茯苓对家兔模型SIL-2R、IL-2、TNF-α的影响
作者：张淑萍 李雅玲 王毅军 郑芳 舒桂明 杜智
单位：天津市第三中心医院 300170
关键词：茯苓；TNF-α；SIL-2R；IL-2
中草药000523摘 要 观察茯苓对家兔Ⅲ型变态反应模型制模前、后或制模过程中对可溶性白细胞介素-2受体 (SIL-2R)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。采用sc正常马血清的方法、建立Ⅲ型变态反应模型，分别于制模过程中或制模后连续ig，并间断取血测定SIL-2R、IL-2、TNF-α。结果制模后给药组SIL-2R下降 (P<0.01)，IL-2上升(P<0.05)，TNF-α下降(P<0.01)；边制模边给药组SIL-2R下降(P<0.01)，IL-2上升(P>0.05)，TNF-α下降(P>0.01)。提示茯苓对Ⅲ型变态反应中SIL-2R、TNF-α有抑制作用，对SIL-2R、IL-2有调节作用。
, 百拇医药
茯苓为利水渗湿类药，参与免疫调节的报道很多[1]，但单独用药调节免疫因子报道甚少。为了观察茯苓对Ⅲ型变态反应模型形成过程及形成后可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、白细胞介素-2(IL-2)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化，我们采用制模后或边制模边ig的方法分别取血测定SIL-2R、IL-2和TNF-α。
1 材料与方法
1.1 实验动物：选正常家兔40只，雄性，大于120 d，体重(2.4±0.5) kg。
1.2 制模方法：采用正常马血清sc建立Ⅲ型变态反应模型[2]，每只家兔sc正常马血清2 mL，每隔4 d注射1次，共5次，于第5次注射后7 d，皮内注射正常马血清0.2 mL发敏，3 h后观察局部反应，水肿面积>600 mm2为模型成功。
, 百拇医药
1.3 药物：茯苓Poria cocos (Schw.)，由天津市饮片厂提供，常规煎药，制成汤剂，过滤、浓缩、每毫升含生药1 g(1 g/mL)。
1.4 用药方法：预实验证实每次灌服7 g生药为最佳剂量。因此实验剂量定为7 mL(含生药7 g)。4组均采用ig给药，(1)制模后灌药对照组于制成模型后，每日ig生理盐水7 mL，共25 d。(2)制模后灌药组：制成模型后，每日ig给药7 mL(含生药7 g)，共25 d。(3)边制模边灌药对照组：从注射马血清第1天起，每日ig生理盐水7 mL，至马血清最后1次注射共25 d。(4)边制模边灌药组：从注射马血清第1天起，每日ig给药7 mL(含生药7 g)，共25 d。
1.5 检测方法：实验结束后第1天即第26天早取血测定观察指标。SIL-2R：采用ELISA双抗体夹心法(测试盒由北京军事医学科学院基础所提供)。IL-2、TNF-α均采用ELISA双抗体夹心法(试剂盒由第四军医大学免疫室提供)。实验结果均用美国MRX-Ⅱ酶标仪检测。
, http://www.100md.com
1.6 数据处理：实验数据经计算机处理。采用student't检验，数值以
±s表示。
2 实验结果
实验结果见表1～3。
从表1中可以看出两组家兔制模前及制模用药前SIL-2R、IL-2、TNF-α均无差异(P>0.05)，茯苓灌药组ig给药后SIL-2R低于对照组(P<0.01)，IL-2高于对照组(P<0.05)，TNF-α低于对照组(P<0.01)。
从表2中可以看出边制模边灌药组ig给药后SIL-2R明显低于对照组(P<0.01)，TNF-α也明显低于对照组(P<0.01)，IL-2则变化不大(P>0.05)。
从表3中可以看出，边制模边灌药的方法对3种因子的影响较制模后给药组大。
, 百拇医药
3 讨论
大量研究表明，SIL-2R在血液和其它液体中水平的变化与临床疾病如恶性肿瘤、自身免疫病、炎症、病毒感染等病程密切相关，可作为某些疾病的辅助诊断、病情变化及预后的判断指标之一[3]。从实验结果看，家兔Ⅲ型变态反应形成后，SIL-2R上升(P<0.01)，说明SIL-2R参与Ⅲ变态反应。制模后灌药和边制模边灌药均使SIL-2R下降，较对照组差异明显(P<0.01)。说明中药茯苓对SIL-2R有抑制作用，边制模边灌药作用好于制模后灌药，但不能
表1 制模后灌药组SIL-2R、IL-2、TNF-α的变化(±s) 组别
例
制模前
, 百拇医药 制模后灌药前
灌药后
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
, http://www.100md.com
(pg/mL)
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
