慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞分泌细胞因子的检测及其意义
作者：薛建亚 秦一中 韩絮琳 万谟彬 沈茜 傅益平 徐玉莲 周凯
单位：薛建亚(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；秦一中(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；韩絮琳(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；万谟彬(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；沈茜(第二军医大学长海医院实验诊断科，上海 200433)
关键词：白细胞介素10；干扰素γ；外周血单个核细胞；肝炎,乙型
第二军医大学学报000612 【摘要】 目的：探讨白细胞介素10和干扰素γ在病毒性肝炎的诊断、治疗和预后判断等方面的意义。方法：采用植物血凝素(PHA)刺激89例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10和IFN-γ，采用ELISA法检测其水平。结果：随着患者病情的加重，IL-10和IFN-γ水平均降低，且与肝脏损伤程度有密切关系。结论：IL-10和IFN-γ参与了肝炎的病理过程。当两者产生水平低于正常水平近一半时，预示肝脏受损较重，病情较重，预后较差。
, http://www.100md.com
【中图分类号】 R 512.62 【文献标识码】 A
【文章编号】 0258-879X(2000)06-0541-03
Detection of cytokines secreted by PBMC in patients infected with chronic hepatitis B virus
XUE Jian-Ya，QIN Yi-Zhong，HAN Xu-Lin，WAN Mo-Bin
(Department of Infectious Disease, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai, 200433, China)
SHEN Qian，XU Yu-Lian，ZHOU Kai
, http://www.100md.com
(Department of Experimental Diagnosis, Changhai Hospital)
FU Yi-Ping
(The 4th Department, The 302th Hospital of PLA.)
【ABSTRACT】 Objective:To study the significance of IL-10 and INF-γ in chronic hepatitis infected by HBV. Methods: IL-10 and INF-γ were secreted by PBMC of viral hepatitis induced by phytohemagglutinin (PHA). ELISA was used in 89 cases of chronic hepatitis infected by HBV in different stage. Results: The state of hepatitis was worsening, the levels of the 2 cytokines became lower. Conclusion: The 2 cytokines closely relate to liver damage and attend the pathogensis of hepatitis. If the levels of these cytokines are half lower than normal, the liver suffers more damage, and the condition becomes more terrible, the prognosis is more unfavourable.
, http://www.100md.com
【KEY WORDS】 interleukin-10 (IL-10); interferon-γ(IFN-γ); peripheral blood mononuclear cells (PBMC); hepatitis B
慢性乙型肝炎发病的确切机制目前仍未完全阐明，但细胞因子的免疫调控作用失常与之有密切关系。其中由Th1/Th0细胞产生的干扰素γ(interferon-γ, IFN-γ)和主要由Th2/Th0细胞合成分泌的白细胞介素10(interleukin-10, IL-10)在病毒性肝炎的病理过程中可能发挥着重要作用[1]。本研究采用病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)在体外情况下，以植物血凝素(PHA)刺激诱导其产生分泌IL-10和IFN-γ，通过对这两者的检测来探讨它们在病毒性肝炎中的病理意义。
1 材料和方法
