甘油合剂和透明质酸钠预防鸡鞘管区屈肌腱粘连的实验研究
甘油合剂和透明质酸钠预防鸡鞘管区屈肌腱粘连的实验研究
潘勇卫 韦加宁 张友乐 赵俊会 尹大庆
摘要 目的：研究甘油合剂预防鞘管区屈肌腱粘连的作用和对肌腱愈合的影响，并与透明质酸钠的作用相比较。方法：双A鸡78只，随机分为甘油合剂(GM)组、透明质酸钠(SH)组及生理盐水(NS)组，每组各26只。将鸡右足第三趾趾深屈肌腱切断，做改良Kessler法缝合，并修复腱鞘，然后在修复的腱鞘内及肌腱周围注入相应药物。术后第1、2、4、6、8周取材，分别进行大体观察、组织学检查、生物力学测试。结果：GM组术后4、8周，肌腱滑动距离、关节屈曲角度以及缝合处粘连程度评分均优于NS组，且差异有显著性意义(P<0.05)。而SH组的上述指标在术后4、8周与NS组相比，差异无显著性意义(P>0.05)。三个处理组的最大抗断裂载荷差异无显著性意义(P>0.05)。结论：GM可以有效预防术后肌腱粘连，不影响肌腱的正常愈合进程。局部应用SH，预防粘连的效果不明显，可能因为本实验使用的SH分子量较小，或浓度较低，代谢过快。
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关键词：腱 粘连 甘油 透明质酸
鞘管区屈肌腱损伤术后的粘连，是手外科的难题之一，目前尚无有效的解决方法。透明质酸钠被认为是一种比较理想的防粘连剂，但其预防粘连的最适浓度和分子量尚存在一些争议。甘油是最常用的体内、外润滑剂和生物组织保护剂。对于其预防肌腱粘连的作用，国内外未见任何研究报告。本实验研究的目的在于探索甘油合剂预防肌腱粘连的可能性，以及其对肌腱愈合的影响，旨在找出一种效果理想而又经济的防肌腱粘连剂。
材料与方法
一、主要试剂及其配制
(一)甘油合剂(glycerol mixture,GM)成分：含有甘油和MEM(minimum essential medium，细胞培养物，含多种氨基酸和无机盐，美国Life TechnologiesInc.公司产品)。配制方法：用灭菌注射用水将甘油配制成体积分数为10%的浓度，在150°C高温下灭菌30min，然后按10∶1比例与MEM原液混合。
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(二)透明质酸钠(sodium hyaluronate,SH)相对分子质量为500×103～730×103，质量浓度为0.01kg/L，意大利FidiaS.P.A公司出品。
二、动物分组及手术方法
成年双A鸡78只，雄性，体重4.0～5.0kg，随机分成甘油合剂(GM)组，透明质酸钠(SH)组，生理盐水(NS)组，每组26只。质量浓度2%戊巴比妥钠肌内注射麻醉。无菌条件下，“凵”形切开右足第三趾A2～A4滑车之间的鞘管，切除趾浅屈肌腱以增加鞘管容量。横断趾深屈肌腱，用5-0Maxon线做改良Kessler法缝合，用9-0单丝尼龙线连续缝合修复鞘管。然后通过聚乙烯管，根据分组,向鞘管腔内分别注入三种药物各1ml。术后将右足各趾屈曲位石膏制动，足底石膏开窗。从术后第1d开始，对实验足行被动屈伸活动，每日1次、每次40下，活动后继续原位制动，术后4周拆除石膏[1]。
, http://www.100md.com 三、术后观察项目
术后1、2、4、6、8周取材，分别行大体观察、组织学检查和生物力学测试，并对4、8周组动物进行粘连评分。评分标准如下[2,3]：0级：缝合处无粘连；1级：少量膜样、束带状粘连，局限于缝合处，肌腱滑动略受限；2级：小块状或宽带状粘连，局限于缝合处，肌腱滑动部分受限；3级：较大面积紧密粘连，向缝合点远近端蔓延，肌腱滑动明显受限或几乎不能滑动；4级：肌腱与鞘管壁、皮下形成紧密粘连，范围广，肌腱无任何滑动。生物力学测试包括肌腱滑动距离、关节屈曲角度、肌腱最大抗断裂载荷测定。方法：在Instron1185型材料实验机上，用1.5N拉力牵引趾深屈肌腱，持续30s，然后测定趾深屈肌腱被牵出鞘管入口的长度，以及近侧指间关节(PIP)、中侧指间关节(DIP)、远侧指间关节(DDIP)的关节屈曲角度，每个标本测定3次，取平均值。再将标本制成末节趾骨-趾深屈肌腱复合体，用机器上下夹具分别夹持待测肌腱的远近端，加载速度为20mm/min，直至肌腱断裂，记录断裂载荷及断裂部位。
