂量组肝纤维化(HE×200)
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图8 复肝宝小剂量组肝纤维化(HE×400)
2.2.2 肝组织中胶原蛋白测定结果见表4。肝组织中的胶原蛋白含量，各治疗组与损伤组比较均显著下降，且两个复肝宝治疗组下降的程度与大黄虫丸组基本相似，无显著差别。
表4 复肝宝对肝损伤大鼠肝组织胶原蛋白含量的影响(±s)mg/g 组别
动物数(只)
肝胶原蛋白含量
正常对照组
10
19.50±2.62
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损伤组
10
42.80±7.05△△
大黄虫丸组
10
30.80±8.41△△*
复肝宝小剂量组
10
26.60±6.53△**
复肝宝大剂量组
10
29.30±7.43△**
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注：与正常对照组比较:△P<0.05,△△P<0.01；与损伤组比较:P<0.05,P<0.01
2.2.3 血清中PⅢP含量测定结果见表5。由表5可见，复肝宝大、小剂量组及大黄虫丸组均可使血清中PⅢP的含量降低,与损伤组比较均有显著性差异,与正常对照组比较均无显著性差异。表5 复肝宝对肝损伤大鼠血清PⅢP的影响(±s)kU/L 组别
动物数(只)
PⅢP
正常对照组
8
0.442±0.181
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损伤组
8
1.313±0.399△△
大黄虫丸组
8
0.793±0.412*
复肝宝小剂量组
8
0.683±0.223*
复肝宝大剂量组
8
0.709±0.266*
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注：与正常对照组比较：△△P<0.01；与损伤组比较:P<0.05
3 讨 论
中医学认为，慢性乙型肝炎肝脏纤维化的病机复杂，既有正气不足、无力抗邪，又有湿热邪毒郁滞体内,综湿热毒郁虚于一体,迁延日久则会因气滞血瘀、瘀血阻络而结为疒 徵积，发生肝脏纤维化，最终导致肝硬化。肝脏病理组织学改变、肝组织中胶原蛋白含量及血清PⅢP含量等是检测肝纤维化的重要指标〔1，2〕。防治肝纤维化是防止肝硬化发生的重要环节。复肝宝针对上述病机，主要由益气活血、凉血解毒、软坚散结等药物组成。方中黄芪益气健脾，取“肝病实脾”之意，现代药理研究证实，此药有双向调节机体免疫功能的作用，可增加血清白蛋白，促进肝细胞修复，减轻因免疫复合物在肝内沉积而引起的变态反应性炎症〔3〕；丹参活血化瘀、消疒 徵除积，文献报道，具有促进肝细胞再生、抑制肝纤维组织增生的作用〔4〕；桃仁、丹皮、 赤芍等均能活血化瘀、改善肝脏血液循环，促进肝内纤维组织降解〔4〕。 白花蛇舌草、青皮清热解毒，疏肝利胆；鳖甲软坚散结、滋阴养肝〔5，6〕。诸药合用，共奏扶正祛邪之效。通过对实验动物各项观察指标结果的分析，复肝宝对小鼠四氯化碳诱发的急性肝损伤有保护作用，对大鼠四氯化碳诱发的慢性肝纤维化有明显治疗作用，可使肝纤维化明显减轻，临床资料亦显示同样结果，从而充分证实复肝宝是防治肝纤维化的有效药物。
, 百拇医药
基金项目：山东省中医药管理局“八五”攻关科研基金资助项目(85920104)
获奖项目：山东省枣庄市科技进步二等奖(19990107)
作者简介：赵德语(1963)，男(汉族)，山东枣庄人，主治医师。曾获山东省枣庄市科技进步奖3项，发表论文10余篇，参编专著6部。
参考文献：
〔1〕高峰，孔宪涛.肝纤维化的血清学诊断.中华内科杂志，1994,32(1):5859.
〔2〕李伟道，段晓娟，叶红军，等.血清Ⅲ型胶原测定诊断肝纤维化的临床评价——119例分析.中华消化杂志，1995,15(4):237.
