无关供者脐血造血干细胞移植治疗一例成人重型再生障碍性贫血
作者：毛平 廖灿 朱志刚 王汉平 王顺清 莫文健 应逸 李庆山 刘斌
单位：毛平 朱志刚 王汉平 王顺清 莫文健 应逸 李庆山(510180 广州市第一人民医院)；廖灿 刘斌(广州市脐血库)
关键词：胎血；移植；贫血，再生障碍性
中华血液学杂志001008
【摘要】 目的 研究无关供者脐血造血干细胞移植(unrelated allo-CBSCT)治疗成人重型再生障碍性贫血(再障)。方法 用HLA配型6个位点全相合无关供者allo-CBSCT治疗1例成人重型再障患者。脐血由广州市脐血库提供，输入的单个核细胞(MNC)数为1.89×107/kg(按患者体重60kg计)，CD34阳性细胞占0.009，CFU-GM为1.8×104/kg。预处理方案由环磷酰胺(CTX)和抗淋巴细胞球蛋白(ALG)组成，CTX总用量为60mg/kg；ALG按120mg/kg给予。用甲氨蝶呤(MTX)和环孢菌素A(CsA)预防移植物抗宿主病(GVHD)，CsA用至8个月逐渐减量停药。结果 输入脐血后白细胞最低值为0.6×109/L，血小板最低值为12.0×109/L，中性粒细胞于移植后第10天大于0.5×109/L，血小板于移植后第20天大于50.0×109/L。移植后8个月时出现皮肤局限性GVHD。微卫星法DNA指纹图示稳定的供、受体混合嵌合状态，但迄今ABO血型仍为受者型。结论 此例为国内首例采用allo-CBSCT治疗成人重型再障，并获得成功，脐血造血干细胞已长期植入。
, 百拇医药
Umbilical cord blood stem cells transplantation from an unrelated donor into an adult with severe aplastic anemia
MAO Ping LIAO Can ZHU Zhigang
(First Municipal Peoples Hospital of Guangzhou, Guangzhou 510180, China)
【Abstract】 Objective To evaluate the availability of the treatment of adult severe aplastic anemia with unrelated allo-cord blood stem cell transplantation(CBSCT). Methods HLA-matched unrelated cord blood transplantation has been successfully performed for an adult severe aplastic anemia patient. A unit of cord blood provided by Guangzhou Cord Blood Bank containing 1.89×107/kg mononucleated cells, 1.8×104/kg CFU-GM and of CD34 positive cells was 0.009. The patient was conditioned with CTX(60mg/kg) and anti-lymphocyte globulin(ALG,120mg/kg). GVHD prophylaxis consisted of both MTX and CsA. The CsA had been given for 8 months. Results The lowest ANC was 0.6×109/L post-transplantation. The patient achieved an ANC of greater than 0.5×109/L at 10 days, and the platelet of greater than 50.0×109/L at day 20 after transplantation. He developed Grade 1 GVHD in the tenth month after grafting. Microsatellite DNA fingerprinting indicated a stable donor-recipient mixed chimerism,whilst the circulating red cells remained host origin. Conclusion It is the first report in China on successful treatment of adult severe aplastic anemia by unrelated allo-CBSCT.
