辅助性牙周维护治疗对正畸矫治患者唾液中一氧化氮含量的影响
作者：唐卫忠 周中华 汪大林 曹志中 徐晓刚
单位：第二军医大学长海医院口腔科，上海 200433
关键词：正畸；牙周组织；一氧化氮；唾液
第二军医大学学报001222 [摘要] 目的：研究辅助性牙周维护治疗 对正畸矫治患者口腔唾液中一氧化氮(NO)含量的影响，探讨正畸矫治和牙周维护治疗与唾液 NO的关系。 方法：应用荧光分光光度法，通过检测正畸矫治患者口腔唾液中亚硝 酸根(NO2-)的含量间接反映NO水平的变化。结果：正畸矫 治患者唾液中NO含量明显高于正常人(P<0.01),而对正畸矫治患者进行辅助性牙周维 护手段(漱口水、洁牙和托盘药物联合治疗等)治疗显著降低NO含量(P<0.01)。结论：牙周维护治疗可以通过减轻龈炎、控制矫治器微生物菌群等来降低 唾液中NO，从而对维护口腔粘膜的完整性和参与牙周组织改建具有一定作用。
, 百拇医药
[中图分类号] R 783.5 [文献标识码] A
[文章编号] 0258-879X(2000)12-1164-02
Influence of assistant periodontal treatment on nitric oxide in saliva of ortho dontic patients
TANG Wei-Zhong ZHOU Zhong-Hua WANG Da-Lin CAO Zhi-Zhong XU Xiao-Gang
(Department of Stomatology, Changhai Hospital, Second Military Medical Univers ity, Shanghai 200433， China)
, 百拇医药
[ABSTRACT] Objective： To study the influence of assistant pe rio dontal treatment on nitric oxide in saliva of orthodontic patients. Meth ods： Assistant periodontal treatment was used in orthodontic patie nts. Fluorometric method was used to determine nitrite in saliva of ort hodontic patients. Results: NO in the saliva of orthodontic pati ents was higher than that in normal patients(P<0.01), and when the assista nt periodontal treatment was applied during the orthodontic treatment， NO level in saliva decreased significantly (P<0.01). Conclusion: The results of this experiment indicate that the assistant periodontal treatment ca n decrease periodo ntitis，and the production of NO in saliva is decreased. NO can play an imp ortant role in orthodontic bone remodeling.
, 百拇医药
[KEY WORDS] orthodontic; periodontal membranes; nitric oxide; saliva
一氧化氮(Nitric oxide，NO)是一种不稳定、易扩散、化学性质极其活泼、半衰期极 短(3～5 s)的自由基，自1987年以来，NO的基础和临床研究已涉及到医学的各个领域。19 93年Bodis首次在唾液中检测出NO的存在[1]。作者在前期研究中也已建立了对唾液 中NO检测的荧光分光光度法，并初步观察了正畸矫治患者口腔液中NO的变化[2]， 其他学者的报道也初步揭示了唾液中的NO与口腔内炎症、疾病的关系[3]。本研究 检测了正畸矫治患者口腔唾液中NO的含量以及辅助性牙周维护治疗方法，对其含量的影响， 探讨并评价牙周维护治疗对正畸矫治患者口腔唾液NO含量的影响和对正畸矫治所产生的可能 性作用。
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 主要仪器和试剂 日立RF-5000型荧光分光光度计(日本)，硅橡胶加热成 形器，1 mmol/L NO2-标准液，DAN溶液(0.05 mg/ml),0.6 mol/L HCl，0.05%洗必太 漱口液，甲硝唑凝胶制剂。
1.2 实验分组 选取121名自愿者进行测试，年龄12～28岁。正常成人组60名(均 无牙周、粘膜及唾液腺疾病)；正畸矫治患者61名，均采用直丝弓矫治技术进行治疗，其中 A组：漱口水组21名，B组：洁牙+漱口水组22名，C组：洁牙+漱口水+托盘式药物治疗组18 名。
1.3 样本采集 参考唐卫忠等[2]方法，收集非刺激性全唾液1 ml左右， 密封置于液氮中保存至测试分析。A组(漱口水组)受试者用0.05%洗必太液漱口3次/d，一 周后取唾液样本测试。B组(洁牙+漱口水组)受试者首先接受龈上洁治，而后用0.05%洗必 太液含漱3次/d，一周后取样测试。C组(洁牙+漱口水+托盘式药物治疗组)受试者接受牙龈 洁治后，除用漱口水含嗽3次/d外，每晚应用托盘内置甲硝唑凝液药物治疗15 min，一周后 取样测试。
