阑尾炎Ⅰ号口服液的制备及质控
作者：王守愚 范津玲4
单位：天津市第二中心医院 30012
关键词：
中草药001114 阑尾炎Ⅰ号口服液是由10味中药组成的中药复方制剂，具有通里攻下、清热解毒、活血祛瘀 的功效，主治急慢性阑尾炎及穿孔造成弥漫性腹膜炎。经本院多年应用，有效率达100%。为 确保本品内在质量，我们进行了制备工艺研究，9味药的薄层鉴别，采用CS-930型薄层扫描 仪测定了制剂中总大黄素的含量。
1 仪器与试药
CS-930型薄层扫描仪(日本岛津)。微量进样器(宁波市镇海玻璃仪器厂)。薄层层析用硅胶G 、高效硅胶薄层板(青岛海洋化工厂)。大黄素、黄芩苷对照品及大黄、金银花、木香、当 归、厚朴、延胡索对照药材(中国药品生物制品检定所)。其它药材购自天津市中药集团公司 。所用试剂均为分析纯。阑尾炎Ⅰ号口服液(天津市第二中心医院)。
, 百拇医药
2 制备工艺
取大黄粗粉，照中华人民共和国药典(1995版一部，附录IO.项下)的渗漉法，用60%乙醇作 溶媒、浸渍24 h，再以1～3 mL / min 的速度渗漉，渗漉至渗漉液色淡为止。其它药味加8倍量水，加热至6 0 ℃，保温浸渍30 min ,100 ℃煎煮2次，每次分别为1 h 、30 min ，同时收集蒸馏液适量 备 用。合并煎液，滤过，浓缩至60 ℃，测定相对密度为1.2±0.05，加95%乙醇使含醇量达5 0 %，搅拌，放置24 h ，滤过，滤液与大黄渗漉液合并，回收乙醇，加入蒸馏液，加水至全量 ，滤过、灌封、100 ℃流通蒸气灭菌30 min 。
3 薄层鉴别
3.1 大黄的鉴别：取成品20 mL，按制剂中总大黄的含量测定的方法制备，为成品供试液 。取大黄对照药材0.3 g，加甲醇20 mL浸渍1 h，滤过、蒸干，残渣加水20 mL溶解，再按 成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制成阴性对照液。以上3液各取2 μL 分别点于 同 一硅胶G薄层板上，以苯-甲酸乙酯-乙酸乙酯-甲酸(20∶7∶2∶0.5)展开，紫外光灯(36 5 nm )下检视。见图1-1。
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3.2 当归的鉴别：取成品20 mL，加水20 mL，水蒸汽蒸馏，收集蒸馏液20 mL，加乙醚萃 取2 次，每次10 mL，合并乙醚层，挥干，加甲醇1 mL溶解，为成品供试液。取当归对照药材2 g ， 加水50 mL，水蒸汽蒸馏，收集馏液20 mL，按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法 制 备阴性对照液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60 ℃～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15 ∶5∶1)上层展开，置紫外光灯(365 nm)下检视，见图1-2。
3.3 金银花的鉴别：取成品20 mL，水浴蒸干，残渣加乙醇10 mL溶解，滤过，水浴蒸干， 残渣加乙醇2 mL溶解，为成品供试液。取金银花对照药材2 g，加水50 mL，水浴回流1 h， 滤过，再按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。分别点于同一硅 胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7∶3∶4)上层展开，紫外光灯(365 nm)下检视，见图 1-3。
3.4 蒲公英的鉴别：取成品20 mL，加氯仿萃取2次，每次15 mL，合并氯仿层，滤过，蒸 干，残渣加乙醇1 mL溶解，为成品供试液。取蒲公英粗粉1 g，加水50 mL水浴回流2 h， 滤 过，再按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液各2 μL分 别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7∶4∶3)上层展开，紫外光灯(365 nm) 下检视，见图1-4。
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A-阳性或对照药材液 B-成品供试液 C-阴性对照液
图1 样品薄层鉴别图
3.5 黄芩的鉴别：取成品20 mL，加乙醚萃取2次，每次20 mL，弃去醚层，加聚酰胺2 g， 摇匀，放置2 h，滤取聚酰胺，用乙醚洗涤至醚液无色，挥尽乙醚，水洗涤2次，每次20 m L，合并洗涤液，滤过，水浴蒸干，加甲醇1 mL溶解，为成品供试液。取黄芩苷对照品，加 甲醇制成1 mg/mL的阳性对照液。同法制备阴性对照液。分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋 酸乙酯-丁酮-甲酸-水(7∶5∶1∶1)上层展开，喷2%三氯化铁乙醇液显色，见图1-5。
3.6 厚朴的鉴别：取成品20 mL，加乙醚萃取2次，每次20 mL，合并乙醚液，挥干乙醚， 残渣加乙醚1 mL溶解，为成品供试液。取厚朴1 g，加水50 mL，水浴回流1 h，滤过，再按 成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液各1 μL，分别点于 同 一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲醇(27∶1)展开，喷1%香草醛硫酸溶液，100 ℃烘烤5 min， 见图1-6。