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四、统计方法
粘连评分所得值，采用H检验进行统计；生物力学测定值，采用方差分析法进行统计。为减少个体间差异的影响，求出实验趾与各自对侧正常趾的比值，然后对比值进行统计学处理。用spss/pc统计软件包进行数据处理，α=0.05。
结果
有5只动物术后发生肌腱断裂，其中SH组2只，NS组3只，排除在统计计算之外。
一、肉眼观察
术后1～8周，GM组动物肌腱缝合处始终保持光滑，粘连程度评分多在0～2级之间。而SH组和NS组,术后1周,肌腱缝合处即与鞘管壁形成膜状粘连。术后2～8周，缝合处逐渐形成大量粗大粘连带，充填鞘管腔，肌腱滑动明显受限。粘连程度评分多在3～4级。
术后4、8周,各组动物肌腱粘连程度评分结果见表1。统计结果(H检验)：术后4周，三个处理组间差异有显著性意义(H=8.10，P=0.017),GM组粘连程度明显小于NS及SH组，差异有显著性意义(P<0.05)；术后8周，三个处理组间差异无显著性意义(H=5.23，P=0.073),但GM组粘连程度小于NS组,差异有显著性意义(H=4.97,P=0.026)。而SH组与NS组间，无论在术后4周还是8周，差异均无显著性意义(P>0.05)。
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表1肉眼下肌腱粘连程度评分结果
周数
组别
例数
总例数
分值
H值
P值
0级
1级
2级
3级
4级
, http://www.100md.com
4
GM
3
1
4
2
0
10
15*△
8.10
0.017
SH
0
, http://www.100md.com
1
1
2
4
8
25
NS
0
2
0
2
4
8
24
, http://www.100md.com
8
GM
3
1
2
2
1
9
15*
5.23
0.073
SH
1
, http://www.100md.com 0
4
1
3
9
23
NS
0
1
0
3
4
8
26
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注：*表示与同一时相NS组间差异有显著性意义(P<0.05);
△表示与同一时相SH组间差异有显著性意义(P<0.05)
二、组织学检查
光镜下，各组动物早期愈合情况有差异。术后1周，NS组缝合间隙细胞稀少，细胞间隙有明显水肿，可见少量红细胞和较多淋巴细胞。而GM组和SH组缝合间隙成纤维细胞数量明显增多，排列较致密，并已开始出现纤细的胶原纤维,淋巴细胞数量少。术后2周，NS组成纤维细胞和新生胶原纤维排列混乱，而GM、SH组的成纤维细胞和新生胶原纤维排列整齐。术后4～8周，各组动物的肌腱愈合情况未再显示出明显差异。GM组外膜始终保持光滑，而SH、NS组外膜不完整，被不规则粘连取代。
电镜下，三个处理组间的肌腱愈合进程未见明显差异。术后2周，GM组还可见到巨噬细胞大量聚集，吞噬甘油，胞浆内可见大量吞饮泡。术后4周，这种现象消失，说明甘油已被吸收或排出。三、生物力学测定结果
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1.肌腱滑动距离
实验趾和对侧正常趾肌腱滑动距离及其比值见表2。统计结果：术后4周及术后8周，方差分析显示三个处理组肌腱滑动距离比值间差异均有显著性意义(F值分别=3.79、4.43，P均<0.05)。两个时相上GM组均优于NS组，差异有显著性意义(P<0.05)，而SH组和NS组间差异无显著性意义(P>0.05)。
表2肌腱滑动距离(x±s，mm)
周数
组别
例数
实验趾
对侧正常趾
比值
, 百拇医药
F值
P值
4
GM
8
9.34±3.13
17.42±2.33
0.53±0.12*#
3.79
<0.05
SH
7
7.23±1.83
, http://www.100md.com
18.01±1.86
0.40±0.07#
NS
7
8.41±2.13
19.51±2.08
0.42±0.10
8
GM
7
11.74±3.17
17.10±1.82
