三种海龙中脂肪酸的分析研究
作者：吴筱丹 李士敏 曾苏
单位：浙江大学药学院 杭州 310006
关键词：拟海龙；粗吻海龙；尖海龙；脂肪酸；GC-MS
中草药000607摘 要 目的：分析3种海龙中脂肪酸的组成。方法：采用GC-MS进 行分离 鉴定，面积归一化法进行定量。结果：粗吻海龙、拟海龙、尖海龙中含有较多的长链不饱和 脂肪酸和奇数碳脂肪酸，并含有不常见的9，10-环次甲基十六酸。结论：海龙可能具有治 疗心血管疾病的药理作用，海龙中环次甲基脂肪酸有可能作为海龙药材定性标准之一。
海龙属于硬骨鱼纲海龙目海龙科 Syngnathidae,具有温肾壮阳、散结消肿之功效 [1]。近年来，有关海龙药理活性、生药鉴定、化学成分的研究已有报道。我们在 对海龙化学成分的研究中，发现海龙含有丰富的脂肪酸。本文报道尖海龙、拟海龙和粗吻海 龙3种海龙药材中脂肪酸的化学组成。
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1 材料和方法
1.1 仪器与试剂：Hp6890气相色谱仪，Hp5973质谱仪，nominal,试剂均为分析纯。
1.2 药材来源：海龙购于河北省安国市药材市场，经浙江大学药学院生药教研室郭汉生教 授鉴定为拟海龙 Syngnathoides biaculeatus(Bloch)、粗吻海龙 Trachyrhamphus s erratus(Temminck et Schle-gel)、尖海龙 Syngnathus acus L.。
1.3 脂肪酸提取：分别取粗吻海龙、拟海龙、尖海龙粗粉适量，加95%乙醇回流提取3次， 醇提液浓缩成浸膏。将浸膏加水制成混悬液，石油醚(60 ℃～90 ℃)萃取，合并萃取液，浓 缩得浸膏，浸膏加10%氢氧化钾乙醇溶溶皂化，皂化完全后，用乙醚萃取非皂化物，余下碱 水层用 1 mol/L HCl 酸化，用石油醚萃取脂肪酸。合并石油醚萃取物，回收溶剂得脂肪酸 混合物。
, 百拇医药
1.4 脂肪酸甲酯化[2]：取1 g 混合脂肪酸加 5 mL三氟化硼-甲醇溶液(市售的3 5%三氟化硼乙醚溶液用无水甲醇稀释25倍)。在70 ℃水浴上加热回流 10 min，放冷，移入 分液漏斗，用乙醚萃取3次。合并乙醚溶液，水洗，用无水硫酸钠干燥，得混合脂肪酸甲酯 的乙醚溶液。回收溶剂，得混合脂肪酸甲酯，充氮气保存于冰箱。
1.5 混合脂肪酸的组成分析：采用GC-MS进行分离鉴定，面积归一化法进行定量。其色谱 条件为：色谱柱为Hp-5MS 5% Phenyl Methy Siloxane Capillary 30.0 m×250 μ m×0 . 25 μ m，进样品温度 260 ℃，柱压64.67 kPa，分流比100∶1，流量 1.0 mL/min,程 序 升温：初温 170 ℃以5 ℃/min 的程度升至 175 ℃，恒温 4 min,再以10 ℃/min速度升至1 92 ℃，保持 2 min，再以20 ℃/min升至230 ℃，保持 4 min，气质接口温度 280 ℃。
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2 结果
2.1 粗吻海龙脂肪酸的组成及相对含量(%)：十二酸0.342、十三酸0.065、十 四酸5.75 4、9-甲基十四酸0.294、10，13-二甲基十四酸0.079、十五酸1.000、十六碳三烯酸0 .212、11(E)-十五烯酸0.284、9(Z)-十六烯酸10. 401、7(E)-十六烯酸0.276、14-甲基十五酸24.976、7-甲基-6(Z)-十六烯 酸0.280、15-甲基十六酸0.506、9，10-环次甲基十六酸0.305、十七酸1.600、10- 甲基十七酸0.071、16-甲基十七酸0.482、10(E)，13(E)-十八二烯酸1.493、9(Z)-十 八烯酸14.085、11(E)-十八烯酸6.184、12(E)-十八烯酸0.216、十八酸1.600、 11-甲基十八酸0.082、10(E)-十九烯酸0.225-13(E)、十九烯酸0.064、十九酸0.395 、5(E)，8(E)，11(E)，14(E)-二十碳四烯酸2.338、5(Z)，8(Z)，11(E)，14(Z)，17(Z) -二十碳五烯酸4.172、7(E)，10(E)，13(E)-二十碳三烯酸0.125，11(E)-二十烯酸1. 948、11(E)，13(E)-二十碳二烯酸1.047、二十酸0.557、4(Z)，7(Z)，10(Z)，13(Z )，16(Z)，19(Z)-二十二碳六烯酸3.780、二十二酸0.325。