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1.4 NO检测 将收集的唾液(1 ml左右)离心15 min (3 500 r/min)，采上清作为 样本，参考唐卫忠法[2]测定唾液中NO含量。
1.5 统计学处理 数据以
±s表示，采用样本均数t检验。
2 结 果
2.1 口腔唾液中NO含量的测定 实验结果显示，正常成人组为(3.004±0.469) μ mol/L，正畸矫治患者组为(5.007±0.261) μmol/L，两组相差非常显著(P<0.01)。
2.2 辅助性牙周维护治疗对矫治患者口腔唾液NO的影响 结果显示，辅助性牙周 维护治疗均能显著地降低正畸矫治患者口腔唾液内NO的含量，其中以C组龈上洁治+漱口水 +托盘式药物治疗效果最为显著(表1)。
, 百拇医药
表 1 正畸矫治患者接受辅助性牙周维护
治疗前后口腔唾液中NO含量
Tab 1 The production of nitric oxide in saliva
of orthodontic patients with the assistant
periodontal treatment (±s, cB/μmol.L-1) Group
n
Before treatment
, 百拇医药
After treatment
A
21
4.888±0.346
4.007±0.336*
B
22
5.046±0.363
3.967±0.456*
C
18
5.098±0.321
, 百拇医药
3.467±0.347**
*P<0.05, ** P<0.01 vs before treatment group3 讨 论
内源性NO是一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)以左型精氨酸(L-arginine, L-Arg)为底物，在还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、黄素单核苷酸(FMN)、黄素腺嘌呤二核苷酸(FA D)及四氢生物喋呤(BH4)等因子辅助下生成的，在体内具有广泛重要的生理功能。1993 年由Bodis等[1]在唾液中首次检出，其后，Tobin[4]、黄干初[3] 、唐卫忠[2]等相继对各种情况下唾液中NO的水平进行了测定，初步显示出唾液N O与口腔多种炎症性疾病、医源性炎症反应等均有密切关系。
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本研究对正常人和正畸矫治患者的唾液样本进行了检测，并辅助应用牙周维护治疗等手段观 察对其含量的影响，结果表明，正畸矫治患者口腔唾液中NO含量明显高于正常人(P<0. 01)，而采用牙周维护治疗后能显著降低其含量，其中尤以洁牙、漱口水和托盘式药物治疗 联合应用效果最为突出。初步表明牙周维护治疗能影响正畸矫治患者口腔唾液NO的含量及口 腔内环境。目前认为唾液中NO来源于腺体内神经末梢、唾液腺分泌细胞、唾液腺内皮细胞、腺体内炎症 细胞(如巨噬细胞)及口腔微生物菌 群等[1]。正畸矫治患者唾液中NO含量的变化可能受以下几个方面影响：(1)正畸 矫治力作用于牙冠时，可以对牙周韧带和颞颌关节等处的感受器产生强烈的刺激，通过反射 作用使唾液分泌状况随之改变；(2)矫治器本身所带来的异物感也会刺激口腔粘膜的触压 觉感受器，通过神经反馈调节腺体分泌；(3)正畸矫治可引起牙龈炎，而口腔炎症患者唾 液中的NO含量较正常人高[3]；(4)正畸矫治器具本身易附着微生物菌群，也可产 生部分NO进入唾液[2]。本研究通过应用漱口水来清除或控制矫治器表面和口腔内 的微生物菌群，通过龈上洁治来减轻龈炎，此外，利用自行研制设计的弹性硅橡胶牙局部 托盘，内置甲硝唑凝胶进行牙周维护治疗，以控制龈炎，促进牙齿移动。结果表明，牙周维 护治疗可以减轻龈炎和控制口内矫治器微生物菌群，从而降低唾液中NO含量。
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唾液中NO不仅具有杀菌防御、杀伤肿瘤细胞等功能，更可能在维持口腔粘膜的完整性和机体 平衡等方面占有重要角色，对于正畸患者治疗期间的牙周组织重建也可能具有一定的作用。 我们将从正畸临床治疗和细胞生物学方面继续深入，更全面地阐释唾液中NO的生物学作用， 及牙周维护性治疗在正畸矫治中的作用。
[作者简介] 唐卫忠(1969-)，男(汉族)，硕士，讲师.
参考文献
[1] Bodis S,Haregewion A. Evidence for the release and possible neura l regulation of nitric oxide in human saliva[J]. Biochem Biophys Res Commun, 1993,194(23):347-353.
[2] 唐卫忠，林 珠，段银钟，等.正畸矫治患者口腔唾液中一氧化氮含量的变化[J] .口腔正畸学杂志，1997,4(2)：166-169.
[3] 黄干初，皮亚庆，刘蜀凡，等.口腔疾病患者唾液中一氧化氮水平的变化[J].湖 南医科大学学报，1995,20(4)：63-65.
[4] Tobin G,Edwords AV, Ekslrom J,et al.Nitric oxide inrolement in saliva ry gland secretory and vasodilator responses [J].J Periodontol,1993,64(5):59 -64.
