胃癌细胞凋亡与胃癌患者临床预后的关系
作者：刘海峰 刘为纹 房殿春 杨仕明 赵晶京 赵丽
单位：第三军医大学附属西南医院消化内科，重庆 400038
关键词：胃肿瘤；细胞凋亡；临床；预后
第三军医大学学报001106
提 要：目的 研究胃癌组织中自发性细胞凋亡的发生情况及其与胃癌临床病理参数和胃癌患者预后的关系。方法 采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术对53例有随访结果的胃癌组织中的凋亡细胞进行原位观察和比较。结果 胃癌组织自发性细胞凋亡指数平均为5.76%。细胞凋亡指数与胃癌患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度无明显关系，与胃癌细胞分化程度、淋巴结转移及临床分期有关，高、中分化腺癌凋亡指数显著高于低分化腺癌(t=3.054，P<0.01)，无淋巴结转移和临床Ⅰ、Ⅱ期胃癌凋亡指数显著高于有淋巴结转移和临床Ⅲ、Ⅳ期胃癌(t=2.160，t=2.322，P<0.05)。高凋亡指数组的胃癌患者生存率优于低凋亡指数组(Logrank时序检验χ2=4.570，P<0.05)。结论 胃癌组织自发性细胞凋亡与胃癌的某些生物学特性有密切的关系，细胞凋亡异常在胃癌发生发展过程中可能起重要作用。细胞凋亡指数可作为一种预测指标用于胃癌的动态观察及预后判断。
, http://www.100md.com
中图法分类号：R329.25;R735.207 文献标识码：A
文章编号：1000-5404(2000)11-1036-03
Relationship between cancerous cell apoptosis and clinical prognosis in patients with gastric carcinoma
LIU Hai-feng,LIU Wei-wen,FANG Dian-chun,YANG Shi-ming,ZHAO Jing-jing,ZHAO Li
(Department of Gastroenterology,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China)
, 百拇医药
Abstract：Objective To study the index of spontaneous apoptosis of cancerous cells and the relationship between the clinicopathological parameters and the prognosis of gastric carcinoma.Methods The apoptotic cells of gastric carcinoma tissues from 53 patients with gastric carcinoma were observed by using terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick and labeling (TUNEL) technique and the results were compared with the patient′s condition obtained from follow up data.Results The average spontaneous apoptotic index of the cancerour tissues was 5.76%.The apoptotic indexes had no obvious correlation with patient′s age,sex,size of tumor and depth of invasion but correlated to tumor cell differentiation,lymph node metastasis and clinical stages of tumor.The apoptotic indexes was higher in the cases of well/moderate- than poorly-differentiated adenocarcinoma (t=3.054,P<0.01),in those without lymph node metastasis than with metastasis,and in those in stage Ⅰ and Ⅱ than stage Ⅲ and Ⅳ (t=2.160,t=2.322,P<0.05).In patients with high apoptotic index,the prognosis was significantly better than those with a low index (χ2=4.570,P<0.05).Conclusion This study indicates that apoptotic index is correlated with tumor cell differentiation,lymph node metastasis and tumor stage.The abnormality of cell apoptosis plays an important role in the incidence and development of gastric carcinoma.Apoptotic index can be regarded as a predictive index in the dynamic observation and prognosis of gastric carcinoma.
