化疗加G-CSF和GM-CSF联合动员自体外周血干细胞
作者：崔秀珍 邵莹 任宝柱 佟仲生 任秀宝 李丽庆 张执萍 张乃宁 戴荣增 郝希山
单位：300060 天津医科大学肿瘤医院、肿瘤研究所
关键词：化学疗法；粒细胞集落刺激因子；粒-巨噬细胞集落刺激因子；造血干细胞
中华血液学杂志000506 【摘要】 目的 探讨化疗加粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)联合动员自体外周血干细胞(APBSC)的效果。方法 卡铂(CBP)350mg/m2，第1天静滴；足叶乙甙(Vp16)350mg/m2，第1～第3天静滴；白细胞降至最低点又回升到(2.4～6.4)×109/L时，皮下注射G-CSF 5μg.kg-1.d-1(早6∶00)+GM-CSF 5μg.kg-1.d-1(晚6∶00)+地塞米松5mg/d(采集日10mg/d)直到采集结束前1天；白细胞上升到(29.80±5.98)×109/L，开始用CS3000 plus血细胞分离机连续2d采集APBSC。结果 20例患者连续采集APBSC 2次，共采集到MNC(5.93±1.62)×108/kg，CD34+细胞(23.10±11.53)×106/kg，CFU-GM(3.44±2.85)×105/kg。无严重不良反应。9例10次自体外周血干细胞移植(APBSCT)造血功能均获满意重建。结论 以化疗联合G-CSF和GM-CSF能高效、安全地动员APBSC,1次动员采集2次可满足1～2次的APBSCT。
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Mobilization of autologous peripheral blood stem cells by chemotherapy and recombinant granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF)
CUI Xiu-zhen,SHAO Ying,REN Baozhu,et al.
(Cancer Institute and Hospital,Tianjin Medical College，Tianjin 300060,China)
【Abstract】 Objective To observe the efficacy of chemotherapy and recombinant granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF,Glycosylated)and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF) in autologous peripheral blood stem cells(APBSC) mobilization.Methods The mobilization regimen:CBP 350mg/m2 intravenously injected at day 1,Vp16 350mg/m2 intravenously injected from day 1 to day 3.G-CSF and GM-CSF 5μg*kg-1*d-1 each,subcutaneously injected and DXM 5mg/d intramuscularly injected,from the day of white blood cell(WBC) recovery to (2.4～6.4)×109/L from nadir to the day before the end of APBSC harvesting.APBSC harvesting started when WBC>20.0×109/L and ended when accumulated mononuclear cells (MNC)>5×108/kg.CFU-GM assay and CD34+ cells counting of the APBSC were performed.Results Twenty cases underwent APBSC mobilization.APBSC harvest began at day 22.15±3.66 for two successive days.Accumulated MNC was (5.93±1.62)×108/kg,CD34+ cells (23.10±11.53)×106/kg and CFU-GM (3.44±2.85)×105/kg.No severe toxicity was observed.Hematopoiesis was well reconstituted in 8 patients received single and in 1 patient received double APBSC transplantations.Conclusion Chemotherapy combined with G-CSF+GM-CSF was a safe and highly effective method for APBSC mobilization.
