法莫替丁肠吸收研究
作者：高申 钟延强 尹东锋 魏华 居红卫 鲁莹
单位：高申(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433)；钟延强(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433) 尹东锋(药学院1998级实习生 )；魏华(海军411医院)；居红卫(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433)；鲁莹(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433)
关键词：法莫替丁；肠道吸收
第二军医大学学报001035 [中图分类号] R 975.2 [文献标识码] B
[文章编号] 0258-879X(2000)10-0913-02
法莫替丁是第三代H2受体拮抗剂，对胃酸分泌有明显的抑制作用，临床上主要用于胃 及十二指肠溃疡和上消化道出血的治疗。法莫替丁口服吸收不完全，生物利用度约为37%～4 5%[1]。法莫替丁极性大，脂溶性小，膜的通透性差，是导致生物利用度低的主要 原因[2]。有关法莫替丁的胃肠道吸收情况未见文献报道，所以探明该药物在肠管 各区段的吸收特征，对于提高生物利用度，开发新制剂具有重要意义。本文采用大鼠在体肠 回流法，对法莫替丁的吸收部位和吸收特点进行了初步探讨。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 试药和仪器 法莫替丁原料药(上海第六制药厂，批号950301)；水合氯醛( 上海五联化工厂，批号980803)；氯化钠(上海金城试剂厂，批号970423)；乙腈(色谱纯 ，上海吴泾化工厂，批号981005)；三乙胺(上海试剂三厂，批号970408)；磷酸(上海联 合化工厂，批号900105)。YSD-2平流泵(中国科学院上海分院科学仪器厂)；恒温水浴 锅(TC-30)；美国Waters公司高效液相色谱仪(510型恒流泵，486UV检测器，810工作站 ，U6k进样阀)；FA1004型电子天平(上海天平厂)。
1.2 实验动物分组 选用SD大鼠20只(第二军医大学实验动物中心提供)，体质量 (200±40) g，雌雄兼用，按十二指肠、空肠、回肠和结肠四部分，分段进行吸收实验,每段 5只大鼠。
1.3 实验方法
, 百拇医药
1.3.1 在体肠回流实验[3，4] 实验前大鼠在自由饮水的条件下禁食12 h。实验开始，用10%水合氯醛溶液腹腔注射将大鼠麻醉后(剂量为0.4 ml/kg)， 固定于手术 台上，沿腹中线打开腹腔。选择所需要考察的肠段，按以下方法取各肠段进行结扎。十二指 肠段自幽门1 cm处开始，空肠段离幽门15 cm 处开始，回肠段距离盲肠20 cm处开始，结肠 段为紧邻盲肠段至直肠，各段均取10 cm左右[5]。在各肠段两端剪切后插管，结扎 ，先用少量37℃的生理盐水冲洗肠段，再以1 ml/min的流速平衡30 min，实验装置如图1所 示。然后用24.99 μg/ml的法莫替丁溶液50 ml回流2 h，流速1 ml/min。结束后，将 所得回流液移入100 ml容量瓶中，另用生理盐水冲洗肠道30 min，冲洗液并入容量瓶，用生 理盐水定容，混匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液20 μl进样，HPLC测定浓度，计算回流前 后回流液中法莫替丁减少百分率。
1.3.2 回流液中法莫替丁的HPLC测定 采用HPLC外标法定量。色谱条件：YMC-pe ak ODS柱(150 mm×4.6 mm， 5μm)，流动相为乙腈∶水∶磷酸∶三乙胺＝5∶95∶0. 013∶0.017，用磷酸调pH为3.5，流速1.0 ml/min，检测波长265 nm，灵敏度0.05 AU FS， 20 μl进样，室温下操作。法莫替丁的保留时间约为5.85 min。
, 百拇医药
图 1 大鼠在体肠回流实验示意图
