中药防治急性肾功能衰竭的实验研究
作者：朱辟疆 韦先进 刘建忠 池雨栩 江丽萍
单位：江苏省中西医结合肾脏病研究中心，江苏 镇江 212002
关键词：肾功能衰竭，急性；表皮生长因子；参虫合剂；中医药
中国中西医结合急救杂志000406摘要：目的：探讨中药对急性肾功能衰竭(ARF)的防治作用。方法：用庆大霉素制成大鼠中毒性ARF模型，治疗组给予中药参虫合剂灌胃，对照组用自来水灌胃，观察模型大鼠尿量、肾功能〔血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)〕、尿N乙酰葡萄糖苷酶(NAG)、尿β2微球蛋白(β2MG)及尿表皮生长因子(EGF)改变。结果：治疗组血BUN、SCr及尿NAG、β2MG均显著低于模型对照组(P<0.01或P<0.05)，尿EGF上升时间明显比模型对照组提前；每日尿量及多尿天数明显低于模型对照组。结论：参虫合剂能减轻庆大霉素中毒性ARF的肾脏损害，促进EGF合成，从而缩短ARF的病程。
, 百拇医药
中图分类号：R692.5 文献标识码：A 文章编号：10089691(2000)04020903
Experimental study on the prevention and therapy of acute renal failure with traditional Chinese medicine
ZHU Pijiang,WEI XianJin,LIU Jianzhong
Jiangsu Research Centre of Nephrology with TCM WM,Zhenjiang Jiangsu 212002
Abstract:Objective:To investigate the preventive and therapeutic effects of traditional Chinese medicine on acute renal failure(ARF).Methods:Gentamicin was used to establish rats toxic ARF model.For the treatment group,Shenchong mixture(参虫合剂) was used for gavage while for the contrast group tap water was used instead.Then the changes of urine volume,renal function,Nacetylglucosaminidase(NAG),β2microglobulin(β2MG) and the epidermal growth factor (EGF) was observed.Results:Blood urea nitrogen(BUN),serum creatinine,NAG and β2MG in the treatment group were remarkably lower than those in the contrast group(P<0.01 or P<0.05).The increase of EGF is obviously faster than that in the contrast group.The total daily urine volume and the time of polyuria were apparently less than those in the contrast group.Conclusions:Shenchong mixture can reduce the renal damage caused by gentamicine toxic ARF and facilitate the synthesis of EGF,thus shortening the course of disease.
, 百拇医药
Key words:acute renal failure;epidermal growth factor;Shenchong mixture;traditional Chinese medicine
CLC number:R692.5 Document code:A Artical ID:10089691(2000)04020903
急性肾功能衰竭(ARF)迄今缺乏有效的治疗方法。为探讨中药对ARF的防治作用，我们选用补肾活血中药组成参虫合剂，观察对庆大霉素毒性ARF模型的肾功能及尿表皮生长因子(EGF)的影响，报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料：①SD雄性大鼠，体重150～180 g，浙江医科大学动物中心提供。②庆大霉素注射液(西安亨通光华制药有限公司，80 mg×2 ml)。③参虫合剂(每毫升含红参、冬虫夏草各0.15 g，丹参0.3 g，由本院制剂室制成口服液)。
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1.2 实验方法：①制模：30只SD大鼠饲养1周后，随机取10只为正常对照组，另20只腹腔注射庆大霉素150 mg.kg-1.d-1，每日1次，连用7日，制成庆大霉素毒性ARF模型；正常对照组大鼠则腹腔注射生理盐水1 ml。②分组：20只ARF模型大鼠随机分为参虫合剂组(参虫治疗组)及模型对照组，每组10只。参虫治疗组从注射庆大霉素第1日起同时给予参虫合剂1 ml灌胃，每日1次；模型对照组则用自来水1 ml灌胃。模型组分别于制模的第4、7、14日心脏取血作相关检查。