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【Key words】 Fetal blood； Transplantation； Anemia, aplastic
自1988年Gluckman等[1]首创脐血移植，成功治疗1例Fanconi贫血以来，脐血移植发展很快，迄今已有数百名患者，包括各类白血病、再生障碍性贫血(再障)、重型地中海贫血以及先天性免疫缺陷症等接受了脐血移植[2,3]。脐血作为移植物具有很大的应用前景，具有采集方便、来源广、对供者无害、排斥反应和移植物抗宿主病(GVHD)发生率低且程度较轻、移植后免疫功能的恢复及长期造血重建能力较高等优点。我们于1998年12月用6个位点相合的无关供者脐血造血干细胞移植治疗1例成人重型再障获得良好效果，脐血造血细胞已长期植入受者体内。
病例和方法
1 患者，男，23岁。因反复齿龈出血1年，面色苍白伴头昏、乏力2月余于1998年6月20日入院。入院时呈重度贫血貌，齿龈出血，胸骨无压痛，肝、脾、淋巴结无肿大。入院后全血细胞减少进行性发展，最低时WBC 1.6×109/L(中性粒细胞占0.45)，RBC 1.23×1012/L，Hb 47g/L，BPC 16×109/L，Ret 0.006；骨髓增生重度减低，三系造血细胞明显减少，骨髓小粒中非造血细胞和脂肪细胞增多。临床无溶血表现，多次Ham试验、糖水试验及蛇毒因子溶血试验均阴性。住院期间先后采用抗淋巴细胞球蛋白(ALG)(法国Paster Merieux公司产品)10mg.kg-1.d-1静脉输注，第1～5天；甲泼尼龙 10mg.kg-1.d-1，第1～5天，以后逐渐减量至第30天停药；第31天开始用环孢菌素A(CsA) 2mg.kg-1.d-1，先静脉给药，后改口服至2个月，合并使用了康力隆、生白能(粒-巨噬细胞集落刺激因子，GM-CSF)和红细胞生成素(Epo)。患者对以上治疗的反应差，无法脱离红细胞和血小板成分输注，治疗后WBC 2.6×109/L，Hb 48g/L，BPC 22×109/L。因免疫抑制治疗效果不好，遂考虑造血干细胞移植。患者之惟一胞兄HLA配型不相合，后在广州市脐血库找到1份A、B、DRB1 6个位点全相合之无关脐血，其HLA表型为A：11，- ；B：75(15)，Bw46；DRB1：1202，15。供、受体ABO血型不合(脐血AB型，受者B型)。
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2 脐血的采集与处理 足月顺产之新生儿脐血，CPO-A抗凝，孕妇无内、产科并发症，病原体检查为阴性，用封闭收集法采集脐血。用羟乙基淀粉沉淀法弃去红细胞和部分血浆。二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻剂。DMSO终浓度为体积分数10%，程序降温法降至-80℃置液氮保存。复温后脐血量72.25ml；锥虫蓝(台盼蓝)拒染法测定细胞活率为99%；流式细胞术测定CD34阳性细胞占0.009；单个核细胞(MNC)数为1.12×109/L； 脐血祖细胞体外培养：粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)数为1.8×104/kg；输入MNC数为1.89×107/kg；输入CD34阳性细胞数为1.69×105/kg；细胞回收率79%。
3 移植方法
3.1 预处理： 联合采用环磷酰胺(CTX)和ALG，ALG 40 mg.kg-1.d-1，连续3d；继以CTX 20 mg.kg-1.d-1，连续3d。
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3.2 移植途径：最后一次给予CTX后36h立即静脉输注全份复温脐血，15min输完。
3.3 预防GVHD： CsA 4 mg.kg-1.d-1，第1～5天，以后根据CsA血药浓度调整用量。甲氨蝶呤(MTX) 15 mg/m2,第1天；12mg/m2，第3，6，11天。第2，4，7，12天使用甲酰四氢叶酸钙解毒。
4 支持疗法
4.1 预防感染：人丙种球蛋白5g/d，连续2周，莫敌、泛捷复、氨曲南、氧哌嗪青霉素、丁胺卡那霉素等交替、联合使用。移植前第9天～移植后第33天行全环境保护。
4.2 细胞生长因子：GM-CSF 300μg/d皮下注射，移植后第1～16天，此时中性粒细胞绝对值(ANC)>2.0×109/L；Epo 4000U 每周3次皮下注射，用至Hb 120 g/L。
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4.3 红细胞、血小板输注： 共输注浓缩红细胞200 ml×2次，血小板15U×2次，两种血制品输注前均经3000cGy γ射线照射，且每次输注均使用白细胞滤过器。
5 DNA指纹法验证移植后脐血细胞植入：选取微卫星DNA CSF1PO位点，采用降落PCR(TDPCR)扩增，80g/L聚丙烯酰胺凝胶电泳，然后置凝胶成像分析系统分析[4]。
结果
1 观察1年血常规变化，结果见表1。
表1 移植后患者外周血血常规变化 移植后时间