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2.2 拟海龙脂肪酸的组成及相对含量(%)：10-甲基十一酸0.167、十 四酸2.807、9- 甲基十四酸0.220、12-甲基十四酸0.403、十五酸1.050、14-甲基十五酸0.160、9(Z )-十六烯酸4.802、11(E)-十六烯酸0.106、十六酸30.695、15-甲基十六酸0.249、9 ，10-环次甲基十六酸0.563，十七酸2.694、8(E)，11(E)-十八二烯酸1.610，9(Z)- 十八烯酸10.867、11(E)-十八烯酸5.092、十八酸22.852、十九酸0.459、10-甲基十 八酸0.114、5(E)，8(E)，11(E)，14(E)-二十碳四烯酸2.675、5(Z)，8(Z)，11(Z)，14( Z)，17(Z)-二十碳五烯酸2.595、3-十二烯-4-炔0.124、10(E)，13(E)-二十碳二烯 酸0.163，11(E)-二十烯酸0.326、二十酸0.845、二十一酸0.359、4(Z)，7(Z)，10(Z) ，13(Z)，16(Z)，19(Z)-二十二碳六烯酸3.606、5(E)，8(E)， 11(E)，14(E)-二十碳五烯酸1.361、二十二酸0.777。
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2.3 尖海龙脂肪酸的组成及相对含量(%)：庚二酸0.418、辛二酸0.41 9、9-酮基葵酸 0.399、壬二酸0.837、葵二酸0.573、十四酸7.100、十一二酸1.317、4，8，12-三甲 基十三酸0.599、十五酸1.010、3-酮基十四二酸0.630、9(E)-十六烯酸10.24 2、9(Z)-十六烯酸0.380、十六酸25.815、十三二酸0.272、15-甲基十六酸0. 324、9.10-环次甲基十六酸0.440、十七酸1.049、8(E)，11(E)-十八 二烯酸2.254、9(Z)-十八烯酸14.309、11(E)-十八烯酸2.510、十八酸 8.783、5(Z)，8(Z)，11(Z)，14(Z)-二十碳四烯酸0.662，5(Z)，8(Z)，11(Z)，14(Z)， 17(Z)-二十碳五烯 酸3.670、11(E)-二十碳烯酸5.026、二十酸0.529、1-乙基戊腙酸0.517、4( Z)，7(Z)，10(Z)，13(Z)，16(Z)，19(Z)- 二十二碳六烯酸4.862、13(Z)-二十二碳烯酸2.540、1-十三炔-3-烯1.157 、5-十四炔-3-烯0.708。
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3 讨论
3.1 以上结果表明：粗吻海龙、拟海龙中含有较多的不饱和脂肪酸，其中粗吻海龙中不饱 和脂肪酸占总脂肪酸的46.92%，主要有C15∶1，C16∶1，C18∶1，C 18∶2，C19∶1，C20∶1，C20∶2，C20∶4，C20∶5 ，C22∶1，C22∶6的异构体组成，拟海龙中不饱和脂肪酸含量占32.62%，不 饱和脂肪酸组成主要为C16∶1，C18∶1，C18∶2，C20∶1，C 20∶2，C20∶4，C20∶5，C20∶6，尖海龙中不饱和脂肪酸含量占4 2.21%，不饱和脂肪酸组成主要为C16∶1，C18∶1，C18∶2，C20 ∶1，C20∶2，C20∶4，C20∶5，C22∶6，因此，海龙可能在 心血管疾病的治疗方面有一定疗效，有待于进一步的研究。
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3.2 粗吻海龙、拟海龙及尖海龙中均发现不常见的9，10-环次甲基十六酸，奇数碳脂肪 酸，另外在三种海龙中还发现有炔烯。因此，9，10-环次甲基十六酸作为一种较特殊的脂 肪酸成分，有可能作为海龙药材定性标准之一。
浙江省自然基金课题 No395131
吴筱丹 女，助教，1993年8月毕业于浙江医科大学药学系，并获得理学士学位，1999年7月 毕业于浙江大学湖滨校区药学院，并获得药物分析专业硕士研究生学位。曾参加国家计划生 育委员会资助课题“可生物降解的高分子药物的研究”的研究工作，研究生课题为“海洋药物海龙的生物活性成分研究”(浙江省自然基金课题)。目前在浙江大学药学院分析中心从事 教学科研工作，主要从事海洋药物方面的研究。
参 考 文 献
1，中华人民共和国药典.一部.北京：人民卫生出版社，1985：255
2，Morrison W R,et al. J Lipid Res,1964,5:600
(1999-10-15收稿), http://www.100md.com
单位：浙江大学药学院 杭州 310006