1.3.3 回流液测定的标准曲线 用空白回流液精密配制5.0，9.8，14.9，20.1，2 4.5,29.5 μg/ml系列浓度法莫替丁标准溶液，同上色谱条件测定，用测得的峰面积A和 浓度c进行回归，得标准曲线方程如下：c(μg/ml)=2.907 1×10-5A+ 0.128 5 (r=0.999 6， n=6)。
1.3.4 方法的回收率 用空白回流液配制4.90，9.80，14.70，19.60 μg/ml 的法莫替丁溶液，同上HPLC测定峰面积，和法莫替丁标准液峰面积比较，计算回收率，得上 述浓度的回收率分别为(99.38±0.85)%，(100.51±0.61)%，(100.34±0.56)%和(100.20±0.43)% ，平均回收率为100.11%。
1.3.5 方法的精密度 同上配制4.90，19.60，29.60 μg/ml的法莫替丁 溶液，各浓度点重复测定5次,实测浓度分别为(9.91±0.04)，(19.93±0.08)和(29.57±0.1 1) μg/ml， RSD分别为0.37，0.40和0.36， 均满足分析要求。
, 百拇医药
1.3.6 法莫替丁在人工肠液中的稳定性 用人工肠液配制3份药液，置(37±0.5) ℃孵育2 h。测定孵育前后药物浓度，孵育后剩余药量为(100.12±0.33)%，可见法莫替丁在 人工肠液中是稳定的。
2 结 果
当回流液中法莫替丁的浓度为25 μg/ml时，根据各段肠管吸收研究的结果，法莫替 丁在大鼠肠管内累计总吸收量为65.31%，并且主要集中在肠管上中部吸收。法莫替丁在 十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收百分率分别为(16.65±6.79)%，(34.08±6.64)%， (12.00±2.85)%和(2.58±0.95)%。每小时每厘米肠管的吸收速度(%*cm-1*h -1)分别为(0.59±0.21)%，(1.37±0.19)%，(0.45±0.09)%和(0.12±0.05)%。以 上实验结果表明，法莫替丁在大鼠各肠段的吸收速率按空肠、十二指肠、回肠和结肠依次下 降。两两比较均有极显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨 论
吸收部位的研究可以通过离体、在体、体内等多种方法进行，在体实验方法应用较多， 因为离体实验破坏了正常的生理状态，结果与实际情况可能产生较大误差。人体试验最能说 明药物吸收的实际情况，但需要对药物进行同位素标记，费用贵，测定设备要求高，目前不 易做到。对于在体实验方法，不同性质的药物可通过适当调整进行研究。动物吸收特点与人 体吸收的相关性也多有实验证明。
本研究通过在大鼠肠管部位插管的方法，对法莫替丁的肠管吸收情况进行初步研究。结果表 明空肠段是法莫替丁的最佳吸收部位。对单位时间吸收速度数据，用方差分析的F检验 法进行统计学分析，结果表明十二指肠、空肠、回肠、结肠之间的吸收速度有极显著性差异 (P<0.01)。若能采用适当的制剂技术延长法莫替丁在肠管上中部的滞留时间，可望提 高法莫替丁的生物利用度。
[作者简介]高申(1957-)，男(汉族)，教授，博士生导师.
, 百拇医药
[参 考 文 献]
[1] Campoli-Richards DM, Clissold SP. Famotidine pharmacodynam ic and pharmacokinetic properties and a preliminary review of its therapeutic us e in peptic ulcer disease and Zollinger-Euison syndrome[J]. Drugs, 1986, 32( 2):197-221.
[2] Hui YF, Kolars J, Hu ZZ. Intestinal clearance of H2-antagonists[ J]. Biochem Pharmacol, 1994, 48(2): 229-231.
[3] 陆 杉 主编. 药剂学实验[M]. 北京: 人民卫生出版社, 1994. 131-135.
[4] 任献忠, 张均寿, 王恒斌. 红霉素肠道吸收机制及最佳吸收部位研究[J]. 中国药科大学学报, 1997， 28(1): 17-22.
