可溶性E-和P-选择素与急性脑梗死的关系
作者：曾杨滨 杨期东 彭光莹 许治强
单位：曾杨滨 彭光莹 许治强(广州市第二人民医 院神经内科，510150)；杨期东(湖南医科大学附属湘雅医院神经内科，410078)
关键词：脑梗塞；选择素族；肿瘤坏死因子；白介素-6
中国急救医学001211 [摘 要]目的 探讨E-和P-选择素与脑梗死的关系。方法 用ELISA方法测定30例脑梗死、25例脑出血患者及28例正常人的sE-和sP-选择素血 清水平，分析它们与WBC、N%、TNF及IL-6血清水平之间的关系。结果 急性期脑梗死患者sE-和sP-选择素血清水平[分别为(65.2±39.4)ng/ml、(399±134) ng/ml]明显高于脑出血患者[分别为(44.6±11.8)ng/ml、(243±112) ng/ml]及正常 人[分别为(40.5±12.5)ng/ml、(227±106) ng/ml]。而该组患者恢复期这两种选择素 水平无明显升高。 急性期脑梗死患者sE-和sP-选择素水平分别与WBC、N%、IL-6水平呈正相关关系，sP-选择素 水 平还与TNF水平呈正相关关系。结论 sE-和sP-选择素血清水平增高 反映脑梗死急性期E-和P-选择素可能在TNF和IL-6的刺激下，参与脑梗死损伤过程。
, 百拇医药
[中图分类号]743.33 [文献标识码]A [文章编号]1002-1949(2000)12-0715-02
Soluble E- and P-selectins in acute cerebral infarction
ZENG Yang-bi n,YANG Qi-dong,PENG Guang-ying,et al.
(Department of Neurology,Guangzhou Second Ho spital,Guangzhou 510150,China)
[Abstract]Objective To determine the roles of E-and P-selectins in the pathogenesis of cerebral infarction.Methods The serum concentrations of sE-and sP-selectins were measured with enzyme-linked immunoso r bent assay (ELISA)in 30 cerebral infarction、25 cerebral haemorrhage and 28 heal thy control subjects.The correlations between selectins and WBC、N%、the serum l evel of TNF or the serum level of IL-6 were analyzed.Results The serum levels of sE- and sP- selectins in acute stage of cerebral infarctio n group[(65.2±39.4)ng/ml，(399±134) ng/ml，respectively]were significantly higher than those in acute stage of cerebral haemorrhage[(44.6±11.8)ng/ml， (243±112) ng/ml，respectively] and those in healthy control group[(40.5±12 .5)ng/ml，(227±106) ng/ml,respectively].In acute stage of cerebral infarction ,the serum concent ration of sE- selectin, as well as the level of sP-selectin,was observed in posi t ive correlation with the WBC、N%、or the level of IL-6 respectively.The level of sP- selectin was also positively correlated with the level of TNF.Co nclusions The increased levels of sE- and sP- selectins reflected that these two selectins might be enhanced the endotheliocyte-leukocyte adhesion,und er the stimulations of TNF and IL-6,so as to be involved in the cerebral injury after acute cerebral infarction.
