人THANK基因的克隆和表达
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第二军医大学东方肝胆外科医院;上海200438 吴东;沈锋;娄永华;朱玉萍;焦炳华;吴孟超
基因|THANK|聚合酶链反应|克隆|分子
参见附件(100kb)。
第二军医大学东方肝胆外科医院;上海200438 吴东;沈锋;娄永华;朱玉萍;焦炳华;吴孟超
关键词:基因;THANK;聚合酶链反应;克隆;分子
摘要:目的 :克隆人 THANK基因全长及胞外区片段 ,将其胞外区在大肠杆菌中表达。 方法 :采用 RT- PCR技术 ,从人白血病细胞系 HL - 6 0细胞总 RNA中扩增人 THANK c DNA ,并定向克隆于 p MD18- T载体 ,经测序证实 ,再亚克隆 THANK的胞外区片段至 p ET表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。 结果 :RT- PCR扩增出一个 85 8bp的 DNA片段 ,该片段与公布的人THANK基因序列一致。诱导后 THANK胞外区在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为 2 .6万的蛋白质。结论 :成功地克隆了人 THANK基因 ,并在大肠杆菌中获得表达 ,为其功能的研究打下基础。
第二军医大学东方肝胆外科医院;上海200438 吴东;沈锋;娄永华;朱玉萍;焦炳华;吴孟超
关键词:基因;THANK;聚合酶链反应;克隆;分子
摘要:目的 :克隆人 THANK基因全长及胞外区片段 ,将其胞外区在大肠杆菌中表达。 方法 :采用 RT- PCR技术 ,从人白血病细胞系 HL - 6 0细胞总 RNA中扩增人 THANK c DNA ,并定向克隆于 p MD18- T载体 ,经测序证实 ,再亚克隆 THANK的胞外区片段至 p ET表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。 结果 :RT- PCR扩增出一个 85 8bp的 DNA片段 ,该片段与公布的人THANK基因序列一致。诱导后 THANK胞外区在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为 2 .6万的蛋白质。结论 :成功地克隆了人 THANK基因 ,并在大肠杆菌中获得表达 ,为其功能的研究打下基础。
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