WBC
(×109/L)
Hb
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(g/L)
BPC
(×109/L)
1天
0.6
51
30
15天
2.6
73
31
1个月
3.7
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89
62
3个月
4.0
123
131
6个月
4.1
119
125
9个月
3.9
143
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161
12个月
4.4
135
147
2 骨髓象 移植前三系血细胞增生重度减低，移植后追踪观察1年，骨髓象示三系造血活跃，未见特殊异常现象。
3 移植后8个月CsA减量至停药，逐渐出现左侧颈肩部、右腰部等处皮肤局部片状红色斑丘疹，痒感，皮肤活检见灶性淋巴细胞浸润。未对以上皮肤病变作特殊处理。至移植后12个月未见病变明显加重，患者亦无消化道症状，肝功能正常。
4 DNA指纹图分析 结果见图1。
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微卫星位点：CSF1PO
M：marker；1：脐血；2：受者移植前；3：移植后3个月；
4：移植后 9个月；5：移植后12个月；6：移植后17个月
图1 DNA指纹图分析结果
5 红细胞血型供者为AB型，受者为B型，从移植至移植后1年，受者红细胞血型无改变，多次检测均为B型。
讨论
1 造血干细胞移植是迄今治疗重型再障的主要有效手段之一。脐血作为一种造血干细胞来源具有许多优点，它采集方便、来源广、对供者无害；脐血造血细胞与骨髓来源的细胞相比更为早期，其长期重建造血和移植后免疫功能的能力较强；脐血免疫细胞较不成熟，移植排斥和GVHD发生率低、程度较轻。脐血作为造血组织供源进行移植已广泛地用于治疗各种血液系统疾病[3，5，6]。脐血移植目前主要用于小儿血液病，用于成人则相对细胞数目不足，迄今成功的报道尚不多。Gluckman等[7]认为MNC达到3.7×107/kg时，中性粒细胞恢复率达94%，而1.0×107/kg7/kg时，中性粒细胞恢复率则不高于76%。Gluckman等[8]认为从欧洲的结果来看，只要细胞数达到一定量，一份脐血能满足一个成人移植的需要。Kai[9]亦认为选择具有足够数量细胞的脐血对成人移植具有良好的前景。我们此例MNC为1.89×107/kg，移植获得了长期成功。
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2 脐血移植供、受者HLA位点相合程序相对要求不那么严格，不完全相合者GVHD发生率及程度均较骨髓移植为低，但有学者认为HLA位点不合影响移植成功率[10]。本例为6个位点全相合，在某种程度上保证了移植的成功。
3 我们的预处理方案较弱，通常骨髓移植治疗重型再障预处理方案中CTX的用量达200 mg/kg[10]，我们的用量仅及此三分之一，目的是不想过分清除骨髓，以减少移植风险。我们主要依靠强力的免疫抑制剂ALG加CTX。移植后形成了一稳定的混合嵌合体持续至今，有可能供、受体细胞之间产生了一定程度的相互免疫耐受，共存于同一个体中。我们认为：造血干细胞移植治疗重型再障，CTX不必像国外报道的那样用足200 mg/kg，这样的剂量患者承受的风险太大，一旦移植失败，患者有生命危险。
4 此例GVHD出现较晚(移植后8个月)，且程度较轻，按照临床病理分类属局限性cGVHD[11]，持续约3个月，未作特殊处理，丘疹性红斑无明显发展，最近尚逐渐减轻。患者从未有过胃肠型GVHD的表现，肝功能始终正常。由此看来，脐血移植GVHD确实程度较轻。
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5 Brady等[12]报道了9例重症联合免疫缺陷病经ABO血型不相合的骨髓移植治疗获得成功后观察6～84个月，有8例仍然保持受者ABO血型不变，仅有1例移植后48个月转为供者血型。其预处理方案包括CTX和ATG，认为预处理方案较轻和去T细胞移植可能与上述现象有关，并认为可能植入的供者干细胞没有向红系分化。Brdicka等[13]亦报道了6例ABO血型不相合的异基因骨髓移植中的类似现象，DNA分析显示完全植入，但红细胞仍为受者型。Lindstrom等[14]则记述了更为有趣的1例，供者为O型，患者为A型，成功植入后12个月，发现受者的红细胞与抗A血型试剂有凝集，17个月时的红细胞仍能与抗A单抗结合。该患者在发生慢性GVHD的3～4周前，出现了O抗原的标志，但治疗GVHD后，这些标志即消失，而受者的A抗原则始终存在。我们此例亦出现了类似情况，供者干细胞的长期植入是肯定的，但ABO血型仍为受者型，这种现象与其它许多需要弄清的与移植有关的问题一样，有待探索和解决。
, http://www.100md.com 本例患者在脐血移植前后，共计使用了10个月的CsA。因此该例重型再障的治愈不能排除CsA与脐血移植的协同作用。
参 考 文 献