对照组
10
137.21
±0.45
97.47
±0.93
, http://www.100md.com
63.46
±0.78
475.39
±0.53△
64.25
±0.88△
265.31
±0.80△
480.11
±0.67
65.97
±0.81
, http://www.100md.com
267.07
±0.51
灌药组
10
135.33
±0.57
98.30
±0.85
65.27
±0.83
483.21
±0.66△
, 百拇医药 65.37
±0.91△
273.25
±0.90△
234.17
±0.73○
84.35
±0.87○
135.17
±0.84○
与对照组比较：P<0.05 P<0.01； 制模后灌药前与制模前比较：△P<0.05； 灌药后与制模后灌药前比较：○P<0.05使其降至制模前，它不能完全抑制SIL-2R的上升。
, 百拇医药
表2 边制模边灌药SIL-2R、IL-2、TNF-α的变化(±s) 组别
例
制模前
边制模边灌药后
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
SIL-2R
, 百拇医药
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
对照组
10
234.47±0.83
90.07±0.47
61.27±0.91
473.57±0.88
67.21±0.43
, 百拇医药
273.35±0.67
灌药组
10
136.21±0.75
95.50±0.80
64.13±0.98
175.30±0.57
73.07±0.89
94.47±0.97
与对照组比较：P<0.05 P<0.01表3 两个灌药组灌药后SIL-2R、IL-2、TNF-α的比较(±s) 组别
, 百拇医药
例
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
制模后灌药组
10
234.17±0.73
84.35±0.87
135.17±0.84
, http://www.100md.com
边制模边灌药组
10
175.30±0.51
73.07±0.89
94.47±0.97
与制模后灌药组比较：P<0.05 P<0.01
IL-2是一种由淋巴细胞在抗原及有丝分裂原刺激下分泌的重要淋巴因子，具有促进T细胞生长、增殖和化合成具有各种功能的T细胞亚群，增强自然杀伤细胞(NK)活性，促进淋巴细胞分泌干扰素等作用，而SIL-2R与IL-2介导的各种免疫反应又是密切不可分的。它既是由白细胞介素-2诱导产生的，同时又作为一种低亲和力受体通过与细胞膜白介素-2受体(MIL-2R)竞争结合IL-2，起着一种封闭因子的作用，中和活化T细胞周围的IL-2[4]。从本实验结果看，两种方法给药后均可使IL-2不同程度升高(P<0.05)，说明茯苓对IL-2有作用，SIL-2R的变化也影响到IL-2，茯苓和SIL-2R对IL-2的作用大小，有待于进一步研究，也有学者报道SIL-2R与IL-2的变化为某些疾病的重要指标，是免疫调控还是免疫损害，目前尚不清楚[5]。
, 百拇医药
肿瘤坏死因子分为TNF-α和TNF-β，两者分别由激活的巨噬细胞和T淋巴细胞产生，具有杀伤肿瘤细胞，诱导细胞增殖等多种免疫效应，适量的TNF-α介导的免疫反应对肌体具有保护作用，过量TNF则会引起肌体损伤[6]。从本实验结果看，TNF-α在对照组制模后明显升高，说明TNF-α参与Ⅲ变态反应。两种方法用药后，TNF-α均下降，以边制模边用药效果好。
从整个实验中可以看出，茯苓对SIL-2R、IL-2、TNF-α均有调节作用，以边制模边用药效果最佳，服药的方法以早期用药为好。它与SIL-2R、IL-2、TNF-α之间的关系还有待于进一步研究。
Address: Z hang Shuping, Tianjin the Third Centre Hospital, Tianjin
张淑萍 女，1976年毕业于天津中医学校，1998年毕业于天津中医学院。现为天津第三中心 医院肝胆外科中医主治医师。自1979年至今一直从事肝胆科的临床工作。“中西 医结合治疗难治性黄疸为局级科研课题“，取得”“成果奖”，其中研制的“利胆膏”于治 疗硬化性胆管炎取得疗效。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，贪允育，等.北京中医药大学学报，1994，17(2)：28
2，赵 琳，等.中国实验临床免疫学杂志，1995，7(3)：41
3，张剑平，等.中国实验临床免疫学杂志，1997，9(1)：60
4，于文彬，等.中国实验临床免疫学杂志，1996，8(1)：17
5，张进友，等.免疫学杂志，1994，10(3)：175
6，张晓京，等.上海免疫学杂志，1995，15(3)：189