1.1 临床资料及分组 实验对象共107名；(1) 正常人群组18名(男、女各9名)，年龄为18～45岁，平均年龄24.4岁(HBsAg及抗HCV均阴性，肝功能指标均正常)；(2) 肝病组89例(女性22例，男性67例)，年龄16～60岁，平均年龄38.8岁，诊断均符合1995年5月北京第五次全国传染病寄生虫学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准，部分病例经肝穿刺活检病理学检查及免疫组化证实均为HBsAg阳性。其中慢性肝炎轻度(CHⅠ)15例；慢性肝炎中度(CHⅡ)19例；慢性肝炎重度(CH Ⅲ)21例；肝硬化活动期(LCA)20例；慢性重型肝炎(CSH)14例。
, http://www.100md.com
1.2 实验方法
1.2.1 肝功能及T细胞亚群的检测 正常组及肝炎组血标本均于清晨空腹采集，并同期测定ALT，BIL，CD4和CD4/CD8。
1.2.2 IL-10和IFN-γ的检测 正常组及肝炎组患者PBMC(2×105个/ml)在体外培养时，以PHA(上海市医学化验所，1∶10配制)刺激的为实验组，未使用PHA刺激的为对照组，37℃，5% CO2孵育48 h，采用ELISA法检测IL-10，IFN-γ(试剂盒均购自深圳晶美生物工程有限公司)。
1.3 统计学处理 据数以
±s表示，采用t检验、Spearman等级相关分析。
2 结 果
, 百拇医药
2.1 各实验组ALT，BIL，CD4及CD4/CD8水平 因各肝炎患者的ALT，BIL变化较大，故其标准差较大。CD4值随着各肝炎组患者肝功能受损的加重而降低，其中慢性肝炎中度、慢性肝炎重度、活动期肝硬化及慢性重型肝炎组与正常人群组之间有显著性差异(P<0.01)。CD4/CD8在各肝炎组与正常人群组之间亦有差异(P<0.05，0.01，表1)。
2.2 各实验组PBMC分泌IL-10及IFN-γ水平 各实验组IL-10及IFN-γ水平较其对照组均明显升高(P<0.01)。在IL-10对照组中，各组之间无显著差异；而在IFN-γ对照组中，肝硬化及慢性重型组与正常人群组有显著性差异(P<0.05)。各实验组中，各肝炎组IL-10及IFN-γ水平均明显低于正常人群组(P<0.01)。在IL-10实验组中，各慢性肝炎组组间均有差异(P<0.05～0.01)；慢性重型组与肝硬化活动期组之间无显著性差异(P>0.05)，这两组与各慢性肝炎组间均有显著性差异(P<0.01)。在IFN-γ实验组中，慢性肝炎组仅在慢性轻度组与慢性重度组间有显著性差异(P<0.01)；肝硬化活动期组与慢性肝炎轻度组及中度组间有显著性差异(P<0.01)；慢性重型组与肝硬化活动期组及各慢性肝炎组间有显著性差异(P<0.05，0.01，表2)。
, 百拇医药
表 1 各实验组肝功及T细胞亚群检测结果
Tab 1 Results of ALT，BIL and T cell subtype of each group(±s) Group
n
ALT(zB/U.L-1)
BIL(cB/μmol.L-1)
CD4(%)
CD4/CD8
, 百拇医药
Normal
18
<30
<17.1
44.28±5.84
1.33±0.12
CHⅠ
15
73.50±29.32
23.09±4.84
40.93±5.75
1.16±0.15*
, 百拇医药
CHⅡ
19
240.43±113.06
54.97±13.38
38.56±6.11**
1.15±0.13**
CHⅢ
21
577.54±184.33
179.15±96.84
36.70±4.69**
, 百拇医药
1.09±0.11**
LCA
20
158.35±213.41
117.51±116.47
32.70±4.60**
1.02±0.12**
CSH
14
95.33±68.44
402.40±124.28
, 百拇医药
30.94±4.94**
0.93±0.18**
*P<0.05， **P<0.01 vs normal group表 2 各实验组PBMC分泌的IL-10和IFN-γ水平
Tab 2 Level of IL-10 and IFN-γ produced by PBMC of each group(±s) Group
n
IL-10 (ρB/pg.ml-1)
, http://www.100md.com
IFN-γ (ρB/pg.ml-1)
PHA
No PHA
PHA
No PHA
Normal
18
738.15±106.28**
38.61±10.23
1198.24±140.89**
, 百拇医药
46.63±15.47
CHⅠ
15
575.59±103.30**△△▲▲
37.78±12.04
955.92±138.83**△△▲▲
42.11±11.14
CHⅡ
19
492.54±136.43**△△▲▲
35.96±12.11
, http://www.100md.com
864.96±174.72**△△▲▲
44.76±14.01
CHⅢ
21
409.95±130.69**△△▲▲
36.09±13.05
802.53±167.68**△△▲▲
39.89±16.16
LCA
20
324.69±138.97**△△
