重度先兆子痫孕妇血浆一氧化氮、肿瘤坏死因子变化的研究
作者：闻莉 张三元 李红梅▲
单位：闻莉(北京同仁医院，100130)；张三元(黑龙江中医药大学)；李红梅(山西省妇幼保健院妇产科)
关键词：
中国急救医学000619 近年来，血管内皮细胞功能紊乱及内皮相关活性物质的变化与先兆子痫发病的关系已引人关注，特别是调整内皮细胞的体内平衡的细胞激动剂TNF-α和NO的代谢异常与先兆子痫的发生和发展关系密切。我们采用荧光分光度法及放射免疫法测定了先兆子痫孕妇血浆中NO和TNF的含量，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 先兆子痫组：23例，年龄23～37岁，平均26.7±3.2岁，均系1997年6月～1999年7月在本院住院患者，按全国统一的先兆子痫诊断标准确诊[1]。正常妊晚期组：22例，年龄23～36岁，平均25.7±3.2岁，均系同期本院住院分娩的健康孕妇。正常非孕妇女组：12例，年龄24～38岁，平均27.4±4.3岁，为本院血库女性献血员。
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 标本采集 取肘静脉血5ml，1小时内4℃1500 r/min离心10分钟，分离血浆于-30℃保存待测。
1.2.2 血浆NO的测定 参照kader等[3]方法略加改进，取待检血浆0.1ml，加入0.15 ml 0.02% 4-羟基香豆素，混匀后冰浴5min，然后加入50μl NaS2O3室温作用10min,最后加入NaOH 0.5 ml，用荧光分光光度计检测相对荧光强度，用NaNO2做标准品作标准曲线，结果以mol/mg湿重表示。
1.2.3 血浆TNF-α的测定 TNF-α测定采用放射免疫法，检测试剂由北京东西免疫技术研究所提供，操作方法严格按药盒说明进行。
1.3 统计学处理 实验数据采用t检验，各检测值均以
±s表示。
, 百拇医药
2 结果
2.1 各组血浆NO的变化 正常妊晚期组血浆NO与非孕对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)，先兆子痫组孕妇血清NO明显低于正常孕晚期妇女和非孕对照组(P<0.01)。
2.2 各组血浆TNF-α含量的变化 先兆子痫组孕妇血清TNF-α含量明显高于正常孕晚期妇女和非孕妇对照组(P<0.01)，结果见附表。
附表 各组血清中NO，TNF-α水平变化(±s) 组别
总例数
年龄(岁)
NO(nmol/L)
, http://www.100md.com TNF-α(ng/L)
正常对照组
12
27±4
1023.7±198.3
1215.7±374.2
正常妊晚期组
22
25±4
3793.2±218.3
1347.8±334.8
先兆子痫组
, 百拇医药
23
26±3
718.7±243.4
1903.2±380.9
3 讨论
目前先兆子痫被看作是怀孕期间的一种弥漫性的内皮紊乱[2]，本文测定了调整内皮细胞体内平衡的细胞激动剂TNF-α和NO的含量，结果发现先兆子痫孕妇血浆NO含量明显低于正常孕晚期妇女和正常非孕妇女，TNF-α含量高于正常妊晚期妇女及正常非孕妇女，说明NO，TNF-α的代谢异常在先兆子痫发病过程中起重要作用。
已知NO在妊娠期合成及分泌增加，并参与了妊娠期血管平滑肌及子宫平滑肌张力的调节。我们的实验结果发现正常孕妇的血浆NO值显著高于正常非妊娠妇女，说明妊娠期间母体血管内皮细胞合成及释放NO增加，是维持正常妊娠的重要调节因子，若NO代谢发生改变，对生理妊娠带来影响。Seligman等[3]首次采用Greiss方法对先兆子痫患者产前血浆中亚硝酸盐进行了测定，发现行兆子痫患者外周血中亚硝酸盐含量明显低于正常妊娠妇女及正常非孕妇女。亚硝酸盐是NO的稳定代谢产物，可间接反应NO的含量。本研究测定了先兆子痫孕妇及正常妊娠孕晚期妇女血中NO的含量变化，结果显示先兆子痫患者NO含量明显低于正常妊晚期妇女。这提示先兆子痫孕妇确实存在NO的合成减少和释放功能障碍。
, http://www.100md.com