〔3〕方步武，朱起贵，竺稽能.益气活血合剂抗牛血清白蛋白免疫性肝纤维化作用的实验研究.中国中西医结合杂志，1992,12(12):739.
〔4〕戚心广.丹参、赤芍对实验性肝损伤肝细胞保护作用的机理研究.中国中西医结合杂志，1991,(11):102.
〔5〕林柳光.赤芍甘草煎剂抗肝癌肝动脉化疗栓塞术后疼痛的观察.中国中西医结合急救杂志，1998，5(10)：442443.
〔6〕喻平瀛.乙型肝炎阴虚黄疸治验4则.中国中西医结合急救杂志，1998，5(10)：473.
(收稿日期：2000-01-05)
(修回日期：2000-06-26), 百拇医药
单位：赵德语(山东省枣庄市中医院，山东 枣庄 277101)；张维东(山东省医学科学院基础医学研究所，山东 济南 250014)
关键词：复肝宝；肝损伤；肝纤维化；中医药
中国中西医结合急救杂志000409摘要：目的：观察中药复肝宝抗实验性肝损伤和肝纤维化的疗效。方法：保肝降酶实验用50只小鼠，抗肝纤维化实验用70只大鼠，各随机分为5组。正常对照组及损伤组不给任何治疗性药物，大黄虫丸组给大黄虫丸1 000 mg/kg，复肝宝大、小剂量组分别给复肝宝2 250和375 mg/kg，均每日1次。保肝降酶实验小鼠口服给药4日后，腹腔注射2.5 %四氯化碳(CCl4)油溶液0.01 ml/g(除正常对照组)，20小时后处死，测定血清谷丙转氨酶(GPT)，并观察肝病理组织学改变。抗肝纤维化实验大鼠(除正常对照组)皮下注射40%CCl41.25 ml/kg，每周2次，6周后给相应药物5周，然后处死，测定Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)及肝组织中胶原蛋白含量，并观察肝病理组织学改变。结果：复肝宝大、小剂量组与损伤组比较，GPT及肝胶原蛋白含量均差异显著(P<0.05或P<0.01)，PⅢP、 肝细胞损伤程度及纤维化分级亦有显著性差异(P均<0.05)。结论：复肝宝对CCl4诱发小鼠急性肝损伤有保护作用；对CCl4诱发大鼠慢性肝纤维化有治疗作用，可使肝纤维化明显减轻。
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中图分类号：R361.2;R965 文献标识码：A 文章编号：10089691(2000)04021704
The experiment study of antiliver fibrosis and protection of liver and to lower enzyme treating with Fuganbao(复肝宝)
ZHAO Deyu,ZHANG Weidong
Zaozhuang Traditional Chinese Medical Hospital,Zaozhuang Shandong 277101
Abstract:Objective:To observe the result of the Fuganbao(复肝宝) in treatment of experimental liver trauma and liver fibrosis.Methods:Fifty mice were served in the experiment of protection of liver and to lower enzyme,and 70 rats in the experiment of antiliver fibrosis.The mice or rats were randomly divided into five groups in each experiment.None medicine was given to the empty contrast team and the model team,The medical contrast team was given to Dahuang Zhechong pill (大黄虫丸,1 000 mg/kg),and the therapy team with little(375 mg/kg) and big dose(2 250 mg/kg) was given to the Fuganbao one time per day.The mice used in the experiment of protection liver and to lower enzyme was given to the medicine by oral for four days,and then 2.5% CCl4(the dose was 0.01 ml/g) injected into their abdomen(but no use in the empty contrast team).After 20 hours,the mice were killed.The serum enzyme of glutamate pyruvate transminase(GPT) was determined and the pathological changes of the liver were observed.The rats used in the experiment of antiliver fibrosis,40% CCl4 (the dose of 1.25 ml/kg) was injected into their subcutaneous two times per week,but except of the empty contrast team.After six weeks,the correspondence medicine was given to them for five weeks.Then the rats were killed,and the contents of the procollagen Ⅲ peptide(PⅢP) and collagenous protein in the heptic tissue were determined.The pathological changes were also observed.Results:Contrast the big and little dose Fuganbao team with the model team,the contents of GPT and hepatic collagenous protein were significantly different(P<0.05 or P<0.01),PⅢP and degree of the liver trauma and grade of liver fibrosis were significantly different(all P<0.05).Conclusions:Fuganbao can protect the liver when liver trauma is happened with the toxic reaction of CCl4 in mice.Fuganbao has the theraputic capability to the chronic liver fibrosis caused by the CCl4 in rats,it can run lower the liver fibrosis obviously.
