L-精氨酸和谷胱甘肽影响大鼠肠系膜动脉血管舒张的实验研究
作者：蒋荣成 张献辉 李文杰
单位：兰州军区总医院急诊科，甘肃 兰州 730050
关键词：
中国急救医学000719
大量的研究已经证明L-精氨酸和谷胱甘肽具有扩张血管的作用，但对其扩张血管的机理尚无明确的报道。本实验通过对L-精氨酸和谷胱甘肽作用于肠系膜并引起血管扩张，而且这种扩张作用可以被L-NA(L-精氨酸的抑制剂)以及BSO(谷胱甘肽的抑制剂)所减弱，同时通过测定cGMP的含量进一步证实L-精氨酸和谷胱甘肽扩张血管的作用是通过增加cGMP的活性而达到扩张血管的目的。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物标本制备 450～600 g大鼠，雌雄不限，仅用水喂养一日后，腹腔注射戊巴比妥麻醉，尽快取优选的肠系膜动脉并切成3～4 cm的螺旋条，迅速移入缓冲液中[缓冲液由以下物质组成(单位：mmol/L)：NaCl 118;KCl 1.75;CaCl2.2H2O 2.54；KHPO3 1.19；MgSO4.7H2O 1.19；Na2CO3 25；葡萄糖10]，洗去脂肪及粘连的组织，固定于37℃的恒温箱内，在加药前后均采用上端清洁挂钩悬挂固定动脉条，下端用1 g的拉力将动脉条平衡60分钟后置于平台上测量平衡后的长度。
, 百拇医药
1.2 分组与方法 本实验将制备的动脉条随机分五组，每组20条，所得结果取平均值。I组(对照组)：0.1 mmol/L的罂粟碱作用于动脉条后的长度作为100%对照长度，组织冷冻允浆处理后测定cGMP的含量作为基础测定对照指标，其他各组均与对照组比较。Ⅱ组(L-精氨酸组)：加0.3 mmol/L的L-精氨酸(L-Arg)于动脉条平衡后测定长度，所得平均值与对照组比，并在冷冻处理后匀浆，用放免盒测定组织cGMP的含量。Ⅲ组(L-精氨酸抑制组)：将制备好的动脉条浸于1 μmol/L的L-硝基精氨酸(L-NA)，20分钟后加入L-精氨酸，用同样的方法测定动脉条的长度，与对照组比较，同样测定cGMP的含量。Ⅳ组(谷胱甘肽组)：加入0.2 μmol/L的谷胱甘肽于动脉条后同Ⅱ组方法测定长度与cGMP的含量。V组(谷胱甘肽抑制组)：制备好的动脉条浸于0.2 μmol/L的BSO(一种谷胱甘肽的抑制剂)，20分钟后加入谷胱甘肽，测定长度及测定cGMP的含量。
1.3 结果处理 所得数据均用均数±标准差，配对t检验进行显著性分析。
, http://www.100md.com
2 结果
Ⅱ组平均舒张长度与对照组比较达到180%，cGMP含量明显高于对照组(P<0.01)；Ⅲ组由于受L-NA的抑制作用，L-精氨酸的舒张血管作用得到抑制，平均长度与对照组比较仅为110%，cGMP含量接近于对照组(P>0.05)；Ⅳ组平均舒张长度达到170%，cGMP含量明显高于对照组(P<0.01)；V组由于提前受BSO的抑制作用，所测长度与对照组比较仅为115%，cGMP的含量也接近于对照组(P>0.05)(见表1、表2)。
表1 L-精氨酸与L-硝基精氨酸对离体
大鼠肠系膜动脉cGMP含量的影响 药 物
肠系膜段数(每组)
cGMP含量
罂粟碱(对照组)
, http://www.100md.com
20
16.2
1.8
L-精氨酸组
20
28.9
2.1*
L-精氨酸+L-硝基精氨酸
20
17.8
1.9ns
与对照组比较*P<0.01 与对照组比较ns无显著差异表2 谷胱甘肽与谷胱甘肽合成酶抑制剂
, 百拇医药
(BSO)的cGMP含量的影响 药 物
肠系膜段数(每组)
cGMP含量
罂粟碱(对照组)
20
16.2
1.8
谷胱甘肽组
20
27.4
1.9**
谷胱甘肽组+BSO组
, 百拇医药
20
18.6
1.5ns
与对照组比较**P<0.01 与对照组比较ns无显著差异
3 讨论
大量的实验已经证实NO具有扩张正常及缺血组织血管的能力[1]，其可能的途径已有很多学说，目前已有资料表明NO的合成部位不在平滑肌[2]，而是在其信息传递过程中通过提高cGMP含量从而达到扩张血管的目的[3]。L-精氨酸以及谷胱甘肽作为NO的供体，在扩张血管的过程中起到很大作用，本实验通过Ⅱ组和Ⅳ组的实验结果进一步证实了这两种药物的作用以及与NO的关系[4]，同时通过对cGMP含量的测定，证实了NO的作用在于信息的传递，通过增加鸟苷酸环化酶(GTP向cGMP转化的酶)的活性达到GTP向cGMP更多转化，从而达到扩张血管的目的[5]。
, http://www.100md.com
以往大量实验已经证实L-NA对L-精氨酸、BSO对谷胱甘肽具有明显的拮抗作用[6，7]。本实验根据Ⅲ组和Ⅴ组所得数据表明在抑制了L-精氨酸和谷胱甘肽的作用后，它们就不能有效地扩张肠系膜动脉条，不能增加cGMP的含量，从而进一步说明L-精氨酸和谷胱甘肽具有较强的扩张血管的能力。可以推测L-精氨酸和谷胱甘肽的这种作用不仅在于其作为NO的供体而且在于增加NO的活性以达到增加正常以及缺血组织的灌流，最终达到改善微循环、降低血管壁张力的效应，为临床提供了理论依据。
[参考文献]
[1]LOpez Jarmillo P,Gonzalez MC,Palmer RMJ,et al.The crucial role of physiogic Ca2+concentration in the production of endothelial nitric oxide and the control of vascular tone.Br J Pharmacol,1990,101:4889-4893.
