应用核酸原位分子杂交法检测弓形虫SAG1抗原基因在免疫小鼠体内的表达
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中山医科大学寄生虫学研究所；广州；510089 陈海峰；陈观今；王又红；郑焕钦；郭虹
弓形虫|SAG1|基因免疫|原位分子杂交
参见附件(48kb)。
中山医科大学寄生虫学研究所；广州；510089 陈海峰；陈观今；王又红；郑焕钦；郭虹
关键词：弓形虫；SAG1；基因免疫；原位分子杂交
摘要：PCR扩增RH株弓形虫抗原基因SAG1编码序列 ,构建pcDNA3 -SAG1重组表达质粒。DNA免疫接种小鼠 ,3周后处死动物 ,取注射部位肌肉作冰冻切片 ,用原位分子杂交方法检测弓形虫 pcDNA3 -SAG1重组质粒在免疫小鼠肌肉内的表达。结果PCR扩增出SAG1编码区目的基因 ,片段大小为 10 2 0bp。测序、酶切分析表明构建的 pcDNA3 -SAG1重组表达质粒含有扩增的基因。利用原位分子杂交在免疫接种 pcDNA3-SAG1的小鼠骨骼肌中检测到紫蓝色的阳性杂交信号 ,提示局部肌肉有目的基因mRNA转录的发生。
中山医科大学寄生虫学研究所；广州；510089 陈海峰；陈观今；王又红；郑焕钦；郭虹
关键词：弓形虫；SAG1；基因免疫；原位分子杂交
摘要：PCR扩增RH株弓形虫抗原基因SAG1编码序列 ,构建pcDNA3 -SAG1重组表达质粒。DNA免疫接种小鼠 ,3周后处死动物 ,取注射部位肌肉作冰冻切片 ,用原位分子杂交方法检测弓形虫 pcDNA3 -SAG1重组质粒在免疫小鼠肌肉内的表达。结果PCR扩增出SAG1编码区目的基因 ,片段大小为 10 2 0bp。测序、酶切分析表明构建的 pcDNA3 -SAG1重组表达质粒含有扩增的基因。利用原位分子杂交在免疫接种 pcDNA3-SAG1的小鼠骨骼肌中检测到紫蓝色的阳性杂交信号 ,提示局部肌肉有目的基因mRNA转录的发生。
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