1，Gluckman E, Broxmeyer HE,Auerbach AD, et al. Hematopoietic reconstitution in a patient with Fanconi’s anemia by means of umbilical cord blood from a HLA-identical sibling . N Engl J Med, 1989,321:1174-1178.
2，Jones CA, Warner JO. Umbilical cord blood transplantation . Arch Dis Child,1999,81:282.
3，Will AM. Umbilical cord blood transplantation. Arch Dis Child, 1999,80:3-6.
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4，Hammond HA, Jin L, Zhong Y, et al. Evaluation of 13 short taudem repeat loci for use in personal identification applications. Am J Hum Genet, 1994,55:175-189.
5，Sirchia G,Rebulla P. Placental/umbilical cord blood transplantation. Haematologica, 1999, 84:738-747.
6，Kai S, Hara H. Development in cord blood transplantation. Nippon Naika Gakkai Zasshi, 1998,87:1516-1521.
7，Gluckman E. European results of unrelated cord blood transplants. Bone Marrow Transplant ,1998,21 Suppl 3:587-591.
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8，Gluckman E . Use of hematopoietic stem cells from cord blood for allogenic transplantation in man. Bull Acad Natl Med,1998,182:337-348.
9，Kai S. Cord blood transplantation for adults. Rinsho Byori, 1999, 110 Suppl:48-53.
10，Doney K, Leisenring W, Storb R, et al. Primary treatment of acquired aplastic anemia: outcomes with bone marrow transplantation and immunosuppressive therapy. Seattle Bone Marrow Transplant Team. Ann Intern Med, 1997,126:107-115.
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11，Atkinson K. Consensus among bone marrow transplanter for diagnosis,grading and treatment of chronic graft-versus-host disease. Bone Marrow Tramsplant, 1989,4:247-251.
12，Brady KA, Cowan MJ,Leavitt AD. Circulating red cells usually remain of host origin after bone marrow transplantation for severe combined immunodeficiency. Transfusion, 1996,36:314-317.
13，Brdicka R, Sieglova Z, Pisacka L. Molecular follow-up of patients after bone marrow transplantation. Stem Cells,1993,11 Suppl 1:42-45.
14，Lindstrom K, Shanwell A, Jacobsson A. Alterations of glycosphingolipid-based blood group antigen expression on erythrocytes and in plasma studied on consecutive samples after blood group O to A bone marrow transplantation. Glycobiology, 1992,2:529-534.