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【Key words】 Chemotherapy; Granulocyte colony-stimulating factor; Granulocyte-macrophage colony stimulating factor; Peripheral blood stem cell
目前动员外周血干细胞(PBSC)的方法有单用化疗[1]、单用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)[2]及化疗+G-CSF或化疗+GM-CSF[1,3,4]，效果肯定。1997年7月～1999年1月，我们以化疗联合G-CSF和GM-CSF动员、采集20例恶性实体瘤患者自体外周血干细胞(APBSC)获得良好结果，报告如下。
病例和方法
1 病例 恶性实体瘤患者20例，男11例，女9例，中位年龄37(24～53)岁，非霍奇金淋巴瘤(NHL)8例，霍奇金病3例，乳腺癌6例，纵隔生殖细胞癌1例，卵巢癌1例，胚胎性横纹肌肉瘤1例。患者均经常规诱导化疗达到或接近完全缓解，骨髓涂片细胞学检查无肿瘤细胞侵润，或虽有侵润但经诱导化疗后骨髓细胞分类正常，贫血和血小板不正常者，给予治疗后，待血象正常时方可开始动员。心、肺、肝、肾等主要脏器功能正常。
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2 APBSC动员方案 除2例NHL患者化疗采用EA方案[足叶乙甙(Vp16) 350mg/m2(第1～第3天)+阿糖胞苷(Ara-C)1g/d(共3d)]，1例乳腺癌采用CAF方案[环磷酰胺(CTX) 750mg/m2，第1天；阿霉素(ADM) 50mg/m2，第1天；氟尿嘧啶(5-FU)300mg.m-2.d-1，共5d]外，其余病例均采用CE方案[卡铂(CBP)350mg/m2，第1天静滴；Vp16 350mg/m2，第1～第3天静滴]；当白细胞降至最低点又回升至(2.4～6.4)×109/L时，开始皮下注射G-CSF(日本中外制药株式会社产品， 5μg.kg-1.d-1，早6∶00)+GM-CSF(先灵葆雅有限公司生产，5μg.kg-1.d-1，晚 6∶00)+地塞米松(5.0mg/d，采集日10mg/d)到采集结束前1天。
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3 APBSC采集及冻存 白细胞上升到>20.0×109/L，CD34+细胞≥1%时，用CS3000 plus血细胞分离机行外周血单个核细胞(MNC)分离，循环血量每次10～18L,将分离的MNC进行细胞计数、涂片、分类，分离的MNC中加入二甲基亚砜，经程控降温仪逐渐降温后，冻存于-196℃液氮中,冻存前检测CFU-GM和CD34+细胞。
4 造血祖细胞培养 CFU-GM按常规方法在CO2孵箱中培养14d。在倒置显微镜下计数集落(CFU-GM≥40个细胞为1个集落单位)。
5 CD34+细胞检测 取APBSC液分离MNC，使之与荧光标记的CD34+抗体(丹麦Dako公司)结合，用FACS-440型流式细胞仪(美国BD公司)检测CD34+细胞，分析5×105个细胞，得出 CD34+含量。
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6 动员、采集相关并发症的防治 Hb<100g/L时输入浓缩红细胞，BPC<10×109/L或有出血倾向时输入血小板，采集过程中同时静脉用100g/L葡萄糖酸钙防治低钙血症。
7 预处理方案 9例已行自体外周血干细胞移植(APBSCT)的患者中，6例用BEAM方案[卡氮芥(BCNU)300mg/m2+Vp16 600mg/m2+Ara-C 2g/m2+马法兰(MEL)140mg/m2],其中1例患者又以此方案的2/3剂量行第2次APBSCT，3例用CEC方案[CTX 1200mg/kg+Vp16 600～800mg/m2+CBP 800～1000mg/m2]。
8 APBSC解冻及回输 预处理结束后36～48h回输APBSC，将冷冻袋快速放入42℃水浴中解冻，并行 MNC计数和台盼蓝染色，解冻后检测CFU-GM和CD34+细胞。完成APBSCT者随访至1999年1月。
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结果
1 APBSC动员、采集结果 以CE方案为主的患者化疗后(14.78±2.80)d，白细胞降至最低值(1.90±0.74)×109/L，在停化疗后(18.42±3.64)d，白细胞回升到(3.25±1.30)×109/L时开始用G-CSF+GM-CSF+地塞米松，持续(3.70±0.98)(2.50～5.00)d，在停化疗后(22.15±3.66)d，白细胞达(29.80±5.98)×109/L时开始采集APBSC。每例均连续采集2次。2次采集APBSC数量见表1。
2 APBSC动员相关不良反应 20例患者出现Ⅱ～Ⅲ度(WHO标准)脱发，14例患者血小板降至(60.50±23.85)×109/L。20例患者均有骨骼疼痛(以骨盆为主)，12例患者发热 (37.2～40.0℃)，3例患者胸闷，2例患者恶心、呕吐。
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3 APBSC回输量 已完成APBSCT的9例患者10次移植中，5例6次移植回输了所采集的APBSC总量的1/2，即MNC(2.73～3.64)×108/kg,CD34+细胞(5.90～16.85)×106/kg ，CFU-GM(1.35～4.14)×105/kg。其余4例将采集的APBSC全部回输。