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3.7 木香的鉴别：取成品20 mL,加乙醚萃取2次，每次10 mL，合并醚层，加1%氢氧化钠溶 液洗涤2次，每次10 mL，取醚层挥发至1 mL，为成品供试液。取木香对照药材1 g，加乙醚2 0 mL，浸渍4 h，滤过，挥发至1 mL,为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液各1 μ L分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲醇(9∶4∶2)展开，喷1%香草醛硫 酸溶液，100 ℃烘烤5 min，见图1-7。
3.8 延胡索的鉴别：取成品20 mL蒸干，加氨水20 mL溶解，加氯化钠5 g，以氯仿萃取3次 ，每次15 mL，合并氯仿层蒸干，残渣加乙醇1 mL，加水50 mL，水浴回流1 h，滤过，浓缩 至10 mL，加95%乙醇10 mL，搅拌，静置12 h，滤过，蒸干，按成品供试液方法制备，为 药材对照液。同法制备阴性对照液。取3液各1 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁 醇 -冰醋酸-水(4∶1∶5)上层展开，置碘蒸气中熏数秒钟后置紫外光灯(365 nm)下检视，见 图1-8。
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3.9 川楝子的鉴别：取成品20 mL，加乙醚10 mL，振摇，弃去醚层，加正丁醇萃取2次， 每次10 mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加正丁醇1 mL溶解，为成品供试液。取川楝子粗粉1 g，加水50 mL，水浴回流1 h，滤过，浓缩至20 mL，加95%乙醇20 mL，搅拌，静置12 h， 滤过，除醇，再按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液 各2 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲苯(1∶1∶0.5)展开，紫外 光灯(365 nm)下检视，见图1-9。
4 大黄素的含量测定
4.1 回归方程的建立：精密称取大黄素9.6 mg，以甲醇定容至10 mL容量瓶中，使之成0 . 96 mg/mL的标准溶液，梯度取样点于同一块高效硅胶薄层板上(20 cm×10 cm),以苯-甲酸 乙 酯-乙酸乙酯-甲酸(20∶7.0∶0.2∶0.05)为展开剂，倾斜上行展开。以CS-930型薄扫 描仪扫描，λS=439 nm,λR=550 nm,SX=3,狭缝1.2 mm×2 mm，灵敏度×1，根据 大黄素浓度与峰面积积分值，计算得标准方程A=0.041 1+0.793 1 C(r=0.997),大黄素浓度在4.8 mg以下与峰面积呈较好的线性关系。
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4.2 样品中总大黄素的测定：精密量取口服液20 mL，加6 mol/L硫酸10 mL，氯仿30 mL，水浴回流4 h，转移至分液漏斗中，分取氯仿 层，水层以氯仿萃取4次(20,20,10,10 mL)，合并氯仿液，以蒸馏水洗至中性， 无 水硫酸钠脱水，回收氯仿至干，以甲醇定容于10 mL容量瓶中，于高效硅胶薄层板上点样4 μ L，大黄素对照液(0.96 mg/mL)2 μL，展开条件同回归方程项，结果见图1-10，3批样品 中总大黄素的含量见表1。
表1 3批口服液中总大黄素测定结果 批 号
960903
970120
971209
RSD%
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含量(毫克/支)
3.401
3.287 1
3.365 4
3.351 2
1.74
4.3 回收率实验：于高效硅胶薄层板上点样品2 μL，间隔点对照品1 μL，以含量 测 定项下展开，扫描，结果回收率为96.6%，RSD=1.86%(n=6)。
5 稳定性实验
本品原包装，室温，湿度40%～60%，保存0～25个月，外观除20～25个月的样品沉淀增多，不易 摇散外，其余样品无变化，按前给出的方法进行鉴别及大黄素的含量测定，均在合格范围。
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6 讨论
6.1 蒽醌类对热不稳定，所以大黄采用渗漉法提取，收集蒸馏液可避免挥发性成分损失。
6.2 本品经鉴别、大黄素含量测定及稳定性实验，认为制备工艺合理，质量控制方法可靠 ，成品质量较稳定。
6.3 本方中各味药均为药典品种。 参 考 文 献
1，中华人民共和国药典.一部.北京：人民卫生出版社，1995：617
2，郝淑清，王汝龙，何丽一.中草药，1984，15(2)：17
(1999-12-20收稿), http://www.100md.com