, 百拇医药
0.68±0.13*
4.43
<0.05
SH
8
10.14±3.50
17.73±1.58
0.56±0.15
NS
7
8.46±3.53
18.08±2.57
, 百拇医药
0.46±0.14
注:*表示与同一时相NS组间差异有显著性意义(P<0.05)；
＃表示与同一个处理组术后8周的比值差异有显著性意义(P<0.05)
2.关节屈曲角度
实验趾和对侧正常趾各关节(PIP、DIP、DDIP)屈曲角度及其比值见表3。统计结果显示，无论术后4周还是8周，各处理组关节屈曲角度比值间差异有显著性意义(F值分别为4.26和5.77，P分别<0.05)；GM组屈曲角度比值均大于同一时相的NS组和SH组，差异有显著性意义(P<0.05)；而SH组与NS组屈曲角度比值间的差异无显著性意义(P>0.05)。
表3关节屈曲角度(x±s)
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周数
组别
例数
实验趾
对侧正常趾
比值
F值
P值
4
GM
8
9.34±3.13
17.42±2.33
, http://www.100md.com
0.53±0.12*#
3.79
<0.05
SH
7
7.23±1.83
18.01±1.86
0.40±0.07#
NS
7
8.41±2.13
19.51±2.08
, 百拇医药
0.42±0.10
8
GM
7
11.74±3.17
17.10±1.82
0.68±0.13*
4.43
<0.05
SH
8
10.14±3.50
, 百拇医药
17.73±1.58
0.56±0.15
NS
7
8.46±3.53
18.08±2.57
0.46±0.14
注:*表示与同一时相NS组间的差异有显著性意义(P<0.05)；
＃表示与同一时相SH组间的差异有显著性意义(P<0.05)
3.最大抗断裂载荷
, http://www.100md.com 各组实验趾和对侧正常趾最大抗断裂载荷及其比值见表4。4周时，各处理组间最大抗断裂载荷比值差异无显著性意义(F=0.36,P=0.70)。术后8周，不同处理组间差异仍无显著性意义(F=0.28,P=0.76)。同一处理组最大抗断裂载荷比值8周较4周时增高，差异有非常显著性意义(P=0.00)。
表4腱-末节趾骨复合体最大抗断裂载荷(x±s，N)
周数
组别
例数
实验趾
对侧正常趾
比值
F值
, 百拇医药
P值
4
GM
8
9.34±3.13
17.42±2.33
0.53±0.12*#
3.79
<0.05
SH
7
7.23±1.83
, http://www.100md.com 18.01±1.86
0.40±0.07#
NS
7
8.41±2.13
19.51±2.08
0.42±0.10
8
GM
7
11.74±3.17
17.10±1.82
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0.68±0.13*
4.43
<0.05
SH
8
10.14±3.50
17.73±1.58
0.56±0.15
NS
7
8.46±3.53
18.08±2.57
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0.46±0.14
讨论
甘油是动物体内正常的组成成分，广泛存在于血浆和各种组织中[4]。MEM由氨基酸、维生素和少量矿物质组成，是细胞体外培养的基本营养成分。在本实验中，局部联合应用甘油和MEM后，未见明显的炎症反应，对肌腱的愈合无影响，说明甘油合剂有良好的组织相容性。
我们首次将甘油合剂应用于肌腱粘连的预防，取得较满意效果。局部应用甘油合剂后，术后4周与8周肌腱滑动距离比值、关节屈曲角度比值均优于同一时相的NS组和SH组(P分别<0.05)。肌腱粘连程度评分结果表明，GM组的粘连程度多在0～2级之间，而SH和NS组多在3～4级。统计结果表明，GM组粘连程度在4周时分别小于SH组和NS组(P分别为0.012和0.023)；8周时，小于NS组(P=0.026)。这些结果表明，GM能有效预防术后肌腱粘连。
