反相高效液相色谱法测定非洛地平缓释片的含量
作者：黄作君 黎月玲 郑企琨
单位：广州市红十字会医院 广州 510220
关键词：非洛地平缓释片 反相高效液相色谱法 含量测定
广东药学000609 摘要 采用RP-HPLC法测定非洛地平缓释片的含量。以NOVA-PAK C18柱为分析柱，甲醇-水(80∶20)为流动相，检测波长为238nm。该法线性良好(r=0.9999),精密度RSD=2.2%，平均加样回收率99.1%，RSD=0.7%(n=5)。
非洛地平(felodipine)是双氢吡啶类钙离子拮抗剂，该药降压效果好，临床应用广泛[1]。非洛地平的含量测定方法有凯氏定氮法[2]、氧化还原法[3]、紫外分光光度法[4]等，但这些方法的专属性差，影响测定的准确性。本文建立了非洛地平缓释片RP-HPLC含量测定方法，该法具有操作简便，测定准确、精密等优点。
, 百拇医药
1 仪器与试剂
WATERS 515 泵、WATERS 996 紫外检测器、RHEODYNE 7725 手动进样器；2010色谱管理系统；非洛地平对照品由广东省药检所提供；尼莫地平对照品由丽珠集团提供；非洛地平缓释片[阿斯特拉(无锡)制药有限公司，5mg/片，批号 9811037，9909009，9911016]；甲醇(色谱纯)；水为重蒸馏水。
2 色谱条件与系统适用性试验
NOVA-PAK C184.6×250mm，4μm分析柱，流动相为甲醇-水(80∶20)，流速1.4ml/min，柱温40℃，检测波长238nm，进样量10μl。非洛地平保留时间约4min，内标尼莫地平保留时间约3min，理论塔板数(按非洛地平计)>5000,分离度>1.5，拖尾因子1.09。色谱图见图1。
, 百拇医药
图1 非洛地平及其内标的色谱图
1.尼莫地平；2.非洛地平。
3 实验方法
3.1 储备液的配制
精密称取非洛地平对照品，用甲醇配制成500μg/ml的储备液。精密称取尼莫地平对照品，用甲醇配制成750μg/ml内标储备液，置4℃保存。
3.2 标准曲线的制备
分别精密吸取非洛地平储备液及尼莫地平储备液，用甲醇配制成含非洛地平10、20、40、60、80μg/ml，内标30μg/ml的标准溶液，进样10μl测定。以非洛地平与内标峰面积比值对非洛地平浓度回归，得回归方程：Y=-0.003+0.026X,r=0.9999，非洛地平在浓度10～80μg/ml范围内线性关系良好。
, 百拇医药
3.3 加样回收试验
取非洛地平缓释片10片，研细，精密称取相当于2.5mg非洛地平粉末，再精密加入非洛地平对照品及内标储备液用甲醇配制成含非洛地平40μg/ml及内标30μg/ml的溶液。按上述色谱条件进行测定，计算加样回收率。结果见表1。
表1 非洛地平加样回收试验结果 (n=5) 加入量
(mg)
回收量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
, 百拇医药
RSD
(%)
1.90
1.87
99.8
1.95
1.94
99.4
2.00
1.96
98.0
99.1
0.7
, 百拇医药
2.05
2.04
99.5
2.10
2.07
98.8
3.4 精密度试验
配制含非洛地平40μg/ml，内标30μg/ml溶液，一日内重复进样5次测定，RSD=2.2%。
3.5 样品测定
取非洛地平缓释片10片，研细，精密称取相当于5mg非洛地平粉末置10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，滤过，精密吸取续滤液4ml，加入内标液2ml，用甲醇配制成含非洛地平40μg/ml，内标30μg/ml的样品溶液，进样前用0.45μm微孔滤膜滤过，按上述色谱条件测定。结果见表2。表2 非洛地平缓释片含量测定结果 (n=6) 批号
, 百拇医药
9811037
9909009
9911016
标示百分量(%)
RSD(%)
102.5
0.5
100.7
1.2
100.6
0.5
4 讨论
4.1 对非洛地平的化学结构分析，其含量测定有多种方法。凯氏定氮法操作繁琐，专属性差 ；氧化还原法和紫外分光光度法虽操作简便但专属性欠佳。本文采用的RP-HPLC法与其它测定方法比较，具有快速、准确、专属性好等优点。
, 百拇医药
4.2 本文采用尼莫地平为内标，相对其他二氢吡啶类药物杂质峰少，保留时间与非洛地平接近。
4.3 在组分间分离良好的前提下，增加流动相中甲醇的比例，提高流速可减少非洛地平的保留时间。本实验建立的色谱条件保留时间适中，色谱峰形良好，线性范围宽。
参考文献
1，徐叔云，等.现代实用临床药理学.华厦出版社，1996：577
2，中国药典(95版)二部.1995：附录43
3，孙毓庆主编.分析化学(上册).人民卫生出版社，1992：179
4，孙毓庆主编.分析化学(下册).人民卫生出版社，1992：12
(收稿日期：2000-07-12), 百拇医药
单位：广州市红十字会医院 广州 510220
关键词：非洛地平缓释片 反相高效液相色谱法 含量测定