, 百拇医药
Key words:gastric neoplasm;apoptosis;clinic;prognosis
已有研究表明，肿瘤的发生发展不仅与肿瘤细胞的增殖而且与其凋亡有密切关系，细胞凋亡是恶性肿瘤普遍的自发现象[1]。为了解临床胃癌标本中细胞凋亡的发生情况，探讨胃癌细胞凋亡与胃癌生物学特性及预后之间的关系，我们采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术对53例有随访结果的胃癌组织中的凋亡细胞进行原位观察和比较。
1 材料和方法
1.1 材料 53例胃癌组织均为我院1994～1996年外科手术切除标本，并经病理诊断证实。53例胃癌均为胃远端癌，所有病例在手术前均未接受化疗、放疗或免疫治疗。胃癌组织标本经100 ml/L福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片。
1.2 方法
, 百拇医药
1.2.1TUNEL染色 细胞凋亡原位检测试剂盒(In situ cell death detection kit，POD)为德国Boehringer Mannheim公司产品，染色步骤：①切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化；②3ml/L H2O2封闭30 min；③20 mg/L蛋白酶K消化液作用20 min；④TUNEL反应液，37 ℃孵育60 min；⑤过氧化物酶连接的抗荧光素抗体，37 ℃ 孵育30 min；②～⑤步后均以10 mmol/L PBS(pH 7.4)振洗3次，每次5 min；⑥DAB显色，苏木素复染，脱水透明，封片。以PBS替代TUNEL反应液作阴性对照，阳性对照切片经DNaseⅠ预处理10 min，再接TUNEL染色步骤。
1.2.2 结果判定 光镜下观察TUNEL染色切片的显色反应，数5个以上高倍视野，不少于1 000个细胞，记数阳性细胞数并以百分数表示，作为胃癌细胞凋亡指数，所得数据资料以
±s表示。
, 百拇医药
1.2.3 胃癌病人的随访 对本组53例胃癌患者均进行随访，随访时间为18～59月，平均39月。随访次数最少1次，最多5次。随访的主要目的是了解胃癌患者的生存期。
1.3 统计学处理
记数资料用t检验进行统计学分析，随访资料采用Kaplan-Meier生存曲线法处理并进行Logrank检验。
2 结果
2.1 胃癌组织中自发性细胞凋亡与胃癌临床病理参数的关系
TUNEL染色阳性物质呈棕黄色，位于细胞核内，浓缩的核质紧贴于核膜，或核质呈现均匀的染色。TUNEL染色阳性细胞在所有的胃癌组织中均可见到。53例胃癌组织中的平均细胞凋亡指数为5.76%。经统计学分析，胃癌细胞凋亡指数与胃癌患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度无明显关系；与胃癌细胞分化程度、淋巴结转移及临床病例分期有关。高、中分化腺癌细胞凋亡指数为8.33%，显著高于低分化腺癌(4.08%，P<0.01)；无淋巴结转移胃癌细胞凋亡指数为6.66%，显著高于有淋巴结转移者(4.03%，P<0.05)；临床Ⅰ、Ⅱ期胃癌细胞凋亡指数为6.73%，显著高于临床Ⅲ、Ⅳ胃癌(4.20%，P<0.05)，见表1。
, 百拇医药
表1 细胞凋亡与胃癌临床病理参数的关系
Tab 1 Correlation between apoptosis and clinico-pathological
parameters of gastric carcinomas Parameters
n
Apoptotic index(%)
Age(years)
≤59
36
5.15±4.83
≥60
, http://www.100md.com
17
7.09±5.11
Sex
Male
37
5.97±4.95
Female
16
5.33±5.10
Grade of differentiation
Well/moderate
18
, http://www.100md.com
8.33±5.74*
Poor
26
4.08±2.67
Mucoid
9
5.56±4.58
Tumor size
<5 cm
33
5.93±4.05
≥5 cm
, 百拇医药
20
6.39±5.48
Lymph-node metastasis
Negative
23
6.66±5.07* *
Positive
30
4.03±3.31
Serosal invasion
Absent
, http://www.100md.com 25
5.96±4.31
Present
28
5.92±5.77
Clinical stages
Ⅰ and Ⅱ
32
6.73±4.90#
Ⅲ and Ⅳ
21
4.20±3.03
, 百拇医药
*：P<0.01 vs poorly differentiated gastric carcinoma;
* *：P<0.05 vs positive Lymph-node metastasis group;
