国产红豆杉各部位紫杉醇含量分析
作者：张鸿 杨明惠
单位：张鸿(深圳大学科技研究院 518060)；杨明惠(云南大理师范高等专科学校)
关键词：
中草药000619 紫杉醇[1～3]目前国内的来源仍主要是从红豆杉树皮中提取，资源十分 短缺。本文对云南红豆杉Taxus yannanensis和南方红 豆杉T. chinensis的皮、根、叶、嫩枝、木和种子及东北红豆杉T.cuspid ata的皮、木、嫩枝和叶中紫杉醇含量 进行了分析比较，为合理开发红豆杉，提供了实验数据。
1 实验部分
1.1 仪器：岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-6V紫外检测器，大连化学物理所产C 18柱(4 mm×250 mm)，CX-250型超声振荡器及80-2型离心机。
, 百拇医药
试剂、试药：紫杉醇为Sigma公司出品，其它试剂均为国产分析纯试剂。
1.2 样品采集及制备：所有样品于1997年4月分别采集于云南省丽江地区和黑龙江省穆棱 县，样品采集后在阴凉通风处干燥，冰箱内避光保存。
1.3 样品溶液制备：干燥样品粉碎后过40目筛，准确称取粉末2 g，置于50 mL磨口具塞三 角瓶中，以20 mL甲醇超声萃取30 min，留上清液，沉淀复加20 mL甲醇，重复操作。合并上 清液，过滤除渣，滤液于50 ℃水浴减压蒸干，残留物溶于10 mL水，并加入10 mL二氯甲烷 ，超声萃取5 min，离心，分离二氯甲烷，水层复加10 mL二氯甲烷，重复操作。合并二氯甲 烷层，室温下减压蒸干，剩余物定溶于0.5 mL甲醇。叶、嫩枝样品的甲醇液，上氧化铝柱 ，用氯仿洗脱至无色，然后用甲醇洗脱，收集甲醇液于50 ℃水浴减压蒸干，残留物溶于0 .5 mL甲醇，制备液均经0.45 μm过滤器过滤，滤液供HPLC分析。
, 百拇医药
1.4 分析方法：采用文献[4]报道的方法。流动相：MEOH-H2O(65∶35)；流速 ：1 mL/min；检测波长：225 nm；灵敏度：0.16AUFS；进样量：40 μL，室温下外标法 进行定量分析。
2 结果
测定结果见表1。树皮中紫杉醇含量最高，其次是种子和根、木和嫩枝，叶中紫杉醇含量最低。表1 不同红豆杉各部位紫杉醇含量(%) 云南红豆杉
南方红豆杉
东北红豆杉
皮
根
木
嫩枝
, http://www.100md.com
叶
种子
皮
根
木
嫩枝
叶
种子
皮
木
嫩枝
叶
0.018
0.0082
, 百拇医药
0.0034
0.0019
0.0011
0.01
0.016
0.017
0.0025
0.0022
0.0025
0.012
0.042
0.009
0.0042
, 百拇医药
0.0039
3 讨论
实验结果显示，东北红豆杉中紫杉醇含量高于云南红豆杉和南方红豆杉，而同种植物中不同 部位紫杉醇分布规律与国外同类研究相一致[5]。
枝叶中紫杉醇的含量虽仅有干皮的1/10左右，但由于枝叶的总量远远大于干皮，加之枝叶中 含有重要的紫杉醇半合成前体baccatin Ⅲ或10-去乙酰baccatin Ⅲ，其在枝叶中的含量与 树皮中的紫杉醇含量相当[6]，由此可见，利用红豆杉枝叶分离紫杉醇是保护红豆 杉资源的良好途径之一。
参 考 文 献
1，Wani M C， et al. J Am Chem Soc,1971,93(9):2325
, http://www.100md.com
2，Denis J N， et al. J Am Chem Soc,1988,110:5917
3，Christen A A， et al. US Partent，5019504，1999-05-28
4，Vidensek N， et al. J Nat Prd,1990,53:1609
5，Borman S. Chemical and Enginering，1992,(9):12
6，Keity M, et al. J Nat Prod,1990,53(5):1249
(1999-12-30收稿), http://www.100md.com
单位：张鸿(深圳大学科技研究院 518060)；杨明惠(云南大理师范高等专科学校)
关键词：