关于TNF-α在先兆子痫发病机制中的作用，Stark[4]强调了线粒体水平上的TNF-α介导氧化应激反应和线粒体过氧化的能力，并强调了最近已表明了现象，即TNF-α可能是先兆子痫病理生理机制的一个因素。在我们研究的实验中，发现先兆子痫孕妇血浆中TNF-α含量明显高于正常妊娠妇女及正常非孕妇女组，说明TNF-α的过量增加在先兆子痫发病过程中可能起重要作用。TNF-α能调整内皮细胞的体内平衡[5]，改变前列腺素、NO、线粒体代谢，其中弥漫性的多器官内皮紊乱是基本特征。重度先兆子痫是以多器官损伤，体内平衡改变和随之而来的巨噬细胞的激活和弥慢的小血管动脉粥样硬化为特征。因此，TNF-α的增加可能与这种紊乱有关，至于是作为一个因果关系还是作为随后的病理生理事件的一个介质，还有待进一步研究。
[参考文献]
[1]郑怀美主编.妇产科学.北京：人民卫生出版社，1993.
, http://www.100md.com
[2]Friedmam SA,Taylor RN,Roberts JM.Pathophysiology of preeclampsia. Clin Perinatol,1991,18:166-182.
[3]Seligman SP,Buyon JP,Clomsy RM,et al.The role of nitric oxide in the pathogenesis of preeclampsia.Am J obstet Cynaecol,1994,171:P44.
[4]Stark JM.Preeclampsia and cytokine induced oxidative stress.Br J Obstet Gynaecol,1993,100:105-109.
[5]Nawroth PP,Stern DM.Modulation of endothelial cell hemostatic properties by tumor necrosis factor.J Exp Med,1986,163:740-745.
[收稿：1999-08-20，修回：2000-03-18], 百拇医药
单位：闻莉(北京同仁医院，100130)；张三元(黑龙江中医药大学)；李红梅(山西省妇幼保健院妇产科)
关键词：
中国急救医学000619 近年来，血管内皮细胞功能紊乱及内皮相关活性物质的变化与先兆子痫发病的关系已引人关注，特别是调整内皮细胞的体内平衡的细胞激动剂TNF-α和NO的代谢异常与先兆子痫的发生和发展关系密切。我们采用荧光分光度法及放射免疫法测定了先兆子痫孕妇血浆中NO和TNF的含量，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 先兆子痫组：23例，年龄23～37岁，平均26.7±3.2岁，均系1997年6月～1999年7月在本院住院患者，按全国统一的先兆子痫诊断标准确诊[1]。正常妊晚期组：22例，年龄23～36岁，平均25.7±3.2岁，均系同期本院住院分娩的健康孕妇。正常非孕妇女组：12例，年龄24～38岁，平均27.4±4.3岁，为本院血库女性献血员。
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 标本采集 取肘静脉血5ml，1小时内4℃1500 r/min离心10分钟，分离血浆于-30℃保存待测。
1.2.2 血浆NO的测定 参照kader等[3]方法略加改进，取待检血浆0.1ml，加入0.15 ml 0.02% 4-羟基香豆素，混匀后冰浴5min，然后加入50μl NaS2O3室温作用10min,最后加入NaOH 0.5 ml，用荧光分光光度计检测相对荧光强度，用NaNO2做标准品作标准曲线，结果以mol/mg湿重表示。
1.2.3 血浆TNF-α的测定 TNF-α测定采用放射免疫法，检测试剂由北京东西免疫技术研究所提供，操作方法严格按药盒说明进行。
1.3 统计学处理 实验数据采用t检验，各检测值均以
±s表示。, 百拇医药
2 结果
2.1 各组血浆NO的变化 正常妊晚期组血浆NO与非孕对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)，先兆子痫组孕妇血清NO明显低于正常孕晚期妇女和非孕对照组(P<0.01)。
