芍药甘草汤平喘和抗过敏作用的实验研究
作者：蔡宛如 钱华 朱渊红 宋康 张弘 王真 汤军
单位：蔡宛如 朱渊红 宋康 张弘 王真 汤军(浙江省中医院呼吸内科，浙江 杭州 310006)；钱华(浙江省林科院植物药研究中心)
关键词：芍药甘草汤；平喘；抗过敏；中医药
芍药甘草汤平喘和抗过敏作用的实验研究 摘要：目的：观察芍药甘草汤的平喘和抗过敏作用。方法：通过整体实验，观察芍药甘草汤对组胺所致豚鼠支气管收缩和卵白蛋白诱发的致敏豚鼠哮喘及致敏大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的影响。结果：3 g/kg和10 g/kg剂量的芍药甘草汤能显著延长豚鼠引喘潜伏期(P<0.01或P<0.001)和抑制大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒(P<0.001)。结论：芍药甘草汤具有平喘和抗过敏作用。
中图分类号：R285.6;R562.25 文献标识码：A
, 百拇医药
文章编号：1008-9691(2000)06-0341-02
Experimental study on the antiallergic and antiasthmatic effects of PeonyLicorice decoction
CAI Wan-ru,QIAN Hua,ZHU Yuan-hong,et al.
(Zhejiang Provincial Hospital of TCM,Hangzhou Zhejiang 310006)
Abstract:Objective:To observe the effect of Peony-Licorice decoction on anti-allergy and anti-asthma.Methods:Observation was made in guinea pigs for the effects of Peony-Licorice decoction on relieving the asthma due to histamine-induced brochoconstriction and egg-albumin induced sensitization,and the changes of degranulation in the mast cells of cranial periosteum in sensitized rat.Results:Peony-Licorice decoction in the dose of 3 g/kg and 10 g/kg could prolong the latent period of asthma significantly in guinea pigs (P<0.01 or P<0.001),and effectively inhibit the degranulation of mast cell in the cranial periosteum of rats (P<0.001).Conclusions:Peony-Licorice decoction has the action on relieving asthma and antianaphylaxis.
, 百拇医药
Key words:Peony-Licorice decoction;asthma-relieving;antianaphylaxis;traditional Chinese medicine
芍药甘草汤(芍甘汤)系张仲景《伤寒论》中的著名方剂。随着临床医学和现代药理学研究的不断发展，人们对此方的作用及应用范围作了广泛的探讨。近年临床研究发现，芍甘汤对哮喘、顽咳和小儿百日咳的疗效十分显著[1]。本研究初步观察了芍甘汤的平喘和抗过敏作用，为其临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材 料：
1.1.1 动物：豚鼠，体重150～200 g，雌雄均可；雄性SD大鼠，体重200 g左右，均由浙江大学药学院实验动物中心提供。
, 百拇医药 1.1.2 药物：白芍(paenoia laciflora pall,杭州产)、甘草(glgcyrrhiza aralensis fisch，承德产)由本院中药房提供。将芍药甘草按2∶1配方，水煎3次，每次30分钟，收集3次水煎液浓缩成4×103 g/L的溶液备用。
1.1.3 试剂：磷酸组胺(中科院上海化所东风生化技术公司，批号：981218)；喘定(中国信谊药厂，批号：981123)；氨茶碱(浙南药业有限公司，批号：980912)；阿斯匹林(恩华药业集团徐州制药厂，批号：109066)；伊文思蓝(上海化学试剂采购供应站，批号：950525)；卵白蛋白(上海生物化学试剂公司，批号：9707111)；百白破三联疫苗(浙江省卫生防疫站，批号：9810123)。
1.1.4 仪器：402超声雾化器(上海合力医疗器械厂)。
1.2 实验方法：
, 百拇医药