(收稿日期：2000-02-16), http://www.100md.com
单位：毛平 朱志刚 王汉平 王顺清 莫文健 应逸 李庆山(510180 广州市第一人民医院)；廖灿 刘斌(广州市脐血库)
关键词：胎血；移植；贫血，再生障碍性
中华血液学杂志001008
【摘要】 目的 研究无关供者脐血造血干细胞移植(unrelated allo-CBSCT)治疗成人重型再生障碍性贫血(再障)。方法 用HLA配型6个位点全相合无关供者allo-CBSCT治疗1例成人重型再障患者。脐血由广州市脐血库提供，输入的单个核细胞(MNC)数为1.89×107/kg(按患者体重60kg计)，CD34阳性细胞占0.009，CFU-GM为1.8×104/kg。预处理方案由环磷酰胺(CTX)和抗淋巴细胞球蛋白(ALG)组成，CTX总用量为60mg/kg；ALG按120mg/kg给予。用甲氨蝶呤(MTX)和环孢菌素A(CsA)预防移植物抗宿主病(GVHD)，CsA用至8个月逐渐减量停药。结果 输入脐血后白细胞最低值为0.6×109/L，血小板最低值为12.0×109/L，中性粒细胞于移植后第10天大于0.5×109/L，血小板于移植后第20天大于50.0×109/L。移植后8个月时出现皮肤局限性GVHD。微卫星法DNA指纹图示稳定的供、受体混合嵌合状态，但迄今ABO血型仍为受者型。结论 此例为国内首例采用allo-CBSCT治疗成人重型再障，并获得成功，脐血造血干细胞已长期植入。
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Umbilical cord blood stem cells transplantation from an unrelated donor into an adult with severe aplastic anemia
MAO Ping LIAO Can ZHU Zhigang
(First Municipal Peoples Hospital of Guangzhou, Guangzhou 510180, China)
【Abstract】 Objective To evaluate the availability of the treatment of adult severe aplastic anemia with unrelated allo-cord blood stem cell transplantation(CBSCT). Methods HLA-matched unrelated cord blood transplantation has been successfully performed for an adult severe aplastic anemia patient. A unit of cord blood provided by Guangzhou Cord Blood Bank containing 1.89×107/kg mononucleated cells, 1.8×104/kg CFU-GM and of CD34 positive cells was 0.009. The patient was conditioned with CTX(60mg/kg) and anti-lymphocyte globulin(ALG,120mg/kg). GVHD prophylaxis consisted of both MTX and CsA. The CsA had been given for 8 months. Results The lowest ANC was 0.6×109/L post-transplantation. The patient achieved an ANC of greater than 0.5×109/L at 10 days, and the platelet of greater than 50.0×109/L at day 20 after transplantation. He developed Grade 1 GVHD in the tenth month after grafting. Microsatellite DNA fingerprinting indicated a stable donor-recipient mixed chimerism,whilst the circulating red cells remained host origin. Conclusion It is the first report in China on successful treatment of adult severe aplastic anemia by unrelated allo-CBSCT.
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【Key words】 Fetal blood； Transplantation； Anemia, aplastic