[收稿日期] 2000-06-26
[修回日期] 2000-09-25, 百拇医药
单位：第二军医大学长海医院口腔科，上海 200433
关键词：正畸；牙周组织；一氧化氮；唾液
第二军医大学学报001222 [摘要] 目的：研究辅助性牙周维护治疗 对正畸矫治患者口腔唾液中一氧化氮(NO)含量的影响，探讨正畸矫治和牙周维护治疗与唾液 NO的关系。 方法：应用荧光分光光度法，通过检测正畸矫治患者口腔唾液中亚硝 酸根(NO2-)的含量间接反映NO水平的变化。结果：正畸矫 治患者唾液中NO含量明显高于正常人(P<0.01),而对正畸矫治患者进行辅助性牙周维 护手段(漱口水、洁牙和托盘药物联合治疗等)治疗显著降低NO含量(P<0.01)。结论：牙周维护治疗可以通过减轻龈炎、控制矫治器微生物菌群等来降低 唾液中NO，从而对维护口腔粘膜的完整性和参与牙周组织改建具有一定作用。
, 百拇医药
[中图分类号] R 783.5 [文献标识码] A
[文章编号] 0258-879X(2000)12-1164-02
Influence of assistant periodontal treatment on nitric oxide in saliva of ortho dontic patients
TANG Wei-Zhong ZHOU Zhong-Hua WANG Da-Lin CAO Zhi-Zhong XU Xiao-Gang
(Department of Stomatology, Changhai Hospital, Second Military Medical Univers ity, Shanghai 200433， China)
, 百拇医药
[ABSTRACT] Objective： To study the influence of assistant pe rio dontal treatment on nitric oxide in saliva of orthodontic patients. Meth ods： Assistant periodontal treatment was used in orthodontic patie nts. Fluorometric method was used to determine nitrite in saliva of ort hodontic patients. Results: NO in the saliva of orthodontic pati ents was higher than that in normal patients(P<0.01), and when the assista nt periodontal treatment was applied during the orthodontic treatment， NO level in saliva decreased significantly (P<0.01). Conclusion: The results of this experiment indicate that the assistant periodontal treatment ca n decrease periodo ntitis，and the production of NO in saliva is decreased. NO can play an imp ortant role in orthodontic bone remodeling.
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[KEY WORDS] orthodontic; periodontal membranes; nitric oxide; saliva
一氧化氮(Nitric oxide，NO)是一种不稳定、易扩散、化学性质极其活泼、半衰期极 短(3～5 s)的自由基，自1987年以来，NO的基础和临床研究已涉及到医学的各个领域。19 93年Bodis首次在唾液中检测出NO的存在[1]。作者在前期研究中也已建立了对唾液 中NO检测的荧光分光光度法，并初步观察了正畸矫治患者口腔液中NO的变化[2]， 其他学者的报道也初步揭示了唾液中的NO与口腔内炎症、疾病的关系[3]。本研究 检测了正畸矫治患者口腔唾液中NO的含量以及辅助性牙周维护治疗方法，对其含量的影响， 探讨并评价牙周维护治疗对正畸矫治患者口腔唾液NO含量的影响和对正畸矫治所产生的可能 性作用。
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 主要仪器和试剂 日立RF-5000型荧光分光光度计(日本)，硅橡胶加热成 形器，1 mmol/L NO2-标准液，DAN溶液(0.05 mg/ml),0.6 mol/L HCl，0.05%洗必太 漱口液，甲硝唑凝胶制剂。
1.2 实验分组 选取121名自愿者进行测试，年龄12～28岁。正常成人组60名(均 无牙周、粘膜及唾液腺疾病)；正畸矫治患者61名，均采用直丝弓矫治技术进行治疗，其中 A组：漱口水组21名，B组：洁牙+漱口水组22名，C组：洁牙+漱口水+托盘式药物治疗组18 名。
1.3 样本采集 参考唐卫忠等[2]方法，收集非刺激性全唾液1 ml左右， 密封置于液氮中保存至测试分析。A组(漱口水组)受试者用0.05%洗必太液漱口3次/d，一 周后取唾液样本测试。B组(洁牙+漱口水组)受试者首先接受龈上洁治，而后用0.05%洗必 太液含漱3次/d，一周后取样测试。C组(洁牙+漱口水+托盘式药物治疗组)受试者接受牙龈 洁治后，除用漱口水含嗽3次/d外，每晚应用托盘内置甲硝唑凝液药物治疗15 min，一周后 取样测试。
