荧光法研究兔体内多潘立酮药时曲线及脏器内分布
作者：张阿慧 王莉 郭琦 杨云 宋军妹
单位：王莉(中国西电集团医院药剂科)；张阿慧 郭琦 杨云(西安交通大学药学院 西安 710061)；宋军妹(陕西省宝鸡市人民医院)
关键词：荧光法；多潘立酮；血药浓度；脏器
西北药学杂志000603 摘要 采用荧光法测定家兔血浆及脏器中多潘立酮浓度。生物样品经二氯甲烷提取净化后，异丙醇定容，于EX＝290nm，EM＝320nm处测荧光强度。多潘立酮浓度在0.5～5.0μg/ml范围内与荧光强度线性相关，回归方程C＝0.205F-0.398，样品提取回收率为96.6%，RSD＝5.6%。
中图分类号：R969.1 文献标识码：A
多潘立酮(domperidone)为外周多巴胺受体阻滞剂，作用于胃肠壁，可增加食管下部括约肌张力，防止胃—食管反流，增强胃蠕动，协调胃与十二指肠运动，抑制恶心、呕吐，并能有效地防止胆汁反流，不影响胃液分泌。体液中多潘立酮测定方法有放射免疫法[1]、高效液相色谱法[2]。本文依据多潘立酮所具有的不饱和共轭体系的荧光分子结构特点[3]，设计了荧光光谱法测定体内多潘立酮(吗丁啉片)浓度，研究了该药物在家兔体内动力学特征及在内脏中分布、代谢情况。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 岛津RF-540荧光分光光度计(日本)；SK-1型快速混匀器(江苏国华仪器厂)。
1.2 试药 多潘立酮(中国药品生物制品检定所)；吗丁啉片(西安杨森制药有限公司)。
2 方法与结果
2.1 生物样品中多潘立酮的提取 取血浆或脏器匀浆上清液适量，加入0.5mol/L硫酸0.2ml酸化后，加入二氯甲烷2ml，经旋摇、离心(3000r/min)，弃去有机层。再加入氨水0.2ml，摇匀；用二氯甲烷提取2次，每次3ml；旋摇1min，3000r/min离心3min，合并提取液，于55℃水浴挥去溶剂。测定前加2.5ml异丙醇定容，测荧光强度(EX290nm，EM320nm，狭缝3/3，OR＝4)。
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2.2 标准曲线制备及回收率测定 精密称取多潘立酮0.01g，制成浓度为1mg/ml的异丙醇溶液，作为贮备液。吸取适量，用异丙醇稀释成0.5，1.0，2.0，3.0，5.0μg/ml标准液。取空白混合兔血浆1ml，加入标准液各1ml，按“2.1”项下操作，测荧光强度F，同时作空白校正。血浆中多潘立酮浓度C在0.5～5.0μg/ml范围内与荧光强度F线性相关(r＝0.9995)，回归方程C＝0.205F-0.398。实验证明，当浓度范围扩大，在0.10～10.0μg/ml内C仍与F呈线性关系(r＝0.9910)。
按标准加入法测定回收率，在0.5～5.0μg范围内，平均回收率为96.6%，RSD＝5.6%。
2.3 家兔血浆中多潘立酮药—时曲线的测绘 取体重2.5～3.0kg健康家兔3只，禁食1d，灌服吗丁啉片(5mg/kg)；不同时间耳动脉插管采血；取血浆1ml，按2.1项下操作，依回归方程求算血药浓度。多潘立酮的药—时曲线见图1。
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图1 兔体内多潘立酮药—时曲线
2.4 家兔脏器内多潘立酮浓度的测定 取健康家兔3只，灌服吗丁啉片(5mg/kg)后，分别于1.5，2.0，12h处死；取出心、肝、肾、胃，用生理盐水冲洗3次，分别称重后，加入生理盐水浸泡24h；按2.1项下操作，测定荧光强度，求算多潘立酮药物浓度。结果见表1。
表1 多潘立酮在家兔脏器中分布(μg/g) 时间(h)
胃
心
肝
肾
1.5
4.81
, 百拇医药
2.35
0.47
2.14
2.0
1.04
1.80
0.26
0.65
12.0
0.00
1.66
0.00
0.42
, 百拇医药
3 讨论
3.1 荧光测定条件的选择
3.1.1 提取剂的选择 曾选用氯仿、二氯甲烷、醋酸乙酯、环己烷、正庚烷等为提取剂，经比较二氯甲烷提取回收率高，沸点适宜。
3.1.2 测定溶剂的选择 曾选用乙醇、甲醇、二氯甲烷、正庚烷、异丙醇定容测定。结果表明在异丙醇中多潘立酮的荧光强度最稳定，24h内基本不变。
3.1.3 多潘立酮在兔体内动力学特征 由图1可见，灌服吗丁啉后1.5～2h家兔血药浓度达峰值，4h降至最低，随后逐渐升高，7h又出现第二高峰，可能是药物溶出迟缓所致。
3.1.4 多潘立酮在兔体脏器中分布情况 选定血药峰值时间1.5h，2h及12h为测定时间，考察胃、心、肝、肾中多潘立酮浓度及分布。由表1看出：在1.5～2h时，胃部药物浓度最高，心、肾次之，肝内含量最少；12h唯心、肾内仍有药物分布，提示每日口服3～4次的必要性及合理性。
参考文献
[1]王文铃，贺师鹏，许光炘，等.吗丁啉片剂和混悬剂的生物利用度研究.中国临床药理学杂志，1992，8(1)：25
[2]张黎明，袁成，冯琳，等.多潘立酮对扑热息痛人体动力学的影响.中国医院药学杂志，1992，12(11)：486
[3]吗丁啉药品介绍.中国医院药学杂志，1989，9(2)：55
(收稿日期：2000-05-12), 百拇医药