1.3 观察项目：①尿量：2组模型大鼠分别各取5只于制模后4、7、9、14和21日用代谢笼收取24小时尿并测尿量，正常对照组大鼠同时间测量。②血尿素氮(BUN)：用脲酶法测定，试剂盒购自上海荣盛生物有限公司。血清肌酐(SCr)：用速率法测定，试剂盒为Raichem公司产品。③尿N乙酰葡萄糖苷酶(NAG)：用化学法测定，试剂盒由福建三强生物有限公司提供。尿β2MG：用放射免疫分析法(RIA法)测定，试剂盒由中国原子能研究所提供。④尿EGF：用RIA法测定，试剂盒由中国原子能研究所提供。均按试剂盒说明书操作。
, 百拇医药
1.4 统计学方法：数据用均数±标准差(
±s)表示，t检验。
2 结 果
2.1 尿量变化：正常对照组大鼠的尿量为(7.9±2.8)ml/24 h。2组制模大鼠均于制模第4日尿量明显增加，第7日参虫治疗组尿量为(15.0±3.5)ml/24 h，模型对照组为(23.0±3.9)ml/24 h，差异非常显著(P<0.01)。参虫治疗组第9日后尿量逐渐减少，至第14日尿量恢复正常〔(7.3±2.1)ml/24 h〕，模型对照组直至第21日尿量仍较多〔(18.4±2.1)ml/24 h〕。正常对照组注射生理盐水前后尿量及各项指标均无差异(P均>0.05)。
2.2 实验大鼠尿EGF改变见表1。
2.3 实验大鼠肾功能比较见表2。
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2.4 实验大鼠尿NAG和β2MG比较见表3。
表1 参虫合剂对ARF大鼠尿EGF改变的影响(±s)μg/L 组别
动物数(只)
第4日
第7日
第14日
参虫治疗组
10
0.356±0.125**
0.646±0.119△△
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0.668±0.114△
模型对照组
10
0.288±0.117**
0.465±0.111**
0.542±0.109*
注：正常对照组大鼠尿EGF为(0.677±0.187)μg/L；与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较：△P<0.05，△△P<0.01
3 讨 论
, 百拇医药
ARF迄今缺乏特异性治疗方法，各种治疗方案基本上是纠正病理生理紊乱，预防和治疗并发症，以及用透析治疗缓解尿毒症。肾功能的恢复必须等待肾小管上皮细胞自身再生和修复。因此，促进肾小管上皮细胞的增殖和再生，就起到缩短病程，提前恢复肾功能的作用。EGF具有强大的刺激上皮细胞分裂和增殖作用，促进肾小管上皮细胞的再生和修复。实验证明，无论缺血性或中毒性ARF，病程早期尿中EGF均明显降低，恢复期则增高，外源性给予EGF可促进肾小管上皮细胞再生和修复，加速肾功能恢复〔1〕。许多中药有促进肾脏合成EGF的作用。黎磊石等〔2〕对中药冬虫夏草防治ARF的机制进行了系列研究，证明冬虫夏草能减轻庆大霉素急性肾毒性损害，使尿NAG、SCr上升幅度降低，认为其机制除了影响线粒体的能量代谢、保护溶酶体、防止肾组织内钙离子沉积、减轻脂质过氧化损伤外，还具有促进肾小管上皮细胞再生的作用。在对服用冬虫夏草组的大鼠ARF模型中发现，尿中EGF明显高于对照组，虫草组第4日起肾组织中EGF前体mRNA已明显高于对照组，认为冬虫夏草通过增加肾内EGF前体mRNA表达，促进EGF合成，从而促进肾小管上皮细胞增殖〔3〕。冬虫夏草还能消炎、降血脂，增强免疫力，益肾保肺〔4〕。研究发现，人参总皂能减轻ARF肾组织损伤，促进再生修复，减轻近曲小管上皮细胞绒毛和细胞器损害；丹参有增加肾血流量，改善肾脏微循环，减轻肾小管上皮细胞变性、坏死的作用〔5〕。本研究选用红参、冬虫夏草、丹参组成参虫合剂，对庆大霉素毒性ARF的研究发现，2组大鼠于制模第4日尿量明显增多，BUN及SCr明显增高，尿EGF显著降低，尿NAG及β2MG增高。但参虫治疗组每日尿量少于模型对照组，多尿天数亦明显缩短，BUN、SCr不仅上升幅度明显低于模型对照组，恢复时间也明显缩短，尿NAG及β2MG含量明显低于模型对照组，且恢复时间明显短于模型对照组，尿中EGF恢复时间明显比模型对照组提前，提示参虫合剂能减轻肾小管病理损害，促进肾内EGF合成，从而使ARF病程明显缩短。
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表2 参虫合剂对ARF大鼠血BUN和SCr变化的影响(±s) 组别
动物数
(例)
BUN(mmol/L)
SCr(μmol/L)
第4日
第7日
第14日
第4日
第7日
第14日
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参虫治疗组
10
10.6±0.7
27.3±11.0△△
8.2±1.6△△
62.4±11.5
102.3±28.3△△
52.0±14.8△△
模型对照组
10
12.0±2.6
, 百拇医药
67.0±11.7
13.1±2.8*
77.7±16.1**
313.4±89.4
57.6±11.8*
注：正常对照组大鼠BUN为(7.9±1.9)mmol/L，SCr为(48.0±4.3)μmol/L；
与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较：△△P<0.01表3 参虫合剂对ARF大鼠尿NAG和β2MG变化的影响(±s) 组别
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动物数
(只)
NAG(U/g)
β2MG(μg/L)
第4日
第7日
第14日
第4日
第7日
第14日
参虫治疗组
10
53.8±21.3**△△
, 百拇医药
202.9±62.8△
16.4±8.7△
41.6±6.3