1.2.1 芍甘汤对组胺喷雾引起豚鼠哮喘的影响：取经预选合格的豚鼠(引喘潜伏期<120秒)40只；随机分成芍甘汤高剂量组(10 g/kg)、芍甘汤低剂量组(3 g/kg)、氨茶碱组(0.1 g/kg)和生理盐水组(等容量)4组，每组10只。芍甘汤均稀释成每只0.5 ml，灌胃给药，连续7日。末次给药后1小时，将各组豚鼠置于4 L容积的密闭玻璃罩内，以最大雾量档次喷入0.4%组胺10秒引喘，观察并记录从喷雾开始到豚鼠发生喘息及至抽搐的时间(即引喘潜伏期)。
1.2.2 芍甘汤对致敏豚鼠哮喘的影响：分组同上，西药对照组改为喘定(0.1 g/kg)。按文献[2]的方法，将0.1 mg卵白蛋白(OA)和100 mg Al(OH)3溶于1 ml生理盐水，配制成凝胶液，在豚鼠足跖、腰、颈、腹股沟处对称共10点分别皮下注射50 μl，同时腹腔注射0.5 ml致敏动物，共3周。致敏最后1日，将豚鼠置于密闭容器内，进行引喘实验。实验前1小时，各组动物先口服相应的药物，1小时后分别吸入0.25%OA气雾0.5分钟，测定不同药物对引喘率和引喘潜伏期的影响。
, 百拇医药
1.2.3 芍甘汤对大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的影响：
1.2.3.1 抗血清制备：用雄性SD大鼠，对每鼠两后腿肌注1%OA生理盐水0.5 ml，同时腹腔注射百白破三联疫苗(2×1010菌体)每鼠1 ml，14日后断头取血，离心取抗血清，-4 ℃以下备用。
1.2.3.2 致敏及抗原攻击：取雄性SD大鼠40只，随机分成4组，每组10只。阳性对照组用阿斯匹林(0.3 g/kg)，其余同平喘实验方法。末次给药后1小时，于大鼠头部皮下注射0.1 ml大鼠抗OA血清，注射后24小时进行抗原攻击，由尾静脉注射1 ml 5%伊文思蓝溶液(内含OA 1%)，30分钟后处死动物，分离颅盖骨经固定染色后，观察骨膜下肥大细胞数及脱颗粒数，按文献[3〕方法计算其抑制率。
2 结 果
2.1 芍甘汤的平喘作用：结果显示，芍甘汤高、低剂量均能延长由组胺喷雾和OA致敏所致豚鼠哮喘的引喘潜伏期，与生理盐水组比较，差异非常显著(P<0.01或P<0.001)。见表1和表2。
, 百拇医药
表1 芍甘汤对组胺喷雾所致豚鼠哮喘的影响(
±s)
组别
动物数(只)
剂量(g/kg)
引喘潜伏期(s)
生理盐水组
10
等容量
93.1±13.2
氨茶碱组
, 百拇医药
10
0.1
224.0±16.2**
芍甘汤低剂量组
10
3
142.0±33.5*
芍甘汤高剂量组
10
10
192.8±28.6**
注：与生理盐水组比较：*P<0.01，**P<0.001表2 芍甘汤对OA所致豚鼠哮喘的影响(±s)
, 百拇医药
组别
动物数(只)
剂量(g/kg)
引喘潜伏期(s)
生理盐水组
10
等容量
87.4±19.3
喘定组
10
0.1
219.8±11.5*
, 百拇医药
芍甘汤低剂量组
10
3
129.6±15.1
芍甘汤高剂量组
10
10
210.3±21.8*
注：与生理盐水组比较：P<0.0012.2 芍甘汤的抗过敏作用：结果表明，芍甘汤能明显抑制大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒，其脱颗粒率较生理盐水组差异非常显著(P<0.001)。见表3。
表3 芍甘汤对大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的抑制作用(±s)
, http://www.100md.com
组别
动物数
(只)
剂量
(g/kg)
脱颗粒率
(%)
抑制率
(%)
生理盐水组
10
等容量
84.0±2.2
, 百拇医药
-
阿斯匹林组
10
0.3
46.0±1.3*
45.2±2.1
芍甘汤低剂量组
10
3
62.0±3.8*
26.1±4.9
芍甘汤高剂量组
, 百拇医药
10
10
55.0±2.7*
34.5±3.7
注：与生理盐水组比较：P<0.0013 讨 论
国内外已有研究表明，芍药甙能抑制多种动物胃肠道及子宫平滑肌的收缩，并与甘草甜素起协同作用[4〕。因此，可以认为对组胺所致豚鼠支气管平滑肌痉挛的缓解作用是芍甘汤平喘的药理学基础。
卵白蛋白致敏引起的豚鼠哮喘和大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒都是由变态反应引起的。肥大细胞是速发型过敏反应的靶细胞，细胞脱颗粒的百分率反映了颅骨骨膜肥大细胞过敏反应的程度[5〕。同样，当致敏豚鼠再次吸入卵白蛋白后，引起豚鼠变态反应，释放过敏介质，导致哮喘及气道炎症反应。芍甘汤能显著抑制哮喘和脱颗粒的数目，说明芍甘汤具有抗变态反应作用。有报道表明，甘草酸及其复合物对豚鼠抗人血清白蛋白和小鼠抗卵白蛋白过敏性休克具有明显的保护效应[6，7〕，而白芍总甙则与小鼠迟发型超敏反应有关[8〕，因此，芍甘汤抗过敏作用可能与甘草中有效成分有关[9〕。
, 百拇医药
基金项目：浙江省中医药管理局基金资助项目(No.98015)
作者简介：蔡宛如(1960-)，女(汉族)，浙江省宁波市人，副主任医师。全国中医学会肺系组专业委员会委员，浙江省中西医结合呼吸病专业委员会副主任委员。承担省级课题9项，获省教委三等奖、省卫生厅优秀奖、省卫生厅科技进步三等奖各1项。
参考文献：
[1]蔡宛如，钱华.芍药甘草汤防治呼吸系统疾病的临床和药理研究进展.中国中医药信息，1998，(6)：5-6.