, http://www.100md.com
34.35±10.98
726.43±190.02**△△▲
35.96±14.94△
CSH
14
302.56±122.76**△△
32.34±13.24
677.51±125.81**△△
34.33±12.03△
**P<0.01 vs no PHA group; △P<0.05， △△ P<0.01 vs normal group; ▲P<0.05， ▲▲P<0.01 vs CSH group3 讨 论
, 百拇医药
IL-10是近年来发现的重要的免疫下向调节因子[1]。有研究表明，在经LPS诱导的小鼠肝损害模型中，若腹腔内注射外源性IL-10可降低小鼠的死亡率，并发现血清中ALT变化与所用IL-10的剂量有依赖性关系[2]，这主要由于IL-10的抗炎作用，也提示它在病毒性肝炎的免疫病理损害中有保护作用。本研究结果提示：随着病毒性肝炎患者病情的加重，其PBMC所产生的IL-10水平也有下降；当IL-10明显下降时，提示患者病情已趋慢性化；当下降接近至正常水平一半时，预示着患者病情较重，预后差。IL-10水平的改变与患者肝脏损害程度具有一定关系，即IL-10水平降低越明显，患者肝脏受损程度越重。
当机体受到肝炎病毒感染后，病毒可刺激机体细胞，主要是单核/巨噬细胞及Th2/Th0细胞等产生IL-10；在慢性肝炎，机体免疫系统功能存在不同程度的障碍或缺陷，因而T细胞等合成分泌IL-10的能力下降；另外，在病毒性肝炎，尤其是肝脏功能障碍时，肝脏对内毒素、肿瘤坏死因子等清除能力下降，这些物质对单核/巨噬细胞等的活性具有抑制作用，因而合成分泌IL-10能力受限，导致慢性肝炎、肝硬化和慢性重型肝炎PBMC分泌IL-10水平下降。
, 百拇医药
慢性活动性乙型肝炎患者肝脏内高浓度的CD4+具有较强的细胞毒性活性[3]。CD4+CD56+T细胞不仅能够杀伤表达MHCⅡ类受肝炎病毒感染的肝细胞，而且可能导致肝炎的慢性化，它们能下向调节特定的免疫反应，损伤抗原提呈细胞、B细胞产生保护性抗原，IL-10可能参与了该过程。IL-10可抑制T细胞炎性趋化和IL-2的产生[4]，从而减轻炎性因子对肝细胞的损害。外源性重组IL-10可减轻多形核粒细胞在肝内的炎性浸润[5]；IL-10也可减少中性粒细胞产生的前炎性介质细胞因子，这亦可能是一个有效的保护作用。另外，IL-10亦能通过影响一氧化氮而在肝损伤中起作用。IL-10可抑制多种细胞因子的功能，这确定了它在病毒性肝炎的病理过程中的重要调节地位，对病毒性肝炎的转归起到重大调控作用。
IFN-γ能抑制Th2功能，阻断Th2所产生的细胞因子对B细胞的激活作用；Th2可分泌IL-10，IL-4 这两种免疫下向调节因子，它们可以抑制Th1的活性，并能阻断IFN-γ激活巨噬细胞的过程[4]。当然，这两者谁占主导地位与机体所处的状态有关。有研究发现，在炎症性疾病中IL-10的产生较其他细胞因子要晚。当病毒侵入肝细胞后，病毒可刺激机体细胞产生IFN-γ等因子对病毒进行杀灭，同时启动细胞因子网络，进而产生系列细胞因子，其中包含IL-10这类抑制因子，控制免疫过程使之处于一适当的状态，既有利于清除受感染的肝细胞，同时又限制炎症的进一步发展。
, http://www.100md.com
本实验结果提示：慢性肝炎、肝硬化活动期及慢性重型肝炎患者PBMC分泌的IFN-γ水平较低，反映了患者的细胞免疫功能下降或缺陷或受到其他因素如IL-4及IL-10等的抑制[3]，因而影响其表达的水平。通过对IFN-γ的检测能判断患者的病情，患者病情越重，其水平越低；反之，其水平愈低，说明患者病情愈重，预后愈差。当IFN-γ水平下降接近正常水平一半时，患者病情已发展到肝硬化活动期或慢性重型肝炎，预后极差。PBMC体外培养并经PHA刺激后分泌IFN-γ水平明显升高，这一结果提示：(1)病毒性肝炎患者血清中可能存在IFN-γ合成或分泌的抑制性因素；(2)病毒性肝炎患者其细胞免疫功能有不同程度的降低，但经适当的刺激，细胞免疫功能会有一定的改善。该结果表明：在临床治疗中可采取免疫干预等措施，以提高机体抗感染能力，阻断病毒感染和病毒在机体内的扩散。
综上所述，细胞因子在病毒性肝炎的致病过程中起着重要作用。通过对患者PBMC所分泌的IL-10及 IFN-γ 的检测，可以判断患者的肝脏受损程度，有利于判断病情，了解患者细胞免疫功能状态，为临床对病毒性肝炎的免疫干预治疗和预后判定提供有效的观察指标。
, 百拇医药
【基金项目】国家自然科学基金资助项目(39970270)
【作者简介】薛建亚(1966～)，男(汉族)，硕士，医师
【作者单位】傅益平(解放军第302医院四科)
徐玉莲(第二军医大学长海医院实验诊断科，上海 200433)
周凯(第二军医大学长海医院实验诊断科，上海 200433)
【参考文献】
[1] Tsai SL, Lian YF, Chen MH, et al. Detection of type 2-like T-helper cells in hepatitis C virus infection: implications for hepatitis C virus chronicity[J]. Hepatology, 1997,25(2):449-458.
