甲状腺肿瘤p185、nm23-H1及PCNA表达的研究
作者：张杰 钟梅 布静秋 朱蕾
单位：张杰(上海市第五人民医院病理科 上海 200240)；钟梅 布静秋(北京解放军总医院病理科 北京100853)；朱蕾(中国石油天然气总公司廊坊中心医院)
关键词：甲状腺肿瘤；增殖细胞核抗原；基因产物，p185；基因产物，nm23-H1蛋白；免疫组织化学
肿瘤000619
摘要：目的 观察p185、nm23-H1蛋白及PCNA在甲状腺良、恶性肿瘤中表达并探讨其临床应用价值。方法 采用免疫组织化学(SP法)检测117例各类甲状腺肿瘤三种蛋白表达状况。结果 p185、nm23-H1蛋白及PCNA在甲状腺癌中表达阳性率分别是46.70 % (28/60)、41.70 % (25/60)和90 % (54/60)，在甲状腺良性肿瘤分别是8.77 % (5/57)、29.83 % (17/57)和21.05 % (12/57)。甲状腺癌的PCNA和p185共表达率(43.30 %)明显高于甲状腺良性肿瘤(1.75 %)(P<0.001)。结论 PCNA和p185在甲状腺癌发生发展中具有一定相关性，而且在甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤的鉴别诊断中可能有重要意义。
, http://www.100md.com
中图分类号：R736.1 文献标识码：A 文章编号：1000-7431(2000)06-0448-03
EXPRESSION OF p185nue、nm23-H1 protein AND PCNA IN THYROID TUMORS
ZHANG Jie ZHONG Mei BU Jing-qiu
Department of Pathology, Shanghai Fifth People's Hospital. Shanghai 200240
Abstract：Objective To investigate the expression of p185neu、nm23-H1 protein and PCNA in benign and malignant thyroid tumors and to discuss the value of its clinicaluse. Methods In 117 cases of thyroid tumors these 3 proteins were detected by immunohistochemical methods. Results The postive rates for p185neu、nm23-H1 protein and PCNA were 46.70 % (28/60)、41.70 % (25/60) and 90 % (54/60) respectively in thyroid carcinoma and were only 8.77 % (5/57)、29.83 % (12/57) and 21.05 % (12/57) respectively in benign thyroid tumors. The co-expression of p185neu and PCNA was 43.30 % in thyroid carcinoma, significantly higher than that in benign thyroid tumors (1.75 %) (P<0.001). Conclusion PCNA and p185neu were correlated with the origin and development of thyroid tumors, moreover p185neu and PCNA co-expression is valuable for differentiate benign from malignant thyroid tumos.
, 百拇医药
Key words： Thyroid neoplasms; Gene products,p185neu;Gene products,nm23-H1 protein; PCNA; Immunohistochemistry
甲状腺肿瘤良、恶性判断比较困难，如滤泡状癌与生长活跃的滤泡性腺瘤的辨别等。随着肿瘤分子生物学研究进展，人们认识到恶性肿瘤的发生及转移同一些原癌基因的激活或扩增关系密切。为此，我们检测与肿瘤转移相关p185，nm23-H1蛋白及与细胞增殖相关的PCNA在各类甲状腺良、恶性肿瘤中的表达状况与甲状腺肿瘤关系。
材料与方法
一、材料 共收集各类甲状腺肿瘤手术切除标本117例。其中恶性甲状腺肿瘤60例，男性11例，女性49例，平均年龄46.9岁；良性甲状腺肿瘤(或病变)标本57例，男性20例，女性37例。
, http://www.100md.com 二、方法 采用链霉菌素-生物素(SP)免疫组织化学法，nm23-H1蛋白单克隆抗体(sc-465)及PCNA单克隆抗体(sc-56)均购自Santa Cruz公司。兔抗人p185多克隆抗体购自DAKO公司。生物素化兔抗鼠IgG，兔抗兔IgG及Avidin-HRP均是DAKO公司产品。免疫组化流程按SP法常规免疫组化染色。已知阳性标本作阳性对照，用TBS代替一抗作为阴性对照。