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Key words:Fuganbao;liver trauma;liver fibrosis;traditional Chinese medicine
CLC number:R361.2;R965 Document code:A Artical ID:10089691(2000)04021704
慢性乙型肝炎是严重危害人们健康的多发病，常可导致肝功能损害，甚至发展为肝硬化。防治肝纤维化是防止发生肝炎后肝硬化的关键问题。我们根据有关资料和临床经验，筛选部分中药制成复肝宝，自1995年开始进行保肝降酶及抗肝纤维化的临床及实验研究，取得了较好的效果。报告如下。
1 保肝降酶实验
1.1 材料与方法：
1.1.1 材料：昆明种小鼠，体重18～22 g，每批动物实验中体重差别不超过3 g，雌雄各半，由山东省卫生防疫站动物实验室提供。复肝宝(自拟处方)，主要成分为黄芪、丹参、赤芍、桃仁、白花蛇舌草、青皮、鳖甲等。四氯化碳(CCl4)由天津市化学试剂一厂生产。大黄虫丸为上海市中药一厂产品。谷丙转氨酶(GPT)试剂盒为北京化工厂产品。721分光光度计。
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1.1.2 方法：将动物随机分为5组：正常对照组，CCl4损伤组，大黄虫丸组(1 000 mg/kg)，复肝宝大剂量组(2 250 mg/kg)，复肝宝小剂量组(375 mg/kg)。每组10只。除正常对照组及损伤组外，其余各组动物每日口服相应药物1次，共给药4次。最后1次给药后1小时，给小鼠(正常对照组除外)腹腔注射2.5%CCl4油溶液0.01 ml/g，20小时后摘眼取血，分离血清，赖氏法测定血清GPT活性；同时取肝脏组织，10%甲醛固定，做病理组织学观察。
1.2 实验结果：
1.2.1 血清GPT测定结果见表1。由表1可见，无论复肝宝剂量如何，其对CCl4损伤鼠肝脏均有保护作用，与传统保肝中药大黄虫丸有相似作用。
表1 复肝宝对肝损伤小鼠血清GPT的影响(
±s) 组别, 百拇医药
动物数(只)
GPT(nmol.s-1.L-1)
正常对照组
10
779.49±276.22
损伤组
10
4 845.64±275.72△△
大黄虫丸组
10
4 443.72± 78.68△△*
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复肝宝小剂量组
10
4 303.69± 87.85△△*
复肝宝大剂量组
10
4 252.52± 80.35△△*
注：与正常对照组比较：△△P<0.01；与损伤组比较：P<0.05
1.2.2 病理组织学检查：在光镜下可见，损伤组动物肝细胞明显浊肿，可见多处点灶状嗜酸性坏死或溶解性坏死。复肝宝大、小剂量给药组肝细胞可见浊肿、嗜酸性变及嗜酸性小体，也可见点灶状坏死，但坏死范围及程度明显轻于损伤组。大黄虫丸组的改变与复肝宝大、小剂量组无明显差别。为了便于观察，将肝组织损伤程度分4级。0级(-)：肝组织结构正常，无明显变性、坏死及炎性细胞浸润；Ⅰ级(+)：肝小叶结构尚正常，肝细胞明显浊肿，少数肝细胞气球样变，并可见部分肝细胞嗜酸性变，少数区域可见嗜酸性小体；Ⅱ级(++)：较多的肝细胞嗜酸性变，肝组织中常见嗜酸性小体，并可见部分肝细胞呈点灶状坏死；Ⅲ级 (+++)：肝小叶结构不清，多数肝细胞嗜酸性变，并可见灶状及片状肝细胞坏死，坏死的范围及程度明显加重。小鼠急性肝损伤情况见表2，组织学改变见图1～4。使用不同剂量复肝宝及大黄虫丸组均能使肝组织损伤明显减轻，以复肝宝大剂量组减轻程度最为明显。表2 复肝宝对肝细胞损伤情况的影响 组别
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动物数
(只)
肝组织损伤程度
平均损伤
程度分级
