天灸对SAM-P10小鼠血清睾酮、雌二醇含量的影响
作者：辛保玉 李学武 石学敏 王舒
单位：辛保玉 李学武(北京中医药大学针推系 北京100029)；石学敏 王舒(天津中医学院第一附属医院 天津300193)
关键词：天灸；小鼠快速老化脑萎缩模型；性激素；衰老
北京中医药大学学报000421 摘要：雄性SAM鼠随着年龄的增长，血清睾酮(T)含量下降，雌二醇(E2)含量无明显变化，E2/T比值升高。天灸“肾俞”、“命门”、“大椎”三穴可增加睾酮(T)含量，使E2/T比值下降，初步研究了天灸延缓衰老的内分泌机制。
中图分类号：R285.5
The Influence of Crude Herb Moxibustion on the Content of
, 百拇医药
Serum Testosterone and Estradiol in the SAM-P10 Mice
Xin Baoyu Li Xuewu Shi Xuemin et al.
(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
ABSTRACT：With aging of the male SAM mouse, the content of testosterone (T) would decrease while the content of estradiol (E2) would not change very much, so the ratio of E2/T would increase. Crude herb moxibustion on the Shenshu, Mingmen and Dazhui could increase the content of testosterone, so to decrease the ratio of E2/T. It is an initial research on the endocrine mechanism of crude herb moxibustion postponing senility.
, http://www.100md.com
KEY WORDS: Senility; Crude herb moxibustion; Mice pattern of fast aging encephalatrophy; Sex hormone
天灸又称发泡灸，是灸法中研究较少的一个部分。本实验以小鼠快速老化脑萎缩模型(SAM-P10)为研究对象，观察天灸对其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)分泌水平的影响，初步探讨天灸延缓衰老的作用机制。
1 材料
1.1 动物 SAM-R1和SAM-P10小鼠，均为雄性，体重200～220 g，由天津中医学院第一附属医院动物中心提供。
1.2 天灸涂膜剂制备 乙醇提取淫羊藿、丹参、辣椒等，加入助渗剂、04膜。由北京中医药大学中药学院加工制成。
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1.3 试剂 血清睾酮、雌二醇放射免疫测定盒购自北京北方生物技术研究所。
2 方法
2.1 动物分组及模型 3月龄、6月龄、9月龄SAM-R1小鼠各10只，作为正常老化对照组。3月龄、6月龄、9月龄SAM-P10小鼠各20只，每个月龄分出10只作为快速老化模型组，剩下的每个月龄10只动物作为天灸组。
SAM，是英文Senescence Accelerated Mouse的缩写。它分为R品系和P品系，R品系为正常老化，其中R1亚系比较常用；P品系为快速老化，P10为新近开发的快速老化脑萎缩模型。天津中医学院第一附属医院于1993年成功地从日本引入SAM鼠，为国内开展衰老和老年病的研究提供了良好的动物模型。
2.2 天灸方法 适应性饲养1周后，根据中国针灸学会实验针灸分会制定的动物穴位图谱，在所有实验动物的“肾俞”、“命门”、“大椎”三穴剪毛。从剪毛后的第2天开始，天灸保健组在所选穴位处贴敷天灸涂膜剂，以局部皮肤潮红和动物能耐受为度，隔日1次，共15次。R1对照组和P10模型组不做任何处理。
, 百拇医药
2.3 观测指标及测定方法 20 g/L戊巴比妥钠溶液麻醉动物(10 μL/kg)，打开腹腔，暴露腹主动脉，用2 mL一次性注射器取血约1 mL。放置30 min后，离心15 min(3 000 r/min)，取上清液测定。按照试剂盒操作程序建立标准曲线，样品浓度从标准曲线上查出。
2.4 统计学处理 实验数据均以
±s表示，采用方差分析进行检验，以P<0.05作为差异显著性的标准。
3 结果
3.1 血清睾酮(T)含量的变化 结果见表1。
表1 各组小鼠血清睾酮(T)含量的变化 (mg/L; n=10；±s) 组 别
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3月龄
6月龄
9月龄
SAM-R1组
102.34±7.77
87.61±3.03△
64.27±3.34△△#
SAM-P10组
105.97±6.88
59.74±6.69△△
41.94±8.21△△#
, 百拇医药
天灸组
110.62±7.28
80.67±8.59★★△
52.76±10.35★△△#