80.8±25.2*△△
49.9±17.*△
模型对照组
10
117.7±25.8**
247.8±92.3
24.6±9.8*
, http://www.100md.com
40.3±6.3
636.5±148.3**
66.7±15.1*
注：正常对照组大鼠NAG为(8.1±3.8)U/g，β2MG为(43.6±15.0)μg/L；
与正常对照组比较：P<0.05，P<0.01；与模型对照组比较：△P<0.05，△△P<0.01
基金项目：江苏省丹徒县科研基金资助项目(1999305)
作者简介：朱辟疆(1942)，男(汉族)，江苏镇江人，主任医师。中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会委员，江苏省中西医结合学会肾病、免疫病专业委员会副主任委员，从事中西医结合肾脏病研究，已发表学术论文70篇。
, 百拇医药
参考文献：
〔1〕刘志红.表皮生长因子与急性肾功能衰竭——急性肾衰研究中的新动向.国外医学泌尿系统分册，1993，13(5):232335.
〔2〕黎磊石，郑丰，刘志红，等.冬虫夏草防治氨基甙肾毒性损害的实验研究.中国中西医结合杂志，1996,16(12):733737.
〔3〕庄永泽，黎磊石.冬虫夏草防治氨基甙急性肾衰的分子学机理.肾脏病与透析肾移植杂志.1993,2(1):1116.
〔4〕贾峥嵘.卡托普利联用冬虫夏草制剂对Ⅱ型糖尿病肾病早期微白蛋白尿的影响.中国中西医结合急救杂志，1999，6(12)：566567.
〔5〕王国栋，房定亚.中药防治急性肾功能衰竭的实验研究概况.中医杂志，1994，35(1):5153.
(收稿日期：1999-10-18)
(修回日期：2000-06-18), http://www.100md.com
单位：江苏省中西医结合肾脏病研究中心，江苏 镇江 212002
关键词：肾功能衰竭，急性；表皮生长因子；参虫合剂；中医药
中国中西医结合急救杂志000406摘要：目的：探讨中药对急性肾功能衰竭(ARF)的防治作用。方法：用庆大霉素制成大鼠中毒性ARF模型，治疗组给予中药参虫合剂灌胃，对照组用自来水灌胃，观察模型大鼠尿量、肾功能〔血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)〕、尿N乙酰葡萄糖苷酶(NAG)、尿β2微球蛋白(β2MG)及尿表皮生长因子(EGF)改变。结果：治疗组血BUN、SCr及尿NAG、β2MG均显著低于模型对照组(P<0.01或P<0.05)，尿EGF上升时间明显比模型对照组提前；每日尿量及多尿天数明显低于模型对照组。结论：参虫合剂能减轻庆大霉素中毒性ARF的肾脏损害，促进EGF合成，从而缩短ARF的病程。
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中图分类号：R692.5 文献标识码：A 文章编号：10089691(2000)04020903
Experimental study on the prevention and therapy of acute renal failure with traditional Chinese medicine
ZHU Pijiang,WEI XianJin,LIU Jianzhong
Jiangsu Research Centre of Nephrology with TCM WM,Zhenjiang Jiangsu 212002
Abstract:Objective:To investigate the preventive and therapeutic effects of traditional Chinese medicine on acute renal failure(ARF).Methods:Gentamicin was used to establish rats toxic ARF model.For the treatment group,Shenchong mixture(参虫合剂) was used for gavage while for the contrast group tap water was used instead.Then the changes of urine volume,renal function,Nacetylglucosaminidase(NAG),β2microglobulin(β2MG) and the epidermal growth factor (EGF) was observed.Results:Blood urea nitrogen(BUN),serum creatinine,NAG and β2MG in the treatment group were remarkably lower than those in the contrast group(P<0.01 or P<0.05).The increase of EGF is obviously faster than that in the contrast group.The total daily urine volume and the time of polyuria were apparently less than those in the contrast group.Conclusions:Shenchong mixture can reduce the renal damage caused by gentamicine toxic ARF and facilitate the synthesis of EGF,thus shortening the course of disease.
