整合素Ⅱb/Ⅲa抑制剂抗涎腺腺样囊性癌转移的实验研究
作者：李凤和 俞光岩 李盛琳 彭师奇 傅嘉
单位：李凤和 俞光岩 李盛琳 傅嘉(北京医科大学口腔医学院口腔颌面外科研究室，北京100081)；彭师奇(北京医科大学药学院中德实验室，北京100083)
关键词：涎腺腺样囊性癌；整合素Ⅱb/Ⅲa；血小板；肿瘤转移；裸小鼠
癌症000510
【摘要】目的：探讨涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma ,SACC)转移与SACC细胞-血小板粘附的关系，观察整合素Ⅱb/Ⅲa抑制剂抗SACC转移的作用。方法：体外实验观察高转移潜能的SACC-LM细胞、非高转移潜能的SACC-83细胞与血小板的粘附，阿斯匹林、阿斯匹林镁、精氨酸-天冬氨酸(arginina-aspartate,RD)对SACC-LM细胞与血小板粘附的影响；动物实验观察阿斯匹林、阿斯匹林镁、RD对SACC-LM细胞实验性肺转移的作用。结果：SACC-LM细胞与SACC-83细胞相比和血小板的粘附增高，阿斯匹林、阿斯匹林镁、RD在1，5，25μg/ml时抑制血小板与SACC-LM细胞的粘附，RD能抑制SACC-LM实验性肺转移的形成。结论：SACC的转移与血小板-肿瘤细胞的粘附有关，RD能明显抑制SACC的转移。
, 百拇医药
中图分类号：R782.7；R73-37文献标识码：A文章编号：1000-467X(2000)05-0429-03
Antimetastatic effect of integrinⅡb/Ⅲa inhibitors on salivary adenoid cystic carcinoma
LI Feng-he, YU Guang-yan, LI Sheng-lin, et al.
(Department of Oral Maxillofacial Surgery, College of Stomatology, Beijing Medical University, Beijing 100083， P.R.China)
【 Abstract】 Objectives： To Study the relationship between metastatic potential of salivary adenoid cystic carcinoma (SACC)and tumor cell-platelet adhesion,and to evaluate antimetastatic effect of integrin Ⅱ b/Ⅲ a inhibitor on SACC. Methods： Tumor cell-platelet adhesion of highly metastatic SACC-LM, non-metastatic SACC-83 and effect of aspirin, arginine-aspartate ( RD) , magnesium acetylsalicylate on adhesion were studied in vitro. Antimetastatic effect of aspirin, RD， magnesium acetysalicylate on experimental metastasis of SACC was observed in vivo. Results： The tumor cell-platelet adhesion was significant in SACC-LM than in SACC-83； aspirin, RD, magnesium acetylsalicylate inhibitet the adhesion of SACC-LM in the final concentration of 1, 5 ,25 μ g/ml respectively. RD inhibited experimental metastasis of SACC. Conclusion： Metastasis of SACC is related to platelet-tumor cell adhesion, and RD can inhibit metastasis of SACC.