#：P<0.05 vs stage Ⅲ and Ⅳ gastric carcinoma
2.2 胃癌细胞凋亡与胃癌患者生存率的关系 以胃癌组织平均细胞凋亡指数5.76%为界，将53例胃癌患者分为两组，即高凋亡指数组(>5.76%，25例)及低凋亡指数组(<5.76%，28例)。Kaplan-Meier生存曲线显示，高凋亡指数组的病例生存率优于低凋亡指数组，Logrank时序检验χ2=4.570，P<0.05。
3 讨论
, 百拇医药 肿瘤组织中自发性细胞凋亡的临床意义目前尚不清楚。Staunton等[2]应用形态学标准，检测了209例不同肿瘤中的细胞凋亡指数，发现不同类型的肿瘤有不同的凋亡指数，而且与肿瘤的分化、分级、发展和肿瘤的生物学行为有关，虽然未作精确的定量研究，但组织学的研究显示，分化良好、生长缓慢、预后较好的肿瘤组织中的凋亡细胞较多。但也有相反的研究结果，Hino等[3]及Saegusa等[4]应用TUNEL技术分别检测了肝癌、胃癌中的细胞凋亡指数，发现低分化癌及进展期癌细胞凋亡指数显著高于高分化癌和早期癌。在解释这一现象时，Hino认为，低分化肝癌及进展期肝癌增殖快、恶性程度高，为维持肿瘤细胞增殖和死亡的相对平衡，细胞凋亡势必会增加。出现这种相互矛盾的研究结果的原因，可能与研究者选择病例数的多少及判断标准的差异有关，有关这方面的问题还有待进一步研究证实。本研究发现，胃癌细胞凋亡指数与胃癌细胞分化程度、淋巴结转移及临床分期有关。高、中分化腺癌细胞凋亡指数显著高于低分化腺癌，可能是高、中分化腺癌生长较低分化腺癌缓慢的原因之一；无淋巴结转移和临床Ⅰ、Ⅱ期胃癌细胞凋亡指数显著高于有淋巴结转移和临床Ⅲ、Ⅳ期胃癌，提示低分化腺癌及进展期胃癌可能具有逃避细胞凋亡的机制，细胞凋亡受抑制可能在胃癌淋巴结转移过程中发挥重要作用。
, 百拇医药
已有研究报道，胃癌的预后与肿瘤自身的增殖活性密切相关[5，6]。本研究发现，胃癌的预后不仅与肿瘤自身的增殖活性有关，还与肿瘤自身的凋亡活性有关，具有较高细胞凋亡指数的胃癌患者预后较好。胃癌组织自发性细胞凋亡与胃癌细胞增殖、胃癌细胞转移及胃癌预后关系密切，检测胃癌组织中的细胞凋亡指数可作为一种预测指标用于胃癌的动态观察及预后判断。因此，今后临床评估胃癌的预后应全面考察肿瘤细胞增殖和细胞凋亡两个方面，这对提高对胃癌患者预后的判断水平及更好的指导胃癌患者的术后治疗具有重要意义。
胃癌组织中自发性细胞凋亡与胃癌的某些生物学特性及预后有密切的关系，提示细胞凋亡异常在胃癌发生发展中可能起重要作用。因此，深入研究细胞凋亡在胃癌发生发展过程中的作用及其调控机制将有助于揭示胃癌的发生机制，并将为胃癌的防治研究提供新的思路。
基金项目：全军“九五”医药卫生重点课题资助项目(96Z047)及重庆市应用基础研究基金资助项目
, 百拇医药
作者简介：刘海峰(1965-)，男，河北省景县人，博士，副主任医师，副教授，主要从事胃癌及胃癌前病变的基础与临床研究，发表论文41篇。
参考文献：
[1]kerr J F R,Winterford C M,Harmon B N.Apoptosis:Its significance in cancer and cancer therapy[J].Cancer,1994，73(8):2013-2026.
[2]Staunton M J,Gaffney E F.Tumor type is a determinant of susceptibility to apoptosis[J].Am J Clin Pathol,1995，103(3):300-307.
[3]Hino N,Higashi T,Nouso K,et al.Apoptosis and proliferation of human hepatocellular carcinoma[J].Liver,1996，16(2):123-129.
, 百拇医药
[4]Saegusa M,Takano Y,Wakabayashi T,et al.Apoptosis in gastric carcinoma and its association with cell proliferation and differentiation[J].Jpn J Cancer Res,1995，86(8):743-748.
[5]Mori M,Kakeji Y,Adachi Y,et al.The prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen in clinical gastric cancer[J].Surgery,1993，113(6):683-690.
[6]Maeda K,Chung Y S,Onoda N,et al.Proliferating cell nuclear antigen labeling index of preoerative biopsy specimens in gastric carcinoma with special reference to prognosis[J].Cancer,1994，73(3):528-533.