收稿2000-01-06, 百拇医药
单位：天津市第三中心医院 300170
关键词：茯苓；TNF-α；SIL-2R；IL-2
中草药000523摘 要 观察茯苓对家兔Ⅲ型变态反应模型制模前、后或制模过程中对可溶性白细胞介素-2受体 (SIL-2R)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。采用sc正常马血清的方法、建立Ⅲ型变态反应模型，分别于制模过程中或制模后连续ig，并间断取血测定SIL-2R、IL-2、TNF-α。结果制模后给药组SIL-2R下降 (P<0.01)，IL-2上升(P<0.05)，TNF-α下降(P<0.01)；边制模边给药组SIL-2R下降(P<0.01)，IL-2上升(P>0.05)，TNF-α下降(P>0.01)。提示茯苓对Ⅲ型变态反应中SIL-2R、TNF-α有抑制作用，对SIL-2R、IL-2有调节作用。
, 百拇医药
茯苓为利水渗湿类药，参与免疫调节的报道很多[1]，但单独用药调节免疫因子报道甚少。为了观察茯苓对Ⅲ型变态反应模型形成过程及形成后可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、白细胞介素-2(IL-2)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化，我们采用制模后或边制模边ig的方法分别取血测定SIL-2R、IL-2和TNF-α。
1 材料与方法
1.1 实验动物：选正常家兔40只，雄性，大于120 d，体重(2.4±0.5) kg。
1.2 制模方法：采用正常马血清sc建立Ⅲ型变态反应模型[2]，每只家兔sc正常马血清2 mL，每隔4 d注射1次，共5次，于第5次注射后7 d，皮内注射正常马血清0.2 mL发敏，3 h后观察局部反应，水肿面积>600 mm2为模型成功。
, 百拇医药
1.3 药物：茯苓Poria cocos (Schw.)，由天津市饮片厂提供，常规煎药，制成汤剂，过滤、浓缩、每毫升含生药1 g(1 g/mL)。
1.4 用药方法：预实验证实每次灌服7 g生药为最佳剂量。因此实验剂量定为7 mL(含生药7 g)。4组均采用ig给药，(1)制模后灌药对照组于制成模型后，每日ig生理盐水7 mL，共25 d。(2)制模后灌药组：制成模型后，每日ig给药7 mL(含生药7 g)，共25 d。(3)边制模边灌药对照组：从注射马血清第1天起，每日ig生理盐水7 mL，至马血清最后1次注射共25 d。(4)边制模边灌药组：从注射马血清第1天起，每日ig给药7 mL(含生药7 g)，共25 d。
1.5 检测方法：实验结束后第1天即第26天早取血测定观察指标。SIL-2R：采用ELISA双抗体夹心法(测试盒由北京军事医学科学院基础所提供)。IL-2、TNF-α均采用ELISA双抗体夹心法(试剂盒由第四军医大学免疫室提供)。实验结果均用美国MRX-Ⅱ酶标仪检测。
, http://www.100md.com
1.6 数据处理：实验数据经计算机处理。采用student't检验，数值以
±s表示。2 实验结果
实验结果见表1～3。
从表1中可以看出两组家兔制模前及制模用药前SIL-2R、IL-2、TNF-α均无差异(P>0.05)，茯苓灌药组ig给药后SIL-2R低于对照组(P<0.01)，IL-2高于对照组(P<0.05)，TNF-α低于对照组(P<0.01)。
从表2中可以看出边制模边灌药组ig给药后SIL-2R明显低于对照组(P<0.01)，TNF-α也明显低于对照组(P<0.01)，IL-2则变化不大(P>0.05)。
从表3中可以看出，边制模边灌药的方法对3种因子的影响较制模后给药组大。
, 百拇医药
3 讨论
大量研究表明，SIL-2R在血液和其它液体中水平的变化与临床疾病如恶性肿瘤、自身免疫病、炎症、病毒感染等病程密切相关，可作为某些疾病的辅助诊断、病情变化及预后的判断指标之一[3]。从实验结果看，家兔Ⅲ型变态反应形成后，SIL-2R上升(P<0.01)，说明SIL-2R参与Ⅲ变态反应。制模后灌药和边制模边灌药均使SIL-2R下降，较对照组差异明显(P<0.01)。说明中药茯苓对SIL-2R有抑制作用，边制模边灌药作用好于制模后灌药，但不能
表1 制模后灌药组SIL-2R、IL-2、TNF-α的变化(
±s) 组别例
制模前
, 百拇医药 制模后灌药前
灌药后
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
, http://www.100md.com
(pg/mL)
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
对照组
10
137.21
±0.45