单位：天津市第二中心医院 30012
关键词：
中草药001114 阑尾炎Ⅰ号口服液是由10味中药组成的中药复方制剂，具有通里攻下、清热解毒、活血祛瘀 的功效，主治急慢性阑尾炎及穿孔造成弥漫性腹膜炎。经本院多年应用，有效率达100%。为 确保本品内在质量，我们进行了制备工艺研究，9味药的薄层鉴别，采用CS-930型薄层扫描 仪测定了制剂中总大黄素的含量。
1 仪器与试药
CS-930型薄层扫描仪(日本岛津)。微量进样器(宁波市镇海玻璃仪器厂)。薄层层析用硅胶G 、高效硅胶薄层板(青岛海洋化工厂)。大黄素、黄芩苷对照品及大黄、金银花、木香、当 归、厚朴、延胡索对照药材(中国药品生物制品检定所)。其它药材购自天津市中药集团公司 。所用试剂均为分析纯。阑尾炎Ⅰ号口服液(天津市第二中心医院)。
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2 制备工艺
取大黄粗粉，照中华人民共和国药典(1995版一部，附录IO.项下)的渗漉法，用60%乙醇作 溶媒、浸渍24 h，再以1～3 mL / min 的速度渗漉，渗漉至渗漉液色淡为止。其它药味加8倍量水，加热至6 0 ℃，保温浸渍30 min ,100 ℃煎煮2次，每次分别为1 h 、30 min ，同时收集蒸馏液适量 备 用。合并煎液，滤过，浓缩至60 ℃，测定相对密度为1.2±0.05，加95%乙醇使含醇量达5 0 %，搅拌，放置24 h ，滤过，滤液与大黄渗漉液合并，回收乙醇，加入蒸馏液，加水至全量 ，滤过、灌封、100 ℃流通蒸气灭菌30 min 。
3 薄层鉴别
3.1 大黄的鉴别：取成品20 mL，按制剂中总大黄的含量测定的方法制备，为成品供试液 。取大黄对照药材0.3 g，加甲醇20 mL浸渍1 h，滤过、蒸干，残渣加水20 mL溶解，再按 成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制成阴性对照液。以上3液各取2 μL 分别点于 同 一硅胶G薄层板上，以苯-甲酸乙酯-乙酸乙酯-甲酸(20∶7∶2∶0.5)展开，紫外光灯(36 5 nm )下检视。见图1-1。
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3.2 当归的鉴别：取成品20 mL，加水20 mL，水蒸汽蒸馏，收集蒸馏液20 mL，加乙醚萃 取2 次，每次10 mL，合并乙醚层，挥干，加甲醇1 mL溶解，为成品供试液。取当归对照药材2 g ， 加水50 mL，水蒸汽蒸馏，收集馏液20 mL，按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法 制 备阴性对照液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60 ℃～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15 ∶5∶1)上层展开，置紫外光灯(365 nm)下检视，见图1-2。
3.3 金银花的鉴别：取成品20 mL，水浴蒸干，残渣加乙醇10 mL溶解，滤过，水浴蒸干， 残渣加乙醇2 mL溶解，为成品供试液。取金银花对照药材2 g，加水50 mL，水浴回流1 h， 滤过，再按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。分别点于同一硅 胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7∶3∶4)上层展开，紫外光灯(365 nm)下检视，见图 1-3。
3.4 蒲公英的鉴别：取成品20 mL，加氯仿萃取2次，每次15 mL，合并氯仿层，滤过，蒸 干，残渣加乙醇1 mL溶解，为成品供试液。取蒲公英粗粉1 g，加水50 mL水浴回流2 h， 滤 过，再按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液各2 μL分 别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7∶4∶3)上层展开，紫外光灯(365 nm) 下检视，见图1-4。
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A-阳性或对照药材液 B-成品供试液 C-阴性对照液
图1 样品薄层鉴别图
3.5 黄芩的鉴别：取成品20 mL，加乙醚萃取2次，每次20 mL，弃去醚层，加聚酰胺2 g， 摇匀，放置2 h，滤取聚酰胺，用乙醚洗涤至醚液无色，挥尽乙醚，水洗涤2次，每次20 m L，合并洗涤液，滤过，水浴蒸干，加甲醇1 mL溶解，为成品供试液。取黄芩苷对照品，加 甲醇制成1 mg/mL的阳性对照液。同法制备阴性对照液。分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋 酸乙酯-丁酮-甲酸-水(7∶5∶1∶1)上层展开，喷2%三氯化铁乙醇液显色，见图1-5。
3.6 厚朴的鉴别：取成品20 mL，加乙醚萃取2次，每次20 mL，合并乙醚液，挥干乙醚， 残渣加乙醚1 mL溶解，为成品供试液。取厚朴1 g，加水50 mL，水浴回流1 h，滤过，再按 成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液各1 μL，分别点于 同 一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲醇(27∶1)展开，喷1%香草醛硫酸溶液，100 ℃烘烤5 min， 见图1-6。