, http://www.100md.com
Key words： Salivary adenoid cystic carcinoma; Integrin Ⅱ b/Ⅲ a; Platelet; Neoplasm metastasis; Nude mice
近年来的研究发现肿瘤细胞具有聚集血小板的能力，血小板-肿瘤细胞的粘附有助于肿瘤的血行转移，这种作用主要是由整合素Ⅱb/Ⅲa介导的[1,2]。涎腺腺样囊性癌是一种常见的涎腺恶性肿瘤，易通过血行发生远处转移，体外实验证明其肿瘤细胞与血小板的粘附能力与肿瘤细胞转移能力一致[3]。本文观察了不同转移能力的涎腺腺样囊性癌细胞与血小板的粘附能力，整合素Ⅱb/Ⅲa抑制剂体外对高转移性涎腺腺样囊性癌细胞-血小板粘附、体内对高转移涎腺腺样囊性癌细胞实验性肺转移形成的作用，以期为涎腺腺样囊性癌的抗转移治疗提供实验依据。
1材料和方法
1.1动物
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BAB/C裸小鼠，雌性，四周龄，由中国医学科学院动物所提供,无特定病原体(SPF)条件下饲养。
1.2细胞
人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83[4]以及由此筛选的人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞系SACC-LM(北京医科大学口腔医学院口腔颌面外科研究室)，用RPMI1640+15%小牛血清+双抗(青霉素100u/ml，链霉素100mg/ml)，于37℃5%CO2条件下培养，传代消化用0.125胰酶/0.1%EDTA。取指数生长期的肿瘤细胞进行实验。
1.3药物
阿斯匹林(商品名巴米尔)，中国无锡阿斯特拉制药有限公司产品；阿斯匹林镁、精氨酸-天冬氨酸(arginine-aspartate,RD)，北京医科大学药学院中德实验室设计、合成。
, 百拇医药
1.4肿瘤细胞-血小板粘附
选择两周内无阿斯匹林等抗血小板药物用药史的健康成年人，抽取静脉血，肝素抗凝(最终浓度1IU/ml)，室温下离心，120g,10分钟，制备富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)；500g,10分钟,制备乏血小板血浆(platelet poor plasma,PPP),用PPP调整PRP血小板数至2×108/ml[5]。将PRP加入24孔细胞培养板中，每孔0.1ml,然后分别加入SACC-83,SACC-LM细胞悬液0.2ml(2×105个细胞)，另设不加PRP孔作对照孔，培养板置于37℃5%CO2培养箱中孵育，分别于30、60、90、120分钟后取出，D-Hank's液轻洗二遍，去除未粘附细胞，0.125胰酶/0.1%EDTA消化后人工计数粘附细胞，计算粘附率[粘附率=粘附细胞总数/(2×105)×100%]，所有实验均做3个平行孔，实验结果进行t检验。
观察药物的作用时，于加入SACC-LM细胞悬液前分别加入阿斯匹林、阿斯匹林镁、RD，最终浓度分别为1,5,25μg/ml,孵育时间为90分钟，其余同上。
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1.5动物实验
四周龄雌性裸鼠随机分为四组，分作如下处理：A组：空白对照组，接种瘤细胞前后不作任何处理；B组：接种瘤细胞前2天至接种后7天，RD30mg/kg，每日灌胃一次；C组：接种瘤细胞前2天至接种后7天，阿斯匹林镁30mg/kg，每日灌胃一次；D组：接种瘤细胞前2天至接种后7天，阿斯匹林30mg/kg，每日灌胃一次。造成涎腺腺样囊性癌实验性肺转移模型的方法为：无血清RPMI1640制成SACC-LM细胞悬液(5×106/ml)，0.2ml/只注入裸小鼠尾静脉。动物于濒死前期处死，所有动物肺组织均进行组织学检查。生存期进行t检验。
2结果
2.1不同转移能力涎腺腺样囊性癌细胞与血小板的粘附
结果见表1，血小板在不同时间均能促进SACC-83、SACC-LM细胞的粘附(P<0.05),尤以孵育90分钟时作用明显。在血小板存在的情况下，SACCLM于30分钟、60分钟时的粘附强于SACC83的粘附(P<0.05)，在无血小板存在的情况下，SACCLM于60分钟、90分钟时的粘附不如SACC83的粘附(P<0.05)。