三、结果判断 染色阳性信号呈棕黄色以定位准确的阳性细胞>20 %为阳性标准。PCNA阳性信号位于细胞核。nm23-H1蛋白和p185阳性信号位于细胞浆或胞膜。数据用χ2检验等。
结 果
60例甲状腺癌和57例甲状腺良性肿瘤中三种蛋白表达的结果见表1。
一、PCNA 60例甲状腺癌中，PCNA表达阳性54例(90%)。9例未分化癌均表达阳性。有转移者与无转移者相比，PCNA表达无明显差异。57例甲状腺良性肿瘤PCNA表达阳性12例(21.05 %)。其中2例为桥本氏甲状腺炎均阳性。甲状腺癌PCNA表达明显高于甲状腺良性肿瘤(P<0.001)。
, 百拇医药
表1 117例甲状腺肿瘤p185neu、nm23-H1及PCNA表达 组别
例数
例数(%)
nm23-H1
p185neu
PCNA
恶性肿瘤
乳头状癌
38
21(55.3)
20(52.6)
34(89.5)
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滤泡状癌
11
2(18.2)
3(27.3)
9(81.2)
未分化癌
9
2(22.2)
5(55.6)
9(100.0)
髓样癌
2
0(0.0)
, http://www.100md.com
0(0.0)
2(100.0)
转移
有
11
3(27.3)
8(72.7)
10(90.9)
无
49
22(44.9)
19(38.8)
44(89.8)
, http://www.100md.com
良性肿瘤
腺瘤
33
11(33.3)
4(12.1)
7(21.2)
结甲
20
4(20.0)
1(5.0)
3(15.0)
甲亢
2
, 百拇医药
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
甲状腺炎
2
2(100.0)
0(0.0)
2(100.0)
二、p185 60例甲状腺癌中，p185表达阳性28例(46.7 %)(见封三图7)。未分化癌表达阳性率最高(55.6 %)。有转移者p185表达率为72.7 %，高于无转移者的28.8 %，由于转移者标本11例，校正检验χ2=2.27，(P>0.05)，无显著性差异。57例甲状腺良性肿瘤p185表达阳性5例(8.77 %)。甲状腺癌p185表达明显高于甲状腺良性肿瘤(P<0.001)。
, http://www.100md.com
三、nm23-H1蛋白 60例甲状腺癌中，nm23-H1蛋白表达阳性25例(41.7 %)(见封三图3)。乳头状癌表达阳性率最高(55.26 %)。有转移者表达率27.27 %，低于无转移者的44.89 %，(P>0.05)。57例甲状腺良性肿瘤nm23-H1蛋白表达阳性17例(29.82 %)。甲状腺癌nm23-H1蛋白表达高于甲状腺良性肿瘤，χ2=1.79，(P>0.05)。表2 甲状腺肿瘤与PCNA和p185neu共同表达 组别
例数(%)
合计
阳性
阴性
恶性肿瘤
乳头状癌
, 百拇医药 18(47.3)
20(52.7)
38
滤泡状癌
4(36.3)
7(63.7)
11
未分化癌
4(44.4)
5(55.6)
9
髓样癌
0(00.0)
, 百拇医药
2(100)
2
转移
有
7(63.6)
4(36.4)
11
无
19(38.8)
30(61.2)
49
良性肿瘤
1(1.80)
, 百拇医药
56(98.2)
57
四、甲状腺肿瘤与PCNA和p185共同表达关系 甲状腺癌中上述两种蛋白共同表达见表2。60例甲状腺癌中，p185和PCNA共同表达阳性26例(43.3 %)。其中乳头状癌47.3 %(18/38)，滤泡状癌36.4 %(4/11)，未分化癌44.4 %(4/9)。有转移者两种蛋白共同表达达63.6 %(7/11)，无转移者38.8 %(19/49)。57例甲状腺良性肿瘤p185和PCNA联合表达阳性仅1例，1.75 %。诊断为甲状腺滤泡状腺瘤。甲状腺癌p185和PCNA共同表达明显高于甲状腺良性肿瘤(P<0.001)。
讨 论
一、细胞增殖核抗原(PCNA)是分子量36 kD的核多肽。PCNA表达程度可以反映甲状腺癌细胞增殖活性，检测该蛋白对判断甲状腺肿瘤良、恶性有一定的参考价值。
, 百拇医药
二、目前认为185 kD蛋白与细胞分化，转移关系十分密切，特别是是乳腺癌，多数学者的研究表明该基因的扩增或过表达与乳腺癌预后呈负相关[1，2]。有转移者与无转移者间，前者p185表达率明显高于后者。甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤间p185表达有极明显差异，表明c-erbB-2基因编码的p185蛋白可能在甲状腺癌发生及转化起一定作用。
三、目前发现nm23-H1基因高水平表达有抑制癌细胞转移作用，而该基因缺失或突变则使其抑制作用丧失[3，4]。本文显示无转移者nm23-H1蛋白表达高于有转移者，但两者间无显著差异。
四、本研究中，甲状腺恶性组p185和PCNA共同表达阳性率为43.3 %，而良性组仅1.75 %，两组有极显著差异，提示这两种基因蛋白不仅在甲状腺癌的发生发展中具有一定的相关性，而且在甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤的鉴别诊断中可能有重要意义。