(-)
(+)
(++)
(+++)
正常对照组
10
10
损伤组
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10
3
7
2.7
大黄虫丸组
10
5
4
1
1.6
复肝宝小剂量组
10
4
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5
1
1.7
复肝宝大剂量组
10
1
5
4
1.3
注：与损伤组比较：P<0.05
图1 小鼠正常肝组织(HE×400)
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图2 损伤组肝组织嗜酸性坏死(HE×400)
图3 复肝宝大剂量组肝细胞灶状坏死(HE×400)
图4 复肝宝小剂量组肝细胞灶状坏死(HE×400)
2 复肝宝对大鼠CCl4诱发慢性肝纤维化的影响
2.1 材料与方法：
2.1.1 材料：Wistar大鼠，雌雄各半，体重110～160 g，由山东医科大学实验动物中心提供。复肝宝、大黄虫丸、CCl4同前。
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2.1.2 方法：将Wistar大鼠，随机分为5组，即正常对照组、损伤组、复肝宝大剂量组、复肝宝小剂量组、大黄虫丸组。除正常对照组外，各组动物均皮下注射40% CCl4 1.25 ml/kg，每周2次。给CCl4 6周后，大黄虫丸组和复肝宝大、小剂量组分别以1 000 mg/kg、2 250 mg/kg、375 mg/kg剂量灌胃，每日1次。治疗5周后，所有动物用0.3 %戊巴比妥钠10 ml/kg注射麻醉，摘眼球取血，测定血清中Ⅲ型前胶原肽(PⅢP，放射免疫法)；取出肝脏，一部分用10%甲醛固定做病理检查，另一部分速冻冰柜内做胶原蛋白含量测定(氯氨T法)。
2.2 实验结果：
2.2.1 复肝宝对CCl4诱发慢性肝损伤病理组织学改变的影响见表3。按下列标准进行肝纤维化分级：0级(-)：无纤维化；Ⅰ级(+)：门管区中央静脉壁增厚；Ⅱ级(++)：门管区纤维化，向肝小叶呈芒状放射，部分增生的纤维分割肝小叶；Ⅲ级(+++)：形成假小叶。组织学改变见图5～8。由表3可见，复肝宝可使大鼠CCl4诱发的肝损伤减轻或修复，使纤维化程度减轻，并随剂量加大而作用加强。
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表3 复肝宝对肝损伤大鼠肝纤维化程度的影响 组别
动物数
(只)
肝组织损伤程度
平均损伤
程度分级
纤维化分级
平均纤维
化分级
(-)
(+)
(++)
(+++)
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(-)
(+)
(++)
(+++)
正常对照组
10
10
10
损伤组
10
8
2
1.2
, 百拇医药 4
6
2.6
大黄虫丸组
10
10
1.0
3
5
2
1.9
复肝宝小剂量组
10
, 百拇医药
10
1.0
1
3
4
2
1.7
复肝宝大剂量组
10
10
1.0
5
4
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1
1.6
注：与损伤组比较：P<0.05
图5 大鼠正常肝组织(HE×200)
图6 损伤组肝纤维化(HE×200)
图7 复肝宝大剂量组肝纤维化(HE×200)
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图8 复肝宝小剂量组肝纤维化(HE×400)
2.2.2 肝组织中胶原蛋白测定结果见表4。肝组织中的胶原蛋白含量，各治疗组与损伤组比较均显著下降，且两个复肝宝治疗组下降的程度与大黄虫丸组基本相似，无显著差别。
表4 复肝宝对肝损伤大鼠肝组织胶原蛋白含量的影响(
±s)mg/g 组别动物数(只)