中草药000619 紫杉醇[1～3]目前国内的来源仍主要是从红豆杉树皮中提取，资源十分 短缺。本文对云南红豆杉Taxus yannanensis和南方红 豆杉T. chinensis的皮、根、叶、嫩枝、木和种子及东北红豆杉T.cuspid ata的皮、木、嫩枝和叶中紫杉醇含量 进行了分析比较，为合理开发红豆杉，提供了实验数据。
1 实验部分
1.1 仪器：岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-6V紫外检测器，大连化学物理所产C 18柱(4 mm×250 mm)，CX-250型超声振荡器及80-2型离心机。
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试剂、试药：紫杉醇为Sigma公司出品，其它试剂均为国产分析纯试剂。
1.2 样品采集及制备：所有样品于1997年4月分别采集于云南省丽江地区和黑龙江省穆棱 县，样品采集后在阴凉通风处干燥，冰箱内避光保存。
1.3 样品溶液制备：干燥样品粉碎后过40目筛，准确称取粉末2 g，置于50 mL磨口具塞三 角瓶中，以20 mL甲醇超声萃取30 min，留上清液，沉淀复加20 mL甲醇，重复操作。合并上 清液，过滤除渣，滤液于50 ℃水浴减压蒸干，残留物溶于10 mL水，并加入10 mL二氯甲烷 ，超声萃取5 min，离心，分离二氯甲烷，水层复加10 mL二氯甲烷，重复操作。合并二氯甲 烷层，室温下减压蒸干，剩余物定溶于0.5 mL甲醇。叶、嫩枝样品的甲醇液，上氧化铝柱 ，用氯仿洗脱至无色，然后用甲醇洗脱，收集甲醇液于50 ℃水浴减压蒸干，残留物溶于0 .5 mL甲醇，制备液均经0.45 μm过滤器过滤，滤液供HPLC分析。
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1.4 分析方法：采用文献[4]报道的方法。流动相：MEOH-H2O(65∶35)；流速 ：1 mL/min；检测波长：225 nm；灵敏度：0.16AUFS；进样量：40 μL，室温下外标法 进行定量分析。
2 结果
测定结果见表1。树皮中紫杉醇含量最高，其次是种子和根、木和嫩枝，叶中紫杉醇含量最低。表1 不同红豆杉各部位紫杉醇含量(%) 云南红豆杉
南方红豆杉
东北红豆杉
皮
根
木
嫩枝
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叶
种子
皮
根
木
嫩枝
叶
种子
皮
木
嫩枝
叶
0.018
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0.0034
0.0019
0.0011
0.01
0.016
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0.0025
0.0022
0.0025
0.012
0.042
0.009
0.0042
, 百拇医药
0.0039
3 讨论
实验结果显示，东北红豆杉中紫杉醇含量高于云南红豆杉和南方红豆杉，而同种植物中不同 部位紫杉醇分布规律与国外同类研究相一致[5]。
枝叶中紫杉醇的含量虽仅有干皮的1/10左右，但由于枝叶的总量远远大于干皮，加之枝叶中 含有重要的紫杉醇半合成前体baccatin Ⅲ或10-去乙酰baccatin Ⅲ，其在枝叶中的含量与 树皮中的紫杉醇含量相当[6]，由此可见，利用红豆杉枝叶分离紫杉醇是保护红豆 杉资源的良好途径之一。
参 考 文 献
1，Wani M C， et al. J Am Chem Soc,1971,93(9):2325
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2，Denis J N， et al. J Am Chem Soc,1988,110:5917
3，Christen A A， et al. US Partent，5019504，1999-05-28
4，Vidensek N， et al. J Nat Prd,1990,53:1609
5，Borman S. Chemical and Enginering，1992,(9):12
6，Keity M, et al. J Nat Prod,1990,53(5):1249
(1999-12-30收稿), http://www.100md.com