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表1 SACC-83,SACC-LM细胞与血小板的粘附(%,
±s) 分组
时间(分)
30
60
90
120
SACC-83
对照
5.7±1.6
15.5±3.5
30.7±2.0
, 百拇医药
45.5±4.1
PRP
15.3±2.8
25.5±2.6
78.3±4.5
84.2±2.6
SACC-LM
对照
3.8±1.0
9.7±0.8
20.0±2.8
41.8±4.3
, http://www.100md.com
PRP
31.3±2.5
42.7±4.7
80.0±7.2
84.7±2.6
2.2药物对SACC-LM细胞与血小板粘附的影响
选择孵育90分钟的条件观察药物对SACC-LM和血小板粘附的影响。SACC-LM的粘附率为80.0%±7.2%,与此相比，RD、阿斯匹林镁、阿斯匹林在1,5,25μg/ml时均能抑制SACC-LM细胞与血小板的粘附(P<0.05)(见表2);阿斯匹林镁在高浓度时(25μg/ml,与1μg/ml相比)抗血小板肿瘤细胞粘附的作用明显(P<0.05),其余药物在不同浓度之间对粘附影响的差异不显著(0.05)。表2不同药物作用下SACC-LM细胞与血小板的粘附率(%，±s) 药物
, http://www.100md.com
不同药物浓度(μg/ml)的粘附率
1
5
25
RD
39.2±5.2
35.3±2.0
32.7±2.0
阿斯匹林镁
46.2±6.2
33.8±3.2
31.8±1.0
, 百拇医药
阿斯匹林
33.8±2.5
32.8±1.8
30.7±4.3
2.3药物对SACC-LM实验性肺转移形成的影响
结果见表3，RD、阿斯匹林镁组生存期明显长于对照组(P<0.05)，但阿斯匹林镁组与对照组相比生存期延长幅度未达到25%，因此只有RD能明显延长涎腺腺样囊性癌实验性肺转移动物的生存期,阿斯匹林组与对照组相比生存期差异不明显(0.05)。表3 不同处理组动物的生存期(天,±s) 分组
n
生存期
, 百拇医药
P
对照
9
43.56±4.95
RD
8
53.88±12.65
0.015
阿斯匹林镁
8
53.88±6.92
0.006
阿斯匹林
, 百拇医药
9
50.11±10.91
0.099
3讨论
3.1肿瘤细胞聚集血小板的机理
不同肿瘤细胞聚集血小板的机理不完全相同，以往的研究表明肿瘤细胞聚集血小板的途径有凝血酶、ADP、5-HT、花生四烯酸等的参与[1,2]，但最终途径均为血小板表面整合素Ⅱb/Ⅲa激活，与纤维蛋白原结合。阿斯匹林的作用是抑制花生四烯酸的代谢,减少血栓烷素的形成。本研究发现阿斯匹林、阿斯匹林镁能抑制SACC-LM细胞与血小板的粘附，这说明SACC-LM细胞聚集血小板的途径与花生四烯酸有关。
3.2肿瘤细胞转移能力与聚集血小板能力的关系
, http://www.100md.com
血小板在肿瘤的血行转移中作用明显，血小板瘤栓的形成有利于减少肿瘤细胞在血运的破坏，增加靶器官对肿瘤细胞的捕获[2]。涎腺腺样囊性癌以血行转移为主，其转移与血小板有关[3]。本实验研究发现SACC-LM在60分钟、90分钟时的粘附低于SACC-83，加入PRP后，SACC-LM在30,60分钟时的粘附高于SACC-83的粘附，这说明SACC-LM聚集血小板的能力强于SACC-83，高转移潜能的肿瘤细胞聚集血小板的能力较强，这与以往的研究结果是一致的[3]。这一结果提示,使用药物抑制血小板聚集,可能是控制涎腺腺样囊性癌血行转移的一条途径。
3.3药物的作用
肿瘤血行转移与血小板的关系是比较肯定的，但是应用抗血小板药物抗肿瘤转移的研究结果并不一致,尤其是阿斯匹林的作用[6～9]，可能与实验条件、应用剂量不一致有关。在本实验中，阿斯匹林、阿斯匹林镁体外作用明显，而在体内效果不明显，分析可能与在动物实验中阿斯匹林、阿斯匹林镁应用的剂量有关。
, 百拇医药