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本实验未能证实SH能预防肌腱周围粘连。对于SH的防粘连作用，国内外研究很多，还存在一些争议。许多学者在不同的动物模型上证实SH有预防肌腱周围粘连的作用[3,5],也有一些学者的实验结果却无效[2,6]。争论的焦点在于SH的分子量。一些学者认为SH的高分子量、高浓度剂型，在鞘管中的降解速率较低分子量、低浓度剂型慢，疗效持续时间较长[7,8]。本实验所用SH的分子量小,浓度较低，降解速率可能较快。过早地被代谢，可能是妨碍其充分发挥作用的原因之一。
已经证实，SH有促进肌腱愈合的作用[9]。在本实验中，我们也观察到SH促进肌腱愈合的现象。SH组在术后4周和8周时最大抗断裂载荷比值均较同一时相的NS组大，说明经过SH处理后，肌腱愈合得到加强。从组织学角度观察，术后前两周，SH组肌腱缝合间隙的细胞数量、细胞排列及胶原分泌均优于同一时相的NS组，与陈至善等[9]的研究结果相一致。
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本实验研究结果显示，GM也不影响肌腱愈合。26只GM组动物无一例发生肌腱断裂。从最大抗断裂载荷比值来看，各组间差异无显著性意义;而4周时GM组为0.19±0.08，8周时为0.79±0.22，均高于同一时相的NS组抗断裂比值(分别为0.17±0.07和0.77±0.24)，与SH组接近。从组织学角度看，术后前两周，GM组肌腱缝合处的细胞反应和胶原分泌与SH组相似，而与NS组排列紊乱的细胞形成对比。GM组在外源性愈合介入比较少的情况下，肌腱能顺利愈合，且细胞排列和胶原分泌在前两周内优于NS组，说明GM在一定程度上能促进肌腱愈合。
本实验首次发现甘油合剂具有防粘连作用，机制尚不十分明确。研究发现，甘油可以通过抗氧化作用和抑制前列腺素I2的活性，减少对缺血组织的破坏[10]。甘油是良好的自由基清除剂，能减少自由基对细胞DNA的损伤[11]。体积分数为2%～10%的甘油溶液能够可逆抑制细胞的增殖，同时又能诱导细胞分化，因此甘油是细胞增殖和细胞功能的调控剂[12,13]。甘油合剂可以通过上述作用，保护缝合处处于缺血状态的细胞，抑制受损部位的炎症反应，促进肌腱中的间质细胞向成纤维细胞转化。通过润滑作用，避免肌腱缝合处粗糙面对鞘管壁的损伤。作为细胞营养物质，暂时替代了因鞘管损伤而丧失的滑液。因此，甘油合剂能够较好地预防肌腱术后粘连，而不妨碍肌腱的愈合。
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作者单位：潘勇卫(100035北京积水潭医院手外科)
韦加宁(100035北京积水潭医院手外科)
张友乐(100035北京积水潭医院手外科)
赵俊会(100035北京积水潭医院手外科)
尹大庆(100035北京积水潭医院手外科)
参考文献
1，张智慧.鞘内肌腱愈合细胞参与形态学的实验研究.中华手外科杂志,1996,12:96-98.
2，Green S, Szabo R, Langa V. The inhibition of flexor tendon adhesions. Bulletin of Hospital for Joint Diseases Orthopaedic Institute,1986, 46: 16- 21.
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3，Thomas SC, Jones LC, Hungerford DS. Hyaluronic acid and its effect on postoperative adhesions in the rabbit flexor tendon: a preliminary look. Clin Orthop, 1986,(206):281- 289.
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5，Amiel D, Ishizue k,Billings E Jr,et al. Hyaluronan in flexor tendon repair. J Hand Surg(Am), 1989,14: 837- 843.