4 移植后造血功能重建 完成APBSCT的9例患者10次移植中白细胞均降到“0”，维持“0”的时间为(4.76±1.20)d，血小板最低水平(19.24±6.48)×109/L。移植后3～4周骨髓穿刺检查造血功能均获满意重建。至随访结束时无造血功能障碍。
讨论
APBSC的动员是APBSCT过程中的关键之一。选择高效低毒的动员方案，掌握动员及采集时机与动员效果有密切关系。动员效果好，不仅减少采集次数，减轻患者痛苦，也降低医疗费用，同时还为多次移植提供条件。
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表1 20例患者APBSC的采集(
±s)
循环血量(ml/kg)
流速(ml/min)
时间(min)
MNC(×108/kg)
CD34+细胞(×106/kg)
CFU-GM(×105/kg)
第1次
232.80±35.53
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75.50±8.14
237.75±28.20
3.08±0.62
11.76±6.59
1.91±1.46
第2次
179.99±48.26
74.38±8.62
201.60±63.44
2.86±1.26
11.34±8.54
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合计
5.93±1.62
23.10±1.53
3.44±2.85
以CE为主的化疗+G-CSF+GM-CSF联合动员 采集2次就能满足1～2次的APBSCT所需要的APBSC。化疗和造血因子的使用能够明显增加动员和采集的PBSC，比稳定状态可增加10～30倍[5]。为进一步提高PBSC动员，1994年Winter联合应用G-CSF和GM-CSF动员PBSC，测定了CFU-GM和CD34+细胞的基础含量，分别与单用G-CSF、单用GM-CSF和G-CSF+GM-CSF联合应用动员后CFU-GM和CD34+细胞含量进行对比，结果G-CSF组和GM-CSF组的CFU-GM含量均增加24～31倍，而G-CSF+GM-CSF联合应用组CFU-GM含量可增加68～80倍[5]。提示G-CSF和GM-CSF对造血祖细胞的增殖有协同作用。Lane等[6]的研究也显示，G-CSF+GM-CSF联合治疗组比单用G-CSF组可有效地收集CD34+细胞和CFU-GM，同时还证明可动员更多早期干细胞。本组20例患者以CE为主的常规化疗结束后，联合应用G-CSF和GM-CSF各5μg.kg-1.d-1 2.5～5.0d，连续采集2次，其采集量为MNC(5.93±1.62)×108/kg，CD34+细胞(23.10±11.53)×106/kg，CFU-GM(3.44±2.85)×105/kg。以能够恢复APBSCT造血功能所需的指标[5][MNC≥(1～8)×108/kg，CD34+细胞≥(0.5～2.0)×106/kg，CFU-GM≥(0.5～2.0)×105/kg]计算，我们首次采集结果就达到了以上标准。连续采集2次所得到的APBSC均能满足2次APBSCT的需要。我们已完成的9例移植中5例只回输了所采集的APBSC的1/2，其中1例第2次APBSCT时输用了保存的另1/2 APBSC，均获造血功能重建。与文献报道的泰素或CTX+G-CSF动员APBSC需平均采集3次或4±1次[3,4]相比，本方案的采集次数明显减少。由于细胞生长因子总用药时间明显缩短，又因本组APBSC动员效果好，采集量大，动员1次可满足2次以上的APBSCT所需要的APBSC数量，这样行2次以上移植仅需1次动员的医疗费用，可大幅度降低医疗开支，同时减轻患者痛苦，使患者易于接受多次移植的实施。
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推迟细胞因子使用时间，使多种动员因素同步进行，以望提高动员效果。文献报道单用化疗动员APBSC，外周血中CFU-GM最高值是在化疗后16～36(26.7±5.0)d出现[7]。本组患者在化疗后14～24(18.42±3.64)d应用G-CSF+GM-CSF+地塞米松，以求其动员作用与化疗后CFU-GM动员到外周血的最高值取得同步，推测刺激因子动员作用峰值可能落到化疗动员峰值中，两种作用相加效果较理想。
多数学者认为在化疗+G-CSF联合动员时白细胞恢复至1.0×109/L或2.5×109/L时开始采集[1,3,4]。我们在化疗后(22.15±3.66)d，白细胞达(29.80±5.98)×109/L时才开始采集，均获满意采集效果。
我们的动员方案加用地塞米松既提高动员效果,又可减少使用细胞因子所致高热的不良反应。本组中初始的2例患者使用细胞因子时未用地塞米松，出现了39～40℃的高热，加用地塞米松后患者高热得到控制。此后所有病例与细胞因子同时应用地塞米松，再未发现高热者。其他的不良反应如骨痛、胸闷和一过性血小板减少均可耐受。基金项目：国家“九五”攻关课题基金资助项目(96-906-01-12)
, 百拇医药
参考文献
1，Rosenfeld CS, Shadduck RK, Zeigler ZR, et al. Cyclophosphamide-mobilized peripheral blood stem cells in patients with lymphoid malignancies. Bone Marrow Transplant, 1995,15:433-438.