收稿日期：2000-03-30
修回日期：2000-07-18, http://www.100md.com
单位：第三军医大学附属西南医院消化内科，重庆 400038
关键词：胃肿瘤；细胞凋亡；临床；预后
第三军医大学学报001106
提 要：目的 研究胃癌组织中自发性细胞凋亡的发生情况及其与胃癌临床病理参数和胃癌患者预后的关系。方法 采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术对53例有随访结果的胃癌组织中的凋亡细胞进行原位观察和比较。结果 胃癌组织自发性细胞凋亡指数平均为5.76%。细胞凋亡指数与胃癌患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度无明显关系，与胃癌细胞分化程度、淋巴结转移及临床分期有关，高、中分化腺癌凋亡指数显著高于低分化腺癌(t=3.054，P<0.01)，无淋巴结转移和临床Ⅰ、Ⅱ期胃癌凋亡指数显著高于有淋巴结转移和临床Ⅲ、Ⅳ期胃癌(t=2.160，t=2.322，P<0.05)。高凋亡指数组的胃癌患者生存率优于低凋亡指数组(Logrank时序检验χ2=4.570，P<0.05)。结论 胃癌组织自发性细胞凋亡与胃癌的某些生物学特性有密切的关系，细胞凋亡异常在胃癌发生发展过程中可能起重要作用。细胞凋亡指数可作为一种预测指标用于胃癌的动态观察及预后判断。
, http://www.100md.com
中图法分类号：R329.25;R735.207 文献标识码：A
文章编号：1000-5404(2000)11-1036-03
Relationship between cancerous cell apoptosis and clinical prognosis in patients with gastric carcinoma
LIU Hai-feng,LIU Wei-wen,FANG Dian-chun,YANG Shi-ming,ZHAO Jing-jing,ZHAO Li
(Department of Gastroenterology,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China)
, 百拇医药
Abstract：Objective To study the index of spontaneous apoptosis of cancerous cells and the relationship between the clinicopathological parameters and the prognosis of gastric carcinoma.Methods The apoptotic cells of gastric carcinoma tissues from 53 patients with gastric carcinoma were observed by using terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick and labeling (TUNEL) technique and the results were compared with the patient′s condition obtained from follow up data.Results The average spontaneous apoptotic index of the cancerour tissues was 5.76%.The apoptotic indexes had no obvious correlation with patient′s age,sex,size of tumor and depth of invasion but correlated to tumor cell differentiation,lymph node metastasis and clinical stages of tumor.The apoptotic indexes was higher in the cases of well/moderate- than poorly-differentiated adenocarcinoma (t=3.054,P<0.01),in those without lymph node metastasis than with metastasis,and in those in stage Ⅰ and Ⅱ than stage Ⅲ and Ⅳ (t=2.160,t=2.322,P<0.05).In patients with high apoptotic index,the prognosis was significantly better than those with a low index (χ2=4.570,P<0.05).Conclusion This study indicates that apoptotic index is correlated with tumor cell differentiation,lymph node metastasis and tumor stage.The abnormality of cell apoptosis plays an important role in the incidence and development of gastric carcinoma.Apoptotic index can be regarded as a predictive index in the dynamic observation and prognosis of gastric carcinoma.
