CX3 DELTA急诊生化分析仪测定尿蛋白的方法学评价
作者：梁瑞莲 邓中新
单位：梁瑞莲(广东省顺德市第一人民医院检验科 528300)；邓中新(广东省广州市红十字会医院检验科 510220)
关键词：
广东医学001160 CX3 DELTA全自动急诊生化分析仪双缩脲法(以下简称CX3法)，在日常尿蛋白测定时具有快捷简便之优点。但我们发现仪器有时不显示结果或者显示负值。因而本文以考马斯亮蓝G-250法(以下简称CBB法)作为比较方法，对CX3法测定尿蛋白进行方法学评价，并提出了CX3法测定尿蛋白的合适浓度范围，以供同道们参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 为1998年9月至1999年4月广州市红十字会医院各病区的138份尿液标本。
, http://www.100md.com
1.1.2 试剂 考马斯亮蓝试剂(CBB)由广州天河高新技术产业开发区环通生物科学有限公司提供，CX3法的双缩脲试剂由Beckman公司提供。
1.1.3 仪器 美国Beckman公司的CX3 DELTA全自动急诊生化分析仪及上海分析仪器厂的752型紫外可见分光光度计。
1.2 方法 对138份标本同时用CBB法和CX3法测定其中的蛋白质含量(CBB法按试剂说明书进行操作，CX3法测定按仪器操作要求进行)。
1.3 准确性评价 两法的直线回归分析及均值的t检验，精密度评价。
2 结果
2.1 回收试验 同一份混合尿标本以CX3法做回收试验，分别加入浓度(g/L)为0.19，0.29，0.48，0.95，1.9和3.8的蛋白标准，当样品测定浓度<0.80 g/L时，回收率均超出理想的回收率范围(52.6%～113%，平均78.2%)，表明在此浓度内存在较大的比例误差。当样品浓度>0.80 g/L时，回收率均在理想的回收率范围内(94.7%～104%，平均99.7%)，表明在此浓度范围内不存在明显的比例误差。
, 百拇医药
2.2 CBB法和CX3法在不同浓度范围测定尿蛋白的直线回归分析 将138份标本以CBB法和CX3法测定后按浓度0.10～0.80 g/L(记为第1组)和0.80～7.5 g/L(记为第2组)分为两组数据作直线回归分析，结果如表1。由表1可见，第1组的相关系数远小于第2组，经两组相关系数差别的显著性意义检验，u=3.68,P<0.01，表明第1组中CX3法与CBB法测定尿蛋白结果有很大差异。
表1 CBB法和CX3法在不同浓度范围内
测定尿蛋白的直线回归分析 浓度分组
例数
回归方程
r值
P值
第1组
, 百拇医药
127
Y=1.471X+0.691
0.300
<0.01
第2组
11
Y=1.006X+0.870
0.929
<0.01
2.3 CBB法和CX3法在不同浓度范围内测定尿蛋白均值的t检验(分组同2.2) 第1组(CBB均值0.286 vs CX3均值1.111)P<0.01，表明在低浓度范围内两种方法均数的差别有非常显著性意义；第2组(6.570 vs 7.481)P>0.05，表明在高浓度范围内两种方法均数的差别无显著性意义。
, 百拇医药
2.4 精密度试验 取两份蛋白质浓度不同的标本以CX3法进行连续20次测定，标本平均浓度为6.30 g/L时，CV=2.27%；标本平均浓度为0.60 g/L时CV=1.34%，结果表明CX3法在两组蛋白质浓度时均有很好的精密度。
3 讨论
1976年Bradford报告的CBB法因具有灵敏度高、特异性强和操作简单等特点而得到广泛的应用。尤其是近年来经寇丽筠、彭惠敏[1，2]等的多次改良及大量研究，CBB法得到了更进一步的改善和更广泛的应用，其测定尿液蛋白质的可靠性得到了肯定。但CBB法毕竟是一种手工的方法，且有如线性范围不宽及试剂对比色杯产生颜色吸附等的缺点，所以不少学者都在继续寻找线性范围广、操作简单快捷、适用于自动化和临床常规应用的方法。CX3法就是其中的一种。