, 百拇医药
[2]Toda N,Okamura T.Mechanism underlying the response to vasodilator nerve stimulation in isolated dog and monkey cerebral arteries.AM J Physiol,1990,259:H511-517.
[3]Tode N,Yoshida K,OK amura T.Analysis of the poteniating action of N-nitro-L-arginine on the contraction of the dog temporal artery elicied by transmural stimulation of noradrenergic nerves.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol,1991,343:221-224.
[4]Tode N.Relaxant responses to transmural stimulation and nicotine of dog and monkey cerebral arteries.AM J Physiol,1982,243:H 145-153.
, 百拇医药
[5]Lopez BL,Snyder JW,Birenbaum DS.N-acetylcysteine enhances endothelium dependent vasorelation in the isolated rat mese artery.Ann Emerg Med,1998,32:405-410.
[6]Tode N,Minami Y,O kanura T.lnhibitory effects of L-NG-nitro-arginine of the synyhesis of EDRF and the cerebroarterial response to vasodilator nerve stimulation.Life Sci,1990,47:345-351.
[7]Meister A.Glutathione Metabolism.Methods Enzymol,1995,251:3-7.
收稿：1999-01-10，修回：1999-09-27, 百拇医药
单位：兰州军区总医院急诊科，甘肃 兰州 730050
关键词：
中国急救医学000719
大量的研究已经证明L-精氨酸和谷胱甘肽具有扩张血管的作用，但对其扩张血管的机理尚无明确的报道。本实验通过对L-精氨酸和谷胱甘肽作用于肠系膜并引起血管扩张，而且这种扩张作用可以被L-NA(L-精氨酸的抑制剂)以及BSO(谷胱甘肽的抑制剂)所减弱，同时通过测定cGMP的含量进一步证实L-精氨酸和谷胱甘肽扩张血管的作用是通过增加cGMP的活性而达到扩张血管的目的。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物标本制备 450～600 g大鼠，雌雄不限，仅用水喂养一日后，腹腔注射戊巴比妥麻醉，尽快取优选的肠系膜动脉并切成3～4 cm的螺旋条，迅速移入缓冲液中[缓冲液由以下物质组成(单位：mmol/L)：NaCl 118;KCl 1.75;CaCl2.2H2O 2.54；KHPO3 1.19；MgSO4.7H2O 1.19；Na2CO3 25；葡萄糖10]，洗去脂肪及粘连的组织，固定于37℃的恒温箱内，在加药前后均采用上端清洁挂钩悬挂固定动脉条，下端用1 g的拉力将动脉条平衡60分钟后置于平台上测量平衡后的长度。
, 百拇医药
1.2 分组与方法 本实验将制备的动脉条随机分五组，每组20条，所得结果取平均值。I组(对照组)：0.1 mmol/L的罂粟碱作用于动脉条后的长度作为100%对照长度，组织冷冻允浆处理后测定cGMP的含量作为基础测定对照指标，其他各组均与对照组比较。Ⅱ组(L-精氨酸组)：加0.3 mmol/L的L-精氨酸(L-Arg)于动脉条平衡后测定长度，所得平均值与对照组比，并在冷冻处理后匀浆，用放免盒测定组织cGMP的含量。Ⅲ组(L-精氨酸抑制组)：将制备好的动脉条浸于1 μmol/L的L-硝基精氨酸(L-NA)，20分钟后加入L-精氨酸，用同样的方法测定动脉条的长度，与对照组比较，同样测定cGMP的含量。Ⅳ组(谷胱甘肽组)：加入0.2 μmol/L的谷胱甘肽于动脉条后同Ⅱ组方法测定长度与cGMP的含量。V组(谷胱甘肽抑制组)：制备好的动脉条浸于0.2 μmol/L的BSO(一种谷胱甘肽的抑制剂)，20分钟后加入谷胱甘肽，测定长度及测定cGMP的含量。
1.3 结果处理 所得数据均用均数±标准差，配对t检验进行显著性分析。
, http://www.100md.com
2 结果
Ⅱ组平均舒张长度与对照组比较达到180%，cGMP含量明显高于对照组(P<0.01)；Ⅲ组由于受L-NA的抑制作用，L-精氨酸的舒张血管作用得到抑制，平均长度与对照组比较仅为110%，cGMP含量接近于对照组(P>0.05)；Ⅳ组平均舒张长度达到170%，cGMP含量明显高于对照组(P<0.01)；V组由于提前受BSO的抑制作用，所测长度与对照组比较仅为115%，cGMP的含量也接近于对照组(P>0.05)(见表1、表2)。