关键词：拟海龙；粗吻海龙；尖海龙；脂肪酸；GC-MS
中草药000607摘 要 目的：分析3种海龙中脂肪酸的组成。方法：采用GC-MS进 行分离 鉴定，面积归一化法进行定量。结果：粗吻海龙、拟海龙、尖海龙中含有较多的长链不饱和 脂肪酸和奇数碳脂肪酸，并含有不常见的9，10-环次甲基十六酸。结论：海龙可能具有治 疗心血管疾病的药理作用，海龙中环次甲基脂肪酸有可能作为海龙药材定性标准之一。
海龙属于硬骨鱼纲海龙目海龙科 Syngnathidae,具有温肾壮阳、散结消肿之功效 [1]。近年来，有关海龙药理活性、生药鉴定、化学成分的研究已有报道。我们在 对海龙化学成分的研究中，发现海龙含有丰富的脂肪酸。本文报道尖海龙、拟海龙和粗吻海 龙3种海龙药材中脂肪酸的化学组成。
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1 材料和方法
1.1 仪器与试剂：Hp6890气相色谱仪，Hp5973质谱仪，nominal,试剂均为分析纯。
1.2 药材来源：海龙购于河北省安国市药材市场，经浙江大学药学院生药教研室郭汉生教 授鉴定为拟海龙 Syngnathoides biaculeatus(Bloch)、粗吻海龙 Trachyrhamphus s erratus(Temminck et Schle-gel)、尖海龙 Syngnathus acus L.。
1.3 脂肪酸提取：分别取粗吻海龙、拟海龙、尖海龙粗粉适量，加95%乙醇回流提取3次， 醇提液浓缩成浸膏。将浸膏加水制成混悬液，石油醚(60 ℃～90 ℃)萃取，合并萃取液，浓 缩得浸膏，浸膏加10%氢氧化钾乙醇溶溶皂化，皂化完全后，用乙醚萃取非皂化物，余下碱 水层用 1 mol/L HCl 酸化，用石油醚萃取脂肪酸。合并石油醚萃取物，回收溶剂得脂肪酸 混合物。
, 百拇医药
1.4 脂肪酸甲酯化[2]：取1 g 混合脂肪酸加 5 mL三氟化硼-甲醇溶液(市售的3 5%三氟化硼乙醚溶液用无水甲醇稀释25倍)。在70 ℃水浴上加热回流 10 min，放冷，移入 分液漏斗，用乙醚萃取3次。合并乙醚溶液，水洗，用无水硫酸钠干燥，得混合脂肪酸甲酯 的乙醚溶液。回收溶剂，得混合脂肪酸甲酯，充氮气保存于冰箱。
1.5 混合脂肪酸的组成分析：采用GC-MS进行分离鉴定，面积归一化法进行定量。其色谱 条件为：色谱柱为Hp-5MS 5% Phenyl Methy Siloxane Capillary 30.0 m×250 μ m×0 . 25 μ m，进样品温度 260 ℃，柱压64.67 kPa，分流比100∶1，流量 1.0 mL/min,程 序 升温：初温 170 ℃以5 ℃/min 的程度升至 175 ℃，恒温 4 min,再以10 ℃/min速度升至1 92 ℃，保持 2 min，再以20 ℃/min升至230 ℃，保持 4 min，气质接口温度 280 ℃。
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2 结果
2.1 粗吻海龙脂肪酸的组成及相对含量(%)：十二酸0.342、十三酸0.065、十 四酸5.75 4、9-甲基十四酸0.294、10，13-二甲基十四酸0.079、十五酸1.000、十六碳三烯酸0 .212、11(E)-十五烯酸0.284、9(Z)-十六烯酸10. 401、7(E)-十六烯酸0.276、14-甲基十五酸24.976、7-甲基-6(Z)-十六烯 酸0.280、15-甲基十六酸0.506、9，10-环次甲基十六酸0.305、十七酸1.600、10- 甲基十七酸0.071、16-甲基十七酸0.482、10(E)，13(E)-十八二烯酸1.493、9(Z)-十 八烯酸14.085、11(E)-十八烯酸6.184、12(E)-十八烯酸0.216、十八酸1.600、 11-甲基十八酸0.082、10(E)-十九烯酸0.225-13(E)、十九烯酸0.064、十九酸0.395 、5(E)，8(E)，11(E)，14(E)-二十碳四烯酸2.338、5(Z)，8(Z)，11(E)，14(Z)，17(Z) -二十碳五烯酸4.172、7(E)，10(E)，13(E)-二十碳三烯酸0.125，11(E)-二十烯酸1. 948、11(E)，13(E)-二十碳二烯酸1.047、二十酸0.557、4(Z)，7(Z)，10(Z)，13(Z )，16(Z)，19(Z)-二十二碳六烯酸3.780、二十二酸0.325。