自1988年Gluckman等[1]首创脐血移植，成功治疗1例Fanconi贫血以来，脐血移植发展很快，迄今已有数百名患者，包括各类白血病、再生障碍性贫血(再障)、重型地中海贫血以及先天性免疫缺陷症等接受了脐血移植[2,3]。脐血作为移植物具有很大的应用前景，具有采集方便、来源广、对供者无害、排斥反应和移植物抗宿主病(GVHD)发生率低且程度较轻、移植后免疫功能的恢复及长期造血重建能力较高等优点。我们于1998年12月用6个位点相合的无关供者脐血造血干细胞移植治疗1例成人重型再障获得良好效果，脐血造血细胞已长期植入受者体内。
病例和方法
1 患者，男，23岁。因反复齿龈出血1年，面色苍白伴头昏、乏力2月余于1998年6月20日入院。入院时呈重度贫血貌，齿龈出血，胸骨无压痛，肝、脾、淋巴结无肿大。入院后全血细胞减少进行性发展，最低时WBC 1.6×109/L(中性粒细胞占0.45)，RBC 1.23×1012/L，Hb 47g/L，BPC 16×109/L，Ret 0.006；骨髓增生重度减低，三系造血细胞明显减少，骨髓小粒中非造血细胞和脂肪细胞增多。临床无溶血表现，多次Ham试验、糖水试验及蛇毒因子溶血试验均阴性。住院期间先后采用抗淋巴细胞球蛋白(ALG)(法国Paster Merieux公司产品)10mg.kg-1.d-1静脉输注，第1～5天；甲泼尼龙 10mg.kg-1.d-1，第1～5天，以后逐渐减量至第30天停药；第31天开始用环孢菌素A(CsA) 2mg.kg-1.d-1，先静脉给药，后改口服至2个月，合并使用了康力隆、生白能(粒-巨噬细胞集落刺激因子，GM-CSF)和红细胞生成素(Epo)。患者对以上治疗的反应差，无法脱离红细胞和血小板成分输注，治疗后WBC 2.6×109/L，Hb 48g/L，BPC 22×109/L。因免疫抑制治疗效果不好，遂考虑造血干细胞移植。患者之惟一胞兄HLA配型不相合，后在广州市脐血库找到1份A、B、DRB1 6个位点全相合之无关脐血，其HLA表型为A：11，- ；B：75(15)，Bw46；DRB1：1202，15。供、受体ABO血型不合(脐血AB型，受者B型)。
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2 脐血的采集与处理 足月顺产之新生儿脐血，CPO-A抗凝，孕妇无内、产科并发症，病原体检查为阴性，用封闭收集法采集脐血。用羟乙基淀粉沉淀法弃去红细胞和部分血浆。二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻剂。DMSO终浓度为体积分数10%，程序降温法降至-80℃置液氮保存。复温后脐血量72.25ml；锥虫蓝(台盼蓝)拒染法测定细胞活率为99%；流式细胞术测定CD34阳性细胞占0.009；单个核细胞(MNC)数为1.12×109/L； 脐血祖细胞体外培养：粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)数为1.8×104/kg；输入MNC数为1.89×107/kg；输入CD34阳性细胞数为1.69×105/kg；细胞回收率79%。
3 移植方法
3.1 预处理： 联合采用环磷酰胺(CTX)和ALG，ALG 40 mg.kg-1.d-1，连续3d；继以CTX 20 mg.kg-1.d-1，连续3d。
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3.2 移植途径：最后一次给予CTX后36h立即静脉输注全份复温脐血，15min输完。
3.3 预防GVHD： CsA 4 mg.kg-1.d-1，第1～5天，以后根据CsA血药浓度调整用量。甲氨蝶呤(MTX) 15 mg/m2,第1天；12mg/m2，第3，6，11天。第2，4，7，12天使用甲酰四氢叶酸钙解毒。
4 支持疗法
4.1 预防感染：人丙种球蛋白5g/d，连续2周，莫敌、泛捷复、氨曲南、氧哌嗪青霉素、丁胺卡那霉素等交替、联合使用。移植前第9天～移植后第33天行全环境保护。
4.2 细胞生长因子：GM-CSF 300μg/d皮下注射，移植后第1～16天，此时中性粒细胞绝对值(ANC)>2.0×109/L；Epo 4000U 每周3次皮下注射，用至Hb 120 g/L。
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4.3 红细胞、血小板输注： 共输注浓缩红细胞200 ml×2次，血小板15U×2次，两种血制品输注前均经3000cGy γ射线照射，且每次输注均使用白细胞滤过器。
5 DNA指纹法验证移植后脐血细胞植入：选取微卫星DNA CSF1PO位点，采用降落PCR(TDPCR)扩增，80g/L聚丙烯酰胺凝胶电泳，然后置凝胶成像分析系统分析[4]。
结果
1 观察1年血常规变化，结果见表1。
表1 移植后患者外周血血常规变化 移植后时间
WBC
(×109/L)
Hb
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(g/L)