肝胶原蛋白含量
正常对照组
10
19.50±2.62
, 百拇医药
损伤组
10
42.80±7.05△△
大黄虫丸组
10
30.80±8.41△△*
复肝宝小剂量组
10
26.60±6.53△**
复肝宝大剂量组
10
29.30±7.43△**
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注：与正常对照组比较:△P<0.05,△△P<0.01；与损伤组比较:P<0.05,P<0.01
2.2.3 血清中PⅢP含量测定结果见表5。由表5可见，复肝宝大、小剂量组及大黄虫丸组均可使血清中PⅢP的含量降低,与损伤组比较均有显著性差异,与正常对照组比较均无显著性差异。表5 复肝宝对肝损伤大鼠血清PⅢP的影响(
±s)kU/L 组别动物数(只)
PⅢP
正常对照组
8
0.442±0.181
, 百拇医药
损伤组
8
1.313±0.399△△
大黄虫丸组
8
0.793±0.412*
复肝宝小剂量组
8
0.683±0.223*
复肝宝大剂量组
8
0.709±0.266*
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注：与正常对照组比较：△△P<0.01；与损伤组比较:P<0.05
3 讨 论
中医学认为，慢性乙型肝炎肝脏纤维化的病机复杂，既有正气不足、无力抗邪，又有湿热邪毒郁滞体内,综湿热毒郁虚于一体,迁延日久则会因气滞血瘀、瘀血阻络而结为疒 徵积，发生肝脏纤维化，最终导致肝硬化。肝脏病理组织学改变、肝组织中胶原蛋白含量及血清PⅢP含量等是检测肝纤维化的重要指标〔1，2〕。防治肝纤维化是防止肝硬化发生的重要环节。复肝宝针对上述病机，主要由益气活血、凉血解毒、软坚散结等药物组成。方中黄芪益气健脾，取“肝病实脾”之意，现代药理研究证实，此药有双向调节机体免疫功能的作用，可增加血清白蛋白，促进肝细胞修复，减轻因免疫复合物在肝内沉积而引起的变态反应性炎症〔3〕；丹参活血化瘀、消疒 徵除积，文献报道，具有促进肝细胞再生、抑制肝纤维组织增生的作用〔4〕；桃仁、丹皮、 赤芍等均能活血化瘀、改善肝脏血液循环，促进肝内纤维组织降解〔4〕。 白花蛇舌草、青皮清热解毒，疏肝利胆；鳖甲软坚散结、滋阴养肝〔5，6〕。诸药合用，共奏扶正祛邪之效。通过对实验动物各项观察指标结果的分析，复肝宝对小鼠四氯化碳诱发的急性肝损伤有保护作用，对大鼠四氯化碳诱发的慢性肝纤维化有明显治疗作用，可使肝纤维化明显减轻，临床资料亦显示同样结果，从而充分证实复肝宝是防治肝纤维化的有效药物。
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基金项目：山东省中医药管理局“八五”攻关科研基金资助项目(85920104)
获奖项目：山东省枣庄市科技进步二等奖(19990107)
作者简介：赵德语(1963)，男(汉族)，山东枣庄人，主治医师。曾获山东省枣庄市科技进步奖3项，发表论文10余篇，参编专著6部。
参考文献：
〔1〕高峰，孔宪涛.肝纤维化的血清学诊断.中华内科杂志，1994,32(1):5859.
〔2〕李伟道，段晓娟，叶红军，等.血清Ⅲ型胶原测定诊断肝纤维化的临床评价——119例分析.中华消化杂志，1995,15(4):237.
〔3〕方步武，朱起贵，竺稽能.益气活血合剂抗牛血清白蛋白免疫性肝纤维化作用的实验研究.中国中西医结合杂志，1992,12(12):739.
〔4〕戚心广.丹参、赤芍对实验性肝损伤肝细胞保护作用的机理研究.中国中西医结合杂志，1991,(11):102.
〔5〕林柳光.赤芍甘草煎剂抗肝癌肝动脉化疗栓塞术后疼痛的观察.中国中西医结合急救杂志，1998，5(10)：442443.
〔6〕喻平瀛.乙型肝炎阴虚黄疸治验4则.中国中西医结合急救杂志，1998，5(10)：473.
(收稿日期：2000-01-05)
(修回日期：2000-06-26), 百拇医药