整合素Ⅱb/Ⅲa，主要存在于血小板表面，当血小板活化后，整合素Ⅱb/Ⅲa的构型发生改变，与纤维蛋白原结合而引起血小板聚集[10]。RD的主要作用是与血小板表面已激活的整合素Ⅱb/Ⅲa结合，从而抑制整合素Ⅱb/Ⅲa与纤维蛋白原结合，这与一般抗血小板药物的机理是不一致的。无论肿瘤细胞从何种途径引起血小板聚集，或是一种肿瘤细胞经几种途径聚集血小板，最终途径是一致的，均为血小板表面整合素Ⅱb/Ⅲa激活。应用RD抑制血小板的聚集，减少肿瘤转移的形成，可能较其他抗血栓药物抗肿瘤转移的作用更为广泛和彻底。本实验研究结果发现RD能显著延长涎腺腺样囊性癌实验性肺转移动物的生存期，可能是由于药物的作用延缓了实验动物发生肺转移的时间,具有一定的抗转移作用。RD无多肽类药物可能存在的免疫原性，毒副作用小,可口服，适于长期用药，但临床上具体的用药方案，仍值得进一步研究。
基金项目：本课题受国家自然科学基金(39270723)资助
[参考文献]
, 百拇医药
1，Oleksowicz L, Mrowiec Z, Schwartz E, et al. Characterization of tumor-induced platelet aggregation： the role of immunorelated GPIb and GPⅡ b/Ⅲ a expression by MCF-7 breast cancer cells [J]. Thromb Res， 1995 , 79(3)： 261～ 274.
2，Nierodzik ML, Klepfish A, Karpatkin S. Role of platelets,thrombin, integrinⅡ b-Ⅲ a, fibronectin and von Willebrand factors on tumor adhesion in vitro and metastasis in vivo [J]. Thromb Haemost， 1995, 74(1)： 282～ 290.
, 百拇医药
3，关晓峰，邱蔚六，何荣根，等.肺高转移性涎腺腺样囊性癌细胞株的筛选[J].中华口腔医学杂志，1996，31(2)：74～76.
4，李盛琳，刘绣屏，章魁华.人涎腺腺样囊性癌(SACC-83)细胞系的建立及其生物学特性[J].中华口腔医学杂志，1990,25(1)：29～31.
5，Chiang HS, Yang RS, Huang TF. The Arg-Gly-Asp-containing peptide, rhodostomin, inhibits in vitro cell adhesion to extracellular matrices and platelet aggregation caused by Saos-2 human osteosarcoma cells [J]. Br J Cancer， 1995,71(2)： 265～270.
6，Karpatkin S, Pearlstein E, Ambrogio C, et al. Role of adhesive protein in platelet tumor interaction in vitro and metastasis formation in vivo [J]. J Clin Invest， 1988,81： 1012～ 1019.
, 百拇医药
7，Fabra A, de Castellarnau C, Carretero F,et al. Effects of ticlopidine on metastasis production in mice bearing Lewis lung carcinoma [J]. Invasion Metastasis， 1987,7(1)： 53～ 60.
8，Wood SJr, Hilgard P. Aspirin and tumor metastasis [J]. Lancet， 1972,2： 1416～ 1417.
9，Gasic GJ, Gasic TB,Galanti N, et al. Platelet-tumor cell interactions in mice. The role of platelet in the spread of malignant disease [J]. Int J Cancer， 1973,11： 704～ 718.
10，Hynes RO. Integrins： versatility, modulation, and signaling in cell adhesion [J]. Cell， 1992,69(1)： 11～25.