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6，叶根茂.预防肌腱粘连的研究进展.中华手外科杂志,1994,10:115-118.
7，Hagberg L, Gerding B. Sodium hyaluronate as an adjunct in adhesion prevention after flexor tendon surgery in rabbits. J Hand Surg(Am), 1992,17:935.
8，Aviad AD, Houpt JB. The molecular weight of therapeutic hyaluronan(sodium hyaluronate): how significant is it? J Rheumatol,1994,21:297- 301.
9，Shimoda M, Oda S, Shibata M,et al. Change in regional cerebral blood flow following glycerol administration predicts. Clinical result from shunting in normal pressure hydrocephalus. Acta Neurochir(Wien),1994,129:171- 176.
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11，Wiebe JP, Dinsdale CJ. Inhibition of cell proliferation by glycerol. Life Sci,1991,48:1511- 1517.
12，Dinsdale CJ, Mirza FM, Wiebe JP.Glycerol alters cytoskeleton and cell adhesion while inhibiting cell proliferation. Cell Biol Int Rep,1992,16:591- 602., 百拇医药
潘勇卫 韦加宁 张友乐 赵俊会 尹大庆
摘要 目的：研究甘油合剂预防鞘管区屈肌腱粘连的作用和对肌腱愈合的影响，并与透明质酸钠的作用相比较。方法：双A鸡78只，随机分为甘油合剂(GM)组、透明质酸钠(SH)组及生理盐水(NS)组，每组各26只。将鸡右足第三趾趾深屈肌腱切断，做改良Kessler法缝合，并修复腱鞘，然后在修复的腱鞘内及肌腱周围注入相应药物。术后第1、2、4、6、8周取材，分别进行大体观察、组织学检查、生物力学测试。结果：GM组术后4、8周，肌腱滑动距离、关节屈曲角度以及缝合处粘连程度评分均优于NS组，且差异有显著性意义(P<0.05)。而SH组的上述指标在术后4、8周与NS组相比，差异无显著性意义(P>0.05)。三个处理组的最大抗断裂载荷差异无显著性意义(P>0.05)。结论：GM可以有效预防术后肌腱粘连，不影响肌腱的正常愈合进程。局部应用SH，预防粘连的效果不明显，可能因为本实验使用的SH分子量较小，或浓度较低，代谢过快。
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关键词：腱 粘连 甘油 透明质酸
鞘管区屈肌腱损伤术后的粘连，是手外科的难题之一，目前尚无有效的解决方法。透明质酸钠被认为是一种比较理想的防粘连剂，但其预防粘连的最适浓度和分子量尚存在一些争议。甘油是最常用的体内、外润滑剂和生物组织保护剂。对于其预防肌腱粘连的作用，国内外未见任何研究报告。本实验研究的目的在于探索甘油合剂预防肌腱粘连的可能性，以及其对肌腱愈合的影响，旨在找出一种效果理想而又经济的防肌腱粘连剂。
材料与方法
一、主要试剂及其配制
(一)甘油合剂(glycerol mixture,GM)成分：含有甘油和MEM(minimum essential medium，细胞培养物，含多种氨基酸和无机盐，美国Life TechnologiesInc.公司产品)。配制方法：用灭菌注射用水将甘油配制成体积分数为10%的浓度，在150°C高温下灭菌30min，然后按10∶1比例与MEM原液混合。
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(二)透明质酸钠(sodium hyaluronate,SH)相对分子质量为500×103～730×103，质量浓度为0.01kg/L，意大利FidiaS.P.A公司出品。