, 百拇医药
Key words:gastric neoplasm;apoptosis;clinic;prognosis
已有研究表明，肿瘤的发生发展不仅与肿瘤细胞的增殖而且与其凋亡有密切关系，细胞凋亡是恶性肿瘤普遍的自发现象[1]。为了解临床胃癌标本中细胞凋亡的发生情况，探讨胃癌细胞凋亡与胃癌生物学特性及预后之间的关系，我们采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术对53例有随访结果的胃癌组织中的凋亡细胞进行原位观察和比较。
1 材料和方法
1.1 材料 53例胃癌组织均为我院1994～1996年外科手术切除标本，并经病理诊断证实。53例胃癌均为胃远端癌，所有病例在手术前均未接受化疗、放疗或免疫治疗。胃癌组织标本经100 ml/L福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片。
1.2 方法
, 百拇医药
1.2.1TUNEL染色 细胞凋亡原位检测试剂盒(In situ cell death detection kit，POD)为德国Boehringer Mannheim公司产品，染色步骤：①切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化；②3ml/L H2O2封闭30 min；③20 mg/L蛋白酶K消化液作用20 min；④TUNEL反应液，37 ℃孵育60 min；⑤过氧化物酶连接的抗荧光素抗体，37 ℃ 孵育30 min；②～⑤步后均以10 mmol/L PBS(pH 7.4)振洗3次，每次5 min；⑥DAB显色，苏木素复染，脱水透明，封片。以PBS替代TUNEL反应液作阴性对照，阳性对照切片经DNaseⅠ预处理10 min，再接TUNEL染色步骤。
1.2.2 结果判定 光镜下观察TUNEL染色切片的显色反应，数5个以上高倍视野，不少于1 000个细胞，记数阳性细胞数并以百分数表示，作为胃癌细胞凋亡指数，所得数据资料以
±s表示。, 百拇医药
1.2.3 胃癌病人的随访 对本组53例胃癌患者均进行随访，随访时间为18～59月，平均39月。随访次数最少1次，最多5次。随访的主要目的是了解胃癌患者的生存期。
1.3 统计学处理
记数资料用t检验进行统计学分析，随访资料采用Kaplan-Meier生存曲线法处理并进行Logrank检验。
2 结果
2.1 胃癌组织中自发性细胞凋亡与胃癌临床病理参数的关系
TUNEL染色阳性物质呈棕黄色，位于细胞核内，浓缩的核质紧贴于核膜，或核质呈现均匀的染色。TUNEL染色阳性细胞在所有的胃癌组织中均可见到。53例胃癌组织中的平均细胞凋亡指数为5.76%。经统计学分析，胃癌细胞凋亡指数与胃癌患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度无明显关系；与胃癌细胞分化程度、淋巴结转移及临床病例分期有关。高、中分化腺癌细胞凋亡指数为8.33%，显著高于低分化腺癌(4.08%，P<0.01)；无淋巴结转移胃癌细胞凋亡指数为6.66%，显著高于有淋巴结转移者(4.03%，P<0.05)；临床Ⅰ、Ⅱ期胃癌细胞凋亡指数为6.73%，显著高于临床Ⅲ、Ⅳ胃癌(4.20%，P<0.05)，见表1。
, 百拇医药
表1 细胞凋亡与胃癌临床病理参数的关系
Tab 1 Correlation between apoptosis and clinico-pathological
parameters of gastric carcinomas Parameters
n
Apoptotic index(%)
Age(years)
≤59
36
5.15±4.83
≥60
, http://www.100md.com
17
7.09±5.11
Sex
Male
37
5.97±4.95
Female
16
5.33±5.10
Grade of differentiation
Well/moderate
18
, http://www.100md.com
8.33±5.74*
Poor
26
4.08±2.67
Mucoid
9
5.56±4.58
Tumor size
<5 cm
33
5.93±4.05
≥5 cm
, 百拇医药
20
6.39±5.48
Lymph-node metastasis
Negative
23
6.66±5.07* *
Positive
30
4.03±3.31
Serosal invasion
Absent
, http://www.100md.com 25
5.96±4.31
Present
28
5.92±5.77
Clinical stages
Ⅰ and Ⅱ
32
6.73±4.90#
Ⅲ and Ⅳ
21
4.20±3.03
, 百拇医药
*：P<0.01 vs poorly differentiated gastric carcinoma;
* *：P<0.05 vs positive Lymph-node metastasis group;
#：P<0.05 vs stage Ⅲ and Ⅳ gastric carcinoma