[2]Santing R E,Olymulder C G,Zaagsma J,et al.Relationships among allergen-induced early and late phase airway obstructions,bronchial byperreactivity and inflammation in conscious,unrestrained guinea pigs.J Allergy Clin Immunol,1994,93:1021-1022.
, http://www.100md.com
[3]李仪奎主编.中医药理实验方法学.第1版.上海：上海科学技术出版社，1991.450-451.
[4]中国医科院药物研究所，等.中药志.第1册.北京：人民卫生出版社，1993.183-184.
[5]陈奇主编.中医药理研究方法学.第1版.北京：人民卫生出版社，1993.657.
[6]乔海灵，马统勋.甘草LX对青霉噻唑蛋白致敏豚鼠过敏性休克的保护作用及机理的研究.中药药理与临床，1990，6(1)：27-28.
[7]杨贵贞，王桂兰，王莉.甘草LX对小鼠过敏性休克的保护效应.中国免疫学杂志，1986，2(1)：4-5.
[8]魏伟，梁君山，周爱武，等.白芍总甙对白细胞介素2产生的影响.中国药理学通报，1989，5(3)：176-177.
[9]彭素岚，白雪，罗家红，等.中西医结合治疗支气管哮喘缓解期患者免疫功能的变化.中国中西医结合急救杂志，1999，6(11)：510-511.
(收稿日期：2000-01-26 修回日期：2000-11-13), 百拇医药
单位：蔡宛如 朱渊红 宋康 张弘 王真 汤军(浙江省中医院呼吸内科，浙江 杭州 310006)；钱华(浙江省林科院植物药研究中心)
关键词：芍药甘草汤；平喘；抗过敏；中医药
芍药甘草汤平喘和抗过敏作用的实验研究 摘要：目的：观察芍药甘草汤的平喘和抗过敏作用。方法：通过整体实验，观察芍药甘草汤对组胺所致豚鼠支气管收缩和卵白蛋白诱发的致敏豚鼠哮喘及致敏大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的影响。结果：3 g/kg和10 g/kg剂量的芍药甘草汤能显著延长豚鼠引喘潜伏期(P<0.01或P<0.001)和抑制大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒(P<0.001)。结论：芍药甘草汤具有平喘和抗过敏作用。
中图分类号：R285.6;R562.25 文献标识码：A
, 百拇医药
文章编号：1008-9691(2000)06-0341-02
Experimental study on the antiallergic and antiasthmatic effects of PeonyLicorice decoction
CAI Wan-ru,QIAN Hua,ZHU Yuan-hong,et al.
(Zhejiang Provincial Hospital of TCM,Hangzhou Zhejiang 310006)
Abstract:Objective:To observe the effect of Peony-Licorice decoction on anti-allergy and anti-asthma.Methods:Observation was made in guinea pigs for the effects of Peony-Licorice decoction on relieving the asthma due to histamine-induced brochoconstriction and egg-albumin induced sensitization,and the changes of degranulation in the mast cells of cranial periosteum in sensitized rat.Results:Peony-Licorice decoction in the dose of 3 g/kg and 10 g/kg could prolong the latent period of asthma significantly in guinea pigs (P<0.01 or P<0.001),and effectively inhibit the degranulation of mast cell in the cranial periosteum of rats (P<0.001).Conclusions:Peony-Licorice decoction has the action on relieving asthma and antianaphylaxis.