, 百拇医药
[Key words] Cerebral infarction; Selectins; TNF; IL-6
E-选择素由活化的血管内皮细胞合成并在其表面表达，P-选择素存在于血管内皮细胞和血小 板内，在炎症反应或缺血等情况刺激下，才在这些细胞膜上表达。实验已证明，E-和P-选择 素介导白细胞与血管内皮细胞的最初粘附。急性脑梗死时，局灶区E-和P-选择素表达明显增 强[1，2]。可溶性E-选择素(sE-选择素)是E-选择素从血管内皮细胞膜脱落而来 ，可溶性P-选择素(sP-选择素)则来自于血管内皮细胞及血小板的膜型P-选择素。目前有些 学者报道可溶性选择素与脑梗死的临床改变存在一定的关系[3，4]。为进一步探 讨选择素在脑梗死过程中的作用，本研究采用ELISA双抗体夹心法测定脑梗死患者sE-和sP- 选择素的血清水平变化，并与脑出血及正常对照组作比较，同时分析它们与外周血白细胞计 数(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)以及肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-6(IL-6)等前炎性细胞因 子的关系，结果报道如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 脑梗死组 随机选择在我科住院的急性脑梗死患者30例，均经临床体检及头颅CT 确诊，诊断标准按第四届全国脑血管病会议所制订的标准[5]，并排除炎症、肿 瘤及免疫性疾病。梗死部位：脑叶8例、基底节区16例、丘脑4例、脑干2例。根据Pullitono 提出的公式计算梗死灶体积，小于4 cm3者7例，4～10 cm3者14例，大于10 cm3者 9例。其中男性15例，女性15例，平均年龄66.8±9.0岁。
1.1.2 脑出血对照组 随机选择脑出血患者25例，无感染、肿瘤和免疫性疾病，其中男 性14例，女性11例，平均年龄64.4±7.8岁。
1.1.3 正常人对照组 随机选择门诊体检者28例，经临床体检及实验室检查，排除心、 肝、肾、脑等器质性病变以及高血压、糖尿病、各种炎症、肿瘤以及免疫性疾病。其中男性 16例，女性12例，平均年龄62.5±8.6岁。各组在年龄、性别方面具有可比性(P>0 .05)。
, 百拇医药
1.2 实验指标及检测方法 脑梗死组、脑出血组急性期(发病3 d内)、恢复期(发病第3周 末)以及正常对照组经禁食8～10 h后清晨卧位抽静脉血。sE-和sP-选择素水平测定采用ELI SA双抗体夹心法，试剂盒由奥地利Bender Medsystems Diagnostics GmbH公司产。IL-6血清 水平测定亦采用ELISA双抗体夹心法，试剂盒由美国Endogen公司产。TNF血清水平测定采用 液相竞争放免法，试剂盒由北京东亚免疫技术研究所产。白细胞计数及中性粒细胞百分比测 定采用美国CELL-DYN3500R血常规分析仪。
1.3 统计学处理 所有数据用
±s表示。组间数据比较先作方差分析，再作 Q检验，各变量间关系作直线相关分析。
2 结果
2.1 脑梗死组、脑出血组与正常对照组sE-和sP-选择素血清水平、WBC、N%、TNF及IL-6血 清水平测定结果见表1。
, 百拇医药
表1 脑梗死组、脑出血组与正常对照组sE-和sP-选择素血清水平、WBC、 N%、TNF和IL-6血清水平的测定结果 组 别
例数
sE-选择素(ng/m l)
sP-选择素(ng/ml)
WBC(×109/L)
N%(%)
TNF(ng/ml)
IL-6(pg/ml)
脑梗死组
急性期
, 百拇医药
30
65.2±39.4△**＃
399±134△△**＃＃
7.5 0±2.0△*＃
69.8±7.0△**
1.69±0.66△△**
49.6±12.3△△**
恢复期
25
46.8±17.7
, 百拇医药
209±108
6.31±0.91
61.5±7.14
1.1 5±0.53
25.8±7.21**
脑出血组
急性期
25
44.6±11.8
243±112
9.41±2.70△△**
, 百拇医药 73.7 ±12.7△**
1.55±0.49△△**
54.1±15.3△△**
恢复期
20
45.7±10.1
220±118
6.60±1.21
60.3±7.30
1.0 8±0.41
30.6±9.72**
, 百拇医药
对照组
28
40.5±12.5
227±106
6.17±1.33
59.7±8.87
1 .02±0.35
14.4±6.10
与正常对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；同组不同期之间比较，△ P<0.05， △△P<0.01；脑梗死与脑出血组同期之间比较，＃P<0.05，＃＃P<0.01