, http://www.100md.com 张 杰，男，硕士，副主任医师。
参考文献
[1]Slamon DJ, Clark GM, Wong SG, et al. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of Her-2/neu oncogene〔J〕. Science, 1987, 235:177
[2]张杰，陈乐真，吕亚莉，等. Her-2/neu基因扩增及其蛋白表达与乳腺癌分化和转移的关系〔J〕. 中华病理学杂志，1997，26：46
[3]Leone A, Flatow U, King CR. Reduced tumor incidence metastatic potential and cytokine responsiveness of nm23-transfected melanoma cells〔J〕. Cell, 1991, 65:25
[4]Leone A, McBride OW, Weston A. Somatic allelic deletion of nm23 in human cancer〔J〕. Cancer Res, 1991, 51:2490
(收稿日期：1999-04-05；修回日期：1999-07-29), 百拇医药
单位：张杰(上海市第五人民医院病理科 上海 200240)；钟梅 布静秋(北京解放军总医院病理科 北京100853)；朱蕾(中国石油天然气总公司廊坊中心医院)
关键词：甲状腺肿瘤；增殖细胞核抗原；基因产物，p185；基因产物，nm23-H1蛋白；免疫组织化学
肿瘤000619
摘要：目的 观察p185、nm23-H1蛋白及PCNA在甲状腺良、恶性肿瘤中表达并探讨其临床应用价值。方法 采用免疫组织化学(SP法)检测117例各类甲状腺肿瘤三种蛋白表达状况。结果 p185、nm23-H1蛋白及PCNA在甲状腺癌中表达阳性率分别是46.70 % (28/60)、41.70 % (25/60)和90 % (54/60)，在甲状腺良性肿瘤分别是8.77 % (5/57)、29.83 % (17/57)和21.05 % (12/57)。甲状腺癌的PCNA和p185共表达率(43.30 %)明显高于甲状腺良性肿瘤(1.75 %)(P<0.001)。结论 PCNA和p185在甲状腺癌发生发展中具有一定相关性，而且在甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤的鉴别诊断中可能有重要意义。
, http://www.100md.com
中图分类号：R736.1 文献标识码：A 文章编号：1000-7431(2000)06-0448-03
EXPRESSION OF p185nue、nm23-H1 protein AND PCNA IN THYROID TUMORS
ZHANG Jie ZHONG Mei BU Jing-qiu
Department of Pathology, Shanghai Fifth People's Hospital. Shanghai 200240
Abstract：Objective To investigate the expression of p185neu、nm23-H1 protein and PCNA in benign and malignant thyroid tumors and to discuss the value of its clinicaluse. Methods In 117 cases of thyroid tumors these 3 proteins were detected by immunohistochemical methods. Results The postive rates for p185neu、nm23-H1 protein and PCNA were 46.70 % (28/60)、41.70 % (25/60) and 90 % (54/60) respectively in thyroid carcinoma and were only 8.77 % (5/57)、29.83 % (12/57) and 21.05 % (12/57) respectively in benign thyroid tumors. The co-expression of p185neu and PCNA was 43.30 % in thyroid carcinoma, significantly higher than that in benign thyroid tumors (1.75 %) (P<0.001). Conclusion PCNA and p185neu were correlated with the origin and development of thyroid tumors, moreover p185neu and PCNA co-expression is valuable for differentiate benign from malignant thyroid tumos.