, 百拇医药
Key words:acute renal failure;epidermal growth factor;Shenchong mixture;traditional Chinese medicine
CLC number:R692.5 Document code:A Artical ID:10089691(2000)04020903
急性肾功能衰竭(ARF)迄今缺乏有效的治疗方法。为探讨中药对ARF的防治作用，我们选用补肾活血中药组成参虫合剂，观察对庆大霉素毒性ARF模型的肾功能及尿表皮生长因子(EGF)的影响，报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料：①SD雄性大鼠，体重150～180 g，浙江医科大学动物中心提供。②庆大霉素注射液(西安亨通光华制药有限公司，80 mg×2 ml)。③参虫合剂(每毫升含红参、冬虫夏草各0.15 g，丹参0.3 g，由本院制剂室制成口服液)。
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1.2 实验方法：①制模：30只SD大鼠饲养1周后，随机取10只为正常对照组，另20只腹腔注射庆大霉素150 mg.kg-1.d-1，每日1次，连用7日，制成庆大霉素毒性ARF模型；正常对照组大鼠则腹腔注射生理盐水1 ml。②分组：20只ARF模型大鼠随机分为参虫合剂组(参虫治疗组)及模型对照组，每组10只。参虫治疗组从注射庆大霉素第1日起同时给予参虫合剂1 ml灌胃，每日1次；模型对照组则用自来水1 ml灌胃。模型组分别于制模的第4、7、14日心脏取血作相关检查。
1.3 观察项目：①尿量：2组模型大鼠分别各取5只于制模后4、7、9、14和21日用代谢笼收取24小时尿并测尿量，正常对照组大鼠同时间测量。②血尿素氮(BUN)：用脲酶法测定，试剂盒购自上海荣盛生物有限公司。血清肌酐(SCr)：用速率法测定，试剂盒为Raichem公司产品。③尿N乙酰葡萄糖苷酶(NAG)：用化学法测定，试剂盒由福建三强生物有限公司提供。尿β2MG：用放射免疫分析法(RIA法)测定，试剂盒由中国原子能研究所提供。④尿EGF：用RIA法测定，试剂盒由中国原子能研究所提供。均按试剂盒说明书操作。
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1.4 统计学方法：数据用均数±标准差(
±s)表示，t检验。2 结 果
2.1 尿量变化：正常对照组大鼠的尿量为(7.9±2.8)ml/24 h。2组制模大鼠均于制模第4日尿量明显增加，第7日参虫治疗组尿量为(15.0±3.5)ml/24 h，模型对照组为(23.0±3.9)ml/24 h，差异非常显著(P<0.01)。参虫治疗组第9日后尿量逐渐减少，至第14日尿量恢复正常〔(7.3±2.1)ml/24 h〕，模型对照组直至第21日尿量仍较多〔(18.4±2.1)ml/24 h〕。正常对照组注射生理盐水前后尿量及各项指标均无差异(P均>0.05)。
2.2 实验大鼠尿EGF改变见表1。
2.3 实验大鼠肾功能比较见表2。
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2.4 实验大鼠尿NAG和β2MG比较见表3。
表1 参虫合剂对ARF大鼠尿EGF改变的影响(
±s)μg/L 组别动物数(只)
第4日
第7日
第14日
参虫治疗组
10
0.356±0.125**
0.646±0.119△△
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0.668±0.114△
模型对照组
10
0.288±0.117**
0.465±0.111**
0.542±0.109*
注：正常对照组大鼠尿EGF为(0.677±0.187)μg/L；与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较：△P<0.05，△△P<0.01
3 讨 论
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ARF迄今缺乏特异性治疗方法，各种治疗方案基本上是纠正病理生理紊乱，预防和治疗并发症，以及用透析治疗缓解尿毒症。肾功能的恢复必须等待肾小管上皮细胞自身再生和修复。因此，促进肾小管上皮细胞的增殖和再生，就起到缩短病程，提前恢复肾功能的作用。EGF具有强大的刺激上皮细胞分裂和增殖作用，促进肾小管上皮细胞的再生和修复。实验证明，无论缺血性或中毒性ARF，病程早期尿中EGF均明显降低，恢复期则增高，外源性给予EGF可促进肾小管上皮细胞再生和修复，加速肾功能恢复〔1〕。许多中药有促进肾脏合成EGF的作用。黎磊石等〔2〕对中药冬虫夏草防治ARF的机制进行了系列研究，证明冬虫夏草能减轻庆大霉素急性肾毒性损害，使尿NAG、SCr上升幅度降低，认为其机制除了影响线粒体的能量代谢、保护溶酶体、防止肾组织内钙离子沉积、减轻脂质过氧化损伤外，还具有促进肾小管上皮细胞再生的作用。