2.2 脑梗死及脑出血患者sE-和sP-选择素血清水平之间关系及它们与WBC、N%、TNF和IL-6 血清水平关系的相关性分析结果，脑梗死急性期sE-选择素与sP-选择素水平、WBC、N%和IL- 6血清水平均呈正相关关系(r值分别为0.475、0.376、0.452和0.385，P值均小 于0.05)，sP-选择素水平与WBC、N%、IL-6和TNF血清水 平均呈正相关关系(r值分别为0.479、0.386、0.499和0.608，P值均小于0.05 )；脑梗死恢复期、脑出血急性期和恢复期上述各指标间均无直线相关关系。
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3 讨论
本研究结果显示，sE-和sP-选择素在急性期脑梗死患者中的血清水平明显高于脑出血患者及 正常人，而该组患者恢复期这两种选择素血清水平则无明显升高。这一结果与E-和P-选择 素在脑梗死局灶区表达增强是一致的，这提示sE-和sP-选择素血清水平的增高反映了这两种 选择素直接参与了脑梗死的发病过程。同时，本研究结果表明，脑梗死急性期sE-选择素与s P-选择素水平呈明显正相关关系。这提示两者在脑梗死过程中，可能相互协同作用，共同促 进白细胞的粘附。
实验已证明，脑缺血有一个急性炎症反应的过程[6]。本研究结果提示，脑梗死急 性期外周血白细胞计数及中性粒细胞百分比与同期sE-和sP-选择素血清水平均呈正相关关系 。这一结果表明，在脑梗死早期，外周血白细胞的变化与sE-和sP-选择素血清水平的变化密 切相关。此时血液中的白细胞需完成与血管壁的接触，在血管内皮细胞上滚动、牢固结合 以及跨内皮细胞转运等过程，才能进入脑实质。而这些过程需各种粘附分子的参与，其中E- 和P-选择素介导白细胞与血管内皮细胞的“滚动”粘附，同时，E-选择素还能激活中性粒细 胞的CD11b整合素促进白细胞与血管内皮细胞的牢固结合。由于sE-和sP-选择素分别是膜型E -和P-选择素的可溶性分子形式，所以它们血清水平的增高反映了在脑梗死早期这两种选择 素所介导的白细胞与血管内皮细胞粘附作用的增强。
, 百拇医药
有文献报道，当脑梗死发生时，在脑缺血部位前炎性细胞因子IL-6、TNF的表达增加，并可 以诱导E-和P-选择素的表达[7]。本研究结果发现，脑梗死急性期患者sE-及s P-选择素水平与IL-6血清水平均存在正相关关系，sP-选择素水平还与TNF血清水平呈正相关 关系。据此推测，脑梗死后血清TNF及IL-6水平增高，刺激血管内皮细胞表达E-和P-选择素 以及血小板表达P-选择素，以致这两种选择素血清水平升高。
综上所述，sE-和sP-选择素水平增高反映了这两种选择素可能在前炎性细胞因子TNF和IL-6 的刺激下，共同促进白细胞与内皮细胞的粘附，从而参与了脑梗死损伤过程。深入研究选择 素与脑梗死的关系，有助于更好地预防和治疗缺血性脑血管病。
[作者简介]曾杨滨，男，主治医师，硕士
[参考文献]
, 百拇医药 [1]Zhang RL,Chopp M,Zhang ZG,et al.The expression of P- and E- selecti ns in three models of middle cerebral artery occlusion[J].Brain Res,1998,785(2 ):207-214.
[2]Zhang RL,Chopp M,Zhang ZG,et al.E-selectin in focal cerebral ischemi a and reperfusion in the rat[J].J Cereb Blood Flow and Metab,1996,16(6):1126-1 136.
[3]Bitsch A,Klone W,Murtada L,et al.A longitudinal prospective study of soluble adhesion molecules in acute stroke[J].Stroke,1998，29(10):2129-2135.
, 百拇医药
[4]Frijns CJ,Kappelle LT,van Gijn J,et al.Soluble adhesion molecules re flect endothelial cell activation in ischemic stroke and in carotid atherosclero sis[J].Stroke,1997,28(11):2214-2218.
[5]中华神经科学会，中华神经外科学会.各类脑血管疾病诊断要点[J].中华 神经科杂志，1996，29(6)：379-380.
[6]Garcia JH,Liu KF,Yoshida Y,et al.Influx of leukocytes and platelets in an evolving brain infarct (Wistar rat)[J].Am J Pathol,1994,144(1):188-199.
[7]Del Zoppo GJ.Microvascular responses to cerebral ischemia/inflammati on[J].Ann N Y Acad Sci,1997,823:132-147.