2.2 各组血浆TNF-α含量的变化 先兆子痫组孕妇血清TNF-α含量明显高于正常孕晚期妇女和非孕妇对照组(P<0.01)，结果见附表。
附表 各组血清中NO，TNF-α水平变化(
±s) 组别总例数
年龄(岁)
NO(nmol/L)
, http://www.100md.com TNF-α(ng/L)
正常对照组
12
27±4
1023.7±198.3
1215.7±374.2
正常妊晚期组
22
25±4
3793.2±218.3
1347.8±334.8
先兆子痫组
, 百拇医药
23
26±3
718.7±243.4
1903.2±380.9
3 讨论
目前先兆子痫被看作是怀孕期间的一种弥漫性的内皮紊乱[2]，本文测定了调整内皮细胞体内平衡的细胞激动剂TNF-α和NO的含量，结果发现先兆子痫孕妇血浆NO含量明显低于正常孕晚期妇女和正常非孕妇女，TNF-α含量高于正常妊晚期妇女及正常非孕妇女，说明NO，TNF-α的代谢异常在先兆子痫发病过程中起重要作用。
已知NO在妊娠期合成及分泌增加，并参与了妊娠期血管平滑肌及子宫平滑肌张力的调节。我们的实验结果发现正常孕妇的血浆NO值显著高于正常非妊娠妇女，说明妊娠期间母体血管内皮细胞合成及释放NO增加，是维持正常妊娠的重要调节因子，若NO代谢发生改变，对生理妊娠带来影响。Seligman等[3]首次采用Greiss方法对先兆子痫患者产前血浆中亚硝酸盐进行了测定，发现行兆子痫患者外周血中亚硝酸盐含量明显低于正常妊娠妇女及正常非孕妇女。亚硝酸盐是NO的稳定代谢产物，可间接反应NO的含量。本研究测定了先兆子痫孕妇及正常妊娠孕晚期妇女血中NO的含量变化，结果显示先兆子痫患者NO含量明显低于正常妊晚期妇女。这提示先兆子痫孕妇确实存在NO的合成减少和释放功能障碍。
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关于TNF-α在先兆子痫发病机制中的作用，Stark[4]强调了线粒体水平上的TNF-α介导氧化应激反应和线粒体过氧化的能力，并强调了最近已表明了现象，即TNF-α可能是先兆子痫病理生理机制的一个因素。在我们研究的实验中，发现先兆子痫孕妇血浆中TNF-α含量明显高于正常妊娠妇女及正常非孕妇女组，说明TNF-α的过量增加在先兆子痫发病过程中可能起重要作用。TNF-α能调整内皮细胞的体内平衡[5]，改变前列腺素、NO、线粒体代谢，其中弥漫性的多器官内皮紊乱是基本特征。重度先兆子痫是以多器官损伤，体内平衡改变和随之而来的巨噬细胞的激活和弥慢的小血管动脉粥样硬化为特征。因此，TNF-α的增加可能与这种紊乱有关，至于是作为一个因果关系还是作为随后的病理生理事件的一个介质，还有待进一步研究。
[参考文献]
[1]郑怀美主编.妇产科学.北京：人民卫生出版社，1993.
, http://www.100md.com
[2]Friedmam SA,Taylor RN,Roberts JM.Pathophysiology of preeclampsia. Clin Perinatol,1991,18:166-182.
[3]Seligman SP,Buyon JP,Clomsy RM,et al.The role of nitric oxide in the pathogenesis of preeclampsia.Am J obstet Cynaecol,1994,171:P44.
[4]Stark JM.Preeclampsia and cytokine induced oxidative stress.Br J Obstet Gynaecol,1993,100:105-109.
[5]Nawroth PP,Stern DM.Modulation of endothelial cell hemostatic properties by tumor necrosis factor.J Exp Med,1986,163:740-745.
[收稿：1999-08-20，修回：2000-03-18], 百拇医药