97.47
±0.93
, http://www.100md.com
63.46
±0.78
475.39
±0.53△
64.25
±0.88△
265.31
±0.80△
480.11
±0.67
65.97
±0.81
, http://www.100md.com
267.07
±0.51
灌药组
10
135.33
±0.57
98.30
±0.85
65.27
±0.83
483.21
±0.66△
, 百拇医药 65.37
±0.91△
273.25
±0.90△
234.17
±0.73○
84.35
±0.87○
135.17
±0.84○
与对照组比较：P<0.05 P<0.01； 制模后灌药前与制模前比较：△P<0.05； 灌药后与制模后灌药前比较：○P<0.05使其降至制模前，它不能完全抑制SIL-2R的上升。
, 百拇医药
表2 边制模边灌药SIL-2R、IL-2、TNF-α的变化(
±s) 组别例
制模前
边制模边灌药后
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
SIL-2R
, 百拇医药
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
对照组
10
234.47±0.83
90.07±0.47
61.27±0.91
473.57±0.88
67.21±0.43
, 百拇医药
273.35±0.67
灌药组
10
136.21±0.75
95.50±0.80
64.13±0.98
175.30±0.57
73.07±0.89
94.47±0.97
与对照组比较：P<0.05 P<0.01表3 两个灌药组灌药后SIL-2R、IL-2、TNF-α的比较(
±s) 组别, 百拇医药
例
SIL-2R
(U/mL)
IL-2
(pg/mL)
TNF-α
(pg/mL)
制模后灌药组
10
234.17±0.73
84.35±0.87
135.17±0.84
, http://www.100md.com
边制模边灌药组
10
175.30±0.51
73.07±0.89
94.47±0.97
与制模后灌药组比较：P<0.05 P<0.01
IL-2是一种由淋巴细胞在抗原及有丝分裂原刺激下分泌的重要淋巴因子，具有促进T细胞生长、增殖和化合成具有各种功能的T细胞亚群，增强自然杀伤细胞(NK)活性，促进淋巴细胞分泌干扰素等作用，而SIL-2R与IL-2介导的各种免疫反应又是密切不可分的。它既是由白细胞介素-2诱导产生的，同时又作为一种低亲和力受体通过与细胞膜白介素-2受体(MIL-2R)竞争结合IL-2，起着一种封闭因子的作用，中和活化T细胞周围的IL-2[4]。从本实验结果看，两种方法给药后均可使IL-2不同程度升高(P<0.05)，说明茯苓对IL-2有作用，SIL-2R的变化也影响到IL-2，茯苓和SIL-2R对IL-2的作用大小，有待于进一步研究，也有学者报道SIL-2R与IL-2的变化为某些疾病的重要指标，是免疫调控还是免疫损害，目前尚不清楚[5]。
, 百拇医药
肿瘤坏死因子分为TNF-α和TNF-β，两者分别由激活的巨噬细胞和T淋巴细胞产生，具有杀伤肿瘤细胞，诱导细胞增殖等多种免疫效应，适量的TNF-α介导的免疫反应对肌体具有保护作用，过量TNF则会引起肌体损伤[6]。从本实验结果看，TNF-α在对照组制模后明显升高，说明TNF-α参与Ⅲ变态反应。两种方法用药后，TNF-α均下降，以边制模边用药效果好。
从整个实验中可以看出，茯苓对SIL-2R、IL-2、TNF-α均有调节作用，以边制模边用药效果最佳，服药的方法以早期用药为好。它与SIL-2R、IL-2、TNF-α之间的关系还有待于进一步研究。
Address: Z hang Shuping, Tianjin the Third Centre Hospital, Tianjin
张淑萍 女，1976年毕业于天津中医学校，1998年毕业于天津中医学院。现为天津第三中心 医院肝胆外科中医主治医师。自1979年至今一直从事肝胆科的临床工作。“中西 医结合治疗难治性黄疸为局级科研课题“，取得”“成果奖”，其中研制的“利胆膏”于治 疗硬化性胆管炎取得疗效。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，贪允育，等.北京中医药大学学报，1994，17(2)：28
2，赵 琳，等.中国实验临床免疫学杂志，1995，7(3)：41
3，张剑平，等.中国实验临床免疫学杂志，1997，9(1)：60
4，于文彬，等.中国实验临床免疫学杂志，1996，8(1)：17
5，张进友，等.免疫学杂志，1994，10(3)：175
6，张晓京，等.上海免疫学杂志，1995，15(3)：189
收稿2000-01-06, 百拇医药