2，Bolwell BJ, Goormastic M, Yanssens T, et al. Comparison of G-CSF with GM-CSF for mobilizing peripheral blood progenitor cells and for enhancing marrow recovery after autologous bone marrow transplant. Bone Marrow Transplant, 1994, 14: 913-918.
, 百拇医药
3，Demirer T, Rowley S, Buckner CD, et al. Peripheral-blood stem-cell collections after paclitaxel, cyclophosphamide, and recombinant human granulocyte colony-stimulating factor in patients with breast and ovarian cancer. J Clin Oncol, 1995, 13: 1714-1719.
4，石远凯，周生余，韩晓红，等.环磷酰胺联合重组人粒细胞集落刺激因子动员自体外周血干细胞.中华血液学杂志,1998，19：425-427.
5，Stadtmauer EA,Schneider CJ,Silberstein LE, et al. Peripheral blood progenitor cell generation and harvesting.Semin Oncol，1995，22：291-300.
, http://www.100md.com
6，Lane TA, Law P, Maruyama M, et al. Harvesting and enrichment of hematopoietic progenitor cells mobilized into the peripheral blood of normal donors by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) or G-CSF: potential role in allogeneic marrow transplantation.Blood,1995,85:275-282.
7，刘开彦，原田实根，赤司浩一，等.G-CSF对化疗后外周血干细胞动员作用的影响.中华血液学杂志,1994，15：414-416.
(收稿日期：1999-03-01), 百拇医药
单位：300060 天津医科大学肿瘤医院、肿瘤研究所
关键词：化学疗法；粒细胞集落刺激因子；粒-巨噬细胞集落刺激因子；造血干细胞
中华血液学杂志000506 【摘要】 目的 探讨化疗加粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)联合动员自体外周血干细胞(APBSC)的效果。方法 卡铂(CBP)350mg/m2，第1天静滴；足叶乙甙(Vp16)350mg/m2，第1～第3天静滴；白细胞降至最低点又回升到(2.4～6.4)×109/L时，皮下注射G-CSF 5μg.kg-1.d-1(早6∶00)+GM-CSF 5μg.kg-1.d-1(晚6∶00)+地塞米松5mg/d(采集日10mg/d)直到采集结束前1天；白细胞上升到(29.80±5.98)×109/L，开始用CS3000 plus血细胞分离机连续2d采集APBSC。结果 20例患者连续采集APBSC 2次，共采集到MNC(5.93±1.62)×108/kg，CD34+细胞(23.10±11.53)×106/kg，CFU-GM(3.44±2.85)×105/kg。无严重不良反应。9例10次自体外周血干细胞移植(APBSCT)造血功能均获满意重建。结论 以化疗联合G-CSF和GM-CSF能高效、安全地动员APBSC,1次动员采集2次可满足1～2次的APBSCT。
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Mobilization of autologous peripheral blood stem cells by chemotherapy and recombinant granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF)
CUI Xiu-zhen,SHAO Ying,REN Baozhu,et al.
