重组人尿激酶原的体外变复性研究(英文)
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南京大学生物化学系；医药生物技术国家重点实验室；南京210093 朱慧；刘伟；史蔚；薛宇鸣；蒯乐天；马忠
参见附件(88kb)。
南京大学生物化学系；医药生物技术国家重点实验室；南京210093 朱慧；刘伟；史蔚；薛宇鸣；蒯乐天；马忠
关键词：重组人尿激酶原；变性；复性
摘要：目的 重组人尿激酶原在大肠杆菌中过量表达时形成不溶物包涵体 ,需经体外变复性后才能获得生物活性。本文旨在提高包涵体中变性尿激酶原的复性效率。方法 通过对pH、温度、变性剂种类及浓度、蛋白浓度、以及巯基氧化还原对比率等的定性定量分析 ,研究重组人尿激酶原体外变复性的基本条件 ,并比较了添加一些非特异有效成分、脉冲稀释、梯度透析等方法对提高重组人尿激酶原体外变复性效率的作用。结果 确定了重组人尿激酶原体外变复性的基本方法 ,其复性效率可达 30 %左右。结论 不同的包涵体蛋白的体外变复性效率因蛋白的分子大小、二巯键数目、疏水。
南京大学生物化学系；医药生物技术国家重点实验室；南京210093 朱慧；刘伟；史蔚；薛宇鸣；蒯乐天；马忠
关键词：重组人尿激酶原；变性；复性
摘要：目的 重组人尿激酶原在大肠杆菌中过量表达时形成不溶物包涵体 ,需经体外变复性后才能获得生物活性。本文旨在提高包涵体中变性尿激酶原的复性效率。方法 通过对pH、温度、变性剂种类及浓度、蛋白浓度、以及巯基氧化还原对比率等的定性定量分析 ,研究重组人尿激酶原体外变复性的基本条件 ,并比较了添加一些非特异有效成分、脉冲稀释、梯度透析等方法对提高重组人尿激酶原体外变复性效率的作用。结果 确定了重组人尿激酶原体外变复性的基本方法 ,其复性效率可达 30 %左右。结论 不同的包涵体蛋白的体外变复性效率因蛋白的分子大小、二巯键数目、疏水。
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