, 百拇医药
[2] Louis H, Le Moine O, Peny MO, et al. Production and role of interleukin-10 in concanavalin A-induced hepatitis in mice[J]. Hepatology,1997,25(6):1382-1389.
[3] Marshall JD, Secrist H, DeKruyff RH, et al. IL-12 inhibits the production of IL-4 and IL-10 in allergen-specific human CD4+ T lymphocytes[J]. J Immunol， 1995, 155(1):111-117.
[4] Marchant A, Bruyns C, Vandenabeele P, et al. Interleukin-10 controls interferon-γ and tumor necrosis factor production during experimental endotoxemia[J]. Eur J Immunol， 1994,24(5):1167-1171.
[5] Cacciarelli TV, Martinez OM, Gish RG, et al. Immunregulatory cytokines in chronic hepatitis C virus infection: pre-and posttreatment with interferon alfa[J]. Hepatology， 1996, 24(1):6-9.
【收稿日期】1999-12-05
【修回日期】2000-04-10, 百拇医药
单位：薛建亚(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；秦一中(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；韩絮琳(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；万谟彬(第二军医大学长海医院感染科，上海 200433)；沈茜(第二军医大学长海医院实验诊断科，上海 200433)
关键词：白细胞介素10；干扰素γ；外周血单个核细胞；肝炎,乙型
第二军医大学学报000612 【摘要】 目的：探讨白细胞介素10和干扰素γ在病毒性肝炎的诊断、治疗和预后判断等方面的意义。方法：采用植物血凝素(PHA)刺激89例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10和IFN-γ，采用ELISA法检测其水平。结果：随着患者病情的加重，IL-10和IFN-γ水平均降低，且与肝脏损伤程度有密切关系。结论：IL-10和IFN-γ参与了肝炎的病理过程。当两者产生水平低于正常水平近一半时，预示肝脏受损较重，病情较重，预后较差。
, http://www.100md.com
【中图分类号】 R 512.62 【文献标识码】 A
【文章编号】 0258-879X(2000)06-0541-03
Detection of cytokines secreted by PBMC in patients infected with chronic hepatitis B virus
XUE Jian-Ya，QIN Yi-Zhong，HAN Xu-Lin，WAN Mo-Bin
(Department of Infectious Disease, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai, 200433, China)
SHEN Qian，XU Yu-Lian，ZHOU Kai
, http://www.100md.com
(Department of Experimental Diagnosis, Changhai Hospital)
FU Yi-Ping
(The 4th Department, The 302th Hospital of PLA.)
【ABSTRACT】 Objective:To study the significance of IL-10 and INF-γ in chronic hepatitis infected by HBV. Methods: IL-10 and INF-γ were secreted by PBMC of viral hepatitis induced by phytohemagglutinin (PHA). ELISA was used in 89 cases of chronic hepatitis infected by HBV in different stage. Results: The state of hepatitis was worsening, the levels of the 2 cytokines became lower. Conclusion: The 2 cytokines closely relate to liver damage and attend the pathogensis of hepatitis. If the levels of these cytokines are half lower than normal, the liver suffers more damage, and the condition becomes more terrible, the prognosis is more unfavourable.