在对服用冬虫夏草组的大鼠ARF模型中发现，尿中EGF明显高于对照组，虫草组第4日起肾组织中EGF前体mRNA已明显高于对照组，认为冬虫夏草通过增加肾内EGF前体mRNA表达，促进EGF合成，从而促进肾小管上皮细胞增殖〔3〕。冬虫夏草还能消炎、降血脂，增强免疫力，益肾保肺〔4〕。研究发现，人参总皂能减轻ARF肾组织损伤，促进再生修复，减轻近曲小管上皮细胞绒毛和细胞器损害；丹参有增加肾血流量，改善肾脏微循环，减轻肾小管上皮细胞变性、坏死的作用〔5〕。本研究选用红参、冬虫夏草、丹参组成参虫合剂，对庆大霉素毒性ARF的研究发现，2组大鼠于制模第4日尿量明显增多，BUN及SCr明显增高，尿EGF显著降低，尿NAG及β2MG增高。但参虫治疗组每日尿量少于模型对照组，多尿天数亦明显缩短，BUN、SCr不仅上升幅度明显低于模型对照组，恢复时间也明显缩短，尿NAG及β2MG含量明显低于模型对照组，且恢复时间明显短于模型对照组，尿中EGF恢复时间明显比模型对照组提前，提示参虫合剂能减轻肾小管病理损害，促进肾内EGF合成，从而使ARF病程明显缩短。
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表2 参虫合剂对ARF大鼠血BUN和SCr变化的影响(
±s) 组别动物数
(例)
BUN(mmol/L)
SCr(μmol/L)
第4日
第7日
第14日
第4日
第7日
第14日
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参虫治疗组
10
10.6±0.7
27.3±11.0△△
8.2±1.6△△
62.4±11.5
102.3±28.3△△
52.0±14.8△△
模型对照组
10
12.0±2.6
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67.0±11.7
13.1±2.8*
77.7±16.1**
313.4±89.4
57.6±11.8*
注：正常对照组大鼠BUN为(7.9±1.9)mmol/L，SCr为(48.0±4.3)μmol/L；
与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较：△△P<0.01表3 参虫合剂对ARF大鼠尿NAG和β2MG变化的影响(
±s) 组别, http://www.100md.com
动物数
(只)
NAG(U/g)
β2MG(μg/L)
第4日
第7日
第14日
第4日
第7日
第14日
参虫治疗组
10
53.8±21.3**△△
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202.9±62.8△
16.4±8.7△
41.6±6.3
80.8±25.2*△△
49.9±17.*△
模型对照组
10
117.7±25.8**
247.8±92.3
24.6±9.8*
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40.3±6.3
636.5±148.3**
66.7±15.1*
注：正常对照组大鼠NAG为(8.1±3.8)U/g，β2MG为(43.6±15.0)μg/L；
与正常对照组比较：P<0.05，P<0.01；与模型对照组比较：△P<0.05，△△P<0.01
基金项目：江苏省丹徒县科研基金资助项目(1999305)
作者简介：朱辟疆(1942)，男(汉族)，江苏镇江人，主任医师。中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会委员，江苏省中西医结合学会肾病、免疫病专业委员会副主任委员，从事中西医结合肾脏病研究，已发表学术论文70篇。
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参考文献：
〔1〕刘志红.表皮生长因子与急性肾功能衰竭——急性肾衰研究中的新动向.国外医学泌尿系统分册，1993，13(5):232335.
〔2〕黎磊石，郑丰，刘志红，等.冬虫夏草防治氨基甙肾毒性损害的实验研究.中国中西医结合杂志，1996,16(12):733737.
〔3〕庄永泽，黎磊石.冬虫夏草防治氨基甙急性肾衰的分子学机理.肾脏病与透析肾移植杂志.1993,2(1):1116.
〔4〕贾峥嵘.卡托普利联用冬虫夏草制剂对Ⅱ型糖尿病肾病早期微白蛋白尿的影响.中国中西医结合急救杂志，1999，6(12)：566567.
〔5〕王国栋，房定亚.中药防治急性肾功能衰竭的实验研究概况.中医杂志，1994，35(1):5153.
(收稿日期：1999-10-18)
(修回日期：2000-06-18), http://www.100md.com