二、动物分组及手术方法
成年双A鸡78只，雄性，体重4.0～5.0kg，随机分成甘油合剂(GM)组，透明质酸钠(SH)组，生理盐水(NS)组，每组26只。质量浓度2%戊巴比妥钠肌内注射麻醉。无菌条件下，“凵”形切开右足第三趾A2～A4滑车之间的鞘管，切除趾浅屈肌腱以增加鞘管容量。横断趾深屈肌腱，用5-0Maxon线做改良Kessler法缝合，用9-0单丝尼龙线连续缝合修复鞘管。然后通过聚乙烯管，根据分组,向鞘管腔内分别注入三种药物各1ml。术后将右足各趾屈曲位石膏制动，足底石膏开窗。从术后第1d开始，对实验足行被动屈伸活动，每日1次、每次40下，活动后继续原位制动，术后4周拆除石膏[1]。
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术后1、2、4、6、8周取材，分别行大体观察、组织学检查和生物力学测试，并对4、8周组动物进行粘连评分。评分标准如下[2,3]：0级：缝合处无粘连；1级：少量膜样、束带状粘连，局限于缝合处，肌腱滑动略受限；2级：小块状或宽带状粘连，局限于缝合处，肌腱滑动部分受限；3级：较大面积紧密粘连，向缝合点远近端蔓延，肌腱滑动明显受限或几乎不能滑动；4级：肌腱与鞘管壁、皮下形成紧密粘连，范围广，肌腱无任何滑动。生物力学测试包括肌腱滑动距离、关节屈曲角度、肌腱最大抗断裂载荷测定。方法：在Instron1185型材料实验机上，用1.5N拉力牵引趾深屈肌腱，持续30s，然后测定趾深屈肌腱被牵出鞘管入口的长度，以及近侧指间关节(PIP)、中侧指间关节(DIP)、远侧指间关节(DDIP)的关节屈曲角度，每个标本测定3次，取平均值。再将标本制成末节趾骨-趾深屈肌腱复合体，用机器上下夹具分别夹持待测肌腱的远近端，加载速度为20mm/min，直至肌腱断裂，记录断裂载荷及断裂部位。
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四、统计方法
粘连评分所得值，采用H检验进行统计；生物力学测定值，采用方差分析法进行统计。为减少个体间差异的影响，求出实验趾与各自对侧正常趾的比值，然后对比值进行统计学处理。用spss/pc统计软件包进行数据处理，α=0.05。
结果
有5只动物术后发生肌腱断裂，其中SH组2只，NS组3只，排除在统计计算之外。
一、肉眼观察
术后1～8周，GM组动物肌腱缝合处始终保持光滑，粘连程度评分多在0～2级之间。而SH组和NS组,术后1周,肌腱缝合处即与鞘管壁形成膜状粘连。术后2～8周，缝合处逐渐形成大量粗大粘连带，充填鞘管腔，肌腱滑动明显受限。粘连程度评分多在3～4级。
术后4、8周,各组动物肌腱粘连程度评分结果见表1。统计结果(H检验)：术后4周，三个处理组间差异有显著性意义(H=8.10，P=0.017),GM组粘连程度明显小于NS及SH组，差异有显著性意义(P<0.05)；术后8周，三个处理组间差异无显著性意义(H=5.23，P=0.073),但GM组粘连程度小于NS组,差异有显著性意义(H=4.97,P=0.026)。而SH组与NS组间，无论在术后4周还是8周，差异均无显著性意义(P>0.05)。
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表1肉眼下肌腱粘连程度评分结果
周数
组别
例数
总例数
分值
H值
P值
0级
1级
2级
3级
4级
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4
GM
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0
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15*△
8.10
0.017
SH
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NS
0
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2
2
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5.23
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NS