[收稿：2000-04-07]
, 百拇医药
单位：曾杨滨 彭光莹 许治强(广州市第二人民医 院神经内科，510150)；杨期东(湖南医科大学附属湘雅医院神经内科，410078)
关键词：脑梗塞；选择素族；肿瘤坏死因子；白介素-6
中国急救医学001211 [摘 要]目的 探讨E-和P-选择素与脑梗死的关系。方法 用ELISA方法测定30例脑梗死、25例脑出血患者及28例正常人的sE-和sP-选择素血 清水平，分析它们与WBC、N%、TNF及IL-6血清水平之间的关系。结果 急性期脑梗死患者sE-和sP-选择素血清水平[分别为(65.2±39.4)ng/ml、(399±134) ng/ml]明显高于脑出血患者[分别为(44.6±11.8)ng/ml、(243±112) ng/ml]及正常 人[分别为(40.5±12.5)ng/ml、(227±106) ng/ml]。而该组患者恢复期这两种选择素 水平无明显升高。 急性期脑梗死患者sE-和sP-选择素水平分别与WBC、N%、IL-6水平呈正相关关系，sP-选择素 水 平还与TNF水平呈正相关关系。结论 sE-和sP-选择素血清水平增高 反映脑梗死急性期E-和P-选择素可能在TNF和IL-6的刺激下，参与脑梗死损伤过程。
, 百拇医药
[中图分类号]743.33 [文献标识码]A [文章编号]1002-1949(2000)12-0715-02
Soluble E- and P-selectins in acute cerebral infarction
ZENG Yang-bi n,YANG Qi-dong,PENG Guang-ying,et al.
(Department of Neurology,Guangzhou Second Ho spital,Guangzhou 510150,China)
[Abstract]Objective To determine the roles of E-and P-selectins in the pathogenesis of cerebral infarction.Methods The serum concentrations of sE-and sP-selectins were measured with enzyme-linked immunoso r bent assay (ELISA)in 30 cerebral infarction、25 cerebral haemorrhage and 28 heal thy control subjects.The correlations between selectins and WBC、N%、the serum l evel of TNF or the serum level of IL-6 were analyzed.Results The serum levels of sE- and sP- selectins in acute stage of cerebral infarctio n group[(65.2±39.4)ng/ml，(399±134) ng/ml，respectively]were significantly higher than those in acute stage of cerebral haemorrhage[(44.6±11.8)ng/ml， (243±112) ng/ml，respectively] and those in healthy control group[(40.5±12 .5)ng/ml，(227±106) ng/ml,respectively].In acute stage of cerebral infarction ,the serum concent ration of sE- selectin, as well as the level of sP-selectin,was observed in posi t ive correlation with the WBC、N%、or the level of IL-6 respectively.The level of sP- selectin was also positively correlated with the level of TNF.Co nclusions The increased levels of sE- and sP- selectins reflected that these two selectins might be enhanced the endotheliocyte-leukocyte adhesion,und er the stimulations of TNF and IL-6,so as to be involved in the cerebral injury after acute cerebral infarction.