收稿日期：1999-07-13；修回日期：2000-01-28, http://www.100md.com
单位：李凤和 俞光岩 李盛琳 傅嘉(北京医科大学口腔医学院口腔颌面外科研究室，北京100081)；彭师奇(北京医科大学药学院中德实验室，北京100083)
关键词：涎腺腺样囊性癌；整合素Ⅱb/Ⅲa；血小板；肿瘤转移；裸小鼠
癌症000510
【摘要】目的：探讨涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma ,SACC)转移与SACC细胞-血小板粘附的关系，观察整合素Ⅱb/Ⅲa抑制剂抗SACC转移的作用。方法：体外实验观察高转移潜能的SACC-LM细胞、非高转移潜能的SACC-83细胞与血小板的粘附，阿斯匹林、阿斯匹林镁、精氨酸-天冬氨酸(arginina-aspartate,RD)对SACC-LM细胞与血小板粘附的影响；动物实验观察阿斯匹林、阿斯匹林镁、RD对SACC-LM细胞实验性肺转移的作用。结果：SACC-LM细胞与SACC-83细胞相比和血小板的粘附增高，阿斯匹林、阿斯匹林镁、RD在1，5，25μg/ml时抑制血小板与SACC-LM细胞的粘附，RD能抑制SACC-LM实验性肺转移的形成。结论：SACC的转移与血小板-肿瘤细胞的粘附有关，RD能明显抑制SACC的转移。
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中图分类号：R782.7；R73-37文献标识码：A文章编号：1000-467X(2000)05-0429-03
Antimetastatic effect of integrinⅡb/Ⅲa inhibitors on salivary adenoid cystic carcinoma
LI Feng-he, YU Guang-yan, LI Sheng-lin, et al.
(Department of Oral Maxillofacial Surgery, College of Stomatology, Beijing Medical University, Beijing 100083， P.R.China)
【 Abstract】 Objectives： To Study the relationship between metastatic potential of salivary adenoid cystic carcinoma (SACC)and tumor cell-platelet adhesion,and to evaluate antimetastatic effect of integrin Ⅱ b/Ⅲ a inhibitor on SACC. Methods： Tumor cell-platelet adhesion of highly metastatic SACC-LM, non-metastatic SACC-83 and effect of aspirin, arginine-aspartate ( RD) , magnesium acetylsalicylate on adhesion were studied in vitro. Antimetastatic effect of aspirin, RD， magnesium acetysalicylate on experimental metastasis of SACC was observed in vivo. Results： The tumor cell-platelet adhesion was significant in SACC-LM than in SACC-83； aspirin, RD, magnesium acetylsalicylate inhibitet the adhesion of SACC-LM in the final concentration of 1, 5 ,25 μ g/ml respectively. RD inhibited experimental metastasis of SACC. Conclusion： Metastasis of SACC is related to platelet-tumor cell adhesion, and RD can inhibit metastasis of SACC.
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Key words： Salivary adenoid cystic carcinoma; Integrin Ⅱ b/Ⅲ a; Platelet; Neoplasm metastasis; Nude mice
