反义RNA抑制乙肝病毒复制的临床分子生物学研究
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北京大学第一医院感染疾病科;北京100034 吴赤红;曾争;王勤环;于敏
乙型肝炎病毒(HBV)|反义RNA|基因治疗
参见附件(44kb)。
北京大学第一医院感染疾病科;北京100034 吴赤红;曾争;王勤环;于敏
关键词:乙型肝炎病毒(HBV);反义RNA;基因治疗
摘要:目的 研究表达反义RNA的逆转录病毒载体体外转基因抗乙肝病毒 (HBV)的作用 ,为临床治疗乙型肝炎探索一条新途径。方法 合成互补于HBVX区 (140 0 - 1430 )的X片段 ,互补于HBVP区 (2 375 - 2 40 5 )的P片段 ,分别构建表达正、反义X或P的重组逆转录病毒载体质粒PLXSN +Xpos/Ppos,PLXSN +X ,PLXSN +P ,转染PA317细胞 ,用假病毒颗粒感染2 2 15细胞后第 8天 ,提取细胞内DNA和RNA ,用荧光PCR(FQ -PCR)定量方法检测 2 2 15细胞的DNA和RNA。结果 反义RNA对HBVS、C、P三个开放读码区的DNA及RNA抑制作用大。结论 细胞内表达HBV反义RNA是有明显抗乙肝病毒复。
北京大学第一医院感染疾病科;北京100034 吴赤红;曾争;王勤环;于敏
关键词:乙型肝炎病毒(HBV);反义RNA;基因治疗
摘要:目的 研究表达反义RNA的逆转录病毒载体体外转基因抗乙肝病毒 (HBV)的作用 ,为临床治疗乙型肝炎探索一条新途径。方法 合成互补于HBVX区 (140 0 - 1430 )的X片段 ,互补于HBVP区 (2 375 - 2 40 5 )的P片段 ,分别构建表达正、反义X或P的重组逆转录病毒载体质粒PLXSN +Xpos/Ppos,PLXSN +X ,PLXSN +P ,转染PA317细胞 ,用假病毒颗粒感染2 2 15细胞后第 8天 ,提取细胞内DNA和RNA ,用荧光PCR(FQ -PCR)定量方法检测 2 2 15细胞的DNA和RNA。结果 反义RNA对HBVS、C、P三个开放读码区的DNA及RNA抑制作用大。结论 细胞内表达HBV反义RNA是有明显抗乙肝病毒复。
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