cDNA芯片技术杂交效率的优化
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军事医学科学院放射医学研究所 北京100850 马淑华；王升启
参见附件(58kb)。
军事医学科学院放射医学研究所 北京100850 马淑华；王升启
关键词：cDNA芯片；杂交效率
摘要：目的 cDNA芯片杂交影响因素很多,如固定于玻片的DNA片段的浓度、溶解DNA片段的点样液、荧光探针浓度及纯度杂交液、杂交温度、杂交时间和Cy3与Cy5荧光素标记探针等,本实验针对其中重要影响因素进行优化筛选,以提高杂交效率。方法 通过逐一改变cDNA杂交技术重要影响因素的实验条件,平行设置多组实验,从中筛选出最佳实验数据。结果与结论 重复实验结果表明,杂交效率较高的条件为:浓度约为0 50μg·μL-1DNA片段,溶于1×MicroSpottingSokution(ArrayItTM)中,与纯化后的荧光标记在0 5%SDS 10×SSC甲酰胺杂交液,在42℃杂交。
军事医学科学院放射医学研究所 北京100850 马淑华；王升启
关键词：cDNA芯片；杂交效率
摘要：目的 cDNA芯片杂交影响因素很多,如固定于玻片的DNA片段的浓度、溶解DNA片段的点样液、荧光探针浓度及纯度杂交液、杂交温度、杂交时间和Cy3与Cy5荧光素标记探针等,本实验针对其中重要影响因素进行优化筛选,以提高杂交效率。方法 通过逐一改变cDNA杂交技术重要影响因素的实验条件,平行设置多组实验,从中筛选出最佳实验数据。结果与结论 重复实验结果表明,杂交效率较高的条件为:浓度约为0 50μg·μL-1DNA片段,溶于1×MicroSpottingSokution(ArrayItTM)中,与纯化后的荧光标记在0 5%SDS 10×SSC甲酰胺杂交液,在42℃杂交。
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