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3.7 木香的鉴别：取成品20 mL,加乙醚萃取2次，每次10 mL，合并醚层，加1%氢氧化钠溶 液洗涤2次，每次10 mL，取醚层挥发至1 mL，为成品供试液。取木香对照药材1 g，加乙醚2 0 mL，浸渍4 h，滤过，挥发至1 mL,为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液各1 μ L分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲醇(9∶4∶2)展开，喷1%香草醛硫 酸溶液，100 ℃烘烤5 min，见图1-7。
3.8 延胡索的鉴别：取成品20 mL蒸干，加氨水20 mL溶解，加氯化钠5 g，以氯仿萃取3次 ，每次15 mL，合并氯仿层蒸干，残渣加乙醇1 mL，加水50 mL，水浴回流1 h，滤过，浓缩 至10 mL，加95%乙醇10 mL，搅拌，静置12 h，滤过，蒸干，按成品供试液方法制备，为 药材对照液。同法制备阴性对照液。取3液各1 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁 醇 -冰醋酸-水(4∶1∶5)上层展开，置碘蒸气中熏数秒钟后置紫外光灯(365 nm)下检视，见 图1-8。
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3.9 川楝子的鉴别：取成品20 mL，加乙醚10 mL，振摇，弃去醚层，加正丁醇萃取2次， 每次10 mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加正丁醇1 mL溶解，为成品供试液。取川楝子粗粉1 g，加水50 mL，水浴回流1 h，滤过，浓缩至20 mL，加95%乙醇20 mL，搅拌，静置12 h， 滤过，除醇，再按成品供试液方法制备，为药材对照液。同法制备阴性对照液。取以上3液 各2 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲苯(1∶1∶0.5)展开，紫外 光灯(365 nm)下检视，见图1-9。
4 大黄素的含量测定
4.1 回归方程的建立：精密称取大黄素9.6 mg，以甲醇定容至10 mL容量瓶中，使之成0 . 96 mg/mL的标准溶液，梯度取样点于同一块高效硅胶薄层板上(20 cm×10 cm),以苯-甲酸 乙 酯-乙酸乙酯-甲酸(20∶7.0∶0.2∶0.05)为展开剂，倾斜上行展开。以CS-930型薄扫 描仪扫描，λS=439 nm,λR=550 nm,SX=3,狭缝1.2 mm×2 mm，灵敏度×1，根据 大黄素浓度与峰面积积分值，计算得标准方程A=0.041 1+0.793 1 C(r=0.997),大黄素浓度在4.8 mg以下与峰面积呈较好的线性关系。
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4.2 样品中总大黄素的测定：精密量取口服液20 mL，加6 mol/L硫酸10 mL，氯仿30 mL，水浴回流4 h，转移至分液漏斗中，分取氯仿 层，水层以氯仿萃取4次(20,20,10,10 mL)，合并氯仿液，以蒸馏水洗至中性， 无 水硫酸钠脱水，回收氯仿至干，以甲醇定容于10 mL容量瓶中，于高效硅胶薄层板上点样4 μ L，大黄素对照液(0.96 mg/mL)2 μL，展开条件同回归方程项，结果见图1-10，3批样品 中总大黄素的含量见表1。
表1 3批口服液中总大黄素测定结果 批 号
960903
970120
971209
RSD%
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含量(毫克/支)
3.401
3.287 1
3.365 4
3.351 2
1.74
4.3 回收率实验：于高效硅胶薄层板上点样品2 μL，间隔点对照品1 μL，以含量 测 定项下展开，扫描，结果回收率为96.6%，RSD=1.86%(n=6)。
5 稳定性实验
本品原包装，室温，湿度40%～60%，保存0～25个月，外观除20～25个月的样品沉淀增多，不易 摇散外，其余样品无变化，按前给出的方法进行鉴别及大黄素的含量测定，均在合格范围。
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6 讨论
6.1 蒽醌类对热不稳定，所以大黄采用渗漉法提取，收集蒸馏液可避免挥发性成分损失。
6.2 本品经鉴别、大黄素含量测定及稳定性实验，认为制备工艺合理，质量控制方法可靠 ，成品质量较稳定。
6.3 本方中各味药均为药典品种。 参 考 文 献
1，中华人民共和国药典.一部.北京：人民卫生出版社，1995：617
2，郝淑清，王汝龙，何丽一.中草药，1984，15(2)：17
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