CX3法采用经过改良后的双缩脲试剂、通过减少样本和试剂的比例(1∶12.5)、利用测定蛋白质分子与铜离子络合物生成的速率方法，在50 s的时间内对尿液和脑脊液标本内蛋白质进行测定。此法除具有双缩脲法原有的准确性外，还提高了反应的速度和灵敏度。据CX3法试剂说明书介绍，此法测定脑脊液标本中蛋白质的线性范围为0.10～7.5 g/L，但没有提及尿蛋白测定的线性范围。
, 百拇医药
本实验中各项试验结果表明，与CBB法相比，CX3法在尿液标本蛋白质浓度较高的范围内时，其准确度及精密度均较好，且其操作简便、迅速、可以用批量的形式由仪器自动完成，是本法先进之处。但本法的灵敏度仍无法与CBB法相比，在低浓度范围内测定尿微量蛋白时其准确性较差，厂家提供的脑脊液的线性范围在应用于尿蛋白测定时得不到本实验的支持，标本实测的过程中也发现结果存有较大偏差。因而用CX3法测定尿蛋白时应注意被测标本中蛋白质的浓度范围，当浓度在0.80～7.5 g/L时，其测定结果有较好的准确性和精密度，但若标本浓度>7.5 g/L时，应稀释到适当的浓度才进行测定；当结果浓度<0.80 g/L时，应考虑标本的蛋白浓度已超出了本法的线性范围，其准确度受到了限制，为保证实验结果的可靠性，应采用CBB法或其他灵敏准确的定量方法进行测定。
参考文献
1，寇丽筠，主编. 临床基础检验学. 北京：人民卫生出版社，1996. 106
2，彭惠敏，袁德辉. 用改良的考马斯亮蓝染料结合法测定脑脊液蛋白质. 广州医药，1994，5(9)：47
(收稿日期：2000-03-23), 百拇医药
单位：梁瑞莲(广东省顺德市第一人民医院检验科 528300)；邓中新(广东省广州市红十字会医院检验科 510220)
关键词：
广东医学001160 CX3 DELTA全自动急诊生化分析仪双缩脲法(以下简称CX3法)，在日常尿蛋白测定时具有快捷简便之优点。但我们发现仪器有时不显示结果或者显示负值。因而本文以考马斯亮蓝G-250法(以下简称CBB法)作为比较方法，对CX3法测定尿蛋白进行方法学评价，并提出了CX3法测定尿蛋白的合适浓度范围，以供同道们参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 为1998年9月至1999年4月广州市红十字会医院各病区的138份尿液标本。
, http://www.100md.com
1.1.2 试剂 考马斯亮蓝试剂(CBB)由广州天河高新技术产业开发区环通生物科学有限公司提供，CX3法的双缩脲试剂由Beckman公司提供。
1.1.3 仪器 美国Beckman公司的CX3 DELTA全自动急诊生化分析仪及上海分析仪器厂的752型紫外可见分光光度计。
1.2 方法 对138份标本同时用CBB法和CX3法测定其中的蛋白质含量(CBB法按试剂说明书进行操作，CX3法测定按仪器操作要求进行)。
1.3 准确性评价 两法的直线回归分析及均值的t检验，精密度评价。
2 结果
2.1 回收试验 同一份混合尿标本以CX3法做回收试验，分别加入浓度(g/L)为0.19，0.29，0.48，0.95，1.9和3.8的蛋白标准，当样品测定浓度<0.80 g/L时，回收率均超出理想的回收率范围(52.6%～113%，平均78.2%)，表明在此浓度内存在较大的比例误差。当样品浓度>0.80 g/L时，回收率均在理想的回收率范围内(94.7%～104%，平均99.7%)，表明在此浓度范围内不存在明显的比例误差。