, 百拇医药
[Key words] Cerebral infarction; Selectins; TNF; IL-6
E-选择素由活化的血管内皮细胞合成并在其表面表达，P-选择素存在于血管内皮细胞和血小 板内，在炎症反应或缺血等情况刺激下，才在这些细胞膜上表达。实验已证明，E-和P-选择 素介导白细胞与血管内皮细胞的最初粘附。急性脑梗死时，局灶区E-和P-选择素表达明显增 强[1，2]。可溶性E-选择素(sE-选择素)是E-选择素从血管内皮细胞膜脱落而来 ，可溶性P-选择素(sP-选择素)则来自于血管内皮细胞及血小板的膜型P-选择素。目前有些 学者报道可溶性选择素与脑梗死的临床改变存在一定的关系[3，4]。为进一步探 讨选择素在脑梗死过程中的作用，本研究采用ELISA双抗体夹心法测定脑梗死患者sE-和sP- 选择素的血清水平变化，并与脑出血及正常对照组作比较，同时分析它们与外周血白细胞计 数(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)以及肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-6(IL-6)等前炎性细胞因 子的关系，结果报道如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 脑梗死组 随机选择在我科住院的急性脑梗死患者30例，均经临床体检及头颅CT 确诊，诊断标准按第四届全国脑血管病会议所制订的标准[5]，并排除炎症、肿 瘤及免疫性疾病。梗死部位：脑叶8例、基底节区16例、丘脑4例、脑干2例。根据Pullitono 提出的公式计算梗死灶体积，小于4 cm3者7例，4～10 cm3者14例，大于10 cm3者 9例。其中男性15例，女性15例，平均年龄66.8±9.0岁。
1.1.2 脑出血对照组 随机选择脑出血患者25例，无感染、肿瘤和免疫性疾病，其中男 性14例，女性11例，平均年龄64.4±7.8岁。
1.1.3 正常人对照组 随机选择门诊体检者28例，经临床体检及实验室检查，排除心、 肝、肾、脑等器质性病变以及高血压、糖尿病、各种炎症、肿瘤以及免疫性疾病。其中男性 16例，女性12例，平均年龄62.5±8.6岁。各组在年龄、性别方面具有可比性(P>0 .05)。
, 百拇医药
1.2 实验指标及检测方法 脑梗死组、脑出血组急性期(发病3 d内)、恢复期(发病第3周 末)以及正常对照组经禁食8～10 h后清晨卧位抽静脉血。sE-和sP-选择素水平测定采用ELI SA双抗体夹心法，试剂盒由奥地利Bender Medsystems Diagnostics GmbH公司产。IL-6血清 水平测定亦采用ELISA双抗体夹心法，试剂盒由美国Endogen公司产。TNF血清水平测定采用 液相竞争放免法，试剂盒由北京东亚免疫技术研究所产。白细胞计数及中性粒细胞百分比测 定采用美国CELL-DYN3500R血常规分析仪。
1.3 统计学处理 所有数据用
±s表示。组间数据比较先作方差分析，再作 Q检验，各变量间关系作直线相关分析。2 结果
2.1 脑梗死组、脑出血组与正常对照组sE-和sP-选择素血清水平、WBC、N%、TNF及IL-6血 清水平测定结果见表1。
, 百拇医药
表1 脑梗死组、脑出血组与正常对照组sE-和sP-选择素血清水平、WBC、 N%、TNF和IL-6血清水平的测定结果 组 别
例数
sE-选择素(ng/m l)
sP-选择素(ng/ml)
WBC(×109/L)
N%(%)
TNF(ng/ml)
IL-6(pg/ml)
脑梗死组
急性期
, 百拇医药
30
65.2±39.4△**＃
399±134△△**＃＃
7.5 0±2.0△*＃
69.8±7.0△**
1.69±0.66△△**
49.6±12.3△△**
恢复期
25
46.8±17.7
, 百拇医药
209±108
6.31±0.91
61.5±7.14
1.1 5±0.53
25.8±7.21**
脑出血组
急性期
25
44.6±11.8
243±112
9.41±2.70△△**
, 百拇医药 73.7 ±12.7△**
1.55±0.49△△**
54.1±15.3△△**
恢复期
20
45.7±10.1
220±118
6.60±1.21
60.3±7.30
1.0 8±0.41
30.6±9.72**
, 百拇医药
对照组
28
40.5±12.5
227±106
6.17±1.33
59.7±8.87
1 .02±0.35
14.4±6.10
与正常对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；同组不同期之间比较，△ P<0.05， △△P<0.01；脑梗死与脑出血组同期之间比较，＃P<0.05，＃＃P<0.01