近年来的研究发现肿瘤细胞具有聚集血小板的能力，血小板-肿瘤细胞的粘附有助于肿瘤的血行转移，这种作用主要是由整合素Ⅱb/Ⅲa介导的[1,2]。涎腺腺样囊性癌是一种常见的涎腺恶性肿瘤，易通过血行发生远处转移，体外实验证明其肿瘤细胞与血小板的粘附能力与肿瘤细胞转移能力一致[3]。本文观察了不同转移能力的涎腺腺样囊性癌细胞与血小板的粘附能力，整合素Ⅱb/Ⅲa抑制剂体外对高转移性涎腺腺样囊性癌细胞-血小板粘附、体内对高转移涎腺腺样囊性癌细胞实验性肺转移形成的作用，以期为涎腺腺样囊性癌的抗转移治疗提供实验依据。
1材料和方法
1.1动物
, http://www.100md.com
BAB/C裸小鼠，雌性，四周龄，由中国医学科学院动物所提供,无特定病原体(SPF)条件下饲养。
1.2细胞
人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83[4]以及由此筛选的人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞系SACC-LM(北京医科大学口腔医学院口腔颌面外科研究室)，用RPMI1640+15%小牛血清+双抗(青霉素100u/ml，链霉素100mg/ml)，于37℃5%CO2条件下培养，传代消化用0.125胰酶/0.1%EDTA。取指数生长期的肿瘤细胞进行实验。
1.3药物
阿斯匹林(商品名巴米尔)，中国无锡阿斯特拉制药有限公司产品；阿斯匹林镁、精氨酸-天冬氨酸(arginine-aspartate,RD)，北京医科大学药学院中德实验室设计、合成。
, 百拇医药
1.4肿瘤细胞-血小板粘附
选择两周内无阿斯匹林等抗血小板药物用药史的健康成年人，抽取静脉血，肝素抗凝(最终浓度1IU/ml)，室温下离心，120g,10分钟，制备富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)；500g,10分钟,制备乏血小板血浆(platelet poor plasma,PPP),用PPP调整PRP血小板数至2×108/ml[5]。将PRP加入24孔细胞培养板中，每孔0.1ml,然后分别加入SACC-83,SACC-LM细胞悬液0.2ml(2×105个细胞)，另设不加PRP孔作对照孔，培养板置于37℃5%CO2培养箱中孵育，分别于30、60、90、120分钟后取出，D-Hank's液轻洗二遍，去除未粘附细胞，0.125胰酶/0.1%EDTA消化后人工计数粘附细胞，计算粘附率[粘附率=粘附细胞总数/(2×105)×100%]，所有实验均做3个平行孔，实验结果进行t检验。
观察药物的作用时，于加入SACC-LM细胞悬液前分别加入阿斯匹林、阿斯匹林镁、RD，最终浓度分别为1,5,25μg/ml,孵育时间为90分钟，其余同上。
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1.5动物实验
四周龄雌性裸鼠随机分为四组，分作如下处理：A组：空白对照组，接种瘤细胞前后不作任何处理；B组：接种瘤细胞前2天至接种后7天，RD30mg/kg，每日灌胃一次；C组：接种瘤细胞前2天至接种后7天，阿斯匹林镁30mg/kg，每日灌胃一次；D组：接种瘤细胞前2天至接种后7天，阿斯匹林30mg/kg，每日灌胃一次。造成涎腺腺样囊性癌实验性肺转移模型的方法为：无血清RPMI1640制成SACC-LM细胞悬液(5×106/ml)，0.2ml/只注入裸小鼠尾静脉。动物于濒死前期处死，所有动物肺组织均进行组织学检查。生存期进行t检验。
2结果
2.1不同转移能力涎腺腺样囊性癌细胞与血小板的粘附
结果见表1，血小板在不同时间均能促进SACC-83、SACC-LM细胞的粘附(P<0.05),尤以孵育90分钟时作用明显。在血小板存在的情况下，SACCLM于30分钟、60分钟时的粘附强于SACC83的粘附(P<0.05)，在无血小板存在的情况下，SACCLM于60分钟、90分钟时的粘附不如SACC83的粘附(P<0.05)。
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表1 SACC-83,SACC-LM细胞与血小板的粘附(%,
±s) 分组时间(分)
30
60
90
120
SACC-83
对照
5.7±1.6
15.5±3.5
30.7±2.0
, 百拇医药
45.5±4.1
PRP
15.3±2.8
25.5±2.6
78.3±4.5
84.2±2.6
SACC-LM
对照
3.8±1.0
9.7±0.8
20.0±2.8
41.8±4.3
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PRP
31.3±2.5
42.7±4.7
80.0±7.2
84.7±2.6