广东药学000609 摘要 采用RP-HPLC法测定非洛地平缓释片的含量。以NOVA-PAK C18柱为分析柱，甲醇-水(80∶20)为流动相，检测波长为238nm。该法线性良好(r=0.9999),精密度RSD=2.2%，平均加样回收率99.1%，RSD=0.7%(n=5)。
非洛地平(felodipine)是双氢吡啶类钙离子拮抗剂，该药降压效果好，临床应用广泛[1]。非洛地平的含量测定方法有凯氏定氮法[2]、氧化还原法[3]、紫外分光光度法[4]等，但这些方法的专属性差，影响测定的准确性。本文建立了非洛地平缓释片RP-HPLC含量测定方法，该法具有操作简便，测定准确、精密等优点。
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1 仪器与试剂
WATERS 515 泵、WATERS 996 紫外检测器、RHEODYNE 7725 手动进样器；2010色谱管理系统；非洛地平对照品由广东省药检所提供；尼莫地平对照品由丽珠集团提供；非洛地平缓释片[阿斯特拉(无锡)制药有限公司，5mg/片，批号 9811037，9909009，9911016]；甲醇(色谱纯)；水为重蒸馏水。
2 色谱条件与系统适用性试验
NOVA-PAK C184.6×250mm，4μm分析柱，流动相为甲醇-水(80∶20)，流速1.4ml/min，柱温40℃，检测波长238nm，进样量10μl。非洛地平保留时间约4min，内标尼莫地平保留时间约3min，理论塔板数(按非洛地平计)>5000,分离度>1.5，拖尾因子1.09。色谱图见图1。
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图1 非洛地平及其内标的色谱图
1.尼莫地平；2.非洛地平。
3 实验方法
3.1 储备液的配制
精密称取非洛地平对照品，用甲醇配制成500μg/ml的储备液。精密称取尼莫地平对照品，用甲醇配制成750μg/ml内标储备液，置4℃保存。
3.2 标准曲线的制备
分别精密吸取非洛地平储备液及尼莫地平储备液，用甲醇配制成含非洛地平10、20、40、60、80μg/ml，内标30μg/ml的标准溶液，进样10μl测定。以非洛地平与内标峰面积比值对非洛地平浓度回归，得回归方程：Y=-0.003+0.026X,r=0.9999，非洛地平在浓度10～80μg/ml范围内线性关系良好。
, 百拇医药
3.3 加样回收试验
取非洛地平缓释片10片，研细，精密称取相当于2.5mg非洛地平粉末，再精密加入非洛地平对照品及内标储备液用甲醇配制成含非洛地平40μg/ml及内标30μg/ml的溶液。按上述色谱条件进行测定，计算加样回收率。结果见表1。
表1 非洛地平加样回收试验结果 (n=5) 加入量
(mg)
回收量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
, 百拇医药
RSD
(%)
1.90
1.87
99.8
1.95
1.94
99.4
2.00
1.96
98.0
99.1
0.7
, 百拇医药
2.05
2.04
99.5
2.10
2.07
98.8
3.4 精密度试验
配制含非洛地平40μg/ml，内标30μg/ml溶液，一日内重复进样5次测定，RSD=2.2%。
3.5 样品测定
取非洛地平缓释片10片，研细，精密称取相当于5mg非洛地平粉末置10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，滤过，精密吸取续滤液4ml，加入内标液2ml，用甲醇配制成含非洛地平40μg/ml，内标30μg/ml的样品溶液，进样前用0.45μm微孔滤膜滤过，按上述色谱条件测定。结果见表2。表2 非洛地平缓释片含量测定结果 (n=6) 批号
, 百拇医药
9811037
9909009
9911016
标示百分量(%)
RSD(%)
102.5
0.5
100.7
1.2
100.6
0.5
4 讨论
4.1 对非洛地平的化学结构分析，其含量测定有多种方法。凯氏定氮法操作繁琐，专属性差 ；氧化还原法和紫外分光光度法虽操作简便但专属性欠佳。本文采用的RP-HPLC法与其它测定方法比较，具有快速、准确、专属性好等优点。
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4.2 本文采用尼莫地平为内标，相对其他二氢吡啶类药物杂质峰少，保留时间与非洛地平接近。
4.3 在组分间分离良好的前提下，增加流动相中甲醇的比例，提高流速可减少非洛地平的保留时间。本实验建立的色谱条件保留时间适中，色谱峰形良好，线性范围宽。
参考文献
1，徐叔云，等.现代实用临床药理学.华厦出版社，1996：577
2，中国药典(95版)二部.1995：附录43
3，孙毓庆主编.分析化学(上册).人民卫生出版社，1992：179
4，孙毓庆主编.分析化学(下册).人民卫生出版社，1992：12
(收稿日期：2000-07-12), 百拇医药