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注：*表示与同一时相NS组间差异有显著性意义(P<0.05);
△表示与同一时相SH组间差异有显著性意义(P<0.05)
二、组织学检查
光镜下，各组动物早期愈合情况有差异。术后1周，NS组缝合间隙细胞稀少，细胞间隙有明显水肿，可见少量红细胞和较多淋巴细胞。而GM组和SH组缝合间隙成纤维细胞数量明显增多，排列较致密，并已开始出现纤细的胶原纤维,淋巴细胞数量少。术后2周，NS组成纤维细胞和新生胶原纤维排列混乱，而GM、SH组的成纤维细胞和新生胶原纤维排列整齐。术后4～8周，各组动物的肌腱愈合情况未再显示出明显差异。GM组外膜始终保持光滑，而SH、NS组外膜不完整，被不规则粘连取代。
电镜下，三个处理组间的肌腱愈合进程未见明显差异。术后2周，GM组还可见到巨噬细胞大量聚集，吞噬甘油，胞浆内可见大量吞饮泡。术后4周，这种现象消失，说明甘油已被吸收或排出。三、生物力学测定结果
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1.肌腱滑动距离
实验趾和对侧正常趾肌腱滑动距离及其比值见表2。统计结果：术后4周及术后8周，方差分析显示三个处理组肌腱滑动距离比值间差异均有显著性意义(F值分别=3.79、4.43，P均<0.05)。两个时相上GM组均优于NS组，差异有显著性意义(P<0.05)，而SH组和NS组间差异无显著性意义(P>0.05)。
表2肌腱滑动距离(x±s，mm)
周数
组别
例数
实验趾
对侧正常趾
比值
, 百拇医药
F值
P值
4
GM
8
9.34±3.13
17.42±2.33
0.53±0.12*#
3.79
<0.05
SH
7
7.23±1.83
, http://www.100md.com
18.01±1.86
0.40±0.07#
NS
7
8.41±2.13
19.51±2.08
0.42±0.10
8
GM
7
11.74±3.17
17.10±1.82
, 百拇医药
0.68±0.13*
4.43
<0.05
SH
8
10.14±3.50
17.73±1.58
0.56±0.15
NS
7
8.46±3.53
18.08±2.57
, 百拇医药
0.46±0.14
注:*表示与同一时相NS组间差异有显著性意义(P<0.05)；
＃表示与同一个处理组术后8周的比值差异有显著性意义(P<0.05)
2.关节屈曲角度
实验趾和对侧正常趾各关节(PIP、DIP、DDIP)屈曲角度及其比值见表3。统计结果显示，无论术后4周还是8周，各处理组关节屈曲角度比值间差异有显著性意义(F值分别为4.26和5.77，P分别<0.05)；GM组屈曲角度比值均大于同一时相的NS组和SH组，差异有显著性意义(P<0.05)；而SH组与NS组屈曲角度比值间的差异无显著性意义(P>0.05)。
表3关节屈曲角度(x±s)
, 百拇医药
周数
组别
例数
实验趾
对侧正常趾
比值
F值
P值
4
GM
8
9.34±3.13
17.42±2.33
, http://www.100md.com
0.53±0.12*#
3.79
<0.05
SH
7
7.23±1.83
18.01±1.86
0.40±0.07#
NS
7
8.41±2.13
19.51±2.08
, 百拇医药
0.42±0.10
8
GM
7
11.74±3.17
17.10±1.82
0.68±0.13*
4.43
<0.05
SH
8
10.14±3.50
, 百拇医药
17.73±1.58
0.56±0.15
NS
7
8.46±3.53
18.08±2.57
0.46±0.14
注:*表示与同一时相NS组间的差异有显著性意义(P<0.05)；
＃表示与同一时相SH组间的差异有显著性意义(P<0.05)
3.最大抗断裂载荷
, http://www.100md.com 各组实验趾和对侧正常趾最大抗断裂载荷及其比值见表4。4周时，各处理组间最大抗断裂载荷比值差异无显著性意义(F=0.36,P=0.70)。术后8周，不同处理组间差异仍无显著性意义(F=0.28,P=0.76)。同一处理组最大抗断裂载荷比值8周较4周时增高，差异有非常显著性意义(P=0.00)。
表4腱-末节趾骨复合体最大抗断裂载荷(x±s，N)
周数
组别
例数
实验趾
对侧正常趾
比值
F值
, 百拇医药
P值
4
GM
8
9.34±3.13
17.42±2.33
0.53±0.12*#
3.79
<0.05
SH
7
7.23±1.83
