HR24L基因过表达抑制细胞凋亡
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于廷曦；朱应葆；童坦君
北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系|北京100083
参见附件(67kb)。
于廷曦；朱应葆；童坦君
关键词：北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系；北京100083
摘要：目的:研究人类DNA损伤修复基因HR24L与细胞凋亡的关系。方法:PCR方法扩增HR24L基因开放阅读框序列,克隆入逆转录病毒载体pDOR neo,转染HeLa细胞,筛选阳性克隆;Southern印迹验证HR24L基因的整合状况。Northern印迹检查HR24LmRNA的细胞内表达水平。过氧化氢、丁酸钠及血清饥饿诱导凋亡,流式细胞计数仪检测凋亡比例,电泳观察DNALadder,Western印迹检测凋亡相关蛋白质的表达。结果:获得转染有HR24L基因的HeLa细胞。与HeLa细胞相比,HeLa HR24L细胞HR24LmRNA表达明显上升。HR24L基因过表达导致Bck 2的表达升高,抑制caspase 3和Bax的表达,而对p53却无明显的影响。HR24L基因过表达抑制过氧化氢和血清饥饿诱导的细胞凋亡,但对丁酸钠诱导的细胞凋亡却无抑制作用。结论:HR24L基因过表达抑制细胞凋亡。
于廷曦；朱应葆；童坦君
关键词：北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系；北京100083
摘要：目的:研究人类DNA损伤修复基因HR24L与细胞凋亡的关系。方法:PCR方法扩增HR24L基因开放阅读框序列,克隆入逆转录病毒载体pDOR neo,转染HeLa细胞,筛选阳性克隆;Southern印迹验证HR24L基因的整合状况。Northern印迹检查HR24LmRNA的细胞内表达水平。过氧化氢、丁酸钠及血清饥饿诱导凋亡,流式细胞计数仪检测凋亡比例,电泳观察DNALadder,Western印迹检测凋亡相关蛋白质的表达。结果:获得转染有HR24L基因的HeLa细胞。与HeLa细胞相比,HeLa HR24L细胞HR24LmRNA表达明显上升。HR24L基因过表达导致Bck 2的表达升高,抑制caspase 3和Bax的表达,而对p53却无明显的影响。HR24L基因过表达抑制过氧化氢和血清饥饿诱导的细胞凋亡,但对丁酸钠诱导的细胞凋亡却无抑制作用。结论:HR24L基因过表达抑制细胞凋亡。
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