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1.4 NO检测 将收集的唾液(1 ml左右)离心15 min (3 500 r/min)，采上清作为 样本，参考唐卫忠法[2]测定唾液中NO含量。
1.5 统计学处理 数据以
±s表示，采用样本均数t检验。2 结 果
2.1 口腔唾液中NO含量的测定 实验结果显示，正常成人组为(3.004±0.469) μ mol/L，正畸矫治患者组为(5.007±0.261) μmol/L，两组相差非常显著(P<0.01)。
2.2 辅助性牙周维护治疗对矫治患者口腔唾液NO的影响 结果显示，辅助性牙周 维护治疗均能显著地降低正畸矫治患者口腔唾液内NO的含量，其中以C组龈上洁治+漱口水 +托盘式药物治疗效果最为显著(表1)。
, 百拇医药
表 1 正畸矫治患者接受辅助性牙周维护
治疗前后口腔唾液中NO含量
Tab 1 The production of nitric oxide in saliva
of orthodontic patients with the assistant
periodontal treatment (
±s, cB/μmol.L-1) Groupn
Before treatment
, 百拇医药
After treatment
A
21
4.888±0.346
4.007±0.336*
B
22
5.046±0.363
3.967±0.456*
C
18
5.098±0.321
, 百拇医药
3.467±0.347**
*P<0.05, ** P<0.01 vs before treatment group3 讨 论
内源性NO是一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)以左型精氨酸(L-arginine, L-Arg)为底物，在还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、黄素单核苷酸(FMN)、黄素腺嘌呤二核苷酸(FA D)及四氢生物喋呤(BH4)等因子辅助下生成的，在体内具有广泛重要的生理功能。1993 年由Bodis等[1]在唾液中首次检出，其后，Tobin[4]、黄干初[3] 、唐卫忠[2]等相继对各种情况下唾液中NO的水平进行了测定，初步显示出唾液N O与口腔多种炎症性疾病、医源性炎症反应等均有密切关系。
, http://www.100md.com
本研究对正常人和正畸矫治患者的唾液样本进行了检测，并辅助应用牙周维护治疗等手段观 察对其含量的影响，结果表明，正畸矫治患者口腔唾液中NO含量明显高于正常人(P<0. 01)，而采用牙周维护治疗后能显著降低其含量，其中尤以洁牙、漱口水和托盘式药物治疗 联合应用效果最为突出。初步表明牙周维护治疗能影响正畸矫治患者口腔唾液NO的含量及口 腔内环境。目前认为唾液中NO来源于腺体内神经末梢、唾液腺分泌细胞、唾液腺内皮细胞、腺体内炎症 细胞(如巨噬细胞)及口腔微生物菌 群等[1]。正畸矫治患者唾液中NO含量的变化可能受以下几个方面影响：(1)正畸 矫治力作用于牙冠时，可以对牙周韧带和颞颌关节等处的感受器产生强烈的刺激，通过反射 作用使唾液分泌状况随之改变；(2)矫治器本身所带来的异物感也会刺激口腔粘膜的触压 觉感受器，通过神经反馈调节腺体分泌；(3)正畸矫治可引起牙龈炎，而口腔炎症患者唾 液中的NO含量较正常人高[3]；(4)正畸矫治器具本身易附着微生物菌群，也可产 生部分NO进入唾液[2]。本研究通过应用漱口水来清除或控制矫治器表面和口腔内 的微生物菌群，通过龈上洁治来减轻龈炎，此外，利用自行研制设计的弹性硅橡胶牙局部 托盘，内置甲硝唑凝胶进行牙周维护治疗，以控制龈炎，促进牙齿移动。结果表明，牙周维 护治疗可以减轻龈炎和控制口内矫治器微生物菌群，从而降低唾液中NO含量。
, http://www.100md.com
唾液中NO不仅具有杀菌防御、杀伤肿瘤细胞等功能，更可能在维持口腔粘膜的完整性和机体 平衡等方面占有重要角色，对于正畸患者治疗期间的牙周组织重建也可能具有一定的作用。 我们将从正畸临床治疗和细胞生物学方面继续深入，更全面地阐释唾液中NO的生物学作用， 及牙周维护性治疗在正畸矫治中的作用。
[作者简介] 唐卫忠(1969-)，男(汉族)，硕士，讲师.
参考文献
[1] Bodis S,Haregewion A. Evidence for the release and possible neura l regulation of nitric oxide in human saliva[J]. Biochem Biophys Res Commun, 1993,194(23):347-353.
[2] 唐卫忠，林 珠，段银钟，等.正畸矫治患者口腔唾液中一氧化氮含量的变化[J] .口腔正畸学杂志，1997,4(2)：166-169.
[3] 黄干初，皮亚庆，刘蜀凡，等.口腔疾病患者唾液中一氧化氮水平的变化[J].湖 南医科大学学报，1995,20(4)：63-65.
[4] Tobin G,Edwords AV, Ekslrom J,et al.Nitric oxide inrolement in saliva ry gland secretory and vasodilator responses [J].J Periodontol,1993,64(5):59 -64.
[收稿日期] 2000-06-26
[修回日期] 2000-09-25, 百拇医药