[收稿日期] 2000-04-24
[修回日期] 2000-07-21, 百拇医药
单位：高申(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433)；钟延强(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433) 尹东锋(药学院1998级实习生 )；魏华(海军411医院)；居红卫(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433)；鲁莹(第二军医大学药学院药剂学教研室，上海200433)
关键词：法莫替丁；肠道吸收
第二军医大学学报001035 [中图分类号] R 975.2 [文献标识码] B
[文章编号] 0258-879X(2000)10-0913-02
法莫替丁是第三代H2受体拮抗剂，对胃酸分泌有明显的抑制作用，临床上主要用于胃 及十二指肠溃疡和上消化道出血的治疗。法莫替丁口服吸收不完全，生物利用度约为37%～4 5%[1]。法莫替丁极性大，脂溶性小，膜的通透性差，是导致生物利用度低的主要 原因[2]。有关法莫替丁的胃肠道吸收情况未见文献报道，所以探明该药物在肠管 各区段的吸收特征，对于提高生物利用度，开发新制剂具有重要意义。本文采用大鼠在体肠 回流法，对法莫替丁的吸收部位和吸收特点进行了初步探讨。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 试药和仪器 法莫替丁原料药(上海第六制药厂，批号950301)；水合氯醛( 上海五联化工厂，批号980803)；氯化钠(上海金城试剂厂，批号970423)；乙腈(色谱纯 ，上海吴泾化工厂，批号981005)；三乙胺(上海试剂三厂，批号970408)；磷酸(上海联 合化工厂，批号900105)。YSD-2平流泵(中国科学院上海分院科学仪器厂)；恒温水浴 锅(TC-30)；美国Waters公司高效液相色谱仪(510型恒流泵，486UV检测器，810工作站 ，U6k进样阀)；FA1004型电子天平(上海天平厂)。
1.2 实验动物分组 选用SD大鼠20只(第二军医大学实验动物中心提供)，体质量 (200±40) g，雌雄兼用，按十二指肠、空肠、回肠和结肠四部分，分段进行吸收实验,每段 5只大鼠。
1.3 实验方法
, 百拇医药
1.3.1 在体肠回流实验[3，4] 实验前大鼠在自由饮水的条件下禁食12 h。实验开始，用10%水合氯醛溶液腹腔注射将大鼠麻醉后(剂量为0.4 ml/kg)， 固定于手术 台上，沿腹中线打开腹腔。选择所需要考察的肠段，按以下方法取各肠段进行结扎。十二指 肠段自幽门1 cm处开始，空肠段离幽门15 cm 处开始，回肠段距离盲肠20 cm处开始，结肠 段为紧邻盲肠段至直肠，各段均取10 cm左右[5]。在各肠段两端剪切后插管，结扎 ，先用少量37℃的生理盐水冲洗肠段，再以1 ml/min的流速平衡30 min，实验装置如图1所 示。然后用24.99 μg/ml的法莫替丁溶液50 ml回流2 h，流速1 ml/min。结束后，将 所得回流液移入100 ml容量瓶中，另用生理盐水冲洗肠道30 min，冲洗液并入容量瓶，用生 理盐水定容，混匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液20 μl进样，HPLC测定浓度，计算回流前 后回流液中法莫替丁减少百分率。
1.3.2 回流液中法莫替丁的HPLC测定 采用HPLC外标法定量。色谱条件：YMC-pe ak ODS柱(150 mm×4.6 mm， 5μm)，流动相为乙腈∶水∶磷酸∶三乙胺＝5∶95∶0. 013∶0.017，用磷酸调pH为3.5，流速1.0 ml/min，检测波长265 nm，灵敏度0.05 AU FS， 20 μl进样，室温下操作。法莫替丁的保留时间约为5.85 min。
, 百拇医药
图 1 大鼠在体肠回流实验示意图
1.3.3 回流液测定的标准曲线 用空白回流液精密配制5.0，9.8，14.9，20.1，2 4.5,29.5 μg/ml系列浓度法莫替丁标准溶液，同上色谱条件测定，用测得的峰面积A和 浓度c进行回归，得标准曲线方程如下：c(μg/ml)=2.907 1×10-5A+ 0.128 5 (r=0.999 6， n=6)。