表1 L-精氨酸与L-硝基精氨酸对离体
大鼠肠系膜动脉cGMP含量的影响 药 物
肠系膜段数(每组)
cGMP含量
罂粟碱(对照组)
, http://www.100md.com
20
16.2
1.8
L-精氨酸组
20
28.9
2.1*
L-精氨酸+L-硝基精氨酸
20
17.8
1.9ns
与对照组比较*P<0.01 与对照组比较ns无显著差异表2 谷胱甘肽与谷胱甘肽合成酶抑制剂
, 百拇医药
(BSO)的cGMP含量的影响 药 物
肠系膜段数(每组)
cGMP含量
罂粟碱(对照组)
20
16.2
1.8
谷胱甘肽组
20
27.4
1.9**
谷胱甘肽组+BSO组
, 百拇医药
20
18.6
1.5ns
与对照组比较**P<0.01 与对照组比较ns无显著差异
3 讨论
大量的实验已经证实NO具有扩张正常及缺血组织血管的能力[1]，其可能的途径已有很多学说，目前已有资料表明NO的合成部位不在平滑肌[2]，而是在其信息传递过程中通过提高cGMP含量从而达到扩张血管的目的[3]。L-精氨酸以及谷胱甘肽作为NO的供体，在扩张血管的过程中起到很大作用，本实验通过Ⅱ组和Ⅳ组的实验结果进一步证实了这两种药物的作用以及与NO的关系[4]，同时通过对cGMP含量的测定，证实了NO的作用在于信息的传递，通过增加鸟苷酸环化酶(GTP向cGMP转化的酶)的活性达到GTP向cGMP更多转化，从而达到扩张血管的目的[5]。
, http://www.100md.com
以往大量实验已经证实L-NA对L-精氨酸、BSO对谷胱甘肽具有明显的拮抗作用[6，7]。本实验根据Ⅲ组和Ⅴ组所得数据表明在抑制了L-精氨酸和谷胱甘肽的作用后，它们就不能有效地扩张肠系膜动脉条，不能增加cGMP的含量，从而进一步说明L-精氨酸和谷胱甘肽具有较强的扩张血管的能力。可以推测L-精氨酸和谷胱甘肽的这种作用不仅在于其作为NO的供体而且在于增加NO的活性以达到增加正常以及缺血组织的灌流，最终达到改善微循环、降低血管壁张力的效应，为临床提供了理论依据。
[参考文献]
[1]LOpez Jarmillo P,Gonzalez MC,Palmer RMJ,et al.The crucial role of physiogic Ca2+concentration in the production of endothelial nitric oxide and the control of vascular tone.Br J Pharmacol,1990,101:4889-4893.
, 百拇医药
[2]Toda N,Okamura T.Mechanism underlying the response to vasodilator nerve stimulation in isolated dog and monkey cerebral arteries.AM J Physiol,1990,259:H511-517.
[3]Tode N,Yoshida K,OK amura T.Analysis of the poteniating action of N-nitro-L-arginine on the contraction of the dog temporal artery elicied by transmural stimulation of noradrenergic nerves.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol,1991,343:221-224.
[4]Tode N.Relaxant responses to transmural stimulation and nicotine of dog and monkey cerebral arteries.AM J Physiol,1982,243:H 145-153.
, 百拇医药
[5]Lopez BL,Snyder JW,Birenbaum DS.N-acetylcysteine enhances endothelium dependent vasorelation in the isolated rat mese artery.Ann Emerg Med,1998,32:405-410.
[6]Tode N,Minami Y,O kanura T.lnhibitory effects of L-NG-nitro-arginine of the synyhesis of EDRF and the cerebroarterial response to vasodilator nerve stimulation.Life Sci,1990,47:345-351.
[7]Meister A.Glutathione Metabolism.Methods Enzymol,1995,251:3-7.
收稿：1999-01-10，修回：1999-09-27, 百拇医药