, 百拇医药
Key words： Thyroid neoplasms; Gene products,p185neu;Gene products,nm23-H1 protein; PCNA; Immunohistochemistry
甲状腺肿瘤良、恶性判断比较困难，如滤泡状癌与生长活跃的滤泡性腺瘤的辨别等。随着肿瘤分子生物学研究进展，人们认识到恶性肿瘤的发生及转移同一些原癌基因的激活或扩增关系密切。为此，我们检测与肿瘤转移相关p185，nm23-H1蛋白及与细胞增殖相关的PCNA在各类甲状腺良、恶性肿瘤中的表达状况与甲状腺肿瘤关系。
材料与方法
一、材料 共收集各类甲状腺肿瘤手术切除标本117例。其中恶性甲状腺肿瘤60例，男性11例，女性49例，平均年龄46.9岁；良性甲状腺肿瘤(或病变)标本57例，男性20例，女性37例。
, http://www.100md.com 二、方法 采用链霉菌素-生物素(SP)免疫组织化学法，nm23-H1蛋白单克隆抗体(sc-465)及PCNA单克隆抗体(sc-56)均购自Santa Cruz公司。兔抗人p185多克隆抗体购自DAKO公司。生物素化兔抗鼠IgG，兔抗兔IgG及Avidin-HRP均是DAKO公司产品。免疫组化流程按SP法常规免疫组化染色。已知阳性标本作阳性对照，用TBS代替一抗作为阴性对照。
三、结果判断 染色阳性信号呈棕黄色以定位准确的阳性细胞>20 %为阳性标准。PCNA阳性信号位于细胞核。nm23-H1蛋白和p185阳性信号位于细胞浆或胞膜。数据用χ2检验等。
结 果
60例甲状腺癌和57例甲状腺良性肿瘤中三种蛋白表达的结果见表1。
一、PCNA 60例甲状腺癌中，PCNA表达阳性54例(90%)。9例未分化癌均表达阳性。有转移者与无转移者相比，PCNA表达无明显差异。57例甲状腺良性肿瘤PCNA表达阳性12例(21.05 %)。其中2例为桥本氏甲状腺炎均阳性。甲状腺癌PCNA表达明显高于甲状腺良性肿瘤(P<0.001)。
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表1 117例甲状腺肿瘤p185neu、nm23-H1及PCNA表达 组别
例数
例数(%)
nm23-H1
p185neu
PCNA
恶性肿瘤
乳头状癌
38
21(55.3)
20(52.6)
34(89.5)
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滤泡状癌
11
2(18.2)
3(27.3)
9(81.2)
未分化癌
9
2(22.2)
5(55.6)
9(100.0)
髓样癌
2
0(0.0)
, http://www.100md.com
0(0.0)
2(100.0)
转移
有
11
3(27.3)
8(72.7)
10(90.9)
无
49
22(44.9)
19(38.8)
44(89.8)
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良性肿瘤
腺瘤
33
11(33.3)
4(12.1)
7(21.2)
结甲
20
4(20.0)
1(5.0)
3(15.0)
甲亢
2
, 百拇医药
0(0.0)
0(0.0)
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甲状腺炎
2
2(100.0)
0(0.0)
2(100.0)
二、p185 60例甲状腺癌中，p185表达阳性28例(46.7 %)(见封三图7)。未分化癌表达阳性率最高(55.6 %)。有转移者p185表达率为72.7 %，高于无转移者的28.8 %，由于转移者标本11例，校正检验χ2=2.27，(P>0.05)，无显著性差异。57例甲状腺良性肿瘤p185表达阳性5例(8.77 %)。甲状腺癌p185表达明显高于甲状腺良性肿瘤(P<0.001)。