1.3.4 方法的回收率 用空白回流液配制4.90，9.80，14.70，19.60 μg/ml 的法莫替丁溶液，同上HPLC测定峰面积，和法莫替丁标准液峰面积比较，计算回收率，得上 述浓度的回收率分别为(99.38±0.85)%，(100.51±0.61)%，(100.34±0.56)%和(100.20±0.43)% ，平均回收率为100.11%。
1.3.5 方法的精密度 同上配制4.90，19.60，29.60 μg/ml的法莫替丁 溶液，各浓度点重复测定5次,实测浓度分别为(9.91±0.04)，(19.93±0.08)和(29.57±0.1 1) μg/ml， RSD分别为0.37，0.40和0.36， 均满足分析要求。
, 百拇医药
1.3.6 法莫替丁在人工肠液中的稳定性 用人工肠液配制3份药液，置(37±0.5) ℃孵育2 h。测定孵育前后药物浓度，孵育后剩余药量为(100.12±0.33)%，可见法莫替丁在 人工肠液中是稳定的。
2 结 果
当回流液中法莫替丁的浓度为25 μg/ml时，根据各段肠管吸收研究的结果，法莫替 丁在大鼠肠管内累计总吸收量为65.31%，并且主要集中在肠管上中部吸收。法莫替丁在 十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收百分率分别为(16.65±6.79)%，(34.08±6.64)%， (12.00±2.85)%和(2.58±0.95)%。每小时每厘米肠管的吸收速度(%*cm-1*h -1)分别为(0.59±0.21)%，(1.37±0.19)%，(0.45±0.09)%和(0.12±0.05)%。以 上实验结果表明，法莫替丁在大鼠各肠段的吸收速率按空肠、十二指肠、回肠和结肠依次下 降。两两比较均有极显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨 论
吸收部位的研究可以通过离体、在体、体内等多种方法进行，在体实验方法应用较多， 因为离体实验破坏了正常的生理状态，结果与实际情况可能产生较大误差。人体试验最能说 明药物吸收的实际情况，但需要对药物进行同位素标记，费用贵，测定设备要求高，目前不 易做到。对于在体实验方法，不同性质的药物可通过适当调整进行研究。动物吸收特点与人 体吸收的相关性也多有实验证明。
本研究通过在大鼠肠管部位插管的方法，对法莫替丁的肠管吸收情况进行初步研究。结果表 明空肠段是法莫替丁的最佳吸收部位。对单位时间吸收速度数据，用方差分析的F检验 法进行统计学分析，结果表明十二指肠、空肠、回肠、结肠之间的吸收速度有极显著性差异 (P<0.01)。若能采用适当的制剂技术延长法莫替丁在肠管上中部的滞留时间，可望提 高法莫替丁的生物利用度。
[作者简介]高申(1957-)，男(汉族)，教授，博士生导师.
, 百拇医药
[参 考 文 献]
[1] Campoli-Richards DM, Clissold SP. Famotidine pharmacodynam ic and pharmacokinetic properties and a preliminary review of its therapeutic us e in peptic ulcer disease and Zollinger-Euison syndrome[J]. Drugs, 1986, 32( 2):197-221.
[2] Hui YF, Kolars J, Hu ZZ. Intestinal clearance of H2-antagonists[ J]. Biochem Pharmacol, 1994, 48(2): 229-231.
[3] 陆 杉 主编. 药剂学实验[M]. 北京: 人民卫生出版社, 1994. 131-135.
[4] 任献忠, 张均寿, 王恒斌. 红霉素肠道吸收机制及最佳吸收部位研究[J]. 中国药科大学学报, 1997， 28(1): 17-22.
[收稿日期] 2000-04-24
[修回日期] 2000-07-21, 百拇医药