2.2药物对SACC-LM细胞与血小板粘附的影响
选择孵育90分钟的条件观察药物对SACC-LM和血小板粘附的影响。SACC-LM的粘附率为80.0%±7.2%,与此相比，RD、阿斯匹林镁、阿斯匹林在1,5,25μg/ml时均能抑制SACC-LM细胞与血小板的粘附(P<0.05)(见表2);阿斯匹林镁在高浓度时(25μg/ml,与1μg/ml相比)抗血小板肿瘤细胞粘附的作用明显(P<0.05),其余药物在不同浓度之间对粘附影响的差异不显著(0.05)。表2不同药物作用下SACC-LM细胞与血小板的粘附率(%，
±s) 药物, http://www.100md.com
不同药物浓度(μg/ml)的粘附率
1
5
25
RD
39.2±5.2
35.3±2.0
32.7±2.0
阿斯匹林镁
46.2±6.2
33.8±3.2
31.8±1.0
, 百拇医药
阿斯匹林
33.8±2.5
32.8±1.8
30.7±4.3
2.3药物对SACC-LM实验性肺转移形成的影响
结果见表3，RD、阿斯匹林镁组生存期明显长于对照组(P<0.05)，但阿斯匹林镁组与对照组相比生存期延长幅度未达到25%，因此只有RD能明显延长涎腺腺样囊性癌实验性肺转移动物的生存期,阿斯匹林组与对照组相比生存期差异不明显(0.05)。表3 不同处理组动物的生存期(天,
±s) 分组n
生存期
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P
对照
9
43.56±4.95
RD
8
53.88±12.65
0.015
阿斯匹林镁
8
53.88±6.92
0.006
阿斯匹林
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9
50.11±10.91
0.099
3讨论
3.1肿瘤细胞聚集血小板的机理
不同肿瘤细胞聚集血小板的机理不完全相同，以往的研究表明肿瘤细胞聚集血小板的途径有凝血酶、ADP、5-HT、花生四烯酸等的参与[1,2]，但最终途径均为血小板表面整合素Ⅱb/Ⅲa激活，与纤维蛋白原结合。阿斯匹林的作用是抑制花生四烯酸的代谢,减少血栓烷素的形成。本研究发现阿斯匹林、阿斯匹林镁能抑制SACC-LM细胞与血小板的粘附，这说明SACC-LM细胞聚集血小板的途径与花生四烯酸有关。
3.2肿瘤细胞转移能力与聚集血小板能力的关系
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血小板在肿瘤的血行转移中作用明显，血小板瘤栓的形成有利于减少肿瘤细胞在血运的破坏，增加靶器官对肿瘤细胞的捕获[2]。涎腺腺样囊性癌以血行转移为主，其转移与血小板有关[3]。本实验研究发现SACC-LM在60分钟、90分钟时的粘附低于SACC-83，加入PRP后，SACC-LM在30,60分钟时的粘附高于SACC-83的粘附，这说明SACC-LM聚集血小板的能力强于SACC-83，高转移潜能的肿瘤细胞聚集血小板的能力较强，这与以往的研究结果是一致的[3]。这一结果提示,使用药物抑制血小板聚集,可能是控制涎腺腺样囊性癌血行转移的一条途径。
3.3药物的作用
肿瘤血行转移与血小板的关系是比较肯定的，但是应用抗血小板药物抗肿瘤转移的研究结果并不一致,尤其是阿斯匹林的作用[6～9]，可能与实验条件、应用剂量不一致有关。在本实验中，阿斯匹林、阿斯匹林镁体外作用明显，而在体内效果不明显，分析可能与在动物实验中阿斯匹林、阿斯匹林镁应用的剂量有关。
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整合素Ⅱb/Ⅲa，主要存在于血小板表面，当血小板活化后，整合素Ⅱb/Ⅲa的构型发生改变，与纤维蛋白原结合而引起血小板聚集[10]。RD的主要作用是与血小板表面已激活的整合素Ⅱb/Ⅲa结合，从而抑制整合素Ⅱb/Ⅲa与纤维蛋白原结合，这与一般抗血小板药物的机理是不一致的。无论肿瘤细胞从何种途径引起血小板聚集，或是一种肿瘤细胞经几种途径聚集血小板，最终途径是一致的，均为血小板表面整合素Ⅱb/Ⅲa激活。应用RD抑制血小板的聚集，减少肿瘤转移的形成，可能较其他抗血栓药物抗肿瘤转移的作用更为广泛和彻底。本实验研究结果发现RD能显著延长涎腺腺样囊性癌实验性肺转移动物的生存期，可能是由于药物的作用延缓了实验动物发生肺转移的时间,具有一定的抗转移作用。RD无多肽类药物可能存在的免疫原性，毒副作用小,可口服，适于长期用药，但临床上具体的用药方案，仍值得进一步研究。
基金项目：本课题受国家自然科学基金(39270723)资助
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收稿日期：1999-07-13；修回日期：2000-01-28, http://www.100md.com