, http://www.100md.com
【KEY WORDS】 interleukin-10 (IL-10); interferon-γ(IFN-γ); peripheral blood mononuclear cells (PBMC); hepatitis B
慢性乙型肝炎发病的确切机制目前仍未完全阐明，但细胞因子的免疫调控作用失常与之有密切关系。其中由Th1/Th0细胞产生的干扰素γ(interferon-γ, IFN-γ)和主要由Th2/Th0细胞合成分泌的白细胞介素10(interleukin-10, IL-10)在病毒性肝炎的病理过程中可能发挥着重要作用[1]。本研究采用病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)在体外情况下，以植物血凝素(PHA)刺激诱导其产生分泌IL-10和IFN-γ，通过对这两者的检测来探讨它们在病毒性肝炎中的病理意义。
1 材料和方法
1.1 临床资料及分组 实验对象共107名；(1) 正常人群组18名(男、女各9名)，年龄为18～45岁，平均年龄24.4岁(HBsAg及抗HCV均阴性，肝功能指标均正常)；(2) 肝病组89例(女性22例，男性67例)，年龄16～60岁，平均年龄38.8岁，诊断均符合1995年5月北京第五次全国传染病寄生虫学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准，部分病例经肝穿刺活检病理学检查及免疫组化证实均为HBsAg阳性。其中慢性肝炎轻度(CHⅠ)15例；慢性肝炎中度(CHⅡ)19例；慢性肝炎重度(CH Ⅲ)21例；肝硬化活动期(LCA)20例；慢性重型肝炎(CSH)14例。
, http://www.100md.com
1.2 实验方法
1.2.1 肝功能及T细胞亚群的检测 正常组及肝炎组血标本均于清晨空腹采集，并同期测定ALT，BIL，CD4和CD4/CD8。
1.2.2 IL-10和IFN-γ的检测 正常组及肝炎组患者PBMC(2×105个/ml)在体外培养时，以PHA(上海市医学化验所，1∶10配制)刺激的为实验组，未使用PHA刺激的为对照组，37℃，5% CO2孵育48 h，采用ELISA法检测IL-10，IFN-γ(试剂盒均购自深圳晶美生物工程有限公司)。
1.3 统计学处理 据数以
±s表示，采用t检验、Spearman等级相关分析。2 结 果
, 百拇医药
2.1 各实验组ALT，BIL，CD4及CD4/CD8水平 因各肝炎患者的ALT，BIL变化较大，故其标准差较大。CD4值随着各肝炎组患者肝功能受损的加重而降低，其中慢性肝炎中度、慢性肝炎重度、活动期肝硬化及慢性重型肝炎组与正常人群组之间有显著性差异(P<0.01)。CD4/CD8在各肝炎组与正常人群组之间亦有差异(P<0.05，0.01，表1)。
2.2 各实验组PBMC分泌IL-10及IFN-γ水平 各实验组IL-10及IFN-γ水平较其对照组均明显升高(P<0.01)。在IL-10对照组中，各组之间无显著差异；而在IFN-γ对照组中，肝硬化及慢性重型组与正常人群组有显著性差异(P<0.05)。各实验组中，各肝炎组IL-10及IFN-γ水平均明显低于正常人群组(P<0.01)。在IL-10实验组中，各慢性肝炎组组间均有差异(P<0.05～0.01)；慢性重型组与肝硬化活动期组之间无显著性差异(P>0.05)，这两组与各慢性肝炎组间均有显著性差异(P<0.01)。在IFN-γ实验组中，慢性肝炎组仅在慢性轻度组与慢性重度组间有显著性差异(P<0.01)；肝硬化活动期组与慢性肝炎轻度组及中度组间有显著性差异(P<0.01)；慢性重型组与肝硬化活动期组及各慢性肝炎组间有显著性差异(P<0.05，0.01，表2)。
, 百拇医药
表 1 各实验组肝功及T细胞亚群检测结果
Tab 1 Results of ALT，BIL and T cell subtype of each group(
±s) Groupn
ALT(zB/U.L-1)
BIL(cB/μmol.L-1)
CD4(%)
CD4/CD8
, 百拇医药
Normal
18
<30
<17.1
44.28±5.84
1.33±0.12
CHⅠ
15
73.50±29.32
23.09±4.84
40.93±5.75
1.16±0.15*
, 百拇医药
CHⅡ
19
240.43±113.06
54.97±13.38