(Cancer Institute and Hospital,Tianjin Medical College，Tianjin 300060,China)
【Abstract】 Objective To observe the efficacy of chemotherapy and recombinant granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF,Glycosylated)and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF) in autologous peripheral blood stem cells(APBSC) mobilization.Methods The mobilization regimen:CBP 350mg/m2 intravenously injected at day 1,Vp16 350mg/m2 intravenously injected from day 1 to day 3.G-CSF and GM-CSF 5μg*kg-1*d-1 each,subcutaneously injected and DXM 5mg/d intramuscularly injected,from the day of white blood cell(WBC) recovery to (2.4～6.4)×109/L from nadir to the day before the end of APBSC harvesting.APBSC harvesting started when WBC>20.0×109/L and ended when accumulated mononuclear cells (MNC)>5×108/kg.CFU-GM assay and CD34+ cells counting of the APBSC were performed.Results Twenty cases underwent APBSC mobilization.APBSC harvest began at day 22.15±3.66 for two successive days.Accumulated MNC was (5.93±1.62)×108/kg,CD34+ cells (23.10±11.53)×106/kg and CFU-GM (3.44±2.85)×105/kg.No severe toxicity was observed.Hematopoiesis was well reconstituted in 8 patients received single and in 1 patient received double APBSC transplantations.Conclusion Chemotherapy combined with G-CSF+GM-CSF was a safe and highly effective method for APBSC mobilization.
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【Key words】 Chemotherapy; Granulocyte colony-stimulating factor; Granulocyte-macrophage colony stimulating factor; Peripheral blood stem cell
目前动员外周血干细胞(PBSC)的方法有单用化疗[1]、单用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)[2]及化疗+G-CSF或化疗+GM-CSF[1,3,4]，效果肯定。1997年7月～1999年1月，我们以化疗联合G-CSF和GM-CSF动员、采集20例恶性实体瘤患者自体外周血干细胞(APBSC)获得良好结果，报告如下。
病例和方法
1 病例 恶性实体瘤患者20例，男11例，女9例，中位年龄37(24～53)岁，非霍奇金淋巴瘤(NHL)8例，霍奇金病3例，乳腺癌6例，纵隔生殖细胞癌1例，卵巢癌1例，胚胎性横纹肌肉瘤1例。患者均经常规诱导化疗达到或接近完全缓解，骨髓涂片细胞学检查无肿瘤细胞侵润，或虽有侵润但经诱导化疗后骨髓细胞分类正常，贫血和血小板不正常者，给予治疗后，待血象正常时方可开始动员。心、肺、肝、肾等主要脏器功能正常。
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2 APBSC动员方案 除2例NHL患者化疗采用EA方案[足叶乙甙(Vp16) 350mg/m2(第1～第3天)+阿糖胞苷(Ara-C)1g/d(共3d)]，1例乳腺癌采用CAF方案[环磷酰胺(CTX) 750mg/m2，第1天；阿霉素(ADM) 50mg/m2，第1天；氟尿嘧啶(5-FU)300mg.m-2.d-1，共5d]外，其余病例均采用CE方案[卡铂(CBP)350mg/m2，第1天静滴；Vp16 350mg/m2，第1～第3天静滴]；当白细胞降至最低点又回升至(2.4～6.4)×109/L时，开始皮下注射G-CSF(日本中外制药株式会社产品， 5μg.kg-1.d-1，早6∶00)+GM-CSF(先灵葆雅有限公司生产，5μg.kg-1.d-1，晚 6∶00)+地塞米松(5.0mg/d，采集日10mg/d)到采集结束前1天。