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2.2 拟海龙脂肪酸的组成及相对含量(%)：10-甲基十一酸0.167、十 四酸2.807、9- 甲基十四酸0.220、12-甲基十四酸0.403、十五酸1.050、14-甲基十五酸0.160、9(Z )-十六烯酸4.802、11(E)-十六烯酸0.106、十六酸30.695、15-甲基十六酸0.249、9 ，10-环次甲基十六酸0.563，十七酸2.694、8(E)，11(E)-十八二烯酸1.610，9(Z)- 十八烯酸10.867、11(E)-十八烯酸5.092、十八酸22.852、十九酸0.459、10-甲基十 八酸0.114、5(E)，8(E)，11(E)，14(E)-二十碳四烯酸2.675、5(Z)，8(Z)，11(Z)，14( Z)，17(Z)-二十碳五烯酸2.595、3-十二烯-4-炔0.124、10(E)，13(E)-二十碳二烯 酸0.163，11(E)-二十烯酸0.326、二十酸0.845、二十一酸0.359、4(Z)，7(Z)，10(Z) ，13(Z)，16(Z)，19(Z)-二十二碳六烯酸3.606、5(E)，8(E)， 11(E)，14(E)-二十碳五烯酸1.361、二十二酸0.777。
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2.3 尖海龙脂肪酸的组成及相对含量(%)：庚二酸0.418、辛二酸0.41 9、9-酮基葵酸 0.399、壬二酸0.837、葵二酸0.573、十四酸7.100、十一二酸1.317、4，8，12-三甲 基十三酸0.599、十五酸1.010、3-酮基十四二酸0.630、9(E)-十六烯酸10.24 2、9(Z)-十六烯酸0.380、十六酸25.815、十三二酸0.272、15-甲基十六酸0. 324、9.10-环次甲基十六酸0.440、十七酸1.049、8(E)，11(E)-十八 二烯酸2.254、9(Z)-十八烯酸14.309、11(E)-十八烯酸2.510、十八酸 8.783、5(Z)，8(Z)，11(Z)，14(Z)-二十碳四烯酸0.662，5(Z)，8(Z)，11(Z)，14(Z)， 17(Z)-二十碳五烯 酸3.670、11(E)-二十碳烯酸5.026、二十酸0.529、1-乙基戊腙酸0.517、4( Z)，7(Z)，10(Z)，13(Z)，16(Z)，19(Z)- 二十二碳六烯酸4.862、13(Z)-二十二碳烯酸2.540、1-十三炔-3-烯1.157 、5-十四炔-3-烯0.708。
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3 讨论
3.1 以上结果表明：粗吻海龙、拟海龙中含有较多的不饱和脂肪酸，其中粗吻海龙中不饱 和脂肪酸占总脂肪酸的46.92%，主要有C15∶1，C16∶1，C18∶1，C 18∶2，C19∶1，C20∶1，C20∶2，C20∶4，C20∶5 ，C22∶1，C22∶6的异构体组成，拟海龙中不饱和脂肪酸含量占32.62%，不 饱和脂肪酸组成主要为C16∶1，C18∶1，C18∶2，C20∶1，C 20∶2，C20∶4，C20∶5，C20∶6，尖海龙中不饱和脂肪酸含量占4 2.21%，不饱和脂肪酸组成主要为C16∶1，C18∶1，C18∶2，C20 ∶1，C20∶2，C20∶4，C20∶5，C22∶6，因此，海龙可能在 心血管疾病的治疗方面有一定疗效，有待于进一步的研究。
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3.2 粗吻海龙、拟海龙及尖海龙中均发现不常见的9，10-环次甲基十六酸，奇数碳脂肪 酸，另外在三种海龙中还发现有炔烯。因此，9，10-环次甲基十六酸作为一种较特殊的脂 肪酸成分，有可能作为海龙药材定性标准之一。
浙江省自然基金课题 No395131
吴筱丹 女，助教，1993年8月毕业于浙江医科大学药学系，并获得理学士学位，1999年7月 毕业于浙江大学湖滨校区药学院，并获得药物分析专业硕士研究生学位。曾参加国家计划生 育委员会资助课题“可生物降解的高分子药物的研究”的研究工作，研究生课题为“海洋药物海龙的生物活性成分研究”(浙江省自然基金课题)。目前在浙江大学药学院分析中心从事 教学科研工作，主要从事海洋药物方面的研究。
参 考 文 献
1，中华人民共和国药典.一部.北京：人民卫生出版社，1985：255
2，Morrison W R,et al. J Lipid Res,1964,5:600
(1999-10-15收稿), http://www.100md.com
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