, 百拇医药
Key words:Peony-Licorice decoction;asthma-relieving;antianaphylaxis;traditional Chinese medicine
芍药甘草汤(芍甘汤)系张仲景《伤寒论》中的著名方剂。随着临床医学和现代药理学研究的不断发展，人们对此方的作用及应用范围作了广泛的探讨。近年临床研究发现，芍甘汤对哮喘、顽咳和小儿百日咳的疗效十分显著[1]。本研究初步观察了芍甘汤的平喘和抗过敏作用，为其临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材 料：
1.1.1 动物：豚鼠，体重150～200 g，雌雄均可；雄性SD大鼠，体重200 g左右，均由浙江大学药学院实验动物中心提供。
, 百拇医药 1.1.2 药物：白芍(paenoia laciflora pall,杭州产)、甘草(glgcyrrhiza aralensis fisch，承德产)由本院中药房提供。将芍药甘草按2∶1配方，水煎3次，每次30分钟，收集3次水煎液浓缩成4×103 g/L的溶液备用。
1.1.3 试剂：磷酸组胺(中科院上海化所东风生化技术公司，批号：981218)；喘定(中国信谊药厂，批号：981123)；氨茶碱(浙南药业有限公司，批号：980912)；阿斯匹林(恩华药业集团徐州制药厂，批号：109066)；伊文思蓝(上海化学试剂采购供应站，批号：950525)；卵白蛋白(上海生物化学试剂公司，批号：9707111)；百白破三联疫苗(浙江省卫生防疫站，批号：9810123)。
1.1.4 仪器：402超声雾化器(上海合力医疗器械厂)。
1.2 实验方法：
, 百拇医药
1.2.1 芍甘汤对组胺喷雾引起豚鼠哮喘的影响：取经预选合格的豚鼠(引喘潜伏期<120秒)40只；随机分成芍甘汤高剂量组(10 g/kg)、芍甘汤低剂量组(3 g/kg)、氨茶碱组(0.1 g/kg)和生理盐水组(等容量)4组，每组10只。芍甘汤均稀释成每只0.5 ml，灌胃给药，连续7日。末次给药后1小时，将各组豚鼠置于4 L容积的密闭玻璃罩内，以最大雾量档次喷入0.4%组胺10秒引喘，观察并记录从喷雾开始到豚鼠发生喘息及至抽搐的时间(即引喘潜伏期)。
1.2.2 芍甘汤对致敏豚鼠哮喘的影响：分组同上，西药对照组改为喘定(0.1 g/kg)。按文献[2]的方法，将0.1 mg卵白蛋白(OA)和100 mg Al(OH)3溶于1 ml生理盐水，配制成凝胶液，在豚鼠足跖、腰、颈、腹股沟处对称共10点分别皮下注射50 μl，同时腹腔注射0.5 ml致敏动物，共3周。致敏最后1日，将豚鼠置于密闭容器内，进行引喘实验。实验前1小时，各组动物先口服相应的药物，1小时后分别吸入0.25%OA气雾0.5分钟，测定不同药物对引喘率和引喘潜伏期的影响。
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1.2.3 芍甘汤对大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的影响：
1.2.3.1 抗血清制备：用雄性SD大鼠，对每鼠两后腿肌注1%OA生理盐水0.5 ml，同时腹腔注射百白破三联疫苗(2×1010菌体)每鼠1 ml，14日后断头取血，离心取抗血清，-4 ℃以下备用。
1.2.3.2 致敏及抗原攻击：取雄性SD大鼠40只，随机分成4组，每组10只。阳性对照组用阿斯匹林(0.3 g/kg)，其余同平喘实验方法。末次给药后1小时，于大鼠头部皮下注射0.1 ml大鼠抗OA血清，注射后24小时进行抗原攻击，由尾静脉注射1 ml 5%伊文思蓝溶液(内含OA 1%)，30分钟后处死动物，分离颅盖骨经固定染色后，观察骨膜下肥大细胞数及脱颗粒数，按文献[3〕方法计算其抑制率。
2 结 果
2.1 芍甘汤的平喘作用：结果显示，芍甘汤高、低剂量均能延长由组胺喷雾和OA致敏所致豚鼠哮喘的引喘潜伏期，与生理盐水组比较，差异非常显著(P<0.01或P<0.001)。见表1和表2。
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表1 芍甘汤对组胺喷雾所致豚鼠哮喘的影响(
±s)组别
动物数(只)
剂量(g/kg)
引喘潜伏期(s)
生理盐水组
10
等容量
93.1±13.2
氨茶碱组
, 百拇医药
10
0.1
224.0±16.2**
芍甘汤低剂量组
10
3
142.0±33.5*
芍甘汤高剂量组
10
10
