应用Southern印迹杂交法检测转移基因在宿主细胞中的整合
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苏州大学附属第一医院；江苏省血液研究所；苏州215006 阳小卫；王玮；夏学鸣；陈子兴
Southern印迹杂交|聚合酶链反应|基因|基因组
参见附件(35kb)。
苏州大学附属第一医院；江苏省血液研究所；苏州215006 阳小卫；王玮；夏学鸣；陈子兴
关键词：Southern印迹杂交；聚合酶链反应；基因；基因组
摘要：目的 应用Southern印迹杂交法 (Southernblot)证实转移基因整合至宿主细胞基因组DNA。方法 酚氯仿法提取基因转导的PA317/AIM及K5 6 2 /AIM细胞基因组DNA ,以聚合酶链反应 (PCR)扩增转移基因片段 ;随机引物法标记3 2 P -DNA探针 ,与经BamHI酶切、琼脂糖凝胶电泳、转移至尼龙膜的基因组DNA进行Southern杂交反应 ,检测转移基因的整合。结果 PCR反应和Southernblot分析证实转移基因存在于受体细胞基因组DNA中。结论 Southern印迹杂交法证实转移基因稳定整合至逆转录病毒生产细胞PA317/AIM及靶细胞K5 6 2 /AIM中。
苏州大学附属第一医院；江苏省血液研究所；苏州215006 阳小卫；王玮；夏学鸣；陈子兴
关键词：Southern印迹杂交；聚合酶链反应；基因；基因组
摘要：目的 应用Southern印迹杂交法 (Southernblot)证实转移基因整合至宿主细胞基因组DNA。方法 酚氯仿法提取基因转导的PA317/AIM及K5 6 2 /AIM细胞基因组DNA ,以聚合酶链反应 (PCR)扩增转移基因片段 ;随机引物法标记3 2 P -DNA探针 ,与经BamHI酶切、琼脂糖凝胶电泳、转移至尼龙膜的基因组DNA进行Southern杂交反应 ,检测转移基因的整合。结果 PCR反应和Southernblot分析证实转移基因存在于受体细胞基因组DNA中。结论 Southern印迹杂交法证实转移基因稳定整合至逆转录病毒生产细胞PA317/AIM及靶细胞K5 6 2 /AIM中。
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