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3 APBSC采集及冻存 白细胞上升到>20.0×109/L，CD34+细胞≥1%时，用CS3000 plus血细胞分离机行外周血单个核细胞(MNC)分离，循环血量每次10～18L,将分离的MNC进行细胞计数、涂片、分类，分离的MNC中加入二甲基亚砜，经程控降温仪逐渐降温后，冻存于-196℃液氮中,冻存前检测CFU-GM和CD34+细胞。
4 造血祖细胞培养 CFU-GM按常规方法在CO2孵箱中培养14d。在倒置显微镜下计数集落(CFU-GM≥40个细胞为1个集落单位)。
5 CD34+细胞检测 取APBSC液分离MNC，使之与荧光标记的CD34+抗体(丹麦Dako公司)结合，用FACS-440型流式细胞仪(美国BD公司)检测CD34+细胞，分析5×105个细胞，得出 CD34+含量。
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6 动员、采集相关并发症的防治 Hb<100g/L时输入浓缩红细胞，BPC<10×109/L或有出血倾向时输入血小板，采集过程中同时静脉用100g/L葡萄糖酸钙防治低钙血症。
7 预处理方案 9例已行自体外周血干细胞移植(APBSCT)的患者中，6例用BEAM方案[卡氮芥(BCNU)300mg/m2+Vp16 600mg/m2+Ara-C 2g/m2+马法兰(MEL)140mg/m2],其中1例患者又以此方案的2/3剂量行第2次APBSCT，3例用CEC方案[CTX 1200mg/kg+Vp16 600～800mg/m2+CBP 800～1000mg/m2]。
8 APBSC解冻及回输 预处理结束后36～48h回输APBSC，将冷冻袋快速放入42℃水浴中解冻，并行 MNC计数和台盼蓝染色，解冻后检测CFU-GM和CD34+细胞。完成APBSCT者随访至1999年1月。
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结果
1 APBSC动员、采集结果 以CE方案为主的患者化疗后(14.78±2.80)d，白细胞降至最低值(1.90±0.74)×109/L，在停化疗后(18.42±3.64)d，白细胞回升到(3.25±1.30)×109/L时开始用G-CSF+GM-CSF+地塞米松，持续(3.70±0.98)(2.50～5.00)d，在停化疗后(22.15±3.66)d，白细胞达(29.80±5.98)×109/L时开始采集APBSC。每例均连续采集2次。2次采集APBSC数量见表1。
2 APBSC动员相关不良反应 20例患者出现Ⅱ～Ⅲ度(WHO标准)脱发，14例患者血小板降至(60.50±23.85)×109/L。20例患者均有骨骼疼痛(以骨盆为主)，12例患者发热 (37.2～40.0℃)，3例患者胸闷，2例患者恶心、呕吐。
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3 APBSC回输量 已完成APBSCT的9例患者10次移植中，5例6次移植回输了所采集的APBSC总量的1/2，即MNC(2.73～3.64)×108/kg,CD34+细胞(5.90～16.85)×106/kg ，CFU-GM(1.35～4.14)×105/kg。其余4例将采集的APBSC全部回输。
4 移植后造血功能重建 完成APBSCT的9例患者10次移植中白细胞均降到“0”，维持“0”的时间为(4.76±1.20)d，血小板最低水平(19.24±6.48)×109/L。移植后3～4周骨髓穿刺检查造血功能均获满意重建。至随访结束时无造血功能障碍。
讨论
APBSC的动员是APBSCT过程中的关键之一。选择高效低毒的动员方案，掌握动员及采集时机与动员效果有密切关系。动员效果好，不仅减少采集次数，减轻患者痛苦，也降低医疗费用，同时还为多次移植提供条件。
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表1 20例患者APBSC的采集(
±s)循环血量(ml/kg)
流速(ml/min)
时间(min)
MNC(×108/kg)
CD34+细胞(×106/kg)
CFU-GM(×105/kg)
第1次
232.80±35.53
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75.50±8.14
237.75±28.20
3.08±0.62
11.76±6.59
1.91±1.46
第2次
179.99±48.26
74.38±8.62
201.60±63.44
2.86±1.26
11.34±8.54
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合计
5.93±1.62
23.10±1.53
3.44±2.85