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三、nm23-H1蛋白 60例甲状腺癌中，nm23-H1蛋白表达阳性25例(41.7 %)(见封三图3)。乳头状癌表达阳性率最高(55.26 %)。有转移者表达率27.27 %，低于无转移者的44.89 %，(P>0.05)。57例甲状腺良性肿瘤nm23-H1蛋白表达阳性17例(29.82 %)。甲状腺癌nm23-H1蛋白表达高于甲状腺良性肿瘤，χ2=1.79，(P>0.05)。表2 甲状腺肿瘤与PCNA和p185neu共同表达 组别
例数(%)
合计
阳性
阴性
恶性肿瘤
乳头状癌
, 百拇医药 18(47.3)
20(52.7)
38
滤泡状癌
4(36.3)
7(63.7)
11
未分化癌
4(44.4)
5(55.6)
9
髓样癌
0(00.0)
, 百拇医药
2(100)
2
转移
有
7(63.6)
4(36.4)
11
无
19(38.8)
30(61.2)
49
良性肿瘤
1(1.80)
, 百拇医药
56(98.2)
57
四、甲状腺肿瘤与PCNA和p185共同表达关系 甲状腺癌中上述两种蛋白共同表达见表2。60例甲状腺癌中，p185和PCNA共同表达阳性26例(43.3 %)。其中乳头状癌47.3 %(18/38)，滤泡状癌36.4 %(4/11)，未分化癌44.4 %(4/9)。有转移者两种蛋白共同表达达63.6 %(7/11)，无转移者38.8 %(19/49)。57例甲状腺良性肿瘤p185和PCNA联合表达阳性仅1例，1.75 %。诊断为甲状腺滤泡状腺瘤。甲状腺癌p185和PCNA共同表达明显高于甲状腺良性肿瘤(P<0.001)。
讨 论
一、细胞增殖核抗原(PCNA)是分子量36 kD的核多肽。PCNA表达程度可以反映甲状腺癌细胞增殖活性，检测该蛋白对判断甲状腺肿瘤良、恶性有一定的参考价值。
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二、目前认为185 kD蛋白与细胞分化，转移关系十分密切，特别是是乳腺癌，多数学者的研究表明该基因的扩增或过表达与乳腺癌预后呈负相关[1，2]。有转移者与无转移者间，前者p185表达率明显高于后者。甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤间p185表达有极明显差异，表明c-erbB-2基因编码的p185蛋白可能在甲状腺癌发生及转化起一定作用。
三、目前发现nm23-H1基因高水平表达有抑制癌细胞转移作用，而该基因缺失或突变则使其抑制作用丧失[3，4]。本文显示无转移者nm23-H1蛋白表达高于有转移者，但两者间无显著差异。
四、本研究中，甲状腺恶性组p185和PCNA共同表达阳性率为43.3 %，而良性组仅1.75 %，两组有极显著差异，提示这两种基因蛋白不仅在甲状腺癌的发生发展中具有一定的相关性，而且在甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤的鉴别诊断中可能有重要意义。
, http://www.100md.com 张 杰，男，硕士，副主任医师。
参考文献
[1]Slamon DJ, Clark GM, Wong SG, et al. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of Her-2/neu oncogene〔J〕. Science, 1987, 235:177
[2]张杰，陈乐真，吕亚莉，等. Her-2/neu基因扩增及其蛋白表达与乳腺癌分化和转移的关系〔J〕. 中华病理学杂志，1997，26：46
[3]Leone A, Flatow U, King CR. Reduced tumor incidence metastatic potential and cytokine responsiveness of nm23-transfected melanoma cells〔J〕. Cell, 1991, 65:25
[4]Leone A, McBride OW, Weston A. Somatic allelic deletion of nm23 in human cancer〔J〕. Cancer Res, 1991, 51:2490
(收稿日期：1999-04-05；修回日期：1999-07-29), 百拇医药