2.2 脑梗死及脑出血患者sE-和sP-选择素血清水平之间关系及它们与WBC、N%、TNF和IL-6 血清水平关系的相关性分析结果，脑梗死急性期sE-选择素与sP-选择素水平、WBC、N%和IL- 6血清水平均呈正相关关系(r值分别为0.475、0.376、0.452和0.385，P值均小 于0.05)，sP-选择素水平与WBC、N%、IL-6和TNF血清水 平均呈正相关关系(r值分别为0.479、0.386、0.499和0.608，P值均小于0.05 )；脑梗死恢复期、脑出血急性期和恢复期上述各指标间均无直线相关关系。
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3 讨论
本研究结果显示，sE-和sP-选择素在急性期脑梗死患者中的血清水平明显高于脑出血患者及 正常人，而该组患者恢复期这两种选择素血清水平则无明显升高。这一结果与E-和P-选择 素在脑梗死局灶区表达增强是一致的，这提示sE-和sP-选择素血清水平的增高反映了这两种 选择素直接参与了脑梗死的发病过程。同时，本研究结果表明，脑梗死急性期sE-选择素与s P-选择素水平呈明显正相关关系。这提示两者在脑梗死过程中，可能相互协同作用，共同促 进白细胞的粘附。
实验已证明，脑缺血有一个急性炎症反应的过程[6]。本研究结果提示，脑梗死急 性期外周血白细胞计数及中性粒细胞百分比与同期sE-和sP-选择素血清水平均呈正相关关系 。这一结果表明，在脑梗死早期，外周血白细胞的变化与sE-和sP-选择素血清水平的变化密 切相关。此时血液中的白细胞需完成与血管壁的接触，在血管内皮细胞上滚动、牢固结合 以及跨内皮细胞转运等过程，才能进入脑实质。而这些过程需各种粘附分子的参与，其中E- 和P-选择素介导白细胞与血管内皮细胞的“滚动”粘附，同时，E-选择素还能激活中性粒细 胞的CD11b整合素促进白细胞与血管内皮细胞的牢固结合。由于sE-和sP-选择素分别是膜型E -和P-选择素的可溶性分子形式，所以它们血清水平的增高反映了在脑梗死早期这两种选择 素所介导的白细胞与血管内皮细胞粘附作用的增强。
, 百拇医药
有文献报道，当脑梗死发生时，在脑缺血部位前炎性细胞因子IL-6、TNF的表达增加，并可 以诱导E-和P-选择素的表达[7]。本研究结果发现，脑梗死急性期患者sE-及s P-选择素水平与IL-6血清水平均存在正相关关系，sP-选择素水平还与TNF血清水平呈正相关 关系。据此推测，脑梗死后血清TNF及IL-6水平增高，刺激血管内皮细胞表达E-和P-选择素 以及血小板表达P-选择素，以致这两种选择素血清水平升高。
综上所述，sE-和sP-选择素水平增高反映了这两种选择素可能在前炎性细胞因子TNF和IL-6 的刺激下，共同促进白细胞与内皮细胞的粘附，从而参与了脑梗死损伤过程。深入研究选择 素与脑梗死的关系，有助于更好地预防和治疗缺血性脑血管病。
[作者简介]曾杨滨，男，主治医师，硕士
[参考文献]
, 百拇医药 [1]Zhang RL,Chopp M,Zhang ZG,et al.The expression of P- and E- selecti ns in three models of middle cerebral artery occlusion[J].Brain Res,1998,785(2 ):207-214.
[2]Zhang RL,Chopp M,Zhang ZG,et al.E-selectin in focal cerebral ischemi a and reperfusion in the rat[J].J Cereb Blood Flow and Metab,1996,16(6):1126-1 136.
[3]Bitsch A,Klone W,Murtada L,et al.A longitudinal prospective study of soluble adhesion molecules in acute stroke[J].Stroke,1998，29(10):2129-2135.
, 百拇医药
[4]Frijns CJ,Kappelle LT,van Gijn J,et al.Soluble adhesion molecules re flect endothelial cell activation in ischemic stroke and in carotid atherosclero sis[J].Stroke,1997,28(11):2214-2218.
[5]中华神经科学会，中华神经外科学会.各类脑血管疾病诊断要点[J].中华 神经科杂志，1996，29(6)：379-380.
[6]Garcia JH,Liu KF,Yoshida Y,et al.Influx of leukocytes and platelets in an evolving brain infarct (Wistar rat)[J].Am J Pathol,1994,144(1):188-199.
[7]Del Zoppo GJ.Microvascular responses to cerebral ischemia/inflammati on[J].Ann N Y Acad Sci,1997,823:132-147.
[收稿：2000-04-07]
, 百拇医药