以CE为主的化疗+G-CSF+GM-CSF联合动员 采集2次就能满足1～2次的APBSCT所需要的APBSC。化疗和造血因子的使用能够明显增加动员和采集的PBSC，比稳定状态可增加10～30倍[5]。为进一步提高PBSC动员，1994年Winter联合应用G-CSF和GM-CSF动员PBSC，测定了CFU-GM和CD34+细胞的基础含量，分别与单用G-CSF、单用GM-CSF和G-CSF+GM-CSF联合应用动员后CFU-GM和CD34+细胞含量进行对比，结果G-CSF组和GM-CSF组的CFU-GM含量均增加24～31倍，而G-CSF+GM-CSF联合应用组CFU-GM含量可增加68～80倍[5]。提示G-CSF和GM-CSF对造血祖细胞的增殖有协同作用。Lane等[6]的研究也显示，G-CSF+GM-CSF联合治疗组比单用G-CSF组可有效地收集CD34+细胞和CFU-GM，同时还证明可动员更多早期干细胞。本组20例患者以CE为主的常规化疗结束后，联合应用G-CSF和GM-CSF各5μg.kg-1.d-1 2.5～5.0d，连续采集2次，其采集量为MNC(5.93±1.62)×108/kg，CD34+细胞(23.10±11.53)×106/kg，CFU-GM(3.44±2.85)×105/kg。以能够恢复APBSCT造血功能所需的指标[5][MNC≥(1～8)×108/kg，CD34+细胞≥(0.5～2.0)×106/kg，CFU-GM≥(0.5～2.0)×105/kg]计算，我们首次采集结果就达到了以上标准。连续采集2次所得到的APBSC均能满足2次APBSCT的需要。我们已完成的9例移植中5例只回输了所采集的APBSC的1/2，其中1例第2次APBSCT时输用了保存的另1/2 APBSC，均获造血功能重建。与文献报道的泰素或CTX+G-CSF动员APBSC需平均采集3次或4±1次[3,4]相比，本方案的采集次数明显减少。由于细胞生长因子总用药时间明显缩短，又因本组APBSC动员效果好，采集量大，动员1次可满足2次以上的APBSCT所需要的APBSC数量，这样行2次以上移植仅需1次动员的医疗费用，可大幅度降低医疗开支，同时减轻患者痛苦，使患者易于接受多次移植的实施。
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推迟细胞因子使用时间，使多种动员因素同步进行，以望提高动员效果。文献报道单用化疗动员APBSC，外周血中CFU-GM最高值是在化疗后16～36(26.7±5.0)d出现[7]。本组患者在化疗后14～24(18.42±3.64)d应用G-CSF+GM-CSF+地塞米松，以求其动员作用与化疗后CFU-GM动员到外周血的最高值取得同步，推测刺激因子动员作用峰值可能落到化疗动员峰值中，两种作用相加效果较理想。
多数学者认为在化疗+G-CSF联合动员时白细胞恢复至1.0×109/L或2.5×109/L时开始采集[1,3,4]。我们在化疗后(22.15±3.66)d，白细胞达(29.80±5.98)×109/L时才开始采集，均获满意采集效果。
我们的动员方案加用地塞米松既提高动员效果,又可减少使用细胞因子所致高热的不良反应。本组中初始的2例患者使用细胞因子时未用地塞米松，出现了39～40℃的高热，加用地塞米松后患者高热得到控制。此后所有病例与细胞因子同时应用地塞米松，再未发现高热者。其他的不良反应如骨痛、胸闷和一过性血小板减少均可耐受。基金项目：国家“九五”攻关课题基金资助项目(96-906-01-12)
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参考文献
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3，Demirer T, Rowley S, Buckner CD, et al. Peripheral-blood stem-cell collections after paclitaxel, cyclophosphamide, and recombinant human granulocyte colony-stimulating factor in patients with breast and ovarian cancer. J Clin Oncol, 1995, 13: 1714-1719.
4，石远凯，周生余，韩晓红，等.环磷酰胺联合重组人粒细胞集落刺激因子动员自体外周血干细胞.中华血液学杂志,1998，19：425-427.
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6，Lane TA, Law P, Maruyama M, et al. Harvesting and enrichment of hematopoietic progenitor cells mobilized into the peripheral blood of normal donors by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) or G-CSF: potential role in allogeneic marrow transplantation.Blood,1995,85:275-282.
7，刘开彦，原田实根，赤司浩一，等.G-CSF对化疗后外周血干细胞动员作用的影响.中华血液学杂志,1994，15：414-416.
(收稿日期：1999-03-01), 百拇医药