重组人肝细胞生长因子重链(rhHGF-α)蛋白的表达与纯化
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山西医科大学生物化学与分子生物学教研室；太原030001 杨涛；牛勃；王惠珍；程牛亮；解军；常冰梅；陈显久
肝细胞生长因子|细胞包涵体|分子生物学
参见附件(42kb)。
山西医科大学生物化学与分子生物学教研室；太原030001 杨涛；牛勃；王惠珍；程牛亮；解军；常冰梅；陈显久
关键词：肝细胞生长因子；细胞包涵体；分子生物学
摘要：大肠杆菌中表达的rhHGF α以包涵体形式存在 ,表达量约占菌体总蛋白的 2 5 %。为了建立一条简便的分离纯化生产工艺 ,我们研究了包涵体溶解及复性条件 ,并进行了活性测定。结果表明 ,用含有 4mol/L尿素的缓冲液洗涤包涵体 ,8mol/L尿素溶解包涵体后的上清 ,经过SephacrylS 2 0 0凝胶过滤、复性后 ,得到纯度达 90 %的rhHGF α ,SDS PAGE测定相对分子质量为 5 2 0 0 0。与rhHGF β体外共复性后 ,完整的rhHGF具有明显刺激原代培养大鼠肝细胞生长的活性。
山西医科大学生物化学与分子生物学教研室；太原030001 杨涛；牛勃；王惠珍；程牛亮；解军；常冰梅；陈显久
关键词：肝细胞生长因子；细胞包涵体；分子生物学
摘要：大肠杆菌中表达的rhHGF α以包涵体形式存在 ,表达量约占菌体总蛋白的 2 5 %。为了建立一条简便的分离纯化生产工艺 ,我们研究了包涵体溶解及复性条件 ,并进行了活性测定。结果表明 ,用含有 4mol/L尿素的缓冲液洗涤包涵体 ,8mol/L尿素溶解包涵体后的上清 ,经过SephacrylS 2 0 0凝胶过滤、复性后 ,得到纯度达 90 %的rhHGF α ,SDS PAGE测定相对分子质量为 5 2 0 0 0。与rhHGF β体外共复性后 ,完整的rhHGF具有明显刺激原代培养大鼠肝细胞生长的活性。
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