38.56±6.11**
1.15±0.13**
CHⅢ
21
577.54±184.33
179.15±96.84
36.70±4.69**
, 百拇医药
1.09±0.11**
LCA
20
158.35±213.41
117.51±116.47
32.70±4.60**
1.02±0.12**
CSH
14
95.33±68.44
402.40±124.28
, 百拇医药
30.94±4.94**
0.93±0.18**
*P<0.05， **P<0.01 vs normal group表 2 各实验组PBMC分泌的IL-10和IFN-γ水平
Tab 2 Level of IL-10 and IFN-γ produced by PBMC of each group(
±s) Groupn
IL-10 (ρB/pg.ml-1)
, http://www.100md.com
IFN-γ (ρB/pg.ml-1)
PHA
No PHA
PHA
No PHA
Normal
18
738.15±106.28**
38.61±10.23
1198.24±140.89**
, 百拇医药
46.63±15.47
CHⅠ
15
575.59±103.30**△△▲▲
37.78±12.04
955.92±138.83**△△▲▲
42.11±11.14
CHⅡ
19
492.54±136.43**△△▲▲
35.96±12.11
, http://www.100md.com
864.96±174.72**△△▲▲
44.76±14.01
CHⅢ
21
409.95±130.69**△△▲▲
36.09±13.05
802.53±167.68**△△▲▲
39.89±16.16
LCA
20
324.69±138.97**△△
, http://www.100md.com
34.35±10.98
726.43±190.02**△△▲
35.96±14.94△
CSH
14
302.56±122.76**△△
32.34±13.24
677.51±125.81**△△
34.33±12.03△
**P<0.01 vs no PHA group; △P<0.05， △△ P<0.01 vs normal group; ▲P<0.05， ▲▲P<0.01 vs CSH group3 讨 论
, 百拇医药
IL-10是近年来发现的重要的免疫下向调节因子[1]。有研究表明，在经LPS诱导的小鼠肝损害模型中，若腹腔内注射外源性IL-10可降低小鼠的死亡率，并发现血清中ALT变化与所用IL-10的剂量有依赖性关系[2]，这主要由于IL-10的抗炎作用，也提示它在病毒性肝炎的免疫病理损害中有保护作用。本研究结果提示：随着病毒性肝炎患者病情的加重，其PBMC所产生的IL-10水平也有下降；当IL-10明显下降时，提示患者病情已趋慢性化；当下降接近至正常水平一半时，预示着患者病情较重，预后差。IL-10水平的改变与患者肝脏损害程度具有一定关系，即IL-10水平降低越明显，患者肝脏受损程度越重。
当机体受到肝炎病毒感染后，病毒可刺激机体细胞，主要是单核/巨噬细胞及Th2/Th0细胞等产生IL-10；在慢性肝炎，机体免疫系统功能存在不同程度的障碍或缺陷，因而T细胞等合成分泌IL-10的能力下降；另外，在病毒性肝炎，尤其是肝脏功能障碍时，肝脏对内毒素、肿瘤坏死因子等清除能力下降，这些物质对单核/巨噬细胞等的活性具有抑制作用，因而合成分泌IL-10能力受限，导致慢性肝炎、肝硬化和慢性重型肝炎PBMC分泌IL-10水平下降。
, 百拇医药
慢性活动性乙型肝炎患者肝脏内高浓度的CD4+具有较强的细胞毒性活性[3]。CD4+CD56+T细胞不仅能够杀伤表达MHCⅡ类受肝炎病毒感染的肝细胞，而且可能导致肝炎的慢性化，它们能下向调节特定的免疫反应，损伤抗原提呈细胞、B细胞产生保护性抗原，IL-10可能参与了该过程。IL-10可抑制T细胞炎性趋化和IL-2的产生[4]，从而减轻炎性因子对肝细胞的损害。外源性重组IL-10可减轻多形核粒细胞在肝内的炎性浸润[5]；IL-10也可减少中性粒细胞产生的前炎性介质细胞因子，这亦可能是一个有效的保护作用。另外，IL-10亦能通过影响一氧化氮而在肝损伤中起作用。IL-10可抑制多种细胞因子的功能，这确定了它在病毒性肝炎的病理过程中的重要调节地位，对病毒性肝炎的转归起到重大调控作用。