, http://www.100md.com 18.01±1.86
0.40±0.07#
NS
7
8.41±2.13
19.51±2.08
0.42±0.10
8
GM
7
11.74±3.17
17.10±1.82
, http://www.100md.com
0.68±0.13*
4.43
<0.05
SH
8
10.14±3.50
17.73±1.58
0.56±0.15
NS
7
8.46±3.53
18.08±2.57
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0.46±0.14
讨论
甘油是动物体内正常的组成成分，广泛存在于血浆和各种组织中[4]。MEM由氨基酸、维生素和少量矿物质组成，是细胞体外培养的基本营养成分。在本实验中，局部联合应用甘油和MEM后，未见明显的炎症反应，对肌腱的愈合无影响，说明甘油合剂有良好的组织相容性。
我们首次将甘油合剂应用于肌腱粘连的预防，取得较满意效果。局部应用甘油合剂后，术后4周与8周肌腱滑动距离比值、关节屈曲角度比值均优于同一时相的NS组和SH组(P分别<0.05)。肌腱粘连程度评分结果表明，GM组的粘连程度多在0～2级之间，而SH和NS组多在3～4级。统计结果表明，GM组粘连程度在4周时分别小于SH组和NS组(P分别为0.012和0.023)；8周时，小于NS组(P=0.026)。这些结果表明，GM能有效预防术后肌腱粘连。
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本实验未能证实SH能预防肌腱周围粘连。对于SH的防粘连作用，国内外研究很多，还存在一些争议。许多学者在不同的动物模型上证实SH有预防肌腱周围粘连的作用[3,5],也有一些学者的实验结果却无效[2,6]。争论的焦点在于SH的分子量。一些学者认为SH的高分子量、高浓度剂型，在鞘管中的降解速率较低分子量、低浓度剂型慢，疗效持续时间较长[7,8]。本实验所用SH的分子量小,浓度较低，降解速率可能较快。过早地被代谢，可能是妨碍其充分发挥作用的原因之一。
已经证实，SH有促进肌腱愈合的作用[9]。在本实验中，我们也观察到SH促进肌腱愈合的现象。SH组在术后4周和8周时最大抗断裂载荷比值均较同一时相的NS组大，说明经过SH处理后，肌腱愈合得到加强。从组织学角度观察，术后前两周，SH组肌腱缝合间隙的细胞数量、细胞排列及胶原分泌均优于同一时相的NS组，与陈至善等[9]的研究结果相一致。
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本实验研究结果显示，GM也不影响肌腱愈合。26只GM组动物无一例发生肌腱断裂。从最大抗断裂载荷比值来看，各组间差异无显著性意义;而4周时GM组为0.19±0.08，8周时为0.79±0.22，均高于同一时相的NS组抗断裂比值(分别为0.17±0.07和0.77±0.24)，与SH组接近。从组织学角度看，术后前两周，GM组肌腱缝合处的细胞反应和胶原分泌与SH组相似，而与NS组排列紊乱的细胞形成对比。GM组在外源性愈合介入比较少的情况下，肌腱能顺利愈合，且细胞排列和胶原分泌在前两周内优于NS组，说明GM在一定程度上能促进肌腱愈合。
本实验首次发现甘油合剂具有防粘连作用，机制尚不十分明确。研究发现，甘油可以通过抗氧化作用和抑制前列腺素I2的活性，减少对缺血组织的破坏[10]。甘油是良好的自由基清除剂，能减少自由基对细胞DNA的损伤[11]。体积分数为2%～10%的甘油溶液能够可逆抑制细胞的增殖，同时又能诱导细胞分化，因此甘油是细胞增殖和细胞功能的调控剂[12,13]。甘油合剂可以通过上述作用，保护缝合处处于缺血状态的细胞，抑制受损部位的炎症反应，促进肌腱中的间质细胞向成纤维细胞转化。通过润滑作用，避免肌腱缝合处粗糙面对鞘管壁的损伤。作为细胞营养物质，暂时替代了因鞘管损伤而丧失的滑液。因此，甘油合剂能够较好地预防肌腱术后粘连，而不妨碍肌腱的愈合。
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作者单位：潘勇卫(100035北京积水潭医院手外科)
韦加宁(100035北京积水潭医院手外科)
张友乐(100035北京积水潭医院手外科)
赵俊会(100035北京积水潭医院手外科)
尹大庆(100035北京积水潭医院手外科)
参考文献
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