2.2 胃癌细胞凋亡与胃癌患者生存率的关系 以胃癌组织平均细胞凋亡指数5.76%为界，将53例胃癌患者分为两组，即高凋亡指数组(>5.76%，25例)及低凋亡指数组(<5.76%，28例)。Kaplan-Meier生存曲线显示，高凋亡指数组的病例生存率优于低凋亡指数组，Logrank时序检验χ2=4.570，P<0.05。
3 讨论
, 百拇医药 肿瘤组织中自发性细胞凋亡的临床意义目前尚不清楚。Staunton等[2]应用形态学标准，检测了209例不同肿瘤中的细胞凋亡指数，发现不同类型的肿瘤有不同的凋亡指数，而且与肿瘤的分化、分级、发展和肿瘤的生物学行为有关，虽然未作精确的定量研究，但组织学的研究显示，分化良好、生长缓慢、预后较好的肿瘤组织中的凋亡细胞较多。但也有相反的研究结果，Hino等[3]及Saegusa等[4]应用TUNEL技术分别检测了肝癌、胃癌中的细胞凋亡指数，发现低分化癌及进展期癌细胞凋亡指数显著高于高分化癌和早期癌。在解释这一现象时，Hino认为，低分化肝癌及进展期肝癌增殖快、恶性程度高，为维持肿瘤细胞增殖和死亡的相对平衡，细胞凋亡势必会增加。出现这种相互矛盾的研究结果的原因，可能与研究者选择病例数的多少及判断标准的差异有关，有关这方面的问题还有待进一步研究证实。本研究发现，胃癌细胞凋亡指数与胃癌细胞分化程度、淋巴结转移及临床分期有关。高、中分化腺癌细胞凋亡指数显著高于低分化腺癌，可能是高、中分化腺癌生长较低分化腺癌缓慢的原因之一；无淋巴结转移和临床Ⅰ、Ⅱ期胃癌细胞凋亡指数显著高于有淋巴结转移和临床Ⅲ、Ⅳ期胃癌，提示低分化腺癌及进展期胃癌可能具有逃避细胞凋亡的机制，细胞凋亡受抑制可能在胃癌淋巴结转移过程中发挥重要作用。
, 百拇医药
已有研究报道，胃癌的预后与肿瘤自身的增殖活性密切相关[5，6]。本研究发现，胃癌的预后不仅与肿瘤自身的增殖活性有关，还与肿瘤自身的凋亡活性有关，具有较高细胞凋亡指数的胃癌患者预后较好。胃癌组织自发性细胞凋亡与胃癌细胞增殖、胃癌细胞转移及胃癌预后关系密切，检测胃癌组织中的细胞凋亡指数可作为一种预测指标用于胃癌的动态观察及预后判断。因此，今后临床评估胃癌的预后应全面考察肿瘤细胞增殖和细胞凋亡两个方面，这对提高对胃癌患者预后的判断水平及更好的指导胃癌患者的术后治疗具有重要意义。
胃癌组织中自发性细胞凋亡与胃癌的某些生物学特性及预后有密切的关系，提示细胞凋亡异常在胃癌发生发展中可能起重要作用。因此，深入研究细胞凋亡在胃癌发生发展过程中的作用及其调控机制将有助于揭示胃癌的发生机制，并将为胃癌的防治研究提供新的思路。
基金项目：全军“九五”医药卫生重点课题资助项目(96Z047)及重庆市应用基础研究基金资助项目
, 百拇医药
作者简介：刘海峰(1965-)，男，河北省景县人，博士，副主任医师，副教授，主要从事胃癌及胃癌前病变的基础与临床研究，发表论文41篇。
参考文献：
[1]kerr J F R,Winterford C M,Harmon B N.Apoptosis:Its significance in cancer and cancer therapy[J].Cancer,1994，73(8):2013-2026.
[2]Staunton M J,Gaffney E F.Tumor type is a determinant of susceptibility to apoptosis[J].Am J Clin Pathol,1995，103(3):300-307.
[3]Hino N,Higashi T,Nouso K,et al.Apoptosis and proliferation of human hepatocellular carcinoma[J].Liver,1996，16(2):123-129.
, 百拇医药
[4]Saegusa M,Takano Y,Wakabayashi T,et al.Apoptosis in gastric carcinoma and its association with cell proliferation and differentiation[J].Jpn J Cancer Res,1995，86(8):743-748.
[5]Mori M,Kakeji Y,Adachi Y,et al.The prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen in clinical gastric cancer[J].Surgery,1993，113(6):683-690.
[6]Maeda K,Chung Y S,Onoda N,et al.Proliferating cell nuclear antigen labeling index of preoerative biopsy specimens in gastric carcinoma with special reference to prognosis[J].Cancer,1994，73(3):528-533.
收稿日期：2000-03-30
修回日期：2000-07-18, http://www.100md.com