IFN-γ能抑制Th2功能，阻断Th2所产生的细胞因子对B细胞的激活作用；Th2可分泌IL-10，IL-4 这两种免疫下向调节因子，它们可以抑制Th1的活性，并能阻断IFN-γ激活巨噬细胞的过程[4]。当然，这两者谁占主导地位与机体所处的状态有关。有研究发现，在炎症性疾病中IL-10的产生较其他细胞因子要晚。当病毒侵入肝细胞后，病毒可刺激机体细胞产生IFN-γ等因子对病毒进行杀灭，同时启动细胞因子网络，进而产生系列细胞因子，其中包含IL-10这类抑制因子，控制免疫过程使之处于一适当的状态，既有利于清除受感染的肝细胞，同时又限制炎症的进一步发展。
, http://www.100md.com
本实验结果提示：慢性肝炎、肝硬化活动期及慢性重型肝炎患者PBMC分泌的IFN-γ水平较低，反映了患者的细胞免疫功能下降或缺陷或受到其他因素如IL-4及IL-10等的抑制[3]，因而影响其表达的水平。通过对IFN-γ的检测能判断患者的病情，患者病情越重，其水平越低；反之，其水平愈低，说明患者病情愈重，预后愈差。当IFN-γ水平下降接近正常水平一半时，患者病情已发展到肝硬化活动期或慢性重型肝炎，预后极差。PBMC体外培养并经PHA刺激后分泌IFN-γ水平明显升高，这一结果提示：(1)病毒性肝炎患者血清中可能存在IFN-γ合成或分泌的抑制性因素；(2)病毒性肝炎患者其细胞免疫功能有不同程度的降低，但经适当的刺激，细胞免疫功能会有一定的改善。该结果表明：在临床治疗中可采取免疫干预等措施，以提高机体抗感染能力，阻断病毒感染和病毒在机体内的扩散。
综上所述，细胞因子在病毒性肝炎的致病过程中起着重要作用。通过对患者PBMC所分泌的IL-10及 IFN-γ 的检测，可以判断患者的肝脏受损程度，有利于判断病情，了解患者细胞免疫功能状态，为临床对病毒性肝炎的免疫干预治疗和预后判定提供有效的观察指标。
, 百拇医药
【基金项目】国家自然科学基金资助项目(39970270)
【作者简介】薛建亚(1966～)，男(汉族)，硕士，医师
【作者单位】傅益平(解放军第302医院四科)
徐玉莲(第二军医大学长海医院实验诊断科，上海 200433)
周凯(第二军医大学长海医院实验诊断科，上海 200433)
【参考文献】
[1] Tsai SL, Lian YF, Chen MH, et al. Detection of type 2-like T-helper cells in hepatitis C virus infection: implications for hepatitis C virus chronicity[J]. Hepatology, 1997,25(2):449-458.
, 百拇医药
[2] Louis H, Le Moine O, Peny MO, et al. Production and role of interleukin-10 in concanavalin A-induced hepatitis in mice[J]. Hepatology,1997,25(6):1382-1389.
[3] Marshall JD, Secrist H, DeKruyff RH, et al. IL-12 inhibits the production of IL-4 and IL-10 in allergen-specific human CD4+ T lymphocytes[J]. J Immunol， 1995, 155(1):111-117.
[4] Marchant A, Bruyns C, Vandenabeele P, et al. Interleukin-10 controls interferon-γ and tumor necrosis factor production during experimental endotoxemia[J]. Eur J Immunol， 1994,24(5):1167-1171.
[5] Cacciarelli TV, Martinez OM, Gish RG, et al. Immunregulatory cytokines in chronic hepatitis C virus infection: pre-and posttreatment with interferon alfa[J]. Hepatology， 1996, 24(1):6-9.
【收稿日期】1999-12-05
【修回日期】2000-04-10, 百拇医药