BPC
(×109/L)
1天
0.6
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15天
2.6
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4.1
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9个月
3.9
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161
12个月
4.4
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2 骨髓象 移植前三系血细胞增生重度减低，移植后追踪观察1年，骨髓象示三系造血活跃，未见特殊异常现象。
3 移植后8个月CsA减量至停药，逐渐出现左侧颈肩部、右腰部等处皮肤局部片状红色斑丘疹，痒感，皮肤活检见灶性淋巴细胞浸润。未对以上皮肤病变作特殊处理。至移植后12个月未见病变明显加重，患者亦无消化道症状，肝功能正常。
4 DNA指纹图分析 结果见图1。
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微卫星位点：CSF1PO
M：marker；1：脐血；2：受者移植前；3：移植后3个月；
4：移植后 9个月；5：移植后12个月；6：移植后17个月
图1 DNA指纹图分析结果
5 红细胞血型供者为AB型，受者为B型，从移植至移植后1年，受者红细胞血型无改变，多次检测均为B型。
讨论
1 造血干细胞移植是迄今治疗重型再障的主要有效手段之一。脐血作为一种造血干细胞来源具有许多优点，它采集方便、来源广、对供者无害；脐血造血细胞与骨髓来源的细胞相比更为早期，其长期重建造血和移植后免疫功能的能力较强；脐血免疫细胞较不成熟，移植排斥和GVHD发生率低、程度较轻。脐血作为造血组织供源进行移植已广泛地用于治疗各种血液系统疾病[3，5，6]。脐血移植目前主要用于小儿血液病，用于成人则相对细胞数目不足，迄今成功的报道尚不多。Gluckman等[7]认为MNC达到3.7×107/kg时，中性粒细胞恢复率达94%，而1.0×107/kg
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2 脐血移植供、受者HLA位点相合程序相对要求不那么严格，不完全相合者GVHD发生率及程度均较骨髓移植为低，但有学者认为HLA位点不合影响移植成功率[10]。本例为6个位点全相合，在某种程度上保证了移植的成功。
3 我们的预处理方案较弱，通常骨髓移植治疗重型再障预处理方案中CTX的用量达200 mg/kg[10]，我们的用量仅及此三分之一，目的是不想过分清除骨髓，以减少移植风险。我们主要依靠强力的免疫抑制剂ALG加CTX。移植后形成了一稳定的混合嵌合体持续至今，有可能供、受体细胞之间产生了一定程度的相互免疫耐受，共存于同一个体中。我们认为：造血干细胞移植治疗重型再障，CTX不必像国外报道的那样用足200 mg/kg，这样的剂量患者承受的风险太大，一旦移植失败，患者有生命危险。
4 此例GVHD出现较晚(移植后8个月)，且程度较轻，按照临床病理分类属局限性cGVHD[11]，持续约3个月，未作特殊处理，丘疹性红斑无明显发展，最近尚逐渐减轻。患者从未有过胃肠型GVHD的表现，肝功能始终正常。由此看来，脐血移植GVHD确实程度较轻。
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5 Brady等[12]报道了9例重症联合免疫缺陷病经ABO血型不相合的骨髓移植治疗获得成功后观察6～84个月，有8例仍然保持受者ABO血型不变，仅有1例移植后48个月转为供者血型。其预处理方案包括CTX和ATG，认为预处理方案较轻和去T细胞移植可能与上述现象有关，并认为可能植入的供者干细胞没有向红系分化。Brdicka等[13]亦报道了6例ABO血型不相合的异基因骨髓移植中的类似现象，DNA分析显示完全植入，但红细胞仍为受者型。Lindstrom等[14]则记述了更为有趣的1例，供者为O型，患者为A型，成功植入后12个月，发现受者的红细胞与抗A血型试剂有凝集，17个月时的红细胞仍能与抗A单抗结合。该患者在发生慢性GVHD的3～4周前，出现了O抗原的标志，但治疗GVHD后，这些标志即消失，而受者的A抗原则始终存在。我们此例亦出现了类似情况，供者干细胞的长期植入是肯定的，但ABO血型仍为受者型，这种现象与其它许多需要弄清的与移植有关的问题一样，有待探索和解决。
, http://www.100md.com 本例患者在脐血移植前后，共计使用了10个月的CsA。因此该例重型再障的治愈不能排除CsA与脐血移植的协同作用。
参 考 文 献
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(收稿日期：2000-02-16), http://www.100md.com