注：与SAM-R1组比P<0.05 P<0.01； 与SAM-P10组比★P<0.05 ★★P<0.01；
与3月龄比△P<0.05 △△P<0.01； 与6月龄比#P<0.05 由表1可知，无论对于R1品系还是P10品系，随着月龄的增加，其血清睾酮(T)的含量是逐渐下降的。但是和R1品系相比，P10品系下降的程度更为显著，在6月龄时即明显降低(P<0.01)，而到9月龄时则呈现一个缓慢降低的趋势(P<0.05)。天灸则有提高血清睾酮(T)的含量的作用，对6月龄的效果较好(P<0.01)，9月龄则较差(P<0.05)。
, 百拇医药
3.2 血清雌二醇(E2)含量的变化 结果见表2。
表2 各组小鼠血清雌二醇(E2)含量的变化
(mg/L; n=10；±s) 组 别
3月龄
6月龄
9月龄
SAM-R1组
11.95±2.14
12.45±2.88
, 百拇医药
13.73±3.29
SAM-P10组
12.68±2.54
13.95±3.01
14.53±2.97
天灸组
10.83±2.01
13.15±2.68
14.27±2.26
表2的结果说明，R1品系和P10品系随月龄的增加，血清雌二醇(E2)含量都有升高的趋势，但经统计学处理，均无显著性意义，天灸对其的影响也不大。4 讨论
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在祖国医学中，灸法保健有着悠久的历史。如宋*窦材在《扁鹊心书》就有“保命之法，灼艾第一，丹药第二，附子第三”的说法，著名医家孙思邈更是保健灸的倡导者，他在《千金方》中指出“勿以健康便为常然，常须安不忘危，预防诸疾”，并提出多个穴位要经常艾灸。天灸是灸法中比较独特的一种方法，亦称自灸、发泡灸。它的保健作用在临床中是非常确切的，但对其机制缺乏认识。
目前，关于衰老的研究已经非常深入，也提出了许多学说。如自由基学说、神经内分泌学说、基因调控学说等[1]。在老化的调节中，神经内分泌网络是很重要的，因为它是控制内环境稳定的中心，而衰老正是由于内外环境不相协调造成的[2]。衰老的模型也很多，如D-半乳糖模型、O3损伤模型等[3]。SAM鼠首先由日本京都大学竹田俊男等人开发成功，它的P品系是自然的快速老化模型。
祖国医学认为，衰老与肾虚阳亏关系密切。因此本实验采用放射免疫分析法，观察了天灸“肾俞”、“命门”、“大椎”三穴对SAM-P10血清睾酮(T)和雌二醇(E2)含量的影响，三穴均为补肾壮阳要穴。结果发现，随着月龄的增加，T的含量是降低的， E2含量的变化有一个增加的趋势，但无统计学意义，因此E2/T比值逐渐上升。天灸对E2含量的影响不大，却可显著的增加T的含量，从而减小E2/T比值。
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辛保玉,男,29岁,在读医学博士生
参 考 文 献
1，童坦君，张宗玉. 医学老年病学. 北京：人民卫生出版社，1998.12～16
2，Meites J. Neuroendocrine Biomarkers of Aging in the Rat. Exp Geront, 1988,23(4):349～351
3，陈 勤. 抗衰老研究实验方法. 北京：中医药科技出版社, 1996.45～47
(收稿日期：2000-01-10), 百拇医药
单位：辛保玉 李学武(北京中医药大学针推系 北京100029)；石学敏 王舒(天津中医学院第一附属医院 天津300193)
关键词：天灸；小鼠快速老化脑萎缩模型；性激素；衰老
北京中医药大学学报000421 摘要：雄性SAM鼠随着年龄的增长，血清睾酮(T)含量下降，雌二醇(E2)含量无明显变化，E2/T比值升高。天灸“肾俞”、“命门”、“大椎”三穴可增加睾酮(T)含量，使E2/T比值下降，初步研究了天灸延缓衰老的内分泌机制。
中图分类号：R285.5
The Influence of Crude Herb Moxibustion on the Content of
, 百拇医药
Serum Testosterone and Estradiol in the SAM-P10 Mice
Xin Baoyu Li Xuewu Shi Xuemin et al.
(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
ABSTRACT：With aging of the male SAM mouse, the content of testosterone (T) would decrease while the content of estradiol (E2) would not change very much, so the ratio of E2/T would increase. Crude herb moxibustion on the Shenshu, Mingmen and Dazhui could increase the content of testosterone, so to decrease the ratio of E2/T. It is an initial research on the endocrine mechanism of crude herb moxibustion postponing senility.