192.8±28.6**
注：与生理盐水组比较：*P<0.01，**P<0.001表2 芍甘汤对OA所致豚鼠哮喘的影响(
±s), 百拇医药
组别
动物数(只)
剂量(g/kg)
引喘潜伏期(s)
生理盐水组
10
等容量
87.4±19.3
喘定组
10
0.1
219.8±11.5*
, 百拇医药
芍甘汤低剂量组
10
3
129.6±15.1
芍甘汤高剂量组
10
10
210.3±21.8*
注：与生理盐水组比较：P<0.0012.2 芍甘汤的抗过敏作用：结果表明，芍甘汤能明显抑制大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒，其脱颗粒率较生理盐水组差异非常显著(P<0.001)。见表3。
表3 芍甘汤对大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的抑制作用(
±s), http://www.100md.com
组别
动物数
(只)
剂量
(g/kg)
脱颗粒率
(%)
抑制率
(%)
生理盐水组
10
等容量
84.0±2.2
, 百拇医药
-
阿斯匹林组
10
0.3
46.0±1.3*
45.2±2.1
芍甘汤低剂量组
10
3
62.0±3.8*
26.1±4.9
芍甘汤高剂量组
, 百拇医药
10
10
55.0±2.7*
34.5±3.7
注：与生理盐水组比较：P<0.0013 讨 论
国内外已有研究表明，芍药甙能抑制多种动物胃肠道及子宫平滑肌的收缩，并与甘草甜素起协同作用[4〕。因此，可以认为对组胺所致豚鼠支气管平滑肌痉挛的缓解作用是芍甘汤平喘的药理学基础。
卵白蛋白致敏引起的豚鼠哮喘和大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒都是由变态反应引起的。肥大细胞是速发型过敏反应的靶细胞，细胞脱颗粒的百分率反映了颅骨骨膜肥大细胞过敏反应的程度[5〕。同样，当致敏豚鼠再次吸入卵白蛋白后，引起豚鼠变态反应，释放过敏介质，导致哮喘及气道炎症反应。芍甘汤能显著抑制哮喘和脱颗粒的数目，说明芍甘汤具有抗变态反应作用。有报道表明，甘草酸及其复合物对豚鼠抗人血清白蛋白和小鼠抗卵白蛋白过敏性休克具有明显的保护效应[6，7〕，而白芍总甙则与小鼠迟发型超敏反应有关[8〕，因此，芍甘汤抗过敏作用可能与甘草中有效成分有关[9〕。
, 百拇医药
基金项目：浙江省中医药管理局基金资助项目(No.98015)
作者简介：蔡宛如(1960-)，女(汉族)，浙江省宁波市人，副主任医师。全国中医学会肺系组专业委员会委员，浙江省中西医结合呼吸病专业委员会副主任委员。承担省级课题9项，获省教委三等奖、省卫生厅优秀奖、省卫生厅科技进步三等奖各1项。
参考文献：
[1]蔡宛如，钱华.芍药甘草汤防治呼吸系统疾病的临床和药理研究进展.中国中医药信息，1998，(6)：5-6.
[2]Santing R E,Olymulder C G,Zaagsma J,et al.Relationships among allergen-induced early and late phase airway obstructions,bronchial byperreactivity and inflammation in conscious,unrestrained guinea pigs.J Allergy Clin Immunol,1994,93:1021-1022.
, http://www.100md.com
[3]李仪奎主编.中医药理实验方法学.第1版.上海：上海科学技术出版社，1991.450-451.
[4]中国医科院药物研究所，等.中药志.第1册.北京：人民卫生出版社，1993.183-184.
[5]陈奇主编.中医药理研究方法学.第1版.北京：人民卫生出版社，1993.657.
[6]乔海灵，马统勋.甘草LX对青霉噻唑蛋白致敏豚鼠过敏性休克的保护作用及机理的研究.中药药理与临床，1990，6(1)：27-28.
[7]杨贵贞，王桂兰，王莉.甘草LX对小鼠过敏性休克的保护效应.中国免疫学杂志，1986，2(1)：4-5.
[8]魏伟，梁君山，周爱武，等.白芍总甙对白细胞介素2产生的影响.中国药理学通报，1989，5(3)：176-177.
[9]彭素岚，白雪，罗家红，等.中西医结合治疗支气管哮喘缓解期患者免疫功能的变化.中国中西医结合急救杂志，1999，6(11)：510-511.
(收稿日期：2000-01-26 修回日期：2000-11-13), 百拇医药