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2.2 CBB法和CX3法在不同浓度范围测定尿蛋白的直线回归分析 将138份标本以CBB法和CX3法测定后按浓度0.10～0.80 g/L(记为第1组)和0.80～7.5 g/L(记为第2组)分为两组数据作直线回归分析，结果如表1。由表1可见，第1组的相关系数远小于第2组，经两组相关系数差别的显著性意义检验，u=3.68,P<0.01，表明第1组中CX3法与CBB法测定尿蛋白结果有很大差异。
表1 CBB法和CX3法在不同浓度范围内
测定尿蛋白的直线回归分析 浓度分组
例数
回归方程
r值
P值
第1组
, 百拇医药
127
Y=1.471X+0.691
0.300
<0.01
第2组
11
Y=1.006X+0.870
0.929
<0.01
2.3 CBB法和CX3法在不同浓度范围内测定尿蛋白均值的t检验(分组同2.2) 第1组(CBB均值0.286 vs CX3均值1.111)P<0.01，表明在低浓度范围内两种方法均数的差别有非常显著性意义；第2组(6.570 vs 7.481)P>0.05，表明在高浓度范围内两种方法均数的差别无显著性意义。
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2.4 精密度试验 取两份蛋白质浓度不同的标本以CX3法进行连续20次测定，标本平均浓度为6.30 g/L时，CV=2.27%；标本平均浓度为0.60 g/L时CV=1.34%，结果表明CX3法在两组蛋白质浓度时均有很好的精密度。
3 讨论
1976年Bradford报告的CBB法因具有灵敏度高、特异性强和操作简单等特点而得到广泛的应用。尤其是近年来经寇丽筠、彭惠敏[1，2]等的多次改良及大量研究，CBB法得到了更进一步的改善和更广泛的应用，其测定尿液蛋白质的可靠性得到了肯定。但CBB法毕竟是一种手工的方法，且有如线性范围不宽及试剂对比色杯产生颜色吸附等的缺点，所以不少学者都在继续寻找线性范围广、操作简单快捷、适用于自动化和临床常规应用的方法。CX3法就是其中的一种。
CX3法采用经过改良后的双缩脲试剂、通过减少样本和试剂的比例(1∶12.5)、利用测定蛋白质分子与铜离子络合物生成的速率方法，在50 s的时间内对尿液和脑脊液标本内蛋白质进行测定。此法除具有双缩脲法原有的准确性外，还提高了反应的速度和灵敏度。据CX3法试剂说明书介绍，此法测定脑脊液标本中蛋白质的线性范围为0.10～7.5 g/L，但没有提及尿蛋白测定的线性范围。
, 百拇医药
本实验中各项试验结果表明，与CBB法相比，CX3法在尿液标本蛋白质浓度较高的范围内时，其准确度及精密度均较好，且其操作简便、迅速、可以用批量的形式由仪器自动完成，是本法先进之处。但本法的灵敏度仍无法与CBB法相比，在低浓度范围内测定尿微量蛋白时其准确性较差，厂家提供的脑脊液的线性范围在应用于尿蛋白测定时得不到本实验的支持，标本实测的过程中也发现结果存有较大偏差。因而用CX3法测定尿蛋白时应注意被测标本中蛋白质的浓度范围，当浓度在0.80～7.5 g/L时，其测定结果有较好的准确性和精密度，但若标本浓度>7.5 g/L时，应稀释到适当的浓度才进行测定；当结果浓度<0.80 g/L时，应考虑标本的蛋白浓度已超出了本法的线性范围，其准确度受到了限制，为保证实验结果的可靠性，应采用CBB法或其他灵敏准确的定量方法进行测定。
参考文献
1，寇丽筠，主编. 临床基础检验学. 北京：人民卫生出版社，1996. 106
2，彭惠敏，袁德辉. 用改良的考马斯亮蓝染料结合法测定脑脊液蛋白质. 广州医药，1994，5(9)：47
(收稿日期：2000-03-23), 百拇医药