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KEY WORDS: Senility; Crude herb moxibustion; Mice pattern of fast aging encephalatrophy; Sex hormone
天灸又称发泡灸，是灸法中研究较少的一个部分。本实验以小鼠快速老化脑萎缩模型(SAM-P10)为研究对象，观察天灸对其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)分泌水平的影响，初步探讨天灸延缓衰老的作用机制。
1 材料
1.1 动物 SAM-R1和SAM-P10小鼠，均为雄性，体重200～220 g，由天津中医学院第一附属医院动物中心提供。
1.2 天灸涂膜剂制备 乙醇提取淫羊藿、丹参、辣椒等，加入助渗剂、04膜。由北京中医药大学中药学院加工制成。
, http://www.100md.com
1.3 试剂 血清睾酮、雌二醇放射免疫测定盒购自北京北方生物技术研究所。
2 方法
2.1 动物分组及模型 3月龄、6月龄、9月龄SAM-R1小鼠各10只，作为正常老化对照组。3月龄、6月龄、9月龄SAM-P10小鼠各20只，每个月龄分出10只作为快速老化模型组，剩下的每个月龄10只动物作为天灸组。
SAM，是英文Senescence Accelerated Mouse的缩写。它分为R品系和P品系，R品系为正常老化，其中R1亚系比较常用；P品系为快速老化，P10为新近开发的快速老化脑萎缩模型。天津中医学院第一附属医院于1993年成功地从日本引入SAM鼠，为国内开展衰老和老年病的研究提供了良好的动物模型。
2.2 天灸方法 适应性饲养1周后，根据中国针灸学会实验针灸分会制定的动物穴位图谱，在所有实验动物的“肾俞”、“命门”、“大椎”三穴剪毛。从剪毛后的第2天开始，天灸保健组在所选穴位处贴敷天灸涂膜剂，以局部皮肤潮红和动物能耐受为度，隔日1次，共15次。R1对照组和P10模型组不做任何处理。
, 百拇医药
2.3 观测指标及测定方法 20 g/L戊巴比妥钠溶液麻醉动物(10 μL/kg)，打开腹腔，暴露腹主动脉，用2 mL一次性注射器取血约1 mL。放置30 min后，离心15 min(3 000 r/min)，取上清液测定。按照试剂盒操作程序建立标准曲线，样品浓度从标准曲线上查出。
2.4 统计学处理 实验数据均以
±s表示，采用方差分析进行检验，以P<0.05作为差异显著性的标准。3 结果
3.1 血清睾酮(T)含量的变化 结果见表1。
表1 各组小鼠血清睾酮(T)含量的变化 (mg/L; n=10；
±s) 组 别, http://www.100md.com
3月龄
6月龄
9月龄
SAM-R1组
102.34±7.77
87.61±3.03△
64.27±3.34△△#
SAM-P10组
105.97±6.88
59.74±6.69△△
41.94±8.21△△#
, 百拇医药
天灸组
110.62±7.28
80.67±8.59★★△
52.76±10.35★△△#
注：与SAM-R1组比P<0.05 P<0.01； 与SAM-P10组比★P<0.05 ★★P<0.01；
与3月龄比△P<0.05 △△P<0.01； 与6月龄比#P<0.05 由表1可知，无论对于R1品系还是P10品系，随着月龄的增加，其血清睾酮(T)的含量是逐渐下降的。但是和R1品系相比，P10品系下降的程度更为显著，在6月龄时即明显降低(P<0.01)，而到9月龄时则呈现一个缓慢降低的趋势(P<0.05)。天灸则有提高血清睾酮(T)的含量的作用，对6月龄的效果较好(P<0.01)，9月龄则较差(P<0.05)。
, 百拇医药
3.2 血清雌二醇(E2)含量的变化 结果见表2。
表2 各组小鼠血清雌二醇(E2)含量的变化
(mg/L; n=10；
±s) 组 别3月龄
6月龄
9月龄
SAM-R1组
11.95±2.14
12.45±2.88
, 百拇医药
13.73±3.29
SAM-P10组
12.68±2.54
13.95±3.01
14.53±2.97
天灸组
10.83±2.01
13.15±2.68
14.27±2.26
表2的结果说明，R1品系和P10品系随月龄的增加，血清雌二醇(E2)含量都有升高的趋势，但经统计学处理，均无显著性意义，天灸对其的影响也不大。4 讨论
, http://www.100md.com
在祖国医学中，灸法保健有着悠久的历史。如宋*窦材在《扁鹊心书》就有“保命之法，灼艾第一，丹药第二，附子第三”的说法，著名医家孙思邈更是保健灸的倡导者，他在《千金方》中指出“勿以健康便为常然，常须安不忘危，预防诸疾”，并提出多个穴位要经常艾灸。天灸是灸法中比较独特的一种方法，亦称自灸、发泡灸。它的保健作用在临床中是非常确切的，但对其机制缺乏认识。
目前，关于衰老的研究已经非常深入，也提出了许多学说。如自由基学说、神经内分泌学说、基因调控学说等[1]。在老化的调节中，神经内分泌网络是很重要的，因为它是控制内环境稳定的中心，而衰老正是由于内外环境不相协调造成的[2]。衰老的模型也很多，如D-半乳糖模型、O3损伤模型等[3]。SAM鼠首先由日本京都大学竹田俊男等人开发成功，它的P品系是自然的快速老化模型。
祖国医学认为，衰老与肾虚阳亏关系密切。因此本实验采用放射免疫分析法，观察了天灸“肾俞”、“命门”、“大椎”三穴对SAM-P10血清睾酮(T)和雌二醇(E2)含量的影响，三穴均为补肾壮阳要穴。结果发现，随着月龄的增加，T的含量是降低的， E2含量的变化有一个增加的趋势，但无统计学意义，因此E2/T比值逐渐上升。天灸对E2含量的影响不大，却可显著的增加T的含量，从而减小E2/T比值。
, http://www.100md.com
辛保玉,男,29岁,在读医学博士生
参 考 文 献
1，童坦君，张宗玉. 医学老年病学. 北京：人民卫生出版社，1998.12～16
2，Meites J. Neuroendocrine Biomarkers of Aging in the Rat. Exp Geront, 1988,23(4):349～351
3，陈 勤. 抗衰老研究实验方法. 北京：中医药科技出版社, 1996.45～47
(收稿日期：2000-01-10), 百拇医药
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