单位：王莉(中国西电集团医院药剂科)；张阿慧 郭琦 杨云(西安交通大学药学院 西安 710061)；宋军妹(陕西省宝鸡市人民医院)
关键词：荧光法；多潘立酮；血药浓度；脏器
西北药学杂志000603 摘要 采用荧光法测定家兔血浆及脏器中多潘立酮浓度。生物样品经二氯甲烷提取净化后，异丙醇定容，于EX＝290nm，EM＝320nm处测荧光强度。多潘立酮浓度在0.5～5.0μg/ml范围内与荧光强度线性相关，回归方程C＝0.205F-0.398，样品提取回收率为96.6%，RSD＝5.6%。
中图分类号：R969.1 文献标识码：A
多潘立酮(domperidone)为外周多巴胺受体阻滞剂，作用于胃肠壁，可增加食管下部括约肌张力，防止胃—食管反流，增强胃蠕动，协调胃与十二指肠运动，抑制恶心、呕吐，并能有效地防止胆汁反流，不影响胃液分泌。体液中多潘立酮测定方法有放射免疫法[1]、高效液相色谱法[2]。本文依据多潘立酮所具有的不饱和共轭体系的荧光分子结构特点[3]，设计了荧光光谱法测定体内多潘立酮(吗丁啉片)浓度，研究了该药物在家兔体内动力学特征及在内脏中分布、代谢情况。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 岛津RF-540荧光分光光度计(日本)；SK-1型快速混匀器(江苏国华仪器厂)。
1.2 试药 多潘立酮(中国药品生物制品检定所)；吗丁啉片(西安杨森制药有限公司)。
2 方法与结果
2.1 生物样品中多潘立酮的提取 取血浆或脏器匀浆上清液适量，加入0.5mol/L硫酸0.2ml酸化后，加入二氯甲烷2ml，经旋摇、离心(3000r/min)，弃去有机层。再加入氨水0.2ml，摇匀；用二氯甲烷提取2次，每次3ml；旋摇1min，3000r/min离心3min，合并提取液，于55℃水浴挥去溶剂。测定前加2.5ml异丙醇定容，测荧光强度(EX290nm，EM320nm，狭缝3/3，OR＝4)。
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2.2 标准曲线制备及回收率测定 精密称取多潘立酮0.01g，制成浓度为1mg/ml的异丙醇溶液，作为贮备液。吸取适量，用异丙醇稀释成0.5，1.0，2.0，3.0，5.0μg/ml标准液。取空白混合兔血浆1ml，加入标准液各1ml，按“2.1”项下操作，测荧光强度F，同时作空白校正。血浆中多潘立酮浓度C在0.5～5.0μg/ml范围内与荧光强度F线性相关(r＝0.9995)，回归方程C＝0.205F-0.398。实验证明，当浓度范围扩大，在0.10～10.0μg/ml内C仍与F呈线性关系(r＝0.9910)。
按标准加入法测定回收率，在0.5～5.0μg范围内，平均回收率为96.6%，RSD＝5.6%。
2.3 家兔血浆中多潘立酮药—时曲线的测绘 取体重2.5～3.0kg健康家兔3只，禁食1d，灌服吗丁啉片(5mg/kg)；不同时间耳动脉插管采血；取血浆1ml，按2.1项下操作，依回归方程求算血药浓度。多潘立酮的药—时曲线见图1。
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图1 兔体内多潘立酮药—时曲线
2.4 家兔脏器内多潘立酮浓度的测定 取健康家兔3只，灌服吗丁啉片(5mg/kg)后，分别于1.5，2.0，12h处死；取出心、肝、肾、胃，用生理盐水冲洗3次，分别称重后，加入生理盐水浸泡24h；按2.1项下操作，测定荧光强度，求算多潘立酮药物浓度。结果见表1。
表1 多潘立酮在家兔脏器中分布(μg/g) 时间(h)
胃
心
肝
肾
1.5
4.81
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2.35
0.47
2.14
2.0
1.04
1.80
0.26
0.65
12.0
0.00
1.66
0.00
0.42
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3 讨论
3.1 荧光测定条件的选择
3.1.1 提取剂的选择 曾选用氯仿、二氯甲烷、醋酸乙酯、环己烷、正庚烷等为提取剂，经比较二氯甲烷提取回收率高，沸点适宜。
3.1.2 测定溶剂的选择 曾选用乙醇、甲醇、二氯甲烷、正庚烷、异丙醇定容测定。结果表明在异丙醇中多潘立酮的荧光强度最稳定，24h内基本不变。
3.1.3 多潘立酮在兔体内动力学特征 由图1可见，灌服吗丁啉后1.5～2h家兔血药浓度达峰值，4h降至最低，随后逐渐升高，7h又出现第二高峰，可能是药物溶出迟缓所致。
3.1.4 多潘立酮在兔体脏器中分布情况 选定血药峰值时间1.5h，2h及12h为测定时间，考察胃、心、肝、肾中多潘立酮浓度及分布。由表1看出：在1.5～2h时，胃部药物浓度最高，心、肾次之，肝内含量最少；12h唯心、肾内仍有药物分布，提示每日口服3～4次的必要性及合理性。
参考文献
[1]王文铃，贺师鹏，许光炘，等.吗丁啉片剂和混悬剂的生物利用度研究.中国临床药理学杂志，1992，8(1)：25
[2]张黎明，袁成，冯琳，等.多潘立酮对扑热息痛人体动力学的影响.中国医院药学杂志，1992，12(11)：486
[3]吗丁啉药品介绍.中国医院药学杂志，1